膀胱引流术式大鼠胰腺移植模型的建立
作者：关 心 刘训良
单位：关 心 南京医科大学附属南京儿童医院外科(210008)；刘训良 南京医科大学第一附属医院普外科
关键词：
江苏医药990831 全胰腺移植采用的方法有经膀胱引流和经肠道引流，其中前者已成为首选移植术式，现今普遍认为带节段十二指肠全胰膀胱引流的技术简单，并发症少，且可以通过监测引流入尿液中的胰淀粉酶诊断排异反应。本文以临床胰腺移植膀胱引流术式为参考，对建立的大鼠胰腺移植模型22例报道如下。
材料和方法
一、实验动物
供体：Lou/MN大鼠，雄性，体重190～220g。受体：Fischer 344/01a(F344)，雄性，体重220～240g。以上动物由中国医学科学院动物繁育中心提供。
, 百拇医药
二、移植模型的建立
1.供体手术：1%戊巴比妥钠40mg/kg注入大鼠腹腔，麻醉成功后固定，腹部去毛，消毒。腹部正中切口，上自剑突、下至耻骨联合。(1)将胃向上翻起，向下牵引横结肠，剪开其与胰腺交界处的腹膜、结扎切断胰腺与大网膜之间的血管联系(结扎切断中结肠血管，胰腺与大网膜之间的胃网膜左右动脉及静脉)，游离脾脏。靠近脾门结扎脾血管，但不切断。结扎十二指肠近端，切断幽门，在食管与胃交界处结扎切断胃左动脉并切除全胃。(2)游离门静脉直到入肝门分叉处。(3)在胰腺下缘结扎切断肠系膜上血管，沿小肠边缘游离胰腺、保留胰管入十二指肠段肠管约1.5cm左右。其余小肠均行离断，保留肠段两端内翻缝合。(4)钝性分离腹主动脉上被覆的后腹膜，切断结扎左、右肾动脉及腰动脉，电凝其它小分支血管，完全游离腹腔动脉和肠系膜上动脉所在的腹主动脉段。在肠系膜上动脉开口以下的腹主动脉上绕一丝线，打一活结，从阴茎背静脉注入肝素(0.5mg/kg)生理盐水。(5)结扎肝动脉远侧。钳夹腹腔动脉开口以上的腹主动脉，在肝门门静脉分叉处切断，立即从腹主动脉绕线处插管，予4℃平衡盐肝素(25u/ml)溶液灌洗移植物(总量约3～5ml)。此时可见胰腺及保留肠管的血液经门静脉断端流出，且逐渐转清，移植物颜色由淡红变成苍白。(6)灌洗完成后，完整取下移植物及脾脏，结扎插管侧腹主动脉端。移植物置4℃冰箱内保存。移植物热缺血时间约3分钟，手术总时间平均3小时。
, 百拇医药
2.受体手术：麻醉用药及处理同前
(1)横切口开腹，用温生理盐水棉球将肠管推向上方并盖住。将乙状结肠推向左侧，完全游离髂血管分叉上方1.5cm腹主动脉及下腔静脉。从阴茎背静脉注肝素(0.5mg/kg)生理盐水达全身肝素化，用血管夹阻断游离段腹主动脉及下腔静脉上下端，将移植物的腹主动脉和门静脉分别与受体的腹主动脉、下腔静脉行端侧吻合，9～0无创尼龙线单层连续缝合，先动脉(16～18针)，后静脉(14～16针)。吻合中只通过牵动脾脏移动胰脉以免直接触摸胰腺造成损伤。吻合完成后先静脉后动脉松开血管夹，可见移植物血液循环立即恢复，切除移植物附带的脾脏。吻合口处渗血以棉棒压迫止血。血管吻合于40分钟内完成。
(2)将1.5cm左右的十二指肠段与受体膀胱顶部行侧侧吻合(3～0丝线单层连续缝合)，吻合口约0.5cm，大网膜覆盖移植物，关腹结束手术。移植物从保存于4℃冰箱内至移植到受体内重建血液循环前一段时间为冷缺血时间，约1.5小时。
, 百拇医药
结 果
建立的22例模型中，死亡7例，1例死于麻醉过深；1例因肺部并发症呼吸功能衰竭死于术后24小时；另1例死于术后血管吻合口出血。还有4例于术后2～4天死亡，尸检见腹腔有较多混浊渗液，移植物及其周围脂肪组织大量坏死，类似坏死性胰腺炎表现。其余15例存活均过一周，手术成功率为68.6%。尿淀粉酶开始下降(即预示排斥反应发生)最短时间是5天，存活的模型在8天左右处死取移植物标本时均可见移植物包裹良好，血供丰富。
讨 论
本实验中除3例死于偶然原因，另4例死亡与移植物重建血循环前低温保存不当，造成移植后受体鼠因罹重症胰腺炎有关。因在4例连续死亡后，查找原因时发现冰箱温度为12℃，远远超过所要求的4℃，在调整冰箱温度之后全部模型均存活良好。由此说明移植后动物存活率与移植物的低温保存密切相关。实验结果也提示移植后的排斥反应不影响实验动物的存活率。, 百拇医药
单位：关 心 南京医科大学附属南京儿童医院外科(210008)；刘训良 南京医科大学第一附属医院普外科
关键词：
江苏医药990831 全胰腺移植采用的方法有经膀胱引流和经肠道引流，其中前者已成为首选移植术式，现今普遍认为带节段十二指肠全胰膀胱引流的技术简单，并发症少，且可以通过监测引流入尿液中的胰淀粉酶诊断排异反应。本文以临床胰腺移植膀胱引流术式为参考，对建立的大鼠胰腺移植模型22例报道如下。
材料和方法
一、实验动物
供体：Lou/MN大鼠，雄性，体重190～220g。受体：Fischer 344/01a(F344)，雄性，体重220～240g。以上动物由中国医学科学院动物繁育中心提供。
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二、移植模型的建立
1.供体手术：1%戊巴比妥钠40mg/kg注入大鼠腹腔，麻醉成功后固定，腹部去毛，消毒。腹部正中切口，上自剑突、下至耻骨联合。(1)将胃向上翻起，向下牵引横结肠，剪开其与胰腺交界处的腹膜、结扎切断胰腺与大网膜之间的血管联系(结扎切断中结肠血管，胰腺与大网膜之间的胃网膜左右动脉及静脉)，游离脾脏。靠近脾门结扎脾血管，但不切断。结扎十二指肠近端，切断幽门，在食管与胃交界处结扎切断胃左动脉并切除全胃。(2)游离门静脉直到入肝门分叉处。(3)在胰腺下缘结扎切断肠系膜上血管，沿小肠边缘游离胰腺、保留胰管入十二指肠段肠管约1.5cm左右。其余小肠均行离断，保留肠段两端内翻缝合。(4)钝性分离腹主动脉上被覆的后腹膜，切断结扎左、右肾动脉及腰动脉，电凝其它小分支血管，完全游离腹腔动脉和肠系膜上动脉所在的腹主动脉段。在肠系膜上动脉开口以下的腹主动脉上绕一丝线，打一活结，从阴茎背静脉注入肝素(0.5mg/kg)生理盐水。(5)结扎肝动脉远侧。钳夹腹腔动脉开口以上的腹主动脉，在肝门门静脉分叉处切断，立即从腹主动脉绕线处插管，予4℃平衡盐肝素(25u/ml)溶液灌洗移植物(总量约3～5ml)。此时可见胰腺及保留肠管的血液经门静脉断端流出，且逐渐转清，移植物颜色由淡红变成苍白。(6)灌洗完成后，完整取下移植物及脾脏，结扎插管侧腹主动脉端。移植物置4℃冰箱内保存。移植物热缺血时间约3分钟，手术总时间平均3小时。
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2.受体手术：麻醉用药及处理同前
(1)横切口开腹，用温生理盐水棉球将肠管推向上方并盖住。将乙状结肠推向左侧，完全游离髂血管分叉上方1.5cm腹主动脉及下腔静脉。从阴茎背静脉注肝素(0.5mg/kg)生理盐水达全身肝素化，用血管夹阻断游离段腹主动脉及下腔静脉上下端，将移植物的腹主动脉和门静脉分别与受体的腹主动脉、下腔静脉行端侧吻合，9～0无创尼龙线单层连续缝合，先动脉(16～18针)，后静脉(14～16针)。吻合中只通过牵动脾脏移动胰脉以免直接触摸胰腺造成损伤。吻合完成后先静脉后动脉松开血管夹，可见移植物血液循环立即恢复，切除移植物附带的脾脏。吻合口处渗血以棉棒压迫止血。血管吻合于40分钟内完成。
(2)将1.5cm左右的十二指肠段与受体膀胱顶部行侧侧吻合(3～0丝线单层连续缝合)，吻合口约0.5cm，大网膜覆盖移植物，关腹结束手术。移植物从保存于4℃冰箱内至移植到受体内重建血液循环前一段时间为冷缺血时间，约1.5小时。
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结 果
建立的22例模型中，死亡7例，1例死于麻醉过深；1例因肺部并发症呼吸功能衰竭死于术后24小时；另1例死于术后血管吻合口出血。还有4例于术后2～4天死亡，尸检见腹腔有较多混浊渗液，移植物及其周围脂肪组织大量坏死，类似坏死性胰腺炎表现。其余15例存活均过一周，手术成功率为68.6%。尿淀粉酶开始下降(即预示排斥反应发生)最短时间是5天，存活的模型在8天左右处死取移植物标本时均可见移植物包裹良好，血供丰富。
讨 论
本实验中除3例死于偶然原因，另4例死亡与移植物重建血循环前低温保存不当，造成移植后受体鼠因罹重症胰腺炎有关。因在4例连续死亡后，查找原因时发现冰箱温度为12℃，远远超过所要求的4℃，在调整冰箱温度之后全部模型均存活良好。由此说明移植后动物存活率与移植物的低温保存密切相关。实验结果也提示移植后的排斥反应不影响实验动物的存活率。, 百拇医药