烫伤对大鼠肠粘膜内花生四烯酸代谢物的影响
作者：孟德胜 汪仕良
单位：第三军医大学附属西南医院烧伤研究所，重庆 400038
关键词：烫伤；肠粘膜；花生四烯酸；代谢
第三军医大学学报991137
中图法分类号 R644 文献标识码 B
The influence of burn on the metabolism of arachidonic acid in small intestine in rats
烫伤引起的应激反应会导致胃肠道粘膜严重损伤，其机制尚不完全清楚。有人认为[1]花生四烯酸代谢产物PGs、TXA2等，在粘膜损伤和修复过程中起重要作用。但目前对烫伤后肠粘膜内花生四烯酸代谢变化研究较少。本实验通过测定大鼠烫伤后空肠和回肠内三种花生四烯酸代谢产物含量的变化，进一步揭示烫伤导致肠粘膜损伤的发病机制，并为促进肠粘膜修复提供线索。
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1 材料与方法
1.1 仪器
FT-608 125I放免测定仪(中国)，BACKMAN紫外分光光度计(德国)。
1.2 动物
Wistar大鼠42只，体重180～220 g，由本校动物实验中心提供。动物背部除毛，饲养24 h后以(94±1)°C热水烫伤18～20 s，烫伤面积占总体表面积的30%，病理学检验证实为Ⅲ度烫伤。
1.3 取材
动物随机分为6组，烫伤后分别于0、6、12、24、48、72 h断头处死，处死动物前禁食12 h。取空肠和回肠轻轻洗净粪便，刮取肠粘膜，迅速置液氮中冷冻保存。测定时取约150 mg肠粘膜，以生理盐水3ml匀浆，3000 r/min离心15 min，取上清液备测。
, 百拇医药
1.4 放免法测定上清液中PGE2、TXB2和6-ketal-PGF1α的含量
PGE2、TXB2和6-ketal-PGF1α放免分析试剂盒均购自苏州医学院血栓室。取待测液100 μl与相同体积的125I示踪剂混匀后加入相应抗体与之反应，再以聚乙二醇4 000吸附抗原抗体复合物，通过测定其放射性即可推算出样品中三种花生四烯酸代谢产物的含量。
1.5 考马氏亮蓝法测定待测液中蛋白质的含量[2]
1.6 数据统计 结果以每mg蛋白中所含3种代谢产物pg数表示(x±s)，组间进行显著性t检验。
2 结果见表1
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表1 烫伤大鼠小肠粘膜内PGE2、TXB2、6-keto-PGF1α
及TXB2/6-keto-PGF1α的变化 Time
(h)
PGE2
(pg/mg)
TXB2
(pg/mg)
6-keto-PGF1α
(pg/mg)
, 百拇医药
TXB2/PGF1α
空肠
0
187.5±53.42
495.1±148.9
261.7±62.00
1.902±0.561
6
105.8±20.30☆
267.9±111.9☆☆
145.9±38.41☆☆
, 百拇医药
1.819±0.459
12
150.0±54.92
11.2±72.51☆☆
122.7±34.24☆☆
0.889±0.648☆☆
24
125.1±41.73☆
264.2±58.86☆☆
120.0±33.67☆☆
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2.324±0.782
48
109.8±16.23☆
325.9±75.64☆
106.3±64.44☆☆
3.798±0.853☆☆
72
83.56±36.33☆☆
257.9±86.40☆☆
103.6±30.24☆☆
, http://www.100md.com
2.584±0.509☆
回肠
0
158.4±46.02
340.8±172.5
202.6±56.31
1.797±0.865
6
98.67±25.57☆
165.6±77.26☆☆
97.12±28.35☆☆
, http://www.100md.com
1.755±0.874
12
117.7±32.00
157.9±39.50☆
120.0±18.40☆
1.475±0.458
24
103.0±10.53☆
261.3±62.18
120.4±48.33☆
, http://www.100md.com 2.363±0.428
48
122.0±30.08
377.2±179.1
121.1±46.15☆
3.402±1.058☆☆
72
68.50±29.13☆☆
201.2±42.47☆
87.20±22.00☆☆
, http://www.100md.com
2.511±0.648☆
☆：P<0.05,☆☆：P<0.01 vs control
在空肠和回肠中PGE2含量烫伤后6 h即开始下降，12 h后略有恢复，24 h后又逐渐降低。TXB2的含量在烫伤后12 h下降最明显，24 h后开始增加，72 h时又显著下降。在空肠中6-keto-PGF1α的含量呈持续性下降趋势，且各时项点与对照组相比均具有非常显著性差异；在回肠中则以烫伤后6 h和72 h时下降最明显。而TXB2/6-keto-PGF1α的比值则呈先下降后上升的趋势，最低点为烫伤后12 h，最高点为烫伤后48 h。
3 讨论
花生四烯酸的代谢产物在机体的病理和生理过程中具有重要作用，早在70年代就有人提出PGE2减少是导致消化性溃疡发生的首要因素。应激性溃疡是烧伤病人的合并症，吴予平等[3]证明烫伤大鼠胃粘膜损伤与PGE2减少有关，给予消炎痛抑制前列腺素的产生可加重粘膜损伤程度。本实验结果显示大鼠烫伤后小肠粘膜内花生四烯酸代谢产物有与之类似的变化规律。应激反应发生时基础代谢率增加，前列腺素和血栓烷素分解代谢加快，故而烫伤6 h内其含量下降，随后PGE2等代偿性增加，这是机体的防御性反应。应激时间延长，机体转入失代偿期，PGE2等含量随之降低。以往的研究表明[4]大鼠烧伤24 h后胃肠粘膜即出现较严重的损伤。TXB2是TXA2代谢终产物，两者均为缩血管物质，烫伤后变化规律与PGE2相似，机制尚不清楚。但一般认为TXA2与PGI2的比率是影响血管收缩与舒张的主要因素[5]，本实验结果显示TXB2与PGI2代谢终产物6-keto-PGF1α的比率先降低后升高，这与烫伤后胃肠粘膜先充血水肿后缺血损伤的病理变化相吻合。张澍田等[6]将富含花生四烯酸的豆油乳用于三种模型的胃溃疡病人，结果使胃粘膜内PGE2含量增加，并明显改善了粘膜损伤状况。有人用PGI2的类似物(Beraprost)治疗大鼠烧伤后肠粘膜损伤也取得了较好的效果[7]。目前尚无烫伤后肠粘膜内花生四烯酸代谢变化的报道，根据本实验结果，我们认为PGE2减少和TXA2/PGI2比率失衡可能是大鼠烫伤后期肠粘膜损伤的原因之一。
, 百拇医药
作者简介：孟德胜，男，32岁，讲师，博士研究生
参考文献
[1] Mitchell P. Fink gastrointestinal mucosal injury in experimental models of shock, truma and sepsis[J]. Critical Care Medicine,1991,19(5):627-631.
[2] 赵善政，陈明伟.微克水平蛋白染料综合比色法[J].中华医学检验杂志，1983，6(4)：210-214.
[3] 吴予平，李 勇，董秀云.大鼠烫伤后胃酸分泌、胃粘膜PGE和DNA合成的变化[J].中华外科杂志，1984，22(8)：464-466.
[4] 黎 鳌，杨宗城，肖光夏，等主编.实验烧伤外科学[M].重庆：重庆大学出版社，1995.319-332.
, 百拇医药
[5] Harlan J M, Harker L A. Hemostasis, thrombosis and thromboembolic disorders: the role of arachdonic acid metabolites in platelet-vessel wall interactions[J]. Med Clin North Am,1981,65(4):855-880.
[6] 张澍田，于中麟，王宝恩，等.植物油乳治疗胃溃疡的实验与临床[J].中华消化杂志，1997，17(1)：23-27.
[7] Battal M N, Hata Y, Matsuka K, et al. Effect of a prostaglandin I2 analogue, beraprost sodium, on burn-induced gastric mucosal injury in rats[J]. Burns,1997,23(3);232-237.
收稿日期：1999-03-20；修回日期：1999-07-15, http://www.100md.com
单位：第三军医大学附属西南医院烧伤研究所，重庆 400038
关键词：烫伤；肠粘膜；花生四烯酸；代谢
第三军医大学学报991137
中图法分类号 R644 文献标识码 B
The influence of burn on the metabolism of arachidonic acid in small intestine in rats
烫伤引起的应激反应会导致胃肠道粘膜严重损伤，其机制尚不完全清楚。有人认为[1]花生四烯酸代谢产物PGs、TXA2等，在粘膜损伤和修复过程中起重要作用。但目前对烫伤后肠粘膜内花生四烯酸代谢变化研究较少。本实验通过测定大鼠烫伤后空肠和回肠内三种花生四烯酸代谢产物含量的变化，进一步揭示烫伤导致肠粘膜损伤的发病机制，并为促进肠粘膜修复提供线索。
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1 材料与方法
1.1 仪器
FT-608 125I放免测定仪(中国)，BACKMAN紫外分光光度计(德国)。
1.2 动物
Wistar大鼠42只，体重180～220 g，由本校动物实验中心提供。动物背部除毛，饲养24 h后以(94±1)°C热水烫伤18～20 s，烫伤面积占总体表面积的30%，病理学检验证实为Ⅲ度烫伤。
1.3 取材
动物随机分为6组，烫伤后分别于0、6、12、24、48、72 h断头处死，处死动物前禁食12 h。取空肠和回肠轻轻洗净粪便，刮取肠粘膜，迅速置液氮中冷冻保存。测定时取约150 mg肠粘膜，以生理盐水3ml匀浆，3000 r/min离心15 min，取上清液备测。
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1.4 放免法测定上清液中PGE2、TXB2和6-ketal-PGF1α的含量
PGE2、TXB2和6-ketal-PGF1α放免分析试剂盒均购自苏州医学院血栓室。取待测液100 μl与相同体积的125I示踪剂混匀后加入相应抗体与之反应，再以聚乙二醇4 000吸附抗原抗体复合物，通过测定其放射性即可推算出样品中三种花生四烯酸代谢产物的含量。
1.5 考马氏亮蓝法测定待测液中蛋白质的含量[2]
1.6 数据统计 结果以每mg蛋白中所含3种代谢产物pg数表示(x±s)，组间进行显著性t检验。
2 结果见表1
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表1 烫伤大鼠小肠粘膜内PGE2、TXB2、6-keto-PGF1α
及TXB2/6-keto-PGF1α的变化 Time
(h)
PGE2
(pg/mg)
TXB2
(pg/mg)
6-keto-PGF1α
(pg/mg)
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TXB2/PGF1α
空肠
0
187.5±53.42
495.1±148.9
261.7±62.00
1.902±0.561
6
105.8±20.30☆
267.9±111.9☆☆
145.9±38.41☆☆
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1.819±0.459
12
150.0±54.92
11.2±72.51☆☆
122.7±34.24☆☆
0.889±0.648☆☆
24
125.1±41.73☆
264.2±58.86☆☆
120.0±33.67☆☆
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2.324±0.782
48
109.8±16.23☆
325.9±75.64☆
106.3±64.44☆☆
3.798±0.853☆☆
72
83.56±36.33☆☆
257.9±86.40☆☆
103.6±30.24☆☆
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2.584±0.509☆
回肠
0
158.4±46.02
340.8±172.5
202.6±56.31
1.797±0.865
6
98.67±25.57☆
165.6±77.26☆☆
97.12±28.35☆☆
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1.755±0.874
12
117.7±32.00
157.9±39.50☆
120.0±18.40☆
1.475±0.458
24
103.0±10.53☆
261.3±62.18
120.4±48.33☆
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48
122.0±30.08
377.2±179.1
121.1±46.15☆
3.402±1.058☆☆
72
68.50±29.13☆☆
201.2±42.47☆
87.20±22.00☆☆
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2.511±0.648☆
☆：P<0.05,☆☆：P<0.01 vs control
在空肠和回肠中PGE2含量烫伤后6 h即开始下降，12 h后略有恢复，24 h后又逐渐降低。TXB2的含量在烫伤后12 h下降最明显，24 h后开始增加，72 h时又显著下降。在空肠中6-keto-PGF1α的含量呈持续性下降趋势，且各时项点与对照组相比均具有非常显著性差异；在回肠中则以烫伤后6 h和72 h时下降最明显。而TXB2/6-keto-PGF1α的比值则呈先下降后上升的趋势，最低点为烫伤后12 h，最高点为烫伤后48 h。
3 讨论
花生四烯酸的代谢产物在机体的病理和生理过程中具有重要作用，早在70年代就有人提出PGE2减少是导致消化性溃疡发生的首要因素。应激性溃疡是烧伤病人的合并症，吴予平等[3]证明烫伤大鼠胃粘膜损伤与PGE2减少有关，给予消炎痛抑制前列腺素的产生可加重粘膜损伤程度。本实验结果显示大鼠烫伤后小肠粘膜内花生四烯酸代谢产物有与之类似的变化规律。应激反应发生时基础代谢率增加，前列腺素和血栓烷素分解代谢加快，故而烫伤6 h内其含量下降，随后PGE2等代偿性增加，这是机体的防御性反应。应激时间延长，机体转入失代偿期，PGE2等含量随之降低。以往的研究表明[4]大鼠烧伤24 h后胃肠粘膜即出现较严重的损伤。TXB2是TXA2代谢终产物，两者均为缩血管物质，烫伤后变化规律与PGE2相似，机制尚不清楚。但一般认为TXA2与PGI2的比率是影响血管收缩与舒张的主要因素[5]，本实验结果显示TXB2与PGI2代谢终产物6-keto-PGF1α的比率先降低后升高，这与烫伤后胃肠粘膜先充血水肿后缺血损伤的病理变化相吻合。张澍田等[6]将富含花生四烯酸的豆油乳用于三种模型的胃溃疡病人，结果使胃粘膜内PGE2含量增加，并明显改善了粘膜损伤状况。有人用PGI2的类似物(Beraprost)治疗大鼠烧伤后肠粘膜损伤也取得了较好的效果[7]。目前尚无烫伤后肠粘膜内花生四烯酸代谢变化的报道，根据本实验结果，我们认为PGE2减少和TXA2/PGI2比率失衡可能是大鼠烫伤后期肠粘膜损伤的原因之一。
, 百拇医药
作者简介：孟德胜，男，32岁，讲师，博士研究生
参考文献
[1] Mitchell P. Fink gastrointestinal mucosal injury in experimental models of shock, truma and sepsis[J]. Critical Care Medicine,1991,19(5):627-631.
[2] 赵善政，陈明伟.微克水平蛋白染料综合比色法[J].中华医学检验杂志，1983，6(4)：210-214.
[3] 吴予平，李 勇，董秀云.大鼠烫伤后胃酸分泌、胃粘膜PGE和DNA合成的变化[J].中华外科杂志，1984，22(8)：464-466.
[4] 黎 鳌，杨宗城，肖光夏，等主编.实验烧伤外科学[M].重庆：重庆大学出版社，1995.319-332.
, 百拇医药
[5] Harlan J M, Harker L A. Hemostasis, thrombosis and thromboembolic disorders: the role of arachdonic acid metabolites in platelet-vessel wall interactions[J]. Med Clin North Am,1981,65(4):855-880.
[6] 张澍田，于中麟，王宝恩，等.植物油乳治疗胃溃疡的实验与临床[J].中华消化杂志，1997，17(1)：23-27.
[7] Battal M N, Hata Y, Matsuka K, et al. Effect of a prostaglandin I2 analogue, beraprost sodium, on burn-induced gastric mucosal injury in rats[J]. Burns,1997,23(3);232-237.
收稿日期：1999-03-20；修回日期：1999-07-15, http://www.100md.com