HPLC法测定高三尖杉酯碱含量
作者：刘莹
单位：西安天诚医药生物工程有限公司(710075)
关键词：
中草药991114 高三尖杉酯碱是从粗榧科植物华粗榧或其同属植物的叶、枝或果实中提取的生物碱。它是抗恶性肿瘤的原料药物。
目前，我国分析高酯碱的含量是采用中国药典的紫外分光光度法，为非专一性的检测方法，不能观察杂质情况。国内还没有用HPLC法测定的报道，我们采用反相HPLC法测定高酯碱的含量，为高酯碱的研究提供了一个准确、简便的测定手段，而且适用于出口高脂碱的质量控制。
1 实验部分
1.1 仪器和试剂：岛津LC-10A高效液相色谱仪，紫外检测器，岛津2101PC紫外扫描仪。甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。高酯碱对照品：中国药品生物制品检定所。
1.2 色谱条件：色谱柱：YWG-C18H37 250 mm×4.6 mm(天津化学试剂二厂)，流动相：0.0008 mol/L碳酸铵溶液-甲醇(42∶58)，用36%醋酸调pH至7～8，检测波长：290 nm，流速：1.0 mL/min。
1.3 对照品溶液配制：精密称取高酯碱对照品约10 mg置50 mL容量瓶中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度，摇匀。
1.4 样品溶液制备：精密称取样品约10 mg置50 mL容量瓶中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度，摇匀。
2 实验结果
2.1 标准曲线：精密量取对照品溶液5，10，15，20，25 μL，分别注入色谱仪，记录峰面积，经分析，高酯碱在进样量为0.5～25 μg的范围内呈线性关系，回归方程为：Y=36800+658441X，r=0.997。
2.2 回收率：取5 份样品各5 mg，置50 mL容量瓶中，各精密加入对照品溶液2 mL，同上述方法处理，测得5 次平均回收率为100.56%，RSD为2.31%。
2.3 精密度：精密度实验结果RSD为1.12%(n=6)。
2.4 样品分离：准确吸取对照品溶液和样品溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪，高酯碱出峰时间为7.70 min，采用外标法计算含量，结果样品1为99.56%，样品2为99.50%，样品3为99.36%，样品4为99.45%。
3 讨论
3.1 最大吸收的选择：以紫外全波长扫描结果高酯碱在290 nm处有最大吸收，故选用290 nm。
3.2 用HPLC法测定高酯碱含量，稳定，重现性好，灵敏度高，为出口高酯碱的质量提供了保障。
收稿日期：1999-03-18, 百拇医药
单位：西安天诚医药生物工程有限公司(710075)
关键词：
中草药991114 高三尖杉酯碱是从粗榧科植物华粗榧或其同属植物的叶、枝或果实中提取的生物碱。它是抗恶性肿瘤的原料药物。
目前，我国分析高酯碱的含量是采用中国药典的紫外分光光度法，为非专一性的检测方法，不能观察杂质情况。国内还没有用HPLC法测定的报道，我们采用反相HPLC法测定高酯碱的含量，为高酯碱的研究提供了一个准确、简便的测定手段，而且适用于出口高脂碱的质量控制。
1 实验部分
1.1 仪器和试剂：岛津LC-10A高效液相色谱仪，紫外检测器，岛津2101PC紫外扫描仪。甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。高酯碱对照品：中国药品生物制品检定所。
1.2 色谱条件：色谱柱：YWG-C18H37 250 mm×4.6 mm(天津化学试剂二厂)，流动相：0.0008 mol/L碳酸铵溶液-甲醇(42∶58)，用36%醋酸调pH至7～8，检测波长：290 nm，流速：1.0 mL/min。
1.3 对照品溶液配制：精密称取高酯碱对照品约10 mg置50 mL容量瓶中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度，摇匀。
1.4 样品溶液制备：精密称取样品约10 mg置50 mL容量瓶中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度，摇匀。
2 实验结果
2.1 标准曲线：精密量取对照品溶液5，10，15，20，25 μL，分别注入色谱仪，记录峰面积，经分析，高酯碱在进样量为0.5～25 μg的范围内呈线性关系，回归方程为：Y=36800+658441X，r=0.997。
2.2 回收率：取5 份样品各5 mg，置50 mL容量瓶中，各精密加入对照品溶液2 mL，同上述方法处理，测得5 次平均回收率为100.56%，RSD为2.31%。
2.3 精密度：精密度实验结果RSD为1.12%(n=6)。
2.4 样品分离：准确吸取对照品溶液和样品溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪，高酯碱出峰时间为7.70 min，采用外标法计算含量，结果样品1为99.56%，样品2为99.50%，样品3为99.36%，样品4为99.45%。
3 讨论
3.1 最大吸收的选择：以紫外全波长扫描结果高酯碱在290 nm处有最大吸收，故选用290 nm。
3.2 用HPLC法测定高酯碱含量，稳定，重现性好，灵敏度高，为出口高酯碱的质量提供了保障。
收稿日期：1999-03-18, 百拇医药