大肠腺瘤与腺癌CD44V6表达及其临床意义
作者：张振玉 陈 江 王崇文 祝金泉 张昆和 黄德强
单位：张振玉 南京市第一医院消化科(210006)；陈 江 王崇文 祝金泉 张昆和 黄德强 江西医学院一附院消化研究所(330006)
关键词：
江苏医药990821 CD44分子是一种膜糖蛋白，参与细胞之间及细胞基质之间特异性粘附。目前发现CD44变异体(CD44V)异常表达，可作为肿瘤早期诊断、转移及复发的生物学标志物。为此我们采用免疫组织化学方法研究CD44V6在大肠腺瘤及大肠癌中表达。
材料与方法
一、材料 所有标本取自本院1990～1996年手术切除及病理活检标本。大肠腺瘤22例，大肠癌54例，其中管状腺癌30例、乳头状腺癌17例、粘液腺癌7例。鼠人CD44V6单抗及SP试剂盒均为美国Zymed公司产品。
, 百拇医药
二、方法 所有标本均经10%福尔马林固定，石腊包埋连续切片，片厚5μm，免疫组化染色采用SP法。CD44V6按1：750稀释，在加一抗前标本于枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)中行微波修复抗原。每批染色均设阴性空白对照，即以PBS液代替一抗，以食道鳞状上皮作为阳性对照。结果判断采用半定量积分法，即根据每张切片的阳性细胞比例及着色深浅计划。着色细胞比例1/3以下为1分，1/3～2/3为2分，2/3以上为3分。着色程度，无着色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分，然后根据二者乘积判断阳性等级。0分为阴性，1～4分为弱阳性(+)，大于4分为强阳性(++)。
三、统计学处理 所有资料采用χ2检验。
结 果
CD44V6阳性染色部位位于细胞膜，腺瘤多呈灶性表达，色浅。12例(-)，9例(+)，1例(++)，而腺癌多呈弥漫性表达，18例(-)，16例(+)，20例(++)，两组比较p<0.01。具有显著性差异。其中淋巴结转移组8例(-)，27例+～++，无淋巴结转移组10例(-)，9例+～++，两组比较P<0.05。在组织类型上，管状腺癌18(-)，12例+～++，乳头状腺癌8例(-)，9例+～++。粘液腺癌4例(-)，3例+～++。三组比较P>0.05。
, http://www.100md.com
讨 论
CD44是淋巴细胞归巢受体，包括标准型CD44(CD44S)及变异型CD44(CDV1―10)，前者存在于大多数细胞上，后者主要存在于上皮细胞源性细胞和肿瘤中，并认为其在肿瘤的发生侵袭和转移中起重要作用。本研究结果显示，大肠腺瘤和大肠癌中CD44V6皆有表达，大肠腺瘤阳性表达率为45.4%，且多呈灶性表达，色浅。大肠癌阳性表达率为66.6%，多呈弥漫性表达，且相对深染，这与Wielenga和Heider研究结果相一致。而且该作者还发现其表达率与异型增生分级相关，以中重度多见。Kim报道CD44基因异常表达在结肠腺瘤向结肠癌的演进过程中即已出现且早于Kras和p53基因突变，故认为CD44基因改变是大肠癌发生的早期事件。
肿瘤转移潜能大小是评价患者预后的关键，而淋巴结转移又是其重要指标。CD44基因在转录和翻译时可发生改变，从而导致CD44分子结构和功能异常，而影响了细胞间识别、粘附及信息传递，改变了细胞的生物学行为，造成侵袭和转移的发生，有资料表明CD44V6与肿瘤转移相关。本组结果显示，淋巴结转移组CD44V6阳性率为77%，而阴性组为52.5%，二者比较，P<0.05，有显著性差异。
CD44V不仅可以预测肿瘤转移，而且可用于早期诊断及复发的评价。Matsamura采用RT-PCR技术，可以从微量标本(血、粪便)中检出CD44基因异常，作为早期诊断和高危人群普查的指标。郭亚军用Elisa法发现进展期结肠癌CD44升高，肿瘤切除后CD44水平下降。Mulder采用免疫组化技术也显示大肠肿瘤切除标本，若CD44V6阳性，常伴术后肿瘤复发。, http://www.100md.com
单位：张振玉 南京市第一医院消化科(210006)；陈 江 王崇文 祝金泉 张昆和 黄德强 江西医学院一附院消化研究所(330006)
关键词：
江苏医药990821 CD44分子是一种膜糖蛋白，参与细胞之间及细胞基质之间特异性粘附。目前发现CD44变异体(CD44V)异常表达，可作为肿瘤早期诊断、转移及复发的生物学标志物。为此我们采用免疫组织化学方法研究CD44V6在大肠腺瘤及大肠癌中表达。
材料与方法
一、材料 所有标本取自本院1990～1996年手术切除及病理活检标本。大肠腺瘤22例，大肠癌54例，其中管状腺癌30例、乳头状腺癌17例、粘液腺癌7例。鼠人CD44V6单抗及SP试剂盒均为美国Zymed公司产品。
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二、方法 所有标本均经10%福尔马林固定，石腊包埋连续切片，片厚5μm，免疫组化染色采用SP法。CD44V6按1：750稀释，在加一抗前标本于枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)中行微波修复抗原。每批染色均设阴性空白对照，即以PBS液代替一抗，以食道鳞状上皮作为阳性对照。结果判断采用半定量积分法，即根据每张切片的阳性细胞比例及着色深浅计划。着色细胞比例1/3以下为1分，1/3～2/3为2分，2/3以上为3分。着色程度，无着色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分，然后根据二者乘积判断阳性等级。0分为阴性，1～4分为弱阳性(+)，大于4分为强阳性(++)。
三、统计学处理 所有资料采用χ2检验。
结 果
CD44V6阳性染色部位位于细胞膜，腺瘤多呈灶性表达，色浅。12例(-)，9例(+)，1例(++)，而腺癌多呈弥漫性表达，18例(-)，16例(+)，20例(++)，两组比较p<0.01。具有显著性差异。其中淋巴结转移组8例(-)，27例+～++，无淋巴结转移组10例(-)，9例+～++，两组比较P<0.05。在组织类型上，管状腺癌18(-)，12例+～++，乳头状腺癌8例(-)，9例+～++。粘液腺癌4例(-)，3例+～++。三组比较P>0.05。
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讨 论
CD44是淋巴细胞归巢受体，包括标准型CD44(CD44S)及变异型CD44(CDV1―10)，前者存在于大多数细胞上，后者主要存在于上皮细胞源性细胞和肿瘤中，并认为其在肿瘤的发生侵袭和转移中起重要作用。本研究结果显示，大肠腺瘤和大肠癌中CD44V6皆有表达，大肠腺瘤阳性表达率为45.4%，且多呈灶性表达，色浅。大肠癌阳性表达率为66.6%，多呈弥漫性表达，且相对深染，这与Wielenga和Heider研究结果相一致。而且该作者还发现其表达率与异型增生分级相关，以中重度多见。Kim报道CD44基因异常表达在结肠腺瘤向结肠癌的演进过程中即已出现且早于Kras和p53基因突变，故认为CD44基因改变是大肠癌发生的早期事件。
肿瘤转移潜能大小是评价患者预后的关键，而淋巴结转移又是其重要指标。CD44基因在转录和翻译时可发生改变，从而导致CD44分子结构和功能异常，而影响了细胞间识别、粘附及信息传递，改变了细胞的生物学行为，造成侵袭和转移的发生，有资料表明CD44V6与肿瘤转移相关。本组结果显示，淋巴结转移组CD44V6阳性率为77%，而阴性组为52.5%，二者比较，P<0.05，有显著性差异。
CD44V不仅可以预测肿瘤转移，而且可用于早期诊断及复发的评价。Matsamura采用RT-PCR技术，可以从微量标本(血、粪便)中检出CD44基因异常，作为早期诊断和高危人群普查的指标。郭亚军用Elisa法发现进展期结肠癌CD44升高，肿瘤切除后CD44水平下降。Mulder采用免疫组化技术也显示大肠肿瘤切除标本，若CD44V6阳性，常伴术后肿瘤复发。, http://www.100md.com