大叶买麻藤化学成分研究△
作者：陈 浩* 林 茂**
单位：中国协和医科大学药物研究所 北京 100050中国医学科学院
关键词：大叶买麻藤；藤茎；二苯乙烯
中草药990805 摘 要 从大叶买麻藤Gnetum montanum藤茎中分得10个已知化合物。经理化常数和光谱分析鉴定为异丹叶大黄素(isorhapontigenin, Ⅰ)，白藜芦醇(resveratrol, Ⅱ)，胡萝卜苷(daucosterol, Ⅲ)， β-谷甾醇(β-sitosterol, Ⅳ)，硬脂酸(stearic acid, Ⅴ)， 买麻藤戊素(gnetifolin E, Ⅵ)， 买麻藤醇(gnetol, Ⅶ)， 异丹叶大黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷(isorhapontigenin-3-O-β-D-glucopyranoside, Ⅷ)，(一)ε-viniferin(Ⅸ)，买麻藤丙素(gnetifolin C, Ⅹ)。化合物Ⅴ首次从买麻藤属植物中分得。
, 百拇医药
大叶买麻藤主要分布于我国云南南部，广东等省及东南亚地区[1]，在民间与小叶买麻藤混用，治疗风湿性关节炎，腰肌劳损，筋骨酸软，跌打损伤，溃疡出血，支气管炎等疾病[2]。经药理动物试验证实大叶买麻藤乙醇提取物对大鼠蛋清性及酵母性关节炎有明显抗炎作用。为了阐明其活性成分，为此进行了化学成分研究。
有关大叶买麻藤化学成分研究，云南大学周建波等[3]从其水溶性部分得到6个化合物，它们分别是：2-羟基-3-甲氧基-4-甲氧羰基吡咯，2-羟基-3-甲氧甲基-4-甲氧羰基吡咯，3，4-二羟基-4-甲氧基二苄醚，2，3-二苯基吡咯和胺甲基甲醇。
作者从云南西双版纳产大叶买麻藤藤茎的60%乙醇提取物中得到15个单体，其中5个结构正待鉴定。本文报到结构已鉴定清楚的10个化合物。
大叶买麻藤藤茎的60%乙醇提取物，经过80%乙醇沉淀和50%丙酮沉淀除去杂质后，溶解部分经聚酰胺柱层析，硅胶常压，低压柱层析，反相低压，中压、高压柱层析，并结合制备薄层层析等手段，得到15个化合物，通过各种光谱、生源推测及化学手段鉴定为：异丹叶大黄素(isorhapontigenin， Ⅰ)，白藜芦醇(resveratrol, Ⅱ)，胡萝卜苷(daucosterol, Ⅲ)， β-谷甾醇(β-sitosterol, Ⅳ)，硬脂酸(stearic acid, Ⅴ)， 买麻藤戊素(gnetifolin E, Ⅵ)， 买麻藤醇(gnetol, Ⅶ)， 异丹叶大黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷(isorhapontigenin-3-O-β-D-glucopyranoside, Ⅷ)，(一)ε-viniferin(Ⅸ)，买麻藤丙素(gnetifolin C, Ⅹ)。还有5个成分为丹叶大黄素的二聚体，其结构正在鉴定中。
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1 仪器和试剂
熔点用Boetius熔点仪测定，温度计未校正；旋光用Perkin-Elmer 241光谱仪测定；质谱用ZAB-2F MAT， 711型质谱仪测定；红外用Perkin-elmer 683型光谱仪测定；核磁共振谱用Bruker AM-500 型核磁共振测定；硅胶薄层板用硅胶GF254(10～40 μ)加水调制；低压硅胶柱层析用硅胶H(10～40 μ)，N2加压(9.807～49.04)×103 Pa(以上所用硅胶均为青岛海洋化工厂产品)；反相低压柱层析：ODS-C18(35～70 μ)，Alltech出品，N2加压(9.807～49.04)×103 Pa；反相中压柱层析：UVILOG-5Ⅲ A型检测器(254 nm)， X.24.290x型泵，Lobar Rp-C8(25～40 μ)柱；酰胺柱层析：100～130 目(湖南澧县一中试剂厂生产)。
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2 提取与分离
大叶买麻藤干燥藤茎碎块(15 kg)，60%乙醇回流提取3次，滤液合并减压浓缩呈膏状后，用80% 乙醇溶解，弃去不溶物，可溶性部分减压浓缩成膏状后，再用50% 丙酮溶解，滤去不溶物，可溶性物减压浓缩得膏(898 g)。用聚酰胺拌样，经聚酰胺柱层析用H2O，30% EtOH，50% EtOH，95% EtOH，(CH3)2CO分别洗脱，得到A，B，C，D，E5个部分。
D部分(95%EtOH洗脱，125 g)，经粗硅胶干柱层析，以CHCl3-CH3OH-H2O(8∶1.5∶1，下层)为洗脱剂，展开至柱底，切割为Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ，Ⅶ7个部分。
Ⅰ(20 g)经硅胶柱层析，以CHCl3→CHCl3-CH3OH(19∶1)为洗脱剂，收集20份(50 mL/份)，第3～4份，经硅胶低压柱层析，以cyclohexane-EtOAc(4∶1)为洗脱剂得化合物Ⅳ(100 mg)。
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Ⅲ(6.7 g)，经硅胶低压柱层析，以CHCl3-CH3OH-H2O(8∶1.5∶1，下层)为洗脱剂，收集30份(100 mL/份)。第12～19份(1 g)，经硅胶低压柱层析，CHCl3-CH3OH(9∶1)为洗脱剂，得到化合物Ⅰ和Ⅱ的粗品。化合物Ⅰ粗品经硅胶制备薄层层析(CHCl3-CH3OH，9∶1)纯化，CH3OH-H2O重结晶得到化合物Ⅰ。化合物Ⅱ粗品经硅胶制备薄层层析(CHCl3-CH3OH，9∶1)精制，Rp-8中压液相柱层析(流动相：CH3OH-H2O，6∶4)纯化，CH3OH-H2O重结晶得到化合物Ⅱ。第25～30份，放置析出白色无定型粉末，过滤，甲醇冲洗，得到化合物Ⅲ。
Ⅳ和Ⅴ(18 g)，经硅胶柱层析，CHCl3-CH3OH(6∶1)为洗脱剂，收集30 份，合并为a,b,c,d 4个部分。
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a(2.6 g)，经硅胶低压柱层析，cyclohexane-EtOAc-CH3OH(1∶1∶0.1)为洗脱剂，得化合物Ⅶ粗品。经硅胶制备薄层层析精制及Sephadex LH-20凝胶柱层析(甲醇为洗脱剂)纯化，丙酮-苯重结晶，得化合物Ⅶ。
b(2.7 g)，经硅胶低压柱层析，cyclohexane-EtOAc(4∶1)为洗脱剂，收集25份(150 mL/份)，合并第16～20份，取70 mg经Rp-8中压液相柱层析(流动相： CH3OH-H2O，6∶4)纯化，得以化合物Ⅹ(50 mg)。
c(3 g)，经硅胶低压柱层析，petrol-EtOAc-CH3OH(5∶5∶0.5)为洗脱剂，收集30份(100 mL/份)，第5～6份(200 mg)，经ODS Rp-18低压液相柱层析(流动相：CH3OH-H2O-HOAc 45∶55∶0.3)及Sephadex LH-20凝胶柱层析(甲醇为洗脱剂)纯化，以醋酐-吡啶常法乙酰化，硅胶制备薄层层析(cyclohexane-EtOAc 2∶1)精制，得到化合物Ⅳ的乙酰物(5 mg)。
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d(200 mg)，经两次硅胶制备薄层层析(CHCl3-CH3OH-EtOAc-H2O 2∶2∶4∶1，下层)精制，得到化合物Ⅵ(150 mg)。
C部分(聚酰胺柱层析以50% EtOH洗脱)，经大孔吸附树脂柱层析，以H2O，20% EtOH，50%EtOH洗脱得到C1，C2，C3 3部分，取C3中200 mg，经两次硅胶制备薄层层析(CHCl3-CH3OH-EtOAc-H2O 2∶2∶4∶1，下层)精制，得到化合物Ⅷ(15mg)。
3 鉴定
化合物Ⅰ：淡黄色针状结晶(甲醇-水)，mp183℃～185℃，薄层Rf值、mp和IR图谱与异丹叶大黄素标准品一致。
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化合物Ⅱ：无色针状结晶(甲醇-水)，mp254℃～256℃，薄层Rf值、mp和IR图谱与白藜芦醇标准品一致。
化合物Ⅲ：白色无定型粉末，mp286℃～293℃，薄层Rf值、mp和IR图谱与胡萝卜苷标准品一致。
化合物Ⅳ：白色针晶(氯仿-甲醇)，mp135℃～137℃，薄层Rf值、mp和IR图谱与β-谷甾醇标准品一致。
化合物Ⅴ：淡黄色结晶，mp52℃～54℃，薄层Rf值、mp、MS和IR图谱与硬脂酸标准品一致。
化合物Ⅵ：淡黄色无定形粉末，[α]=-33.2°(c，0.78，Me2CO)。旋光值和IR图谱与买麻藤戊素标准品一致。
化合物Ⅶ：淡黄色结晶(苯-丙酮)，mp 268℃～270℃，薄层Rf值，mp，MS和IR图谱与买麻藤醇标准品一致。
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化合物Ⅷ：淡黄色无定形粉末，[α]=42.6°(c，0.67，Me2CO)，薄层Rf值、旋光值和IR图谱与异丹叶大黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷标准品一致。
化合物Ⅸ：淡黄色无定形粉末，[α]=-70°(c，0.067，Me2CO)。全乙酰物为无色无定形粉末；EIMS(rel.int.)m/z：664(M+，45%)，622(52)，580(40)，538(20)，496(10)，107(20)，43(100)；薄层Rf值，旋光值与(-)ε-viniferin标准品一致。
化合物Ⅹ：淡黄色无定形粉末，全乙酰物为无色针晶(丙酮-水)，mp172℃～174℃。IR、1HNMR数据与买藤丙素的乙酰物一致[4]。薄层Rf值与买麻藤丙素标准品一致。
致谢：样品由中国医学科学院药用植物研究所云南分所江开交先生采集，本所宋万志教授鉴定，药效试验由朱秀缓，程桂芳教授等测定。本所仪器室代测各种光谱。
参考文献
1 中国科学院《中国植物志》编委会.中国植物志(第7卷).1978：492
2 江苏新医学院编.中药大辞典.上册.上海：上海人民出版社，1997：990
3 周建波，等.植物学报，1989，18：234
4 Lin M, et al. Phytochemistry, 1992,31:633
收稿日期：1998-06-05, http://www.100md.com(陈 浩* 林 茂**)
单位：中国协和医科大学药物研究所 北京 100050中国医学科学院
关键词：大叶买麻藤；藤茎；二苯乙烯
中草药990805 摘 要 从大叶买麻藤Gnetum montanum藤茎中分得10个已知化合物。经理化常数和光谱分析鉴定为异丹叶大黄素(isorhapontigenin, Ⅰ)，白藜芦醇(resveratrol, Ⅱ)，胡萝卜苷(daucosterol, Ⅲ)， β-谷甾醇(β-sitosterol, Ⅳ)，硬脂酸(stearic acid, Ⅴ)， 买麻藤戊素(gnetifolin E, Ⅵ)， 买麻藤醇(gnetol, Ⅶ)， 异丹叶大黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷(isorhapontigenin-3-O-β-D-glucopyranoside, Ⅷ)，(一)ε-viniferin(Ⅸ)，买麻藤丙素(gnetifolin C, Ⅹ)。化合物Ⅴ首次从买麻藤属植物中分得。
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大叶买麻藤主要分布于我国云南南部，广东等省及东南亚地区[1]，在民间与小叶买麻藤混用，治疗风湿性关节炎，腰肌劳损，筋骨酸软，跌打损伤，溃疡出血，支气管炎等疾病[2]。经药理动物试验证实大叶买麻藤乙醇提取物对大鼠蛋清性及酵母性关节炎有明显抗炎作用。为了阐明其活性成分，为此进行了化学成分研究。
有关大叶买麻藤化学成分研究，云南大学周建波等[3]从其水溶性部分得到6个化合物，它们分别是：2-羟基-3-甲氧基-4-甲氧羰基吡咯，2-羟基-3-甲氧甲基-4-甲氧羰基吡咯，3，4-二羟基-4-甲氧基二苄醚，2，3-二苯基吡咯和胺甲基甲醇。
作者从云南西双版纳产大叶买麻藤藤茎的60%乙醇提取物中得到15个单体，其中5个结构正待鉴定。本文报到结构已鉴定清楚的10个化合物。
大叶买麻藤藤茎的60%乙醇提取物，经过80%乙醇沉淀和50%丙酮沉淀除去杂质后，溶解部分经聚酰胺柱层析，硅胶常压，低压柱层析，反相低压，中压、高压柱层析，并结合制备薄层层析等手段，得到15个化合物，通过各种光谱、生源推测及化学手段鉴定为：异丹叶大黄素(isorhapontigenin， Ⅰ)，白藜芦醇(resveratrol, Ⅱ)，胡萝卜苷(daucosterol, Ⅲ)， β-谷甾醇(β-sitosterol, Ⅳ)，硬脂酸(stearic acid, Ⅴ)， 买麻藤戊素(gnetifolin E, Ⅵ)， 买麻藤醇(gnetol, Ⅶ)， 异丹叶大黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷(isorhapontigenin-3-O-β-D-glucopyranoside, Ⅷ)，(一)ε-viniferin(Ⅸ)，买麻藤丙素(gnetifolin C, Ⅹ)。还有5个成分为丹叶大黄素的二聚体，其结构正在鉴定中。
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1 仪器和试剂
熔点用Boetius熔点仪测定，温度计未校正；旋光用Perkin-Elmer 241光谱仪测定；质谱用ZAB-2F MAT， 711型质谱仪测定；红外用Perkin-elmer 683型光谱仪测定；核磁共振谱用Bruker AM-500 型核磁共振测定；硅胶薄层板用硅胶GF254(10～40 μ)加水调制；低压硅胶柱层析用硅胶H(10～40 μ)，N2加压(9.807～49.04)×103 Pa(以上所用硅胶均为青岛海洋化工厂产品)；反相低压柱层析：ODS-C18(35～70 μ)，Alltech出品，N2加压(9.807～49.04)×103 Pa；反相中压柱层析：UVILOG-5Ⅲ A型检测器(254 nm)， X.24.290x型泵，Lobar Rp-C8(25～40 μ)柱；酰胺柱层析：100～130 目(湖南澧县一中试剂厂生产)。
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2 提取与分离
大叶买麻藤干燥藤茎碎块(15 kg)，60%乙醇回流提取3次，滤液合并减压浓缩呈膏状后，用80% 乙醇溶解，弃去不溶物，可溶性部分减压浓缩成膏状后，再用50% 丙酮溶解，滤去不溶物，可溶性物减压浓缩得膏(898 g)。用聚酰胺拌样，经聚酰胺柱层析用H2O，30% EtOH，50% EtOH，95% EtOH，(CH3)2CO分别洗脱，得到A，B，C，D，E5个部分。
D部分(95%EtOH洗脱，125 g)，经粗硅胶干柱层析，以CHCl3-CH3OH-H2O(8∶1.5∶1，下层)为洗脱剂，展开至柱底，切割为Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ，Ⅶ7个部分。
Ⅰ(20 g)经硅胶柱层析，以CHCl3→CHCl3-CH3OH(19∶1)为洗脱剂，收集20份(50 mL/份)，第3～4份，经硅胶低压柱层析，以cyclohexane-EtOAc(4∶1)为洗脱剂得化合物Ⅳ(100 mg)。
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Ⅲ(6.7 g)，经硅胶低压柱层析，以CHCl3-CH3OH-H2O(8∶1.5∶1，下层)为洗脱剂，收集30份(100 mL/份)。第12～19份(1 g)，经硅胶低压柱层析，CHCl3-CH3OH(9∶1)为洗脱剂，得到化合物Ⅰ和Ⅱ的粗品。化合物Ⅰ粗品经硅胶制备薄层层析(CHCl3-CH3OH，9∶1)纯化，CH3OH-H2O重结晶得到化合物Ⅰ。化合物Ⅱ粗品经硅胶制备薄层层析(CHCl3-CH3OH，9∶1)精制，Rp-8中压液相柱层析(流动相：CH3OH-H2O，6∶4)纯化，CH3OH-H2O重结晶得到化合物Ⅱ。第25～30份，放置析出白色无定型粉末，过滤，甲醇冲洗，得到化合物Ⅲ。
Ⅳ和Ⅴ(18 g)，经硅胶柱层析，CHCl3-CH3OH(6∶1)为洗脱剂，收集30 份，合并为a,b,c,d 4个部分。
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a(2.6 g)，经硅胶低压柱层析，cyclohexane-EtOAc-CH3OH(1∶1∶0.1)为洗脱剂，得化合物Ⅶ粗品。经硅胶制备薄层层析精制及Sephadex LH-20凝胶柱层析(甲醇为洗脱剂)纯化，丙酮-苯重结晶，得化合物Ⅶ。
b(2.7 g)，经硅胶低压柱层析，cyclohexane-EtOAc(4∶1)为洗脱剂，收集25份(150 mL/份)，合并第16～20份，取70 mg经Rp-8中压液相柱层析(流动相： CH3OH-H2O，6∶4)纯化，得以化合物Ⅹ(50 mg)。
c(3 g)，经硅胶低压柱层析，petrol-EtOAc-CH3OH(5∶5∶0.5)为洗脱剂，收集30份(100 mL/份)，第5～6份(200 mg)，经ODS Rp-18低压液相柱层析(流动相：CH3OH-H2O-HOAc 45∶55∶0.3)及Sephadex LH-20凝胶柱层析(甲醇为洗脱剂)纯化，以醋酐-吡啶常法乙酰化，硅胶制备薄层层析(cyclohexane-EtOAc 2∶1)精制，得到化合物Ⅳ的乙酰物(5 mg)。
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d(200 mg)，经两次硅胶制备薄层层析(CHCl3-CH3OH-EtOAc-H2O 2∶2∶4∶1，下层)精制，得到化合物Ⅵ(150 mg)。
C部分(聚酰胺柱层析以50% EtOH洗脱)，经大孔吸附树脂柱层析，以H2O，20% EtOH，50%EtOH洗脱得到C1，C2，C3 3部分，取C3中200 mg，经两次硅胶制备薄层层析(CHCl3-CH3OH-EtOAc-H2O 2∶2∶4∶1，下层)精制，得到化合物Ⅷ(15mg)。
3 鉴定
化合物Ⅰ：淡黄色针状结晶(甲醇-水)，mp183℃～185℃，薄层Rf值、mp和IR图谱与异丹叶大黄素标准品一致。
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化合物Ⅱ：无色针状结晶(甲醇-水)，mp254℃～256℃，薄层Rf值、mp和IR图谱与白藜芦醇标准品一致。
化合物Ⅲ：白色无定型粉末，mp286℃～293℃，薄层Rf值、mp和IR图谱与胡萝卜苷标准品一致。
化合物Ⅳ：白色针晶(氯仿-甲醇)，mp135℃～137℃，薄层Rf值、mp和IR图谱与β-谷甾醇标准品一致。
化合物Ⅴ：淡黄色结晶，mp52℃～54℃，薄层Rf值、mp、MS和IR图谱与硬脂酸标准品一致。
化合物Ⅵ：淡黄色无定形粉末，[α]=-33.2°(c，0.78，Me2CO)。旋光值和IR图谱与买麻藤戊素标准品一致。
化合物Ⅶ：淡黄色结晶(苯-丙酮)，mp 268℃～270℃，薄层Rf值，mp，MS和IR图谱与买麻藤醇标准品一致。
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化合物Ⅷ：淡黄色无定形粉末，[α]=42.6°(c，0.67，Me2CO)，薄层Rf值、旋光值和IR图谱与异丹叶大黄素-3-O-β-D-葡萄糖苷标准品一致。
化合物Ⅸ：淡黄色无定形粉末，[α]=-70°(c，0.067，Me2CO)。全乙酰物为无色无定形粉末；EIMS(rel.int.)m/z：664(M+，45%)，622(52)，580(40)，538(20)，496(10)，107(20)，43(100)；薄层Rf值，旋光值与(-)ε-viniferin标准品一致。
化合物Ⅹ：淡黄色无定形粉末，全乙酰物为无色针晶(丙酮-水)，mp172℃～174℃。IR、1HNMR数据与买藤丙素的乙酰物一致[4]。薄层Rf值与买麻藤丙素标准品一致。
致谢：样品由中国医学科学院药用植物研究所云南分所江开交先生采集，本所宋万志教授鉴定，药效试验由朱秀缓，程桂芳教授等测定。本所仪器室代测各种光谱。
参考文献
1 中国科学院《中国植物志》编委会.中国植物志(第7卷).1978：492
2 江苏新医学院编.中药大辞典.上册.上海：上海人民出版社，1997：990
3 周建波，等.植物学报，1989，18：234
4 Lin M, et al. Phytochemistry, 1992,31:633
收稿日期：1998-06-05, http://www.100md.com(陈 浩* 林 茂**)