兔围失血性休克期内源性血管活性物质的动态变化
作者：邓小明 李金宝 候 炯 马 宇 徐美英
单位：邓小明 李金宝 候 炯 马 宇 徐美英 上海第二军医大学长海医院麻醉科，200433
关键词：失血性休克；复苏；一氧化氮；内皮素；血栓素A2；前列环素
中国急救医学991102 摘要：目的 了解围失血性休克期内源性血管活性物质的动态变化及其意义。方法 复制兔失血性休克及复苏模型，分别于休克前、休克1 h、复苏1 h、复苏2 h用比色法和放射免疫法测定血浆中一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、血栓素A2(TXA2)、前列环素(PGI2)的变化。结果 休克后NO、ET、TXA2升高，PGI2下降，复苏后均有所回复，但均未回复到休克前水平。结论 内源性血管活性物质参与了失血性休克的发生发展，内源性血管舒缩物质的平衡在休克及抗休克中具有重要作用。
, http://www.100md.com
中图分类号：R 605.972；R 605.971
文献标识码：A
文章编号：1002-1949(1999)11-0642-02
Dynamic changes of NO, ET, TXA2, PGI2 during hemorrhagic shock in rabbit
DENG Xiao-ming, LI Jin-bao, HOU Jiong, et al.
Department of Anesthesiology, First Affiliated Hospital, Second Melitory Medical University, Shanghai 200433, China
, 百拇医药
Abstract Objective To study the dynamic changes of plasma levels of NO, ET, TXA2, PGI2 during hemorrhagic shock and resusitation. Methods The artery blood samples were taken to measure plasma concentration of NO, ET, TXA2, PGI2, before shock, 1 h after shock, 1 h after resusitation, 2 h after resusitation. Results The levels of NO, ET, TXA2 after shock were significantly higher than bsaeline. The level of PGI2 after shock was lower than baseline. After resusitation, the levels of four substances were still not back to baseline. Conclusions The levels of NO, ET, TXA2, PGI2 were very important to the development of hemorrhagic shock.
, 百拇医药
Key words Hemorrhagic shock； Resusitation； NO； ET； TXA2； PGI2
一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、血栓素A2(TXA2)和前列环素(PGI2)是体内重要的内源性血管舒缩物质，NO与ET，TXA2与PGI2可相互拮抗，广泛参与机体的生理功能调节，在血管舒缩、血压调节、局部组织器官的血流供应以及内脏平滑肌舒缩方面均有重要作用。为了解围失血性休克期体内四种内源性血管舒缩物质的变化，通过复制兔失血性休克及复苏模型，测定兔围失血性休克期血浆NO、ET、TXA2及PGI2的含量，旨在探讨上述内源性血管活性物质在失血性休克复苏前后的作用及意义。
1 资料与方法
, 百拇医药
1.1 动物模型制作 新西兰白兔12只，雌雄不限，体重2.1～2.8 kg，由第二军医大学实验动物中心提供，2.5%硫喷妥钠3～5 ml/kg腹腔注射，气管切开插管，左颈外静脉及右颈总动脉插管，左颈外静脉通过三通与中心静脉测压管相连，同时经微泵持续输入平衡液(2 ml*kg-1*h-1)，右颈总动脉导管与压力传感器相接至惠普多功能监护仪以测血压，导管经肝素抗凝。心电图电极与监护仪连接监测心率。稳定30分钟后，用一50 ml注射器，肝素液抗凝后与颈总动脉插管的三通连接，打开三通，放血至血压6.7 kPa，通过血液再输入或再放血的办法使血压稳定在6.7 kPa左右，1小时后将注射器内的血液从静脉缓慢回输，于休克前、休克1 h、复苏1 h、复苏2 h抽动脉血测定NO、ET、TXA2、PGI2的含量。并记录各时点的平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)、心率(HR)。
1.2 指标测定方法 NO测定以镉还原比色法测定血清中NO-3的浓度代表NO的含量，结果以μmol/L表示。以放射免疫非平衡法测定ET，结果以ng/L表示。以放射免疫平衡法测定血浆中TXB2含量代表TXA2水平，结果以ng/L表示。以放射免疫非平衡法测定血浆中6-酮-前列环素F1a(6-keto-PGF1a)含量代表PGI2的水平，结果以ng/L表示。以上四种药盒均购自解放军总医院东亚免疫技术研究所，严格按说明书操作。
, 百拇医药
1.3 统计学分析 所有数据均以均数±标准差(x±s)表示，各组数据间的比较用t检验，P<0.05为相差显著。
2 结果
各时相点血浆各时相点血浆NO、ET、TXA2、PGI2含量的变化见附表。休克后血浆中NO、ET、TXA2含量均较休克前升高(P<0.01)，PGI2较休克前下降(P<0.01)，复苏后四种物质均有所回复，但均未回复到休克前水平(P<0.05)，复苏后1小时与复苏后2小时各组数据无统计学差别。休克复苏后MAP及CVP较休克前低(P<0.05)，HR无明显变化。
附表 围失血性休克期动物内源性血管
活性物质的变化(x±s，n=12) 时 间
, 百拇医药
NO(μmol/L)
ET(ng/L)
TXA2(ng/L)
PGI2(ng/L)
休克前
331.56±50.14
70.21±5.42
174.89±20.34
154.82±10.41
休克1 h
448.72±52.50**
, http://www.100md.com
174.24±10.13**
315.92±25.36*
109.21±11.49**
复苏1 h
398.51±60.34*
124.38±11.17*
274.32±21.20*
138.13±12.23*
复苏2 h
, http://www.100md.com 382.35±57.42*
116.43±10.24*
230.45±19.24*
141.20±19.23*
注：与休克前相比，*P<0.05，**P<0.01
3 讨论
NO是一种内源性的扩血管物质，通过激活可溶性的鸟苷酸环化酶形成环二磷酸鸟苷(cGMP)，后者可激活蛋白激酶使肌浆蛋白轻链去磷酸化，从而引起血管平滑肌舒张[1]。本研究中兔休克NO水平较休克前明显升高，复苏后2小时仍未恢复到休克前水平，表明休克时NO使血管扩张，使血压进一步下降。围休克期NO水平的升高的机制可能有：①失血性休克时血液经过短暂的低凝期后转为高凝状态，其中凝血酶被激活，后者可激活NO合成酶产生NO；②细胞因子特别是肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1(IL-1)及r-干扰素是NO升高的重要原因。③肠道功能紊乱产生的肠毒素也是NO水平升高的原因之一[2]。
, 百拇医药
ET是由内皮细胞所产生的一种多肽，具有收缩血管的作用，可引起血压升高，维持器官组织的灌注压，对NO的舒张血管起拮抗作用，本实验中休克及复苏后ET均较休克前升高，表明休克时ET水平的升高对维持机体的血压和器官组织的灌注压有重要作用，是机体的一种自我调节反应[3]。围休克期ET升高的机制可能有：①失血性休克时，机体处于应激状态，释放大量肾上腺素，肾上腺素可促使ET的产生；②失血性休克时凝血酶被激活，而凝血酶是ETmRNA合成的强力驱动剂；③缺血、缺氧时，血管内皮细胞受损，释放ET；④休克时肾、肺的血流减少，而ET的主要清除场所在肾和肺，因而造成ET的清除率下降，ET水平上升[4]。
PGI2/TXA2系统在维持血管紧张性和血小板聚集方面具有重要的意义，二者对心血管和血小板聚集具有相反的调节作用。正常情况下，二者代谢、消长处于动态平衡，从而保持血管一定的紧张性并控制着血小板的聚集与血栓形成。失血性休克时由于儿茶酚胺释放，组织缺氧，组胺的释放及补体激活等因素而使血小板产生和释放TXA2增多；而血管内皮细胞因缺氧、酸中毒而受损，PGI2生成减少[5]。这与本实验结果一致。
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本实验表明，上述四种内源性血管活性物质参与了失血性休克的发生发展；NO与ET，TXA2与PGI2的动态平衡在休克和抗休克中具有重要作用。
参考文献
[1]Anggard E. Nitric oxide: mediator, murderer, and medicine[J]. Lancet, 1994, 343: 1199-1206.
[2]Shah NS, Billar TR. Role of nitric oxide in inflammation and tissue injury during endotoxemia and hemorrhagic shock[J]. Environ Health Perpect, 1998, 10(s5): 1139-1143.
, 百拇医药 [3]Edwards JD, Dovgan PS, Rowley JM, et al. Endothelin-1 levels in ischaemia, reperfustion and hemorrhagic shock in the canine infrarenal aortic revascularisation nodel[J]. Eur J Vasc Surg, 1994, 8(6):729-734.
[4]Schichting E, Aspelin T, Grotmol T, et al. Endothelin and hemodynamic responses to superior mesenteric artery occlustion shock and hemorrhagic shock in pigs[J]. Shock, 1995, 3(2): 109-115.
[5]Oborin AN, Chuklin SN, Kobria TM. The prostaglandin I2 and thromboxane A2 content of the blood of dogs in the dynamic development of hemorrhagic shock[J]. Gematol Transfuziol, 1992, 37(7): 25-27.
收稿：1999-09-27, 百拇医药
单位：邓小明 李金宝 候 炯 马 宇 徐美英 上海第二军医大学长海医院麻醉科，200433
关键词：失血性休克；复苏；一氧化氮；内皮素；血栓素A2；前列环素
中国急救医学991102 摘要：目的 了解围失血性休克期内源性血管活性物质的动态变化及其意义。方法 复制兔失血性休克及复苏模型，分别于休克前、休克1 h、复苏1 h、复苏2 h用比色法和放射免疫法测定血浆中一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、血栓素A2(TXA2)、前列环素(PGI2)的变化。结果 休克后NO、ET、TXA2升高，PGI2下降，复苏后均有所回复，但均未回复到休克前水平。结论 内源性血管活性物质参与了失血性休克的发生发展，内源性血管舒缩物质的平衡在休克及抗休克中具有重要作用。
, http://www.100md.com
中图分类号：R 605.972；R 605.971
文献标识码：A
文章编号：1002-1949(1999)11-0642-02
Dynamic changes of NO, ET, TXA2, PGI2 during hemorrhagic shock in rabbit
DENG Xiao-ming, LI Jin-bao, HOU Jiong, et al.
Department of Anesthesiology, First Affiliated Hospital, Second Melitory Medical University, Shanghai 200433, China
, 百拇医药
Abstract Objective To study the dynamic changes of plasma levels of NO, ET, TXA2, PGI2 during hemorrhagic shock and resusitation. Methods The artery blood samples were taken to measure plasma concentration of NO, ET, TXA2, PGI2, before shock, 1 h after shock, 1 h after resusitation, 2 h after resusitation. Results The levels of NO, ET, TXA2 after shock were significantly higher than bsaeline. The level of PGI2 after shock was lower than baseline. After resusitation, the levels of four substances were still not back to baseline. Conclusions The levels of NO, ET, TXA2, PGI2 were very important to the development of hemorrhagic shock.
, 百拇医药
Key words Hemorrhagic shock； Resusitation； NO； ET； TXA2； PGI2
一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、血栓素A2(TXA2)和前列环素(PGI2)是体内重要的内源性血管舒缩物质，NO与ET，TXA2与PGI2可相互拮抗，广泛参与机体的生理功能调节，在血管舒缩、血压调节、局部组织器官的血流供应以及内脏平滑肌舒缩方面均有重要作用。为了解围失血性休克期体内四种内源性血管舒缩物质的变化，通过复制兔失血性休克及复苏模型，测定兔围失血性休克期血浆NO、ET、TXA2及PGI2的含量，旨在探讨上述内源性血管活性物质在失血性休克复苏前后的作用及意义。
1 资料与方法
, 百拇医药
1.1 动物模型制作 新西兰白兔12只，雌雄不限，体重2.1～2.8 kg，由第二军医大学实验动物中心提供，2.5%硫喷妥钠3～5 ml/kg腹腔注射，气管切开插管，左颈外静脉及右颈总动脉插管，左颈外静脉通过三通与中心静脉测压管相连，同时经微泵持续输入平衡液(2 ml*kg-1*h-1)，右颈总动脉导管与压力传感器相接至惠普多功能监护仪以测血压，导管经肝素抗凝。心电图电极与监护仪连接监测心率。稳定30分钟后，用一50 ml注射器，肝素液抗凝后与颈总动脉插管的三通连接，打开三通，放血至血压6.7 kPa，通过血液再输入或再放血的办法使血压稳定在6.7 kPa左右，1小时后将注射器内的血液从静脉缓慢回输，于休克前、休克1 h、复苏1 h、复苏2 h抽动脉血测定NO、ET、TXA2、PGI2的含量。并记录各时点的平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)、心率(HR)。
1.2 指标测定方法 NO测定以镉还原比色法测定血清中NO-3的浓度代表NO的含量，结果以μmol/L表示。以放射免疫非平衡法测定ET，结果以ng/L表示。以放射免疫平衡法测定血浆中TXB2含量代表TXA2水平，结果以ng/L表示。以放射免疫非平衡法测定血浆中6-酮-前列环素F1a(6-keto-PGF1a)含量代表PGI2的水平，结果以ng/L表示。以上四种药盒均购自解放军总医院东亚免疫技术研究所，严格按说明书操作。
, 百拇医药
1.3 统计学分析 所有数据均以均数±标准差(x±s)表示，各组数据间的比较用t检验，P<0.05为相差显著。
2 结果
各时相点血浆各时相点血浆NO、ET、TXA2、PGI2含量的变化见附表。休克后血浆中NO、ET、TXA2含量均较休克前升高(P<0.01)，PGI2较休克前下降(P<0.01)，复苏后四种物质均有所回复，但均未回复到休克前水平(P<0.05)，复苏后1小时与复苏后2小时各组数据无统计学差别。休克复苏后MAP及CVP较休克前低(P<0.05)，HR无明显变化。
附表 围失血性休克期动物内源性血管
活性物质的变化(x±s，n=12) 时 间
, 百拇医药
NO(μmol/L)
ET(ng/L)
TXA2(ng/L)
PGI2(ng/L)
休克前
331.56±50.14
70.21±5.42
174.89±20.34
154.82±10.41
休克1 h
448.72±52.50**
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174.24±10.13**
315.92±25.36*
109.21±11.49**
复苏1 h
398.51±60.34*
124.38±11.17*
274.32±21.20*
138.13±12.23*
复苏2 h
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116.43±10.24*
230.45±19.24*
141.20±19.23*
注：与休克前相比，*P<0.05，**P<0.01
3 讨论
NO是一种内源性的扩血管物质，通过激活可溶性的鸟苷酸环化酶形成环二磷酸鸟苷(cGMP)，后者可激活蛋白激酶使肌浆蛋白轻链去磷酸化，从而引起血管平滑肌舒张[1]。本研究中兔休克NO水平较休克前明显升高，复苏后2小时仍未恢复到休克前水平，表明休克时NO使血管扩张，使血压进一步下降。围休克期NO水平的升高的机制可能有：①失血性休克时血液经过短暂的低凝期后转为高凝状态，其中凝血酶被激活，后者可激活NO合成酶产生NO；②细胞因子特别是肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1(IL-1)及r-干扰素是NO升高的重要原因。③肠道功能紊乱产生的肠毒素也是NO水平升高的原因之一[2]。
, 百拇医药
ET是由内皮细胞所产生的一种多肽，具有收缩血管的作用，可引起血压升高，维持器官组织的灌注压，对NO的舒张血管起拮抗作用，本实验中休克及复苏后ET均较休克前升高，表明休克时ET水平的升高对维持机体的血压和器官组织的灌注压有重要作用，是机体的一种自我调节反应[3]。围休克期ET升高的机制可能有：①失血性休克时，机体处于应激状态，释放大量肾上腺素，肾上腺素可促使ET的产生；②失血性休克时凝血酶被激活，而凝血酶是ETmRNA合成的强力驱动剂；③缺血、缺氧时，血管内皮细胞受损，释放ET；④休克时肾、肺的血流减少，而ET的主要清除场所在肾和肺，因而造成ET的清除率下降，ET水平上升[4]。
PGI2/TXA2系统在维持血管紧张性和血小板聚集方面具有重要的意义，二者对心血管和血小板聚集具有相反的调节作用。正常情况下，二者代谢、消长处于动态平衡，从而保持血管一定的紧张性并控制着血小板的聚集与血栓形成。失血性休克时由于儿茶酚胺释放，组织缺氧，组胺的释放及补体激活等因素而使血小板产生和释放TXA2增多；而血管内皮细胞因缺氧、酸中毒而受损，PGI2生成减少[5]。这与本实验结果一致。
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本实验表明，上述四种内源性血管活性物质参与了失血性休克的发生发展；NO与ET，TXA2与PGI2的动态平衡在休克和抗休克中具有重要作用。
参考文献
[1]Anggard E. Nitric oxide: mediator, murderer, and medicine[J]. Lancet, 1994, 343: 1199-1206.
[2]Shah NS, Billar TR. Role of nitric oxide in inflammation and tissue injury during endotoxemia and hemorrhagic shock[J]. Environ Health Perpect, 1998, 10(s5): 1139-1143.
, 百拇医药 [3]Edwards JD, Dovgan PS, Rowley JM, et al. Endothelin-1 levels in ischaemia, reperfustion and hemorrhagic shock in the canine infrarenal aortic revascularisation nodel[J]. Eur J Vasc Surg, 1994, 8(6):729-734.
[4]Schichting E, Aspelin T, Grotmol T, et al. Endothelin and hemodynamic responses to superior mesenteric artery occlustion shock and hemorrhagic shock in pigs[J]. Shock, 1995, 3(2): 109-115.
[5]Oborin AN, Chuklin SN, Kobria TM. The prostaglandin I2 and thromboxane A2 content of the blood of dogs in the dynamic development of hemorrhagic shock[J]. Gematol Transfuziol, 1992, 37(7): 25-27.
收稿：1999-09-27, 百拇医药