脑性瘫痪大鼠交感神经与骨骼肌红、白纤维关系的研究
作者：吴珊鹏 罗永湘
单位：(吴珊鹏)福建医科大学附属第二医院，福建泉州 362000；(罗永湘)同济医院，湖北武汉 430030
关键词：痉挛性脑瘫;交感阻断；收缩肌纤维
现代康复990921 摘要 目的：探讨脑性瘫痪(简称脑瘫)大鼠交感神经与骨骼肌红、白纤维之间的关系。方法：将30只大白鼠做成痉挛性脑瘫模型，分成三组，随机选择一组采用颈总动脉周围交感神经网剥脱切除术，另一组采用颈上节交感神经切断术，于术后20d切取大鼠上肢部分肱三头肌组织，然后在光学显微镜下及IBAS图像分析仪上分别观察三组肱三头肌组织内快收缩肌纤维、慢收缩肌纤维及中间型纤维三者的改变情况。结果：交感神经阻断后，肌肉中的红纤维增加明显，而白纤维减少，尤以颈上节交感神经切断改变更为明显。结论：本研究为采用交感神经阻断治疗痉挛性脑瘫提供了一些依据。
, http://www.100md.com A study between twitch muscle fibers and
sympathetic nerve on central spastic palsy rats
WU Shan-peng LUO Yong-xiang.
Department of Orthopedics.The Second Affiliated Hospital
Fujian Medical University, Quanzhou 362000 ,China
Abstract Objective:To detect the relationships between twitch muscle fibre and sympathetic nerve on central spastic palsy rats.Methods:Thirty wistar rats were established as central spastic palsy model,then divided into three groups. One group received cervical perival cular sympathectomy(CPCS),other group received superior cervical sympathectomy(SCS). Removed some musculus triceps brachii of rats after sympathectomy. Detected the fast twitch muscle fibers and slow twitchmuscle fibres with microscope and graph analysis equipment.Results:The slow twitch muscle fibers incressed after sympathectomy. it is more significant in SCS group.Conclusion:The results might serve as a potential tool for the sympathentomy therapy of central spastic palsy.
, 百拇医药
Key words ]spastic celebral palsy; sympathectomy; twitch muscle fibre
脑瘫是上运动神经元损害的疾病,临床多见，目前尚无有效的治疗方法。为探索其治疗方法，本组对痉挛性脑瘫采用颈交感神经阻断，从实验角度观察其治疗效果，本部分介绍交感神经阻断后大鼠上肢肱三头肌内快收缩肌纤维与慢收缩肌纤维的改变情况。
1 材料与方法
1.1 实验动物分组 选用清洁级wistar大白鼠30只，体重200～250g，雌雄各半，随机均分为3组，每组雌雄各5只。
1.2 脑瘫模型的建立 分别将三组大鼠以戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔麻醉后，卧位固定于大鼠脑立体定位器上，安装定位辅助装置。在大鼠颅顶矢状缝作纵行切口，暴露前囱后6.6mm，矢状缝左侧1.0mm，用小型电钻在颅板上钻孔，直径约2mm，将阳极针电极(直径0.5mm)垂直插入9.7mm，阴极接鼠尾，通直流电刺激以毁损锥体束，刺激后拔出电极，关闭切口。并用10%活力碘消毒缝合创口。
, 百拇医药
1.3 颈部交感环路阻断 模型建立后第5d，在三组大鼠中随机选择二组，一组采用颈总动脉周围交感神经网剥脱切除术，另一组采用颈上节交感神经切断术，手术均在患侧颈部进行。于术后第20d分别切取三组大鼠上肢肱三头肌组织，约30g，冷冻处理。
1.4 组织染色 将所取组织置于冰箱冷冻，并分别做冰冻切片，采用琥珀酰胆碱法(SDH)染色。
1.5 光学显微镜下计数 所染切片在光学显微镜下做慢肌纤维计数，每张切片数4个视野，每个视野数染色较清晰的肌纤维束100个。其中色呈深蓝的为慢收缩纤维(红纤维)，淡蓝的为快收缩纤维(白纤维)，蓝色的为中间型纤维。每张切片计数取平均值，然后比较三种纤维所占比例，以60%为界，若切片中白纤维60%，则其活性为“+”，若红纤维60%，其活性为“+++”，介于中间活性为“++”。结果见表1。
表1 肉眼纤维计数 组别
, 百拇医药
红纤维数(个)
1组
14
31
30
14
21
29
14
13
33
28
2组
62
, http://www.100md.com
59
73
70
62
27
52
24
70
66
3组
18
20
16
52
, http://www.100md.com
38
36
78
64
42
52
注：由于三组三种纤维列表烦琐，因此表中只列红纤维改变情况。
统计结果：一组与二组：P<0.01。二组与三组：P>0.05。一组与三组：0.01
1.6 图像分析仪计数 将切片置于IBAS图像分析仪上再进行三种纤维计数(横截面积表示)。结果见表2。
表2 图像分析仪计数 组别
, 百拇医药
红纤维横截面积(um2)
1组
20020.31
13459.37
12781.29
16334.37
34551.56
37132.81
78473.44
65168.75
56992.19
92193.75
, http://www.100md.com
2组
253110.9
314881.2
275854.6
251701.5
194092.1
223207.8
335945.3
311607.8
283025.0
264214.0
3组
, http://www.100md.com
138226.5
104878.1
134509.3
145496.8
132567.1
183931.2
144510.9
198106.2
194064.0
183314.0
统计结果：一组与二组：P<0.01。二组与三组：P<0.01。一组与三组P<0.01。
, 百拇医药
1.7 统计学处理 所有参数用均数及标准差表达，差异显著性用t检验分析。P<0.01为有显著差异性。
2 结果
统计结果：内眼纤维计数见表1。图像分析仪计数见表2。
3 讨论
骨骼肌纤维主要由快收缩纤维(白纤维)和慢收缩纤维(红纤维)组成。交感神经及交感胺是通过对α及β受体作用于骨骼肌的红、白纤维，起易化作用，β受体对肌纤维发生直接作用，β受体激活后，引起快收缩白肌活动延长而慢收缩红肌的活动缩短[1]。本实验所出现的结果可能由于脑瘫后，肢体局部肾上腺素类交感胺释放增加，使α及β受体激活，当交感神经阻断后，受体被抑制，肌肉收缩的兴奋性下降，快收缩白肌活动缩短，而慢收缩红肌活动延长，从而出现慢收缩纤维增加，而快收缩纤维减少的结果。颈动脉周交感网剥脱只阻断上肢交感神经支配的一部分，而颈上节交感神经切除阻断上肢交感神经支配的大部分，阻断较完全，为此，其手术后所出现的结果，较前者明显。从肌肉结构可看出，交感神经阻断后，肌肉收缩的兴奋性有受抑制的表现，因此，肌痉挛将会有所缓解。
, 百拇医药
Karlson等(1983)[2]用狗做实验，将腰交感神经切断，结果狗下肢骨骼肌内的慢收缩纤维减少，而快收缩纤维增多。本实验在痉挛性脑瘫大鼠模型上切断颈交感神经，其结果显示：肌肉中的红纤维增加明显，而白纤维减少，尤以颈上节交感神经切断改变更为明显(图1、2、3)。此结果恰与Karlson的结果相反。对此，看法如下：本实验是在模型建立后第25d(即交感神经切断后第20d)取肌组织做检查(由于脑瘫模型的症状在第25d后会出现恢复表现，为此只能在神经阻断后第20d取样本)，而Karlson实验是在交感神经切断后第14周取样本，两实验时间相差长，是否交感神经切断后肌组织结构会出现一些转折性改变，尚有待做更多的实验加以论证。本实验是在痉挛性脑瘫模型上进行的，而Karlson实验是在正常狗上进行的，脑瘫肢体骨骼肌原已持续处于痉挛状态，神经切断前以白纤维为主，神经切断后，可能由于肌肉痉挛得到缓解，出现白纤维比例下降。本组实验对象为大鼠上肢，而Karlson实验对象为狗的下肢，是否两种动物不同肢体间也存在差异，有待探讨。
, 百拇医药
图1 图2 图3
图版说明
图1交感神经阻断前肌肉结构
图2颈动脉周交感网剥后肌肉结构,慢收缩肌纤维增加
图3颈上节交感神经阻断后肌肉结构,慢收缩肌纤维增加更明显
EXPLANATION OF FIGURES
Fig.1 Muscle fibre types before sympathectomy.
Fig.2 Muscle fibre types after cervical Perival cular sympathectomy,the slow twitch muscle fibre sincreased.
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Fig.3 Muscle fibre types after superior cervical sympathectomy,the
slow twitch muscle fibres increased significantly.
作者简介：吴珊鹏(1953-)，福建泉州人，男，骨科副主任医师，博士、硕士生导师，主要研究方向：儿童骨科疾病。
参考文献
[1] 王子栋,徐有怛.植物性神经系统生理学-基础与临床[M].北京:科学出版社,1994.316
[2] Karlson J.et al.The effect of lumbar sympathectomy on fiber composition.Contractility of skeletal muscle and regulation of centralcirculation in dogs.Acta physiol Scan,1993,119:1
收稿日期：1999-07-15, 百拇医药
单位：(吴珊鹏)福建医科大学附属第二医院，福建泉州 362000；(罗永湘)同济医院，湖北武汉 430030
关键词：痉挛性脑瘫;交感阻断；收缩肌纤维
现代康复990921 摘要 目的：探讨脑性瘫痪(简称脑瘫)大鼠交感神经与骨骼肌红、白纤维之间的关系。方法：将30只大白鼠做成痉挛性脑瘫模型，分成三组，随机选择一组采用颈总动脉周围交感神经网剥脱切除术，另一组采用颈上节交感神经切断术，于术后20d切取大鼠上肢部分肱三头肌组织，然后在光学显微镜下及IBAS图像分析仪上分别观察三组肱三头肌组织内快收缩肌纤维、慢收缩肌纤维及中间型纤维三者的改变情况。结果：交感神经阻断后，肌肉中的红纤维增加明显，而白纤维减少，尤以颈上节交感神经切断改变更为明显。结论：本研究为采用交感神经阻断治疗痉挛性脑瘫提供了一些依据。
, http://www.100md.com A study between twitch muscle fibers and
sympathetic nerve on central spastic palsy rats
WU Shan-peng LUO Yong-xiang.
Department of Orthopedics.The Second Affiliated Hospital
Fujian Medical University, Quanzhou 362000 ,China
Abstract Objective:To detect the relationships between twitch muscle fibre and sympathetic nerve on central spastic palsy rats.Methods:Thirty wistar rats were established as central spastic palsy model,then divided into three groups. One group received cervical perival cular sympathectomy(CPCS),other group received superior cervical sympathectomy(SCS). Removed some musculus triceps brachii of rats after sympathectomy. Detected the fast twitch muscle fibers and slow twitchmuscle fibres with microscope and graph analysis equipment.Results:The slow twitch muscle fibers incressed after sympathectomy. it is more significant in SCS group.Conclusion:The results might serve as a potential tool for the sympathentomy therapy of central spastic palsy.
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Key words ]spastic celebral palsy; sympathectomy; twitch muscle fibre
脑瘫是上运动神经元损害的疾病,临床多见，目前尚无有效的治疗方法。为探索其治疗方法，本组对痉挛性脑瘫采用颈交感神经阻断，从实验角度观察其治疗效果，本部分介绍交感神经阻断后大鼠上肢肱三头肌内快收缩肌纤维与慢收缩肌纤维的改变情况。
1 材料与方法
1.1 实验动物分组 选用清洁级wistar大白鼠30只，体重200～250g，雌雄各半，随机均分为3组，每组雌雄各5只。
1.2 脑瘫模型的建立 分别将三组大鼠以戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔麻醉后，卧位固定于大鼠脑立体定位器上，安装定位辅助装置。在大鼠颅顶矢状缝作纵行切口，暴露前囱后6.6mm，矢状缝左侧1.0mm，用小型电钻在颅板上钻孔，直径约2mm，将阳极针电极(直径0.5mm)垂直插入9.7mm，阴极接鼠尾，通直流电刺激以毁损锥体束，刺激后拔出电极，关闭切口。并用10%活力碘消毒缝合创口。
, 百拇医药
1.3 颈部交感环路阻断 模型建立后第5d，在三组大鼠中随机选择二组，一组采用颈总动脉周围交感神经网剥脱切除术，另一组采用颈上节交感神经切断术，手术均在患侧颈部进行。于术后第20d分别切取三组大鼠上肢肱三头肌组织，约30g，冷冻处理。
1.4 组织染色 将所取组织置于冰箱冷冻，并分别做冰冻切片，采用琥珀酰胆碱法(SDH)染色。
1.5 光学显微镜下计数 所染切片在光学显微镜下做慢肌纤维计数，每张切片数4个视野，每个视野数染色较清晰的肌纤维束100个。其中色呈深蓝的为慢收缩纤维(红纤维)，淡蓝的为快收缩纤维(白纤维)，蓝色的为中间型纤维。每张切片计数取平均值，然后比较三种纤维所占比例，以60%为界，若切片中白纤维60%，则其活性为“+”，若红纤维60%，其活性为“+++”，介于中间活性为“++”。结果见表1。
表1 肉眼纤维计数 组别
, 百拇医药
红纤维数(个)
1组
14
31
30
14
21
29
14
13
33
28
2组
62
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59
73
70
62
27
52
24
70
66
3组
18
20
16
52
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38
36
78
64
42
52
注：由于三组三种纤维列表烦琐，因此表中只列红纤维改变情况。
统计结果：一组与二组：P<0.01。二组与三组：P>0.05。一组与三组：0.01
1.6 图像分析仪计数 将切片置于IBAS图像分析仪上再进行三种纤维计数(横截面积表示)。结果见表2。
表2 图像分析仪计数 组别
, 百拇医药
红纤维横截面积(um2)
1组
20020.31
13459.37
12781.29
16334.37
34551.56
37132.81
78473.44
65168.75
56992.19
92193.75
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2组
253110.9
314881.2
275854.6
251701.5
194092.1
223207.8
335945.3
311607.8
283025.0
264214.0
3组
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138226.5
104878.1
134509.3
145496.8
132567.1
183931.2
144510.9
198106.2
194064.0
183314.0
统计结果：一组与二组：P<0.01。二组与三组：P<0.01。一组与三组P<0.01。
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1.7 统计学处理 所有参数用均数及标准差表达，差异显著性用t检验分析。P<0.01为有显著差异性。
2 结果
统计结果：内眼纤维计数见表1。图像分析仪计数见表2。
3 讨论
骨骼肌纤维主要由快收缩纤维(白纤维)和慢收缩纤维(红纤维)组成。交感神经及交感胺是通过对α及β受体作用于骨骼肌的红、白纤维，起易化作用，β受体对肌纤维发生直接作用，β受体激活后，引起快收缩白肌活动延长而慢收缩红肌的活动缩短[1]。本实验所出现的结果可能由于脑瘫后，肢体局部肾上腺素类交感胺释放增加，使α及β受体激活，当交感神经阻断后，受体被抑制，肌肉收缩的兴奋性下降，快收缩白肌活动缩短，而慢收缩红肌活动延长，从而出现慢收缩纤维增加，而快收缩纤维减少的结果。颈动脉周交感网剥脱只阻断上肢交感神经支配的一部分，而颈上节交感神经切除阻断上肢交感神经支配的大部分，阻断较完全，为此，其手术后所出现的结果，较前者明显。从肌肉结构可看出，交感神经阻断后，肌肉收缩的兴奋性有受抑制的表现，因此，肌痉挛将会有所缓解。
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Karlson等(1983)[2]用狗做实验，将腰交感神经切断，结果狗下肢骨骼肌内的慢收缩纤维减少，而快收缩纤维增多。本实验在痉挛性脑瘫大鼠模型上切断颈交感神经，其结果显示：肌肉中的红纤维增加明显，而白纤维减少，尤以颈上节交感神经切断改变更为明显(图1、2、3)。此结果恰与Karlson的结果相反。对此，看法如下：本实验是在模型建立后第25d(即交感神经切断后第20d)取肌组织做检查(由于脑瘫模型的症状在第25d后会出现恢复表现，为此只能在神经阻断后第20d取样本)，而Karlson实验是在交感神经切断后第14周取样本，两实验时间相差长，是否交感神经切断后肌组织结构会出现一些转折性改变，尚有待做更多的实验加以论证。本实验是在痉挛性脑瘫模型上进行的，而Karlson实验是在正常狗上进行的，脑瘫肢体骨骼肌原已持续处于痉挛状态，神经切断前以白纤维为主，神经切断后，可能由于肌肉痉挛得到缓解，出现白纤维比例下降。本组实验对象为大鼠上肢，而Karlson实验对象为狗的下肢，是否两种动物不同肢体间也存在差异，有待探讨。
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图1 图2 图3
图版说明
图1交感神经阻断前肌肉结构
图2颈动脉周交感网剥后肌肉结构,慢收缩肌纤维增加
图3颈上节交感神经阻断后肌肉结构,慢收缩肌纤维增加更明显
EXPLANATION OF FIGURES
Fig.1 Muscle fibre types before sympathectomy.
Fig.2 Muscle fibre types after cervical Perival cular sympathectomy,the slow twitch muscle fibre sincreased.
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Fig.3 Muscle fibre types after superior cervical sympathectomy,the
slow twitch muscle fibres increased significantly.
作者简介：吴珊鹏(1953-)，福建泉州人，男，骨科副主任医师，博士、硕士生导师，主要研究方向：儿童骨科疾病。
参考文献
[1] 王子栋,徐有怛.植物性神经系统生理学-基础与临床[M].北京:科学出版社,1994.316
[2] Karlson J.et al.The effect of lumbar sympathectomy on fiber composition.Contractility of skeletal muscle and regulation of centralcirculation in dogs.Acta physiol Scan,1993,119:1
收稿日期：1999-07-15, 百拇医药