急性白血病化疗后外周血粒／单祖细胞的扩增作用
作者：戚秋藤 孙海鹰 彭中宜 肖敬华
单位：戚秋藤；孙海鹰；彭中宜；肖敬华；黑龙江省医院
关键词：急性非淋巴细胞白血病；外周血干细胞；自身外周血干细胞移植粒 /单祖细胞
黑龙江医学990701 摘要 采用单层琼脂体外细胞培养法，对32例急性非淋巴细胞白血病患者在完全缓解后1～3周时外周血粒/单祖细胞(CFU-GM)的动态变化情况进行了比较观察。患者分4组，分别采用DA(柔红霉素、阿糖胞苷)、HA(三尖杉酯碱、阿糖胞苷)、AA(阿克拉霉素、阿糖胞苷)、MA(米托蒽醌、阿糖胞苷)4种不同化疗方案治疗。结果表明：4种化疗方案对外周血干细胞(PBSC)均具有一定的扩增作用。外周血CFU-GM产率的高峰时间为诱导化疗达到完全缓解后2～3周时，高峰出现平均为16.5d，是采集PBSC的最佳时机。不同化疗方案对CFU-GM的扩增效果有一定的差异。本研究结果显示DA方案的扩增作用显著高于其它方案。
, 百拇医药
Amplification Study on CFU-GM after Acute Leukemia Chemothera py
Qi Qiuteng Sun Haiying Peng Zhongyi et al
The Provincial Hospital of Heilongjiang
Abstract The compared dynamic observation on peripheral bloo d CFU-GM were taken for 32 cases of acute non-lymphocyte leukemia at 1-3 weeks after complete remission with single layer cell agar platemethod in vitro.The p atients were divided into 4 groups with 4 kinds ofdifferent chemotherapy plan DA ,HA,AA and MA.The results showed that all plans had some amplification to periph eral blood stem cell.The peak time was about 2-3 weeks after complete remission of induced chemotherapy.The average 16.5d was best time to collect PBSC.Varied p lans had different amplification effects and DA was significant higher than othe rs.
, 百拇医药
Key words Acute non-lymphocyte leukemia PBSC ABSCT CFU-GM
继自体骨髓移植之后，自体外周血干细胞移植(ABSCT)已经成为治疗急 性白血病的另一有效治疗方法。特别在我国同基因供髓者缺乏的情况下，发展ABSCT更具有 实际应用价值。但在正常状态下外周血干细胞(PBSC)水平仅为骨髓的1%～10%〔1〕。 因此，如何提高外周血干细胞水平，采集到足够的PBSC是进行ABSCT的成功的关键。已知抗 肿瘤药物具有对PBSC的扩增作用〔2〕，但是目前国内常用的几种治疗急性白血病的 化疗药物对PBSC的扩增作用有何不同及化疗后PBSC的动态变化如何，报道甚少。我们对32例 急性非淋巴细胞白血病采用4种不同方案化疗后，对PBSC的变化进行了动态的比较观察，结 果如下。
1 材料和方法
1.1 研究对象
, http://www.100md.com
对照组：30例，健康人，其中男14例，女16例。年龄18～42岁(中位年龄30岁)。
观察组：急性非淋巴细胞白血病32例，均经骨髓检查确诊，按1987年全国白血病分类分型讨 论会标准分型：M118例，M25例，M45例，M54例。年龄16～45岁(中位年龄30.5岁) ，其中男15例，女17例。
1.2 化疗方案
DA方案8例：柔红霉素60mg/d，连用3d。阿糖胞苷200mg/d，连用5～7d(以下方案阿糖胞苷 用法、用量均相同)；HA方案8例：三尖杉酯碱4mg/d，连用3d；AA方案8例：阿克拉霉素20m g/d，连用3d；MA方案8例：米托蒽醌40mg/d，连用3d。
1.3 粒/单祖细胞(CFU-GM)测定
, 百拇医药
1.3.1 取材：每次取静脉血5ml，用肝素(10U/ml)抗凝。化疗前及化疗后骨髓完全缓解 期1、2、3周各取材1次。
1.3.2 方法：采用单层琼脂培养法〔3〕。细胞数为2×105/ml，重复3皿，置 于37℃二氧化碳培养箱中培养。7d后置显微镜下计数集落，超过40个细胞的集团计数为集 落。集落数取3皿的平均值。
2 结果
正常对照组30例，外周血CFU-GM产率为12.3±2.4/2×105MNC。32例患者化疗 前只有2例有CFU-GM生长，产率分别为6.5±1.6/2×105MNC和7.1±1.0/2×105M NC，其余30例均无生长。
各化疗方案CFU-GM生长情况见表1。
, 百拇医药
表1 各化疗方案GFU-GM生长情况 化疗方案
例数
平均水平(Xs±X)
高峰出现
CR后1周
CR后2周
CR后3周
平均(d)
DA
8
77.1±1.2
170.2±3.1
, http://www.100md.com
302.2±2.0
10
HA
8
46.6±1.6
82.1±2.3
162.4±1.5
19
AA
8
7.2±1.64
92.2±1.8
132.5±2.1
, 百拇医药
17
MA
8
50.3±2.4
8.6±1.4
175.5±1.5
18
在CR早期各化疗方案CFU-GM产率都开始增加，为正常值的3～6倍，DA方案增加 比较明显，但与其它方案比较无统计学意义(P>0.05)。至CR后3周，仍然是DA方案化 疗组 产率最高，达正常值的25倍，与其它方案比较有显著意义(P<0.05)，而且DA方案高峰 出 现的时间较早，高峰出现平均日为10d，比其它方案平均早8.6d(P<0.05)。(见表2) 。
, 百拇医药 表2 DA 方案与其它方案GFU-GM生长情况比较 化疗方案
例数
平均水平(Xs±X)
高峰出现
CR后1周
CR后2周
CR后3周
平均(d)
DA
8
77.1±1.2
150.2±3.1
, http://www.100md.com
302.2±2.0
10
其它
24
41.4±1.8
84.3±1.8
163.4±1.7
18.6
P值
>0.05
<0.05
<0.05
<0.05
, 百拇医药
化疗后外周血CFU-GM的动态变化，各化疗方案均可见从CR早期(1周后)CFU-GM 产率开始增加，平均产率为50.33±1.7/2×105MNC，在CR后3周达高峰值，平均为198 .15±1.8，为正常值的16.4倍，高峰出现平均日为16.5d。
3 讨论
化疗药物对PBSC的扩增作用，文献已有报告，在诱导化疗后CR的早期，PBSC的高峰水 平可达正常人的数10倍〔1〕。本研究结果证实了化疗药物对PBSC的扩增作用。采集PBSC的最佳时间，为化疗后CFU-GM产率高峰时间。本研究结果表明为诱导化疗达到完全缓解后2～3周左右为CFU-GM产率最高期，也是采集PBSC的最佳时间。
有文献报告，不同化疗方案对CFU-GM的扩增效果有一定的差异，Jutt ner曾比较3种不同化 疗方案CFU-GM产率，结果是DAT(柔红霉素、阿糖胞苷、6-TG)方案的产率最高〔4〕 ，本研究结果也显示DA方案的CFU-GM产率明显高于其它方案。一般认为：不同方案扩增效 果的差异可能与其强烈程度不同有关。化疗方案愈强烈造成骨髓抑制愈明显，其扩增作用愈 好〔5〕。
, http://www.100md.com
关于抗肿瘤药物对PBSC的扩增作用机理，目前尚未完全阐明，多数学者认为可能与化疗后骨 髓恢复期祖细胞池的大量增殖引起“外溢”有关，而化疗药物对这种“外溢”有促进作用。 〔6〕
外周血造血干细胞移植是近年来应用于临床治疗恶性血液病和恶性肿瘤的新技术，具有采集 方便，造血恢复快等优点。外周血造血干细胞的动员是进行移植成功的关键之一。目前常用大剂量化疗和造血因子联合方案，但常伴有感染、出血等并发症，甚至导致治疗相关死亡， 造血因子价格昂贵，每次移植仅该项药费就需2～3万元，是使移植费用高昂而不能普遍开展 的主要原因之一。
本项目研究了不同药物常用剂量化疗方案的动员作用，得出了最佳动员方案及最佳采集时间 ，并且获得了与大剂量化疗方案相同的动员效果，应用这一成果，可明显减少外周血干细胞移植的费用，减少并发症，可进一步提高移植成功率，促进外周血干细胞移植的广泛开展。 这正是本项目的先进性、科学性和实际应用价值所在。
, 百拇医药
参考文献
〔1，2〕Richman CM,Siena S,Henon P，et al.Increase in circulating stemcell s following chemotherapy in man.Blood,1031,47:1976
〔3〕唐佩弦.造血细胞.见：唐佩弦，杨天盈主编.造血细胞培养技术.第1版，西安：陕 西科学技术出版社，1985.103
〔4，6〕邱录贵，严文伟.自体外周血干细胞移植进展.中华血液学杂志，1991，11(7)：3 82
〔5〕Cantin G,Fermand J.Blood-derived stem cell collection in acute nonlymphobla st leukemia:Predictive faclors for a good yield.Exp Hematol,991,17:1989
*黑河市中医院
(收稿日期：1999-02-28), http://www.100md.com
单位：戚秋藤；孙海鹰；彭中宜；肖敬华；黑龙江省医院
关键词：急性非淋巴细胞白血病；外周血干细胞；自身外周血干细胞移植粒 /单祖细胞
黑龙江医学990701 摘要 采用单层琼脂体外细胞培养法，对32例急性非淋巴细胞白血病患者在完全缓解后1～3周时外周血粒/单祖细胞(CFU-GM)的动态变化情况进行了比较观察。患者分4组，分别采用DA(柔红霉素、阿糖胞苷)、HA(三尖杉酯碱、阿糖胞苷)、AA(阿克拉霉素、阿糖胞苷)、MA(米托蒽醌、阿糖胞苷)4种不同化疗方案治疗。结果表明：4种化疗方案对外周血干细胞(PBSC)均具有一定的扩增作用。外周血CFU-GM产率的高峰时间为诱导化疗达到完全缓解后2～3周时，高峰出现平均为16.5d，是采集PBSC的最佳时机。不同化疗方案对CFU-GM的扩增效果有一定的差异。本研究结果显示DA方案的扩增作用显著高于其它方案。
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Amplification Study on CFU-GM after Acute Leukemia Chemothera py
Qi Qiuteng Sun Haiying Peng Zhongyi et al
The Provincial Hospital of Heilongjiang
Abstract The compared dynamic observation on peripheral bloo d CFU-GM were taken for 32 cases of acute non-lymphocyte leukemia at 1-3 weeks after complete remission with single layer cell agar platemethod in vitro.The p atients were divided into 4 groups with 4 kinds ofdifferent chemotherapy plan DA ,HA,AA and MA.The results showed that all plans had some amplification to periph eral blood stem cell.The peak time was about 2-3 weeks after complete remission of induced chemotherapy.The average 16.5d was best time to collect PBSC.Varied p lans had different amplification effects and DA was significant higher than othe rs.
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Key words Acute non-lymphocyte leukemia PBSC ABSCT CFU-GM
继自体骨髓移植之后，自体外周血干细胞移植(ABSCT)已经成为治疗急 性白血病的另一有效治疗方法。特别在我国同基因供髓者缺乏的情况下，发展ABSCT更具有 实际应用价值。但在正常状态下外周血干细胞(PBSC)水平仅为骨髓的1%～10%〔1〕。 因此，如何提高外周血干细胞水平，采集到足够的PBSC是进行ABSCT的成功的关键。已知抗 肿瘤药物具有对PBSC的扩增作用〔2〕，但是目前国内常用的几种治疗急性白血病的 化疗药物对PBSC的扩增作用有何不同及化疗后PBSC的动态变化如何，报道甚少。我们对32例 急性非淋巴细胞白血病采用4种不同方案化疗后，对PBSC的变化进行了动态的比较观察，结 果如下。
1 材料和方法
1.1 研究对象
, http://www.100md.com
对照组：30例，健康人，其中男14例，女16例。年龄18～42岁(中位年龄30岁)。
观察组：急性非淋巴细胞白血病32例，均经骨髓检查确诊，按1987年全国白血病分类分型讨 论会标准分型：M118例，M25例，M45例，M54例。年龄16～45岁(中位年龄30.5岁) ，其中男15例，女17例。
1.2 化疗方案
DA方案8例：柔红霉素60mg/d，连用3d。阿糖胞苷200mg/d，连用5～7d(以下方案阿糖胞苷 用法、用量均相同)；HA方案8例：三尖杉酯碱4mg/d，连用3d；AA方案8例：阿克拉霉素20m g/d，连用3d；MA方案8例：米托蒽醌40mg/d，连用3d。
1.3 粒/单祖细胞(CFU-GM)测定
, 百拇医药
1.3.1 取材：每次取静脉血5ml，用肝素(10U/ml)抗凝。化疗前及化疗后骨髓完全缓解 期1、2、3周各取材1次。
1.3.2 方法：采用单层琼脂培养法〔3〕。细胞数为2×105/ml，重复3皿，置 于37℃二氧化碳培养箱中培养。7d后置显微镜下计数集落，超过40个细胞的集团计数为集 落。集落数取3皿的平均值。
2 结果
正常对照组30例，外周血CFU-GM产率为12.3±2.4/2×105MNC。32例患者化疗 前只有2例有CFU-GM生长，产率分别为6.5±1.6/2×105MNC和7.1±1.0/2×105M NC，其余30例均无生长。
各化疗方案CFU-GM生长情况见表1。
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表1 各化疗方案GFU-GM生长情况 化疗方案
例数
平均水平(Xs±X)
高峰出现
CR后1周
CR后2周
CR后3周
平均(d)
DA
8
77.1±1.2
170.2±3.1
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302.2±2.0
10
HA
8
46.6±1.6
82.1±2.3
162.4±1.5
19
AA
8
7.2±1.64
92.2±1.8
132.5±2.1
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17
MA
8
50.3±2.4
8.6±1.4
175.5±1.5
18
在CR早期各化疗方案CFU-GM产率都开始增加，为正常值的3～6倍，DA方案增加 比较明显，但与其它方案比较无统计学意义(P>0.05)。至CR后3周，仍然是DA方案化 疗组 产率最高，达正常值的25倍，与其它方案比较有显著意义(P<0.05)，而且DA方案高峰 出 现的时间较早，高峰出现平均日为10d，比其它方案平均早8.6d(P<0.05)。(见表2) 。
, 百拇医药 表2 DA 方案与其它方案GFU-GM生长情况比较 化疗方案
例数
平均水平(Xs±X)
高峰出现
CR后1周
CR后2周
CR后3周
平均(d)
DA
8
77.1±1.2
150.2±3.1
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302.2±2.0
10
其它
24
41.4±1.8
84.3±1.8
163.4±1.7
18.6
P值
>0.05
<0.05
<0.05
<0.05
, 百拇医药
化疗后外周血CFU-GM的动态变化，各化疗方案均可见从CR早期(1周后)CFU-GM 产率开始增加，平均产率为50.33±1.7/2×105MNC，在CR后3周达高峰值，平均为198 .15±1.8，为正常值的16.4倍，高峰出现平均日为16.5d。
3 讨论
化疗药物对PBSC的扩增作用，文献已有报告，在诱导化疗后CR的早期，PBSC的高峰水 平可达正常人的数10倍〔1〕。本研究结果证实了化疗药物对PBSC的扩增作用。采集PBSC的最佳时间，为化疗后CFU-GM产率高峰时间。本研究结果表明为诱导化疗达到完全缓解后2～3周左右为CFU-GM产率最高期，也是采集PBSC的最佳时间。
有文献报告，不同化疗方案对CFU-GM的扩增效果有一定的差异，Jutt ner曾比较3种不同化 疗方案CFU-GM产率，结果是DAT(柔红霉素、阿糖胞苷、6-TG)方案的产率最高〔4〕 ，本研究结果也显示DA方案的CFU-GM产率明显高于其它方案。一般认为：不同方案扩增效 果的差异可能与其强烈程度不同有关。化疗方案愈强烈造成骨髓抑制愈明显，其扩增作用愈 好〔5〕。
, http://www.100md.com
关于抗肿瘤药物对PBSC的扩增作用机理，目前尚未完全阐明，多数学者认为可能与化疗后骨 髓恢复期祖细胞池的大量增殖引起“外溢”有关，而化疗药物对这种“外溢”有促进作用。 〔6〕
外周血造血干细胞移植是近年来应用于临床治疗恶性血液病和恶性肿瘤的新技术，具有采集 方便，造血恢复快等优点。外周血造血干细胞的动员是进行移植成功的关键之一。目前常用大剂量化疗和造血因子联合方案，但常伴有感染、出血等并发症，甚至导致治疗相关死亡， 造血因子价格昂贵，每次移植仅该项药费就需2～3万元，是使移植费用高昂而不能普遍开展 的主要原因之一。
本项目研究了不同药物常用剂量化疗方案的动员作用，得出了最佳动员方案及最佳采集时间 ，并且获得了与大剂量化疗方案相同的动员效果，应用这一成果，可明显减少外周血干细胞移植的费用，减少并发症，可进一步提高移植成功率，促进外周血干细胞移植的广泛开展。 这正是本项目的先进性、科学性和实际应用价值所在。
, 百拇医药
参考文献
〔1，2〕Richman CM,Siena S,Henon P，et al.Increase in circulating stemcell s following chemotherapy in man.Blood,1031,47:1976
〔3〕唐佩弦.造血细胞.见：唐佩弦，杨天盈主编.造血细胞培养技术.第1版，西安：陕 西科学技术出版社，1985.103
〔4，6〕邱录贵，严文伟.自体外周血干细胞移植进展.中华血液学杂志，1991，11(7)：3 82
〔5〕Cantin G,Fermand J.Blood-derived stem cell collection in acute nonlymphobla st leukemia:Predictive faclors for a good yield.Exp Hematol,991,17:1989
*黑河市中医院
(收稿日期：1999-02-28), http://www.100md.com