中药止痛胶囊中芍药苷的HPLC含量测定
作者：邵长凤 陈坚 杨吉田 张颖
单位：天津计划生育研究所(300191)
关键词：HPLC；中药止痛胶囊；芍药苷
中草药991109摘 要 用HPLC法，超声波提取，对中药止痛胶囊中主药白芍中芍药苷含量进行测定。其平均回收率为100.72%，相对标准偏差为1.23%。结果表明：用本法测定该止痛胶囊中芍药苷含量，结果准确、灵敏、方法简便，且有适用性。
Determination of Paeoniflorin in Analgesic
Zhitong Capsule by HPLC
Shao Changfeng Chen Jian Yang Jitian et al.
, 百拇医药
(Tianjin Municipal Research Institute for Family Planning, Tianjin 300191)
Abstract The determination of paeoniflorin in analgesic Zhitong Capsule by HPLC was reported. The sample was extracted by ultrasonography. Chromatographic conditions: Shimadzu LC-6; column size Shim-pack CLC-ODS 150 mm×6 mm; detection wave length, 245 nm; flow rate 1 mL/min; mobile phase methanol-acetonitril-acetic acid-water (15∶7.5∶2∶75.5). The average recovery was 100.72% and RSD 1.23%. The method is simple, sensitive and gave satisfactory results.
, 百拇医药
Key words HPLC paeoniflorin analgesic Zhitong Capsule
白芍系Paeonia lactiflora Pall. 多年生草木植物，有平肝止痛、养血调经之功，可用于头痛眩晕、胁痛、腹痛、四肢挛痛等，芍药中芍药苷显示了较强的生理活性。新研制的中药止痛胶囊是以白芍为主要药味及其它中草药经精制而成。芍药苷在止痛胶囊中含量多少对药效起着致关重要的作用。中药止痛胶囊中芍药苷含量测定方法尚未见报道。本文采用HPLC法，用超声波萃取，对该止痛胶囊中芍药苷含量进行测定[1，2]，其平均回收率为100.72%；相对标准偏差为1.23%。表明本法测定该止痛胶囊中芍药苷含量，结果准确、灵敏、方法简便易行。
1 仪器、试药
1.1 仪器：日本岛津LC-6A高效液相色谱仪；上海CSF-3A超声波发生器。
, 百拇医药
1.2 试药：甲醇、乙腈色谱纯，醋酸分析纯，超纯水；对照品：芍药苷购于中国药品生物制品检定所；中药止痛胶囊样品：由天津医药科学研究所提供。
2 色谱条件
色谱柱：岛津Shimpack CLC-ODS柱(15 cm×6 mm)，流动相：甲醇-乙腈-醋酸-水=(15∶7.5∶2∶75.5)；检测波长：245 nm；流速：1.4 mL/min；纸速：1 mm/min。
实验表明，在上述选择的色谱条件下中药止痛胶囊中，其它组分对芍药苷组分峰无干扰，分离好，能够满足该止痛胶囊中芍药苷含量测定的要求，结果见图1(A，B，C)。
A-芍药苷 B-空白 C-止痛胶囊
, http://www.100md.com 图1 样品色谱图
由色谱图中可见，其它组分对芍药苷主峰的保留时间与对照品(芍药苷)的色谱峰保留时间一致(tR=8.4 min)。
3 工作曲线制备
3.1 标准溶液配制：精称适量对照品(芍药苷)，于10 mL量瓶中用70%甲醇溶解并稀至刻度，摇匀、备用。浓度为2 mg/mL。
3.2 工作曲线制作：精密移取上述标液(2 mg/mL)1，0.5，0.25，0.125 mL，分别置入10 mL量瓶中，用70%甲醇水溶液稀释至刻度摇匀。分别在上述色谱条件下进样20 μL，以芍药苷的浓度(c)为横坐标，峰高(h)为纵坐标绘图得一直线，其回归方程为c=0.001h-0.03，r=0.9999。
由上述实验表明：芍药苷浓度在0.2～0.025 mg范围内呈线性关系。
, 百拇医药
4 重现性考察试验
精称3 份相同量的芍药苷与适量的空白样品，分别置入10 mL量瓶中，加入适量70%甲醇，超声波提取1 h，取出放至室温后，用70%甲醇水稀至刻度、摇匀，待用。分别精取上述液1 mL，于10 mL量瓶中用70%甲醇水稀至刻度、摇匀，取适量于1.5 mL小离心管中，在高速离心机1 2000 r/min下离心2～3 min，取出吸取上清液20 μL进样，测得重现性实验结果RSD=0.89%。
试验表明：芍药苷含量测定重复性较好，能够满足止痛胶囊中芍药苷含量测定要求。
5 回收率及精密度试验
精称对照品(芍药苷)适量及空白样品适量于10 mL量瓶中，加入适量70%甲醇水，在超声波发生器中提取1 h后，取出放至室温后，用70%甲醇水稀至刻度，摇匀、备用。
, 百拇医药
分别精取上述溶液1 mL，于10 mL量瓶中，用70%甲醇水稀至刻度，摇匀，取1.5 mL于小离心管中，在高速离心机中1 2000 r/min离心2～3 min，取出，吸取上清液进样20 μL，测得4 次平均回收率为100.72%；RSD为1.22%。
6 中药止痛胶囊样品含量测定方法
取内容物，混合均匀，精称适量(相当一粒止痛胶囊1/2的量，约0.25 g)于50 mL量瓶中，加入适量70%甲醇水，在超声波发生器中提取1 h，取出待室温后，稀释至刻度摇匀，待用。
取上述样品液1 mL置量瓶中，用70%甲醇稀释至刻度，摇匀，取适量于1.5 mL小离心管中，在高速离心机1 2000 r/min中离心2～3 min，取出后，取上清液20 μL进样，测得三批样品结果见表1。
表1 止痛胶囊中芍药苷含量(%/粒，0.5 g) 样品
, 百拇医药
一批
二批
三批
1
16.43
16.12
16.65
2
16.27
16.35
16.19
平均含量
16.35
, 百拇医药
16.24
16.42
7 结果、讨论
7.1 样品处理方法：本文样品处理采用超声波提取法，该法比文献报道的普通提取处理法简单且样品不易丢失。
7.2 由试验表明：本法测定中药止痛胶囊中芍药苷的含量，其方法简便易行、结果准确、灵敏，能够满足该止痛胶囊中含量测定的要求，批量生产时可用于控制质量。
参考文献
1 李俊，等.中国药学杂志，1991，26(5)：289
2 王杰民，等.中成药，1991，13(4)：32
收稿日期：1999-03-18, 百拇医药
单位：天津计划生育研究所(300191)
关键词：HPLC；中药止痛胶囊；芍药苷
中草药991109摘 要 用HPLC法，超声波提取，对中药止痛胶囊中主药白芍中芍药苷含量进行测定。其平均回收率为100.72%，相对标准偏差为1.23%。结果表明：用本法测定该止痛胶囊中芍药苷含量，结果准确、灵敏、方法简便，且有适用性。
Determination of Paeoniflorin in Analgesic
Zhitong Capsule by HPLC
Shao Changfeng Chen Jian Yang Jitian et al.
, 百拇医药
(Tianjin Municipal Research Institute for Family Planning, Tianjin 300191)
Abstract The determination of paeoniflorin in analgesic Zhitong Capsule by HPLC was reported. The sample was extracted by ultrasonography. Chromatographic conditions: Shimadzu LC-6; column size Shim-pack CLC-ODS 150 mm×6 mm; detection wave length, 245 nm; flow rate 1 mL/min; mobile phase methanol-acetonitril-acetic acid-water (15∶7.5∶2∶75.5). The average recovery was 100.72% and RSD 1.23%. The method is simple, sensitive and gave satisfactory results.
, 百拇医药
Key words HPLC paeoniflorin analgesic Zhitong Capsule
白芍系Paeonia lactiflora Pall. 多年生草木植物，有平肝止痛、养血调经之功，可用于头痛眩晕、胁痛、腹痛、四肢挛痛等，芍药中芍药苷显示了较强的生理活性。新研制的中药止痛胶囊是以白芍为主要药味及其它中草药经精制而成。芍药苷在止痛胶囊中含量多少对药效起着致关重要的作用。中药止痛胶囊中芍药苷含量测定方法尚未见报道。本文采用HPLC法，用超声波萃取，对该止痛胶囊中芍药苷含量进行测定[1，2]，其平均回收率为100.72%；相对标准偏差为1.23%。表明本法测定该止痛胶囊中芍药苷含量，结果准确、灵敏、方法简便易行。
1 仪器、试药
1.1 仪器：日本岛津LC-6A高效液相色谱仪；上海CSF-3A超声波发生器。
, 百拇医药
1.2 试药：甲醇、乙腈色谱纯，醋酸分析纯，超纯水；对照品：芍药苷购于中国药品生物制品检定所；中药止痛胶囊样品：由天津医药科学研究所提供。
2 色谱条件
色谱柱：岛津Shimpack CLC-ODS柱(15 cm×6 mm)，流动相：甲醇-乙腈-醋酸-水=(15∶7.5∶2∶75.5)；检测波长：245 nm；流速：1.4 mL/min；纸速：1 mm/min。
实验表明，在上述选择的色谱条件下中药止痛胶囊中，其它组分对芍药苷组分峰无干扰，分离好，能够满足该止痛胶囊中芍药苷含量测定的要求，结果见图1(A，B，C)。
A-芍药苷 B-空白 C-止痛胶囊
, http://www.100md.com 图1 样品色谱图
由色谱图中可见，其它组分对芍药苷主峰的保留时间与对照品(芍药苷)的色谱峰保留时间一致(tR=8.4 min)。
3 工作曲线制备
3.1 标准溶液配制：精称适量对照品(芍药苷)，于10 mL量瓶中用70%甲醇溶解并稀至刻度，摇匀、备用。浓度为2 mg/mL。
3.2 工作曲线制作：精密移取上述标液(2 mg/mL)1，0.5，0.25，0.125 mL，分别置入10 mL量瓶中，用70%甲醇水溶液稀释至刻度摇匀。分别在上述色谱条件下进样20 μL，以芍药苷的浓度(c)为横坐标，峰高(h)为纵坐标绘图得一直线，其回归方程为c=0.001h-0.03，r=0.9999。
由上述实验表明：芍药苷浓度在0.2～0.025 mg范围内呈线性关系。
, 百拇医药
4 重现性考察试验
精称3 份相同量的芍药苷与适量的空白样品，分别置入10 mL量瓶中，加入适量70%甲醇，超声波提取1 h，取出放至室温后，用70%甲醇水稀至刻度、摇匀，待用。分别精取上述液1 mL，于10 mL量瓶中用70%甲醇水稀至刻度、摇匀，取适量于1.5 mL小离心管中，在高速离心机1 2000 r/min下离心2～3 min，取出吸取上清液20 μL进样，测得重现性实验结果RSD=0.89%。
试验表明：芍药苷含量测定重复性较好，能够满足止痛胶囊中芍药苷含量测定要求。
5 回收率及精密度试验
精称对照品(芍药苷)适量及空白样品适量于10 mL量瓶中，加入适量70%甲醇水，在超声波发生器中提取1 h后，取出放至室温后，用70%甲醇水稀至刻度，摇匀、备用。
, 百拇医药
分别精取上述溶液1 mL，于10 mL量瓶中，用70%甲醇水稀至刻度，摇匀，取1.5 mL于小离心管中，在高速离心机中1 2000 r/min离心2～3 min，取出，吸取上清液进样20 μL，测得4 次平均回收率为100.72%；RSD为1.22%。
6 中药止痛胶囊样品含量测定方法
取内容物，混合均匀，精称适量(相当一粒止痛胶囊1/2的量，约0.25 g)于50 mL量瓶中，加入适量70%甲醇水，在超声波发生器中提取1 h，取出待室温后，稀释至刻度摇匀，待用。
取上述样品液1 mL置量瓶中，用70%甲醇稀释至刻度，摇匀，取适量于1.5 mL小离心管中，在高速离心机1 2000 r/min中离心2～3 min，取出后，取上清液20 μL进样，测得三批样品结果见表1。
表1 止痛胶囊中芍药苷含量(%/粒，0.5 g) 样品
, 百拇医药
一批
二批
三批
1
16.43
16.12
16.65
2
16.27
16.35
16.19
平均含量
16.35
, 百拇医药
16.24
16.42
7 结果、讨论
7.1 样品处理方法：本文样品处理采用超声波提取法，该法比文献报道的普通提取处理法简单且样品不易丢失。
7.2 由试验表明：本法测定中药止痛胶囊中芍药苷的含量，其方法简便易行、结果准确、灵敏，能够满足该止痛胶囊中含量测定的要求，批量生产时可用于控制质量。
参考文献
1 李俊，等.中国药学杂志，1991，26(5)：289
2 王杰民，等.中成药，1991，13(4)：32
收稿日期：1999-03-18, 百拇医药