266例健康人血清蛋白电泳参考值及两种电泳载体结果比较
作者:邵丽丽 潘瑾 李海峰
单位:第三军医大学附属新桥医院检验科,重庆 400037
关键词:血清蛋白;电泳
第三军医大学学报991135
中图法分类号 R446.112 文献标识码 B
Electrophoretic reference value of serum protein of 266 healthy persons and its comparison between 2 kinds of electrophoretic carrier
血清蛋白电泳技术是临床化学工作中重要而实用的检测手段,它对于体液中蛋白质成分的分析甚至某些疾病的诊断起着决定性作用。随着醋酸纤维素薄膜等各种电泳载体的应用发展及更先进的电泳扫描仪器的推出,其参考值可能存在差异[1]。本科最近引进Helena EDC电泳扫描仪,为评价仪器、建立参考值(包括两种蛋白电泳载体)我们做了一些工作,总结如下。
, 百拇医药
1 检查对象
重庆市郊区农民、工人、国家干部、某小学学龄儿童经体检,排除心、肺、肝、肾等主要脏器疾病,脑血管病,高血压病,糖尿病等代谢内分泌疾病。选出男性127人,年龄18~78岁(平均42.1岁);女性100人,年龄17~84岁(平均40.6岁);学龄儿童39人,其中男23人、女16人,年龄5~8岁(平均6.1岁)。于清晨空腹取血及时分离血清,剔除溶血、黄疸及脂血,于当日检查或-20℃保存三日内检查。
2 材料
2.1 Helena EDC
电泳扫描仪及处理系统。
2.2 Helena电泳工作台
电泳仪,加样器。
, 百拇医药
2.3 电极液
巴比妥缓冲液pH8.6离子强度0.075。
2.4 电泳膜
醋酸纤维素薄膜(浙江黄岩四青生化材料厂产)。TITANⅢ型电泳膜(Helena公司产)。
2.5 试剂
2.5.1 染色液 丽春红S(上海化学试剂厂产)。
2.5.2 脱色剂 5%醋酸液。
2.5.3 透明液 醋纤膜透明液、TITAN膜透明液。
3 方法
3.1 电泳条件
, 百拇医药
电压180伏电泳15 min。
3.2 染色条件
丽春红S染色10 min,脱色3次各3min。
3.3 透明条件
干燥(TITAN膜用无水甲醇脱水)后透明,醋纤膜3min,TITAN膜10 min。
3.4 结果统计
将电泳结果分别按材料、性别、年龄分组用Microsoft Excel 7.0做假设不等方差t检验,分别求出、t值、P值、标准差,并用(x±1.96 s)表示结果。
4 结果
, http://www.100md.com
见表1~3。
表1 266例健康人血清蛋白电泳结果%(x±1.96 s) 年龄(岁)
例数
ALB
α1
α2
β
γ
5~8
39
63.1±5.5*
4.4±1.3*
, 百拇医药
8.7±2.3*
9.7±1.5*
14.3±4.5*
17~44
146
61.9±6.9
2.9±1.1
6.8±2.6
10.8±2.9
17.7±5.8
45~59
, http://www.100md.com
52
61.2±5.6
2.9±1.0
7.0±2.8
11.2±2.4
17.8±5.3
60~84
29
59.8±7.9▲
3.0±1.2
7.7±3.2
11.3±3.0
, http://www.100md.com
18.2±5.7
*:P<0.05儿童与成人各期比较;▲:P<0.05老年期与老年前期及青中年期比较表2 227例血清蛋白醋纤膜电泳结果%(x±1.96 s)
例数
ALB
α1
α2
β
γ
成年男性
127
62.7±5.6*
, http://www.100md.com
2.8±1.0
6.8±2.8
10.9±2.6
16.8±4.5*
成年女性
100
59.8±7.0
2.9±1.3
7.2±2.6
11.0±3.1
19.0±6.0
合计
, 百拇医药
227
61.4±6.9
2.9±1.1
7.0±2.7
10.9±2.8
17.8±5.6
*:P<0.05成年男女ALB、γ比较表3 血清蛋白电泳TITAN膜与醋纤膜结果比较%(x±1.96 s)
例数
ALB
α1
α2
, http://www.100md.com
β
γ
TITAN膜
229
57.3±6.4
3.1±1.7
9.7±2.9
12.3±2.8
17.6±6.0
醋纤膜
227
61.4±6.9
2.9±1.1
, http://www.100md.com
7.0±2.7
10.9±2.8
17.8±5.6
P值
-
P<0.01
P<0.01
P<0.01
P<0.01
P<0.01
5 讨论
①儿童及成人电泳结果比较:将结果按年龄分学龄儿童期(5~8岁),青中年期(17~44岁),老年前期(45~59岁),老年期(60~84岁)四组,做t检验。儿童与成人各期比较P值均小于0.05相差显著,见表1。其中ALB、α1、α2儿童均高于成人各期。成人各组除ALB带老年期与老年前期及青中年期差别显著外(P<0.05)其余各组差别均不显著(P>0.05)。②成年男女电泳结果比较:经t检验,见表2。成年男女ALB、γ带相差显著(P<0.05)其中ALB带男性高于女性,γ带则男性低于女性。α1、α2、β带相差均不显著(P>0.05)。其结果与相关的文献报道一致[2,3]。③醋纤膜与Helena TITANⅢ型膜电泳结果比较:将血清标本做醋纤膜电泳的同时用Helena公司TITANⅢ型电泳膜做载体电泳。由表3可见,两种载体结果除γ带相差不显著外,余均相差显著。TITAN膜β、α1、α2高于醋纤膜,而ALB低于醋纤膜。由此推测血清蛋白的各组分与TITAN膜亲和性大于醋纤膜,电泳时血清蛋白过原点后(γ带在原点)一路滞留,造成β、α2、α1带量值高,而AIB量值偏低。提示由于载体成分及做工不同,对血清蛋白吸附、分离等能力不同会造成电泳结果的差异。
, 百拇医药
作者简介:邵丽丽,女,46岁,副主任技师
参考文献
[1] 李健斋.参考值、参考范围与医学决定水平[J].中华医学检验杂志,1983,6(4):248-249.
[2] 康格非 主编.临床生物化学[M].北京:人民卫生出版社,1989.37-54.
[3] 郑得成,冯淑娟.正常成人血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳正常值调查[J].河北医药,1986,8(1):12-14.
收稿日期:1998-10-30;修回日期:1999-03-18, 百拇医药
单位:第三军医大学附属新桥医院检验科,重庆 400037
关键词:血清蛋白;电泳
第三军医大学学报991135
中图法分类号 R446.112 文献标识码 B
Electrophoretic reference value of serum protein of 266 healthy persons and its comparison between 2 kinds of electrophoretic carrier
血清蛋白电泳技术是临床化学工作中重要而实用的检测手段,它对于体液中蛋白质成分的分析甚至某些疾病的诊断起着决定性作用。随着醋酸纤维素薄膜等各种电泳载体的应用发展及更先进的电泳扫描仪器的推出,其参考值可能存在差异[1]。本科最近引进Helena EDC电泳扫描仪,为评价仪器、建立参考值(包括两种蛋白电泳载体)我们做了一些工作,总结如下。
, 百拇医药
1 检查对象
重庆市郊区农民、工人、国家干部、某小学学龄儿童经体检,排除心、肺、肝、肾等主要脏器疾病,脑血管病,高血压病,糖尿病等代谢内分泌疾病。选出男性127人,年龄18~78岁(平均42.1岁);女性100人,年龄17~84岁(平均40.6岁);学龄儿童39人,其中男23人、女16人,年龄5~8岁(平均6.1岁)。于清晨空腹取血及时分离血清,剔除溶血、黄疸及脂血,于当日检查或-20℃保存三日内检查。
2 材料
2.1 Helena EDC
电泳扫描仪及处理系统。
2.2 Helena电泳工作台
电泳仪,加样器。
, 百拇医药
2.3 电极液
巴比妥缓冲液pH8.6离子强度0.075。
2.4 电泳膜
醋酸纤维素薄膜(浙江黄岩四青生化材料厂产)。TITANⅢ型电泳膜(Helena公司产)。
2.5 试剂
2.5.1 染色液 丽春红S(上海化学试剂厂产)。
2.5.2 脱色剂 5%醋酸液。
2.5.3 透明液 醋纤膜透明液、TITAN膜透明液。
3 方法
3.1 电泳条件
, 百拇医药
电压180伏电泳15 min。
3.2 染色条件
丽春红S染色10 min,脱色3次各3min。
3.3 透明条件
干燥(TITAN膜用无水甲醇脱水)后透明,醋纤膜3min,TITAN膜10 min。
3.4 结果统计
将电泳结果分别按材料、性别、年龄分组用Microsoft Excel 7.0做假设不等方差t检验,分别求出、t值、P值、标准差,并用(x±1.96 s)表示结果。
4 结果
, http://www.100md.com
见表1~3。
表1 266例健康人血清蛋白电泳结果%(x±1.96 s) 年龄(岁)
例数
ALB
α1
α2
β
γ
5~8
39
63.1±5.5*
4.4±1.3*
, 百拇医药
8.7±2.3*
9.7±1.5*
14.3±4.5*
17~44
146
61.9±6.9
2.9±1.1
6.8±2.6
10.8±2.9
17.7±5.8
45~59
, http://www.100md.com
52
61.2±5.6
2.9±1.0
7.0±2.8
11.2±2.4
17.8±5.3
60~84
29
59.8±7.9▲
3.0±1.2
7.7±3.2
11.3±3.0
, http://www.100md.com
18.2±5.7
*:P<0.05儿童与成人各期比较;▲:P<0.05老年期与老年前期及青中年期比较表2 227例血清蛋白醋纤膜电泳结果%(x±1.96 s)
例数
ALB
α1
α2
β
γ
成年男性
127
62.7±5.6*
, http://www.100md.com
2.8±1.0
6.8±2.8
10.9±2.6
16.8±4.5*
成年女性
100
59.8±7.0
2.9±1.3
7.2±2.6
11.0±3.1
19.0±6.0
合计
, 百拇医药
227
61.4±6.9
2.9±1.1
7.0±2.7
10.9±2.8
17.8±5.6
*:P<0.05成年男女ALB、γ比较表3 血清蛋白电泳TITAN膜与醋纤膜结果比较%(x±1.96 s)
例数
ALB
α1
α2
, http://www.100md.com
β
γ
TITAN膜
229
57.3±6.4
3.1±1.7
9.7±2.9
12.3±2.8
17.6±6.0
醋纤膜
227
61.4±6.9
2.9±1.1
, http://www.100md.com
7.0±2.7
10.9±2.8
17.8±5.6
P值
-
P<0.01
P<0.01
P<0.01
P<0.01
P<0.01
5 讨论
①儿童及成人电泳结果比较:将结果按年龄分学龄儿童期(5~8岁),青中年期(17~44岁),老年前期(45~59岁),老年期(60~84岁)四组,做t检验。儿童与成人各期比较P值均小于0.05相差显著,见表1。其中ALB、α1、α2儿童均高于成人各期。成人各组除ALB带老年期与老年前期及青中年期差别显著外(P<0.05)其余各组差别均不显著(P>0.05)。②成年男女电泳结果比较:经t检验,见表2。成年男女ALB、γ带相差显著(P<0.05)其中ALB带男性高于女性,γ带则男性低于女性。α1、α2、β带相差均不显著(P>0.05)。其结果与相关的文献报道一致[2,3]。③醋纤膜与Helena TITANⅢ型膜电泳结果比较:将血清标本做醋纤膜电泳的同时用Helena公司TITANⅢ型电泳膜做载体电泳。由表3可见,两种载体结果除γ带相差不显著外,余均相差显著。TITAN膜β、α1、α2高于醋纤膜,而ALB低于醋纤膜。由此推测血清蛋白的各组分与TITAN膜亲和性大于醋纤膜,电泳时血清蛋白过原点后(γ带在原点)一路滞留,造成β、α2、α1带量值高,而AIB量值偏低。提示由于载体成分及做工不同,对血清蛋白吸附、分离等能力不同会造成电泳结果的差异。
, 百拇医药
作者简介:邵丽丽,女,46岁,副主任技师
参考文献
[1] 李健斋.参考值、参考范围与医学决定水平[J].中华医学检验杂志,1983,6(4):248-249.
[2] 康格非 主编.临床生物化学[M].北京:人民卫生出版社,1989.37-54.
[3] 郑得成,冯淑娟.正常成人血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳正常值调查[J].河北医药,1986,8(1):12-14.
收稿日期:1998-10-30;修回日期:1999-03-18, 百拇医药