消化性溃疡及胃癌患者血清CagA VacA抗体研究
作者：黄品川 陈彩风 程荣墀 叶蕤 卢惟纯
单位：黄品川 程荣墀 叶蕤 卢惟纯 温州市第三医院 1消化科; 陈彩风 检验科 浙江省温州市 325000
关键词：螺杆菌、幽门；CagA；VacA；消化性溃疡，胃肿瘤
世界华人消化杂志991046 中国图书馆分类号 R735.2
Subject headings helicobacter pylori; CagA; VacA; peptic ulcer; stomachneoplasms;
细胞毒素相关蛋白(cytotoxin associated protein, CagA)和空泡形成毒素(vacuolating cytotoxin, VacA)是幽门螺杆菌(Hp)相应的CagA，VacA基因编码产生的两种蛋白质，是Hp的重要致病因子，也作为Hp毒力分型的标志[1]，与消化性溃疡(PU)、胃癌有密切关系[2，3]，由于Hp菌株类型的分布存在明显的地区差异[4，5]. 我们检测了本地区PU和胃癌患者的血清CagA，VacA抗体，旨在探讨我国东南沿海地区CagA，VacA与PU及胃癌的关系.
, http://www.100md.com
1 材料和方法
1.1 材料 PU76例，男52例，女24例，年龄18岁～74岁；胃癌31例，男28例，女3例，年龄43岁～75岁；慢性胃炎33例，男21例，女12例，年龄24岁～56岁，所有患者均经内镜及病理证实. 另设非消化科同期住院患者且无胃病史、近期无消化道症状者28例为对照组，男17例，女11例，年龄33岁～64岁.
1.2 方法 用Western blot法检测血清中CagA，VacA抗体，采用新加坡Genelabs公司的Helico blot 2.0药盒，使用国产TS-8转移脱色摇床，严格按产品说明书操作. 结果判断：每份薄膜共有6条条带，其抗原Mr分别是19.5，26.5，30，35，89，116. 前3条中任2条显色和(或)后3者中任1条显色均判为Hp阳性. 89显色判为VacA阳性，116显色判为CagA阳性. CagA,VacA均阳性为Ⅰ型Hp，均阴性为Ⅱ型Hp，1项阳性为中间型.
, 百拇医药
2 结果
Hp感染率各组相比无统计学意义. CagA以PU组最高，明显高于其他3组. VacA以胃癌组最高，胃炎与对照组各项相比均无统计学意义(表1).
表1 各组胃病Helico blot 2.0检测血清Hp抗体结果 组别
n
Hp(%)
Ⅰ型Hp(%)
CagA(%)
VacA(%)
PU
78
, http://www.100md.com 76(97.4)
22(28.2)a
65(83.3)bcd
26(33.3)
胃癌
31
27(87.1)
10(32.3)a
18(54.5)
13(41.9)a
CG
, 百拇医药
33
29(87.9)
4(12.1)
20(60.6)
7(21.2)
对照
28
24(85.7)
2(7.1)
15(53.6)
5(17.9)
aP<0.05，bP<0.01，vs对照组；cP<0.05vs胃炎组；dP<0.05vs胃癌组.
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3 讨论
1988年，Leunk发现部分Hp菌株能产生一种使Hela细胞产生空泡的毒素称空泡形成毒素[4]. 此后国外对Hp的致病因子进行了大量的研究. CagA，VacA阳性菌株能促使胃上皮分泌IL-8以加重炎症反应[6]. 动物实验提示，接种Ⅰ型Hp使小鼠溃疡愈合延迟[7]. CagA阳性，VacAS1a阳性株能增加胃粒膜细胞的增殖而未能相应增加细胞凋亡，提示与胃癌有关[8].
我们的资料显示，人群中Hp感染率相当高，25例无消化道病状的对照组中有21例感染过Hp. Hp感染率各组之间相比无统计学意义. PU组和胃癌组的Ⅰ型Hp感染率则明显高于对照组和胃炎组(P<0.05)，与文献报告一致[3，9]. 提示在Hp感染率相当高的人群中，PU及胃癌与是否感染毒力较强的Ⅰ型Hp有密切关系.
, http://www.100md.com
PU组与胃癌组的CagA，VacA阳性率有所不同，PU组CagA，VacA均高，尤其是CagA明显高于胃炎和对照组(P<0.01)，这与Elios et al[10]的研究相一致. 该研究发现宿主对Hp感染后是否形成溃疡跟宿主的免疫反应类型有关，极化Th1反应(polarized Th1 response)有助于溃疡形成. Tho反应和IL4的产生则阻止溃疡形成，而极化Th1反应与Hp的CagA抗原有关. 胃癌组CagA阳性率与对照组相比无统计学意义，这与Mitchell et al[11]在我国广东地区的检测相似. 但VacA却明显高于对照组. Satin et al[12]的研究发现VacA能抑制Hela细胞前溶酶素D(procathepsin D)的成熟和释放，并抑制EGF的灭活，而EGF的过度表达可能与胃癌有关.
通讯作者：黄品川
参考文献
, http://www.100md.com
1 韩锋产，阎小君，苏成芝. 幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A及细胞空泡毒素A的研究. 华人消化杂志，1998；6：160-161
2 Harry HXX, Association between Helicobacterpylori and gastric cancer: curret knowledge and future research. WJG, 1998；4：93-96
3 Wang ZX, Shen HF, Cen HJ, Adherent properties of Helicobacter pylori to hemen epithelial cells. China Nalt New Gastroenterol, 1997；3：35-37
4 Leunk KD, Johnsen PT, Dauid BC, Cytotoxin activity in broth-cultrue filtrates of campylobater pylori. J Med Microbiol, 1988; 26:93-99
, 百拇医药
5 Yang JC, Wang TH, Wang HJ, Kuo CH, Wang JT, Wang WC. Genetic analysis of the cytotoxin associated gene and the vacuolating toxigene in Helicobacter pylori strains isolated from Taiwanese patients. Am J Gastroenterol, 1997; 92:1316-1321
6 Crabtree JE. Immune and inflammatory responses to Helicobacter pylori infection. Scand J Gastroenterol, 1996; 215(Suppl):3-10
7 Li H, Mellgard B, Helander HF. Inoculation of VacA and CagA Helicobacter pylori delays gastric ulcer healing in the rat. Scand J Gastroenterol, 1997;32:439-444
, http://www.100md.com
8 Peek RM, Moss SF, Tham KJ, Perez GI, Wang S, Miller GG. Helicobacter pylori CagA strains and dissociation at gastric epithelial cell proliferation from apoptosis. J Natl Cancer Inst, 1997;89:863-868
9 Blum AL. Helicobacter pylori and peptic ulcer disease. Scand J Gastroenterol, 1996;214(Supp1):24-27
10 Elios MM, Manghettim, Almerigogna F, Amedei A, Costa F, Burroni, Different cytokine profile and autigen specificity repertoire in Helicobacter pylori specific T cell clones from the antrum of chronic gastritis patients with or without peptic ulcer. Eur J Immunol, 1997;27:1751-1755
, 百拇医药
11 Mitchell HM, Hazell SL, Li YY, Hu PJ. Serological response to specific Helicobacter pylori antigens: antibody against CagA antigen is not predictive of gastric cancer in a developing country. Am J Gastroenterol, 1996;91:1785-1788
12 Satin B, Norais N, Teltord J, Rappuoli R, Murgia M, Montecucco C. Effect of Helicobacter pylori vacuolating toxin on maturation and extracellular release of procathepsin D and on epidermal growth factor degradation. J Biol Chem, 1997;272:25022-25028
收稿日期 1999-03-06 修回日期 1999-05-15, 百拇医药
单位：黄品川 程荣墀 叶蕤 卢惟纯 温州市第三医院 1消化科; 陈彩风 检验科 浙江省温州市 325000
关键词：螺杆菌、幽门；CagA；VacA；消化性溃疡，胃肿瘤
世界华人消化杂志991046 中国图书馆分类号 R735.2
Subject headings helicobacter pylori; CagA; VacA; peptic ulcer; stomachneoplasms;
细胞毒素相关蛋白(cytotoxin associated protein, CagA)和空泡形成毒素(vacuolating cytotoxin, VacA)是幽门螺杆菌(Hp)相应的CagA，VacA基因编码产生的两种蛋白质，是Hp的重要致病因子，也作为Hp毒力分型的标志[1]，与消化性溃疡(PU)、胃癌有密切关系[2，3]，由于Hp菌株类型的分布存在明显的地区差异[4，5]. 我们检测了本地区PU和胃癌患者的血清CagA，VacA抗体，旨在探讨我国东南沿海地区CagA，VacA与PU及胃癌的关系.
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1 材料和方法
1.1 材料 PU76例，男52例，女24例，年龄18岁～74岁；胃癌31例，男28例，女3例，年龄43岁～75岁；慢性胃炎33例，男21例，女12例，年龄24岁～56岁，所有患者均经内镜及病理证实. 另设非消化科同期住院患者且无胃病史、近期无消化道症状者28例为对照组，男17例，女11例，年龄33岁～64岁.
1.2 方法 用Western blot法检测血清中CagA，VacA抗体，采用新加坡Genelabs公司的Helico blot 2.0药盒，使用国产TS-8转移脱色摇床，严格按产品说明书操作. 结果判断：每份薄膜共有6条条带，其抗原Mr分别是19.5，26.5，30，35，89，116. 前3条中任2条显色和(或)后3者中任1条显色均判为Hp阳性. 89显色判为VacA阳性，116显色判为CagA阳性. CagA,VacA均阳性为Ⅰ型Hp，均阴性为Ⅱ型Hp，1项阳性为中间型.
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2 结果
Hp感染率各组相比无统计学意义. CagA以PU组最高，明显高于其他3组. VacA以胃癌组最高，胃炎与对照组各项相比均无统计学意义(表1).
表1 各组胃病Helico blot 2.0检测血清Hp抗体结果 组别
n
Hp(%)
Ⅰ型Hp(%)
CagA(%)
VacA(%)
PU
78
, http://www.100md.com 76(97.4)
22(28.2)a
65(83.3)bcd
26(33.3)
胃癌
31
27(87.1)
10(32.3)a
18(54.5)
13(41.9)a
CG
, 百拇医药
33
29(87.9)
4(12.1)
20(60.6)
7(21.2)
对照
28
24(85.7)
2(7.1)
15(53.6)
5(17.9)
aP<0.05，bP<0.01，vs对照组；cP<0.05vs胃炎组；dP<0.05vs胃癌组.
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3 讨论
1988年，Leunk发现部分Hp菌株能产生一种使Hela细胞产生空泡的毒素称空泡形成毒素[4]. 此后国外对Hp的致病因子进行了大量的研究. CagA，VacA阳性菌株能促使胃上皮分泌IL-8以加重炎症反应[6]. 动物实验提示，接种Ⅰ型Hp使小鼠溃疡愈合延迟[7]. CagA阳性，VacAS1a阳性株能增加胃粒膜细胞的增殖而未能相应增加细胞凋亡，提示与胃癌有关[8].
我们的资料显示，人群中Hp感染率相当高，25例无消化道病状的对照组中有21例感染过Hp. Hp感染率各组之间相比无统计学意义. PU组和胃癌组的Ⅰ型Hp感染率则明显高于对照组和胃炎组(P<0.05)，与文献报告一致[3，9]. 提示在Hp感染率相当高的人群中，PU及胃癌与是否感染毒力较强的Ⅰ型Hp有密切关系.
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PU组与胃癌组的CagA，VacA阳性率有所不同，PU组CagA，VacA均高，尤其是CagA明显高于胃炎和对照组(P<0.01)，这与Elios et al[10]的研究相一致. 该研究发现宿主对Hp感染后是否形成溃疡跟宿主的免疫反应类型有关，极化Th1反应(polarized Th1 response)有助于溃疡形成. Tho反应和IL4的产生则阻止溃疡形成，而极化Th1反应与Hp的CagA抗原有关. 胃癌组CagA阳性率与对照组相比无统计学意义，这与Mitchell et al[11]在我国广东地区的检测相似. 但VacA却明显高于对照组. Satin et al[12]的研究发现VacA能抑制Hela细胞前溶酶素D(procathepsin D)的成熟和释放，并抑制EGF的灭活，而EGF的过度表达可能与胃癌有关.
通讯作者：黄品川
参考文献
, http://www.100md.com
1 韩锋产，阎小君，苏成芝. 幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A及细胞空泡毒素A的研究. 华人消化杂志，1998；6：160-161
2 Harry HXX, Association between Helicobacterpylori and gastric cancer: curret knowledge and future research. WJG, 1998；4：93-96
3 Wang ZX, Shen HF, Cen HJ, Adherent properties of Helicobacter pylori to hemen epithelial cells. China Nalt New Gastroenterol, 1997；3：35-37
4 Leunk KD, Johnsen PT, Dauid BC, Cytotoxin activity in broth-cultrue filtrates of campylobater pylori. J Med Microbiol, 1988; 26:93-99
, 百拇医药
5 Yang JC, Wang TH, Wang HJ, Kuo CH, Wang JT, Wang WC. Genetic analysis of the cytotoxin associated gene and the vacuolating toxigene in Helicobacter pylori strains isolated from Taiwanese patients. Am J Gastroenterol, 1997; 92:1316-1321
6 Crabtree JE. Immune and inflammatory responses to Helicobacter pylori infection. Scand J Gastroenterol, 1996; 215(Suppl):3-10
7 Li H, Mellgard B, Helander HF. Inoculation of VacA and CagA Helicobacter pylori delays gastric ulcer healing in the rat. Scand J Gastroenterol, 1997;32:439-444
, http://www.100md.com
8 Peek RM, Moss SF, Tham KJ, Perez GI, Wang S, Miller GG. Helicobacter pylori CagA strains and dissociation at gastric epithelial cell proliferation from apoptosis. J Natl Cancer Inst, 1997;89:863-868
9 Blum AL. Helicobacter pylori and peptic ulcer disease. Scand J Gastroenterol, 1996;214(Supp1):24-27
10 Elios MM, Manghettim, Almerigogna F, Amedei A, Costa F, Burroni, Different cytokine profile and autigen specificity repertoire in Helicobacter pylori specific T cell clones from the antrum of chronic gastritis patients with or without peptic ulcer. Eur J Immunol, 1997;27:1751-1755
, 百拇医药
11 Mitchell HM, Hazell SL, Li YY, Hu PJ. Serological response to specific Helicobacter pylori antigens: antibody against CagA antigen is not predictive of gastric cancer in a developing country. Am J Gastroenterol, 1996;91:1785-1788
12 Satin B, Norais N, Teltord J, Rappuoli R, Murgia M, Montecucco C. Effect of Helicobacter pylori vacuolating toxin on maturation and extracellular release of procathepsin D and on epidermal growth factor degradation. J Biol Chem, 1997;272:25022-25028
收稿日期 1999-03-06 修回日期 1999-05-15, 百拇医药