末梢血快速测定幽门螺杆菌IgG抗体
作者：杨燕 侯淑萍 孙军强
单位：中国人民解放军空军86513部队医院 天津市 300074
关键词：螺杆菌，幽门；抗体，细菌/ 分析；胃炎；胃溃疡
世界华人消化杂志990936 中国图书馆分类号 R 573.2
Subject headings helicobacter pylori; antibody, bacterial/ analysis; gastritis; stomach ulcer
目前用于Hp诊断的方法很多，如创伤性的有快速尿素酶试验(RUT)、组织病理切片染色、分离培养、聚合酶链反应(PCR)及其相关技术. 非创伤性的有血清学、尿素呼气试验. 下面是我院引用美国Bioage公司原料加工制成非创伤性的采用末梢血(40 μL)快速检测幽门螺杆Hp-IgG抗体.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 1998-04/ 10因上消化道症状来我院胃肠门诊就诊，并行内镜检查的胃炎或消化性溃疡患者150例，其中男102例，年龄17岁～77岁，平均47岁. 女48例，年龄21岁～76岁，平均49岁. 全部病例既往均未进行过系统的杀灭Hp的治疗，并且1 mo内未服用过抗生素及铋剂等影响检测结果的药物.
1.2 方法
1.2.1 Hp-IgG检测卡 引进美国Bioage公司原料加工而成的Hp-IgG检测卡，用毛细管吸取被检患者(无名指、耳垂均无冻伤等外部炎症)末梢血40 μL加入测试卡上，5min后于“视窗”中观察结果. 被检血样中的Hp-IgG抗体与试验卡中的Hp高分子量的菌体蛋白抗原、染料结合，形成抗原-抗体附合物并被测试区的抗该复合物的抗体捕捉结合呈现红线. 如标本中无Hp抗体则测试区只结合反应区内的兰色素而形成兰线，即“视窗”内如果同时显示红线和兰线为阳性，只显示兰线为阴性. 没有任何标志出现者为失效，应重新更换测试卡测试.
, 百拇医药
1.2.2 间接ELISA法 抽取静脉血2 mL，待凝固后离心分离血清备用. 试剂盒由广东珠海丽珠集团、丽珠试剂厂生产，经过加样、水浴、冲洗后测得，用酶标仪于450 mm处读数，吸光度小于临界值为阴性，大于临界值为阳性.
1.2.3 快速尿素酶法(RUT) 试剂盒由福建三强生物化工公司出品. 内镜于胃窦、胃体部各取粘膜活检并放入检测井中，加入检测试剂后5min～10min内观察结果. 出现红颜色为阳性，无色为阴性.
1.2.4 组织涂片染色法 内镜活检标本(与尿素酶法活检部位相同)于玻片上制成涂片，革兰染色，油镜下观察. 见到革兰染色阳性的“S”形或“海鸥”形的典型的弯曲菌样细菌为阳性，否则为阴性.
2 结果
按照4种方法各自的阳性标准，Hp感染的检出情况如表1. 按照目前公认的满足条件，制订本研究的Hp阳性诊断标准为：①涂片见大量典型的“S”形或“海鸥”形的弯曲样细菌者；②涂片见少量典型的弯曲样细菌+RUT或ELISA法阳性者；③RUT和ELISA法同时阳性者，与Hp阳性标准比较，4种方法的检出准确性见表2.
, http://www.100md.com
表1 Hp感染的检出情况 (n) 方法
测试卡
ELISA
RUI
涂片
Hp(+)
108
110
102
108
Hp(-)
42
40
, 百拇医药
48
42
合计
150
150
150
150
表2 Hp感染检出的准确性
方法
阳性
假阳性
阴性
假阴性
, 百拇医药
敏感性(%)
特异性(%)
测试卡
99
6
40
5
95.6
87.1
ELISA
99
7
39
, http://www.100md.com
5
95.6
83.9
RUT
91
0
47
12
88.4a
79.5a
涂片
104
1
, http://www.100md.com
45
0
100.0
96.8
aP<0.05(U>1.9600),vs 涂片、试条、ELISA法.
测试卡检测 Hp感染的阳性预测值为94%，阴性预测值为90%，与涂片法比较符合率为92%，与ELISA法比较符合率为99%.
3 讨论
测试卡测定Hp-IgG所用抗原是直接从培养的Hp中分离提取的多种高分子量的菌体蛋白，与其他弯曲菌，如空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌、大肠杆菌等均无交叉反应. 对血液中Hp抗体测定的敏感度和特异度皆高，分别为95.6%与87.1%，证实此法对中国人群中Hp测定的敏感度和特异度均很高，它具有耗时少(5min)，准确度高、价廉、患者痛苦极小，与其他快速测定Hp抗体的方法比较，有用血量少(40 μL)省时(全过程只需5min～10min)敏感度高(95.6%)，特异度(87.1%)高，因此在临床上对卫生设备简陋地处边远地方的小医院应用适合，尤其适合少年儿童、体弱多病的老年患者. 可作为筛选检查及大规模的Hp感染的流行病学调查和Hp根除后的定期随访.
通讯作者 杨燕
收稿日期 1999-05-08, http://www.100md.com
单位：中国人民解放军空军86513部队医院 天津市 300074
关键词：螺杆菌，幽门；抗体，细菌/ 分析；胃炎；胃溃疡
世界华人消化杂志990936 中国图书馆分类号 R 573.2
Subject headings helicobacter pylori; antibody, bacterial/ analysis; gastritis; stomach ulcer
目前用于Hp诊断的方法很多，如创伤性的有快速尿素酶试验(RUT)、组织病理切片染色、分离培养、聚合酶链反应(PCR)及其相关技术. 非创伤性的有血清学、尿素呼气试验. 下面是我院引用美国Bioage公司原料加工制成非创伤性的采用末梢血(40 μL)快速检测幽门螺杆Hp-IgG抗体.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 1998-04/ 10因上消化道症状来我院胃肠门诊就诊，并行内镜检查的胃炎或消化性溃疡患者150例，其中男102例，年龄17岁～77岁，平均47岁. 女48例，年龄21岁～76岁，平均49岁. 全部病例既往均未进行过系统的杀灭Hp的治疗，并且1 mo内未服用过抗生素及铋剂等影响检测结果的药物.
1.2 方法
1.2.1 Hp-IgG检测卡 引进美国Bioage公司原料加工而成的Hp-IgG检测卡，用毛细管吸取被检患者(无名指、耳垂均无冻伤等外部炎症)末梢血40 μL加入测试卡上，5min后于“视窗”中观察结果. 被检血样中的Hp-IgG抗体与试验卡中的Hp高分子量的菌体蛋白抗原、染料结合，形成抗原-抗体附合物并被测试区的抗该复合物的抗体捕捉结合呈现红线. 如标本中无Hp抗体则测试区只结合反应区内的兰色素而形成兰线，即“视窗”内如果同时显示红线和兰线为阳性，只显示兰线为阴性. 没有任何标志出现者为失效，应重新更换测试卡测试.
, 百拇医药
1.2.2 间接ELISA法 抽取静脉血2 mL，待凝固后离心分离血清备用. 试剂盒由广东珠海丽珠集团、丽珠试剂厂生产，经过加样、水浴、冲洗后测得，用酶标仪于450 mm处读数，吸光度小于临界值为阴性，大于临界值为阳性.
1.2.3 快速尿素酶法(RUT) 试剂盒由福建三强生物化工公司出品. 内镜于胃窦、胃体部各取粘膜活检并放入检测井中，加入检测试剂后5min～10min内观察结果. 出现红颜色为阳性，无色为阴性.
1.2.4 组织涂片染色法 内镜活检标本(与尿素酶法活检部位相同)于玻片上制成涂片，革兰染色，油镜下观察. 见到革兰染色阳性的“S”形或“海鸥”形的典型的弯曲菌样细菌为阳性，否则为阴性.
2 结果
按照4种方法各自的阳性标准，Hp感染的检出情况如表1. 按照目前公认的满足条件，制订本研究的Hp阳性诊断标准为：①涂片见大量典型的“S”形或“海鸥”形的弯曲样细菌者；②涂片见少量典型的弯曲样细菌+RUT或ELISA法阳性者；③RUT和ELISA法同时阳性者，与Hp阳性标准比较，4种方法的检出准确性见表2.
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表1 Hp感染的检出情况 (n) 方法
测试卡
ELISA
RUI
涂片
Hp(+)
108
110
102
108
Hp(-)
42
40
, 百拇医药
48
42
合计
150
150
150
150
表2 Hp感染检出的准确性
方法
阳性
假阳性
阴性
假阴性
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敏感性(%)
特异性(%)
测试卡
99
6
40
5
95.6
87.1
ELISA
99
7
39
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5
95.6
83.9
RUT
91
0
47
12
88.4a
79.5a
涂片
104
1
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45
0
100.0
96.8
aP<0.05(U>1.9600),vs 涂片、试条、ELISA法.
测试卡检测 Hp感染的阳性预测值为94%，阴性预测值为90%，与涂片法比较符合率为92%，与ELISA法比较符合率为99%.
3 讨论
测试卡测定Hp-IgG所用抗原是直接从培养的Hp中分离提取的多种高分子量的菌体蛋白，与其他弯曲菌，如空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌、大肠杆菌等均无交叉反应. 对血液中Hp抗体测定的敏感度和特异度皆高，分别为95.6%与87.1%，证实此法对中国人群中Hp测定的敏感度和特异度均很高，它具有耗时少(5min)，准确度高、价廉、患者痛苦极小，与其他快速测定Hp抗体的方法比较，有用血量少(40 μL)省时(全过程只需5min～10min)敏感度高(95.6%)，特异度(87.1%)高，因此在临床上对卫生设备简陋地处边远地方的小医院应用适合，尤其适合少年儿童、体弱多病的老年患者. 可作为筛选检查及大规模的Hp感染的流行病学调查和Hp根除后的定期随访.
通讯作者 杨燕
收稿日期 1999-05-08, http://www.100md.com