骨松Ⅰ号主要药效的实验研究
作者：程爱华，韩凤岳
单位：中国中医研究院骨伤科研究所，北京 100700
关键词：骨松Ⅰ号；骨质疏松
中国中医基础医学杂志991112 骨质疏松是好发于中老年人的疾病，其基本的病理变化是骨钙脱失、骨质吸收和骨密度降低。国内有大量研究文献，报道了该病的发病机理和治疗问题。在我国采用中西结合疗法，尤其是使用一些中药制剂治疗骨质疏松的报道很多，也不乏取得较满意疗效的报道。但是，主要为临床治疗病例的总结，对所用的药物缺乏系统而深入的实验研究。骨松Ⅰ号是我们研究所研制的一种治疗骨质疏松的中药胶囊制剂，在临床应用中显示出可以提高患者骨密度、改善关节运动障碍和止痛等多方面疗效。为了检验Ⅰ号药的疗效和阐明其治疗机理，我们对Ⅰ号药做了多种实验研究。现将主要结果报告如下。
材料和方法
, http://www.100md.com
1 Ⅰ号药的主要组成有当归、川芎、土鳖虫、自然铜、骨碎补、细辛和麝香等十几味中药。由北京中药加工厂按我所配方及要求制成胶囊制剂。本实验用该胶囊剂内的药粉，配制成悬浮液，灌喂实验动物。
2 造模及分组：以成年大耳白家兔为实验动物，共100只，两性兼有，体重在2500g左右，体健无病。随机分为五组，即正常对照组，不做任何致病或治疗处置只做骨密度检查；造模组，用上海第九制药厂生产的醋酸氢化考地松(Hydrocortisonacetatis)注射液作为制造股骨头骨质疏松动物模型的造模药，剂量为25mg/kg/体重/周，共注射5周，行腹腔注射，整个实验过程不给抗菌素；NS对照组，造模后逐日灌喂生理盐水1个月；中药对照组，造模后逐日灌喂龙牡壮骨冲剂(武汉健民制药厂出产)，剂量为0.5g/kg/体重/d(约为成人剂量的2倍)，灌喂1个月；实验组，造模后逐日灌喂Ⅰ号药1个月，日剂量为1g/kg体重(为成人剂量的2倍)。
3 髋区骨密度的测定：用Lunar双光子骨密度测量仪测定髋区(以股骨头为中心，包括少许髋臼和股骨颈)骨密度。对每只动物都在造模开始前、造模完成后和治疗处置完成后，测定三次骨密度。对测得的数据做统计学处理。
, 百拇医药
4 Ⅰ号药镇痛和抗炎效应的实验
共用160只纯系昆明小白鼠，两性兼有，体重在20g左右。按照《中药药理实验方法学》所介绍的方法，选择扭体抑制实验作为Ⅰ号药镇痛效应的指标；以抗巴豆油致炎效应作为Ⅰ号药抗炎消肿作用的指标。
5 在全部实验完成后，处死动物，取双侧股骨头。右侧股骨头和部分左侧股骨头，用10%中性福尔马林固定，硝酸脱钙后，制成石蜡切片，行HE染色，做光镜观察。另一部分左侧股骨头固定后，用10%EDTA液脱钙，20%明胶包埋，恒冷箱切片，油红0染色，60%异丙醇分色，蒸馏水浸洗，甘油明胶封固，观察骨细胞脂肪变性的情况。
结果
1 Ⅰ号药对家兔髋部骨密度的影响
家兔髋部骨密度测定的结果见表1。
, http://www.100md.com
表1 髋部骨密度测定结果
(单位：gm/cm) 组 别
±s
p-正*
p-模*
p-实*
p-中*
正 常 组
0.3728±0.0453
-
<0.001
<0.01
, 百拇医药
<0.01
造 模 组
0.3206±0.0336
<0.001
-
<0.001
<0.01
实 验 组
0.4005±0.0496
<0.01
<0.001
-
, http://www.100md.com <0.05
中药对照组
0.3404±0.0350
<0.01
<0.01
<0.05
-
NS对照组
0.3223±0.0333
<0.001
>0.1
<0.001
, http://www.100md.com <0.01
表2 耳廓圆片重量均值表
单位：mg 组 别
左耳圆片(x)
右耳圆片(x)
左-右(x)
Ⅰ 号 组
7.66±0.39
7.38±1.03
0.28
活血止痛散
10.55±2.16
, 百拇医药
8.87±2.77
1.68
三 七 粉
10.42±1.83
8.93±1.94
1.49
伤 愈 散
12.04±4.78
10.23±4.16
1.81
空白对照
19.29±2.82
, http://www.100md.com
10.13±3.02
9.16
从表1可以看出：(1)造模后，家兔髋区骨密度明显降低，与正常者有极显著的差异；(2)用1号药治疗后，髋区骨密度明显回升，并超过正常水平；(3)喂生理盐水无此效应；(4)龙牡壮骨冲剂有此效应，但不如Ⅰ号药显著。
2 Ⅰ号药对家兔股骨头组织结构的影响
用光镜观察的结果，可以概括如下：
2.1 正常组家兔股骨头的骨质、骨髓等结构正常，股骨头的骺板消失。
2.2 造模组或NS对照组家兔股骨头的主要病理表现有：骨小梁破坏吸收过程加强，骨小梁变细(窄)，数量减少；髓腔扩大，髓细胞增生，有散在的髓细胞坏死灶；在多数股骨头内又出现了骺板。
, 百拇医药
2.3 实验组和中药对照组家兔股骨头的结构基本恢复正常：骨小梁的成骨过程活跃，骨小梁变粗(宽)，数量增加；未见扩大的髓腔和髓细胞坏死灶；仅在少数股骨头内见到了骺板。
3 1号药抗巴豆油致炎实验的结果
各组小鼠耳廓圆片重量的平均值列于表2。因为左耳为涂药侧，右耳是正常则，故左-右值越小，表明药物抑制肿胀消炎的作用越强。故表2的结果表明，其抗巴豆油致炎的效力以1号药为最强，以下的顺序为三七粉、活血止痛散和伤愈散。而空白组没有涂抗炎药，故巴豆油致炎效应最显著。
4 小鼠扭体实验结果
各组小鼠10min扭体次数的平均值见表3。
表3 小鼠扭体次数平均值(次) 组 别
水对照组
, http://www.100md.com
阿斯匹林
布洛芬组
12.5倍组*
25倍组
50倍组
100倍组
平均值
62.10
4.40
18.90
9.20
5.20
7.60
, 百拇医药
9.86
s
2.22
0.83
0.30
1.13
0.74
0.98
1.35
s
10
10
10
, 百拇医药
10
10
10
10
注：即按成人每公斤体重用药量的12.5倍给药(余同)。讨论
下面试从中西医结合及中医理论两方面，对Ⅰ号药疗效的机理进行一些探讨：
1 从中西医结合角度看，Ⅰ号药的临床疗效可以概括为：可以提高骨密度，有良好的止痛效应；可以改善关节的运动功能。这可能与该药在动物实验中显示的下述效应相关：Ⅰ号药具有激发骨小梁成骨与骨化的作用，从而纠正了骨质疏松的病理变化；Ⅰ号药具有优良的止痛效应和良好的消炎祛肿作用，这会在一定程度上使患者的退行性炎症受到抑制。因此，减轻或消除患者的症状是在情理之中的。至于Ⅰ号药何以有这种激发作用，则有待今后的研究。
, 百拇医药
2 从中医角度看，本方中当归为君药能补血活血，破恶血，养新血。川芎入血可分理血中之气。土鳖虫和自然铜等活血化瘀，辅助当归加强散瘀、定痛、消痛之功效。骨碎补补肾活血，推动血脉运行，与土鳖虫和自然铜配合具有较强的生骨作用，俱为臣药。用细辛和麝香为佐使，可以提升、开窍、通络、活血止痛。以上诸药配合，实现了生骨、活血、通络、止痛等功效。破除瘀血，新血则生；骨质修复，疏痹自愈。
参考文献
[1] Fairbank,Ac et al. long-term results of core decompression for i schaemic necrosis of the femoral head. J Bone Joint Surg[Br],1994,76B-:42-49 .
[2] Koo,K-H et al. Preventing collapse in early osteonecrosis of the femoral head. J Bone Joint Surg [Br],1995,77B-:870-874.
, 百拇医药
[3] 全国股骨头无菌性坏死学术研讨会论文汇编，北京.1992.11.
[4] 李仪奎.中药药理实验方法学，上海：上海科学技术出版社，1991.149，300，353.
[5] Ficat,RP,and Arlet,J. Necrosis of the femoral head.In:Hungerford DS. ed. 《Ischaemia and Necrosis of Bone》 Baltimore.Williams and Wilkins,1980,171-182.
[6] Ficat,RP.Idiopathic bone necrosis of the femoral head: early diagnosis an d treatment. J Bone Joint Surg.[Br],1985,67-B:3-9.
[7] Steinberg.ME. et al. A quantitative system for staging avascular necrosis . J Bone Joint Surg [Br],1995,77-:34-41.
(收稿日期 1999-04-07 修回日期 1999-05-06), 百拇医药
单位：中国中医研究院骨伤科研究所，北京 100700
关键词：骨松Ⅰ号；骨质疏松
中国中医基础医学杂志991112 骨质疏松是好发于中老年人的疾病，其基本的病理变化是骨钙脱失、骨质吸收和骨密度降低。国内有大量研究文献，报道了该病的发病机理和治疗问题。在我国采用中西结合疗法，尤其是使用一些中药制剂治疗骨质疏松的报道很多，也不乏取得较满意疗效的报道。但是，主要为临床治疗病例的总结，对所用的药物缺乏系统而深入的实验研究。骨松Ⅰ号是我们研究所研制的一种治疗骨质疏松的中药胶囊制剂，在临床应用中显示出可以提高患者骨密度、改善关节运动障碍和止痛等多方面疗效。为了检验Ⅰ号药的疗效和阐明其治疗机理，我们对Ⅰ号药做了多种实验研究。现将主要结果报告如下。
材料和方法
, http://www.100md.com
1 Ⅰ号药的主要组成有当归、川芎、土鳖虫、自然铜、骨碎补、细辛和麝香等十几味中药。由北京中药加工厂按我所配方及要求制成胶囊制剂。本实验用该胶囊剂内的药粉，配制成悬浮液，灌喂实验动物。
2 造模及分组：以成年大耳白家兔为实验动物，共100只，两性兼有，体重在2500g左右，体健无病。随机分为五组，即正常对照组，不做任何致病或治疗处置只做骨密度检查；造模组，用上海第九制药厂生产的醋酸氢化考地松(Hydrocortisonacetatis)注射液作为制造股骨头骨质疏松动物模型的造模药，剂量为25mg/kg/体重/周，共注射5周，行腹腔注射，整个实验过程不给抗菌素；NS对照组，造模后逐日灌喂生理盐水1个月；中药对照组，造模后逐日灌喂龙牡壮骨冲剂(武汉健民制药厂出产)，剂量为0.5g/kg/体重/d(约为成人剂量的2倍)，灌喂1个月；实验组，造模后逐日灌喂Ⅰ号药1个月，日剂量为1g/kg体重(为成人剂量的2倍)。
3 髋区骨密度的测定：用Lunar双光子骨密度测量仪测定髋区(以股骨头为中心，包括少许髋臼和股骨颈)骨密度。对每只动物都在造模开始前、造模完成后和治疗处置完成后，测定三次骨密度。对测得的数据做统计学处理。
, 百拇医药
4 Ⅰ号药镇痛和抗炎效应的实验
共用160只纯系昆明小白鼠，两性兼有，体重在20g左右。按照《中药药理实验方法学》所介绍的方法，选择扭体抑制实验作为Ⅰ号药镇痛效应的指标；以抗巴豆油致炎效应作为Ⅰ号药抗炎消肿作用的指标。
5 在全部实验完成后，处死动物，取双侧股骨头。右侧股骨头和部分左侧股骨头，用10%中性福尔马林固定，硝酸脱钙后，制成石蜡切片，行HE染色，做光镜观察。另一部分左侧股骨头固定后，用10%EDTA液脱钙，20%明胶包埋，恒冷箱切片，油红0染色，60%异丙醇分色，蒸馏水浸洗，甘油明胶封固，观察骨细胞脂肪变性的情况。
结果
1 Ⅰ号药对家兔髋部骨密度的影响
家兔髋部骨密度测定的结果见表1。
, http://www.100md.com
表1 髋部骨密度测定结果
(单位：gm/cm) 组 别
±sp-正*
p-模*
p-实*
p-中*
正 常 组
0.3728±0.0453
-
<0.001
<0.01
, 百拇医药
<0.01
造 模 组
0.3206±0.0336
<0.001
-
<0.001
<0.01
实 验 组
0.4005±0.0496
<0.01
<0.001
-
, http://www.100md.com <0.05
中药对照组
0.3404±0.0350
<0.01
<0.01
<0.05
-
NS对照组
0.3223±0.0333
<0.001
>0.1
<0.001
, http://www.100md.com <0.01
表2 耳廓圆片重量均值表
单位：mg 组 别
左耳圆片(x)
右耳圆片(x)
左-右(x)
Ⅰ 号 组
7.66±0.39
7.38±1.03
0.28
活血止痛散
10.55±2.16
, 百拇医药
8.87±2.77
1.68
三 七 粉
10.42±1.83
8.93±1.94
1.49
伤 愈 散
12.04±4.78
10.23±4.16
1.81
空白对照
19.29±2.82
, http://www.100md.com
10.13±3.02
9.16
从表1可以看出：(1)造模后，家兔髋区骨密度明显降低，与正常者有极显著的差异；(2)用1号药治疗后，髋区骨密度明显回升，并超过正常水平；(3)喂生理盐水无此效应；(4)龙牡壮骨冲剂有此效应，但不如Ⅰ号药显著。
2 Ⅰ号药对家兔股骨头组织结构的影响
用光镜观察的结果，可以概括如下：
2.1 正常组家兔股骨头的骨质、骨髓等结构正常，股骨头的骺板消失。
2.2 造模组或NS对照组家兔股骨头的主要病理表现有：骨小梁破坏吸收过程加强，骨小梁变细(窄)，数量减少；髓腔扩大，髓细胞增生，有散在的髓细胞坏死灶；在多数股骨头内又出现了骺板。
, 百拇医药
2.3 实验组和中药对照组家兔股骨头的结构基本恢复正常：骨小梁的成骨过程活跃，骨小梁变粗(宽)，数量增加；未见扩大的髓腔和髓细胞坏死灶；仅在少数股骨头内见到了骺板。
3 1号药抗巴豆油致炎实验的结果
各组小鼠耳廓圆片重量的平均值列于表2。因为左耳为涂药侧，右耳是正常则，故左-右值越小，表明药物抑制肿胀消炎的作用越强。故表2的结果表明，其抗巴豆油致炎的效力以1号药为最强，以下的顺序为三七粉、活血止痛散和伤愈散。而空白组没有涂抗炎药，故巴豆油致炎效应最显著。
4 小鼠扭体实验结果
各组小鼠10min扭体次数的平均值见表3。
表3 小鼠扭体次数平均值(次) 组 别
水对照组
, http://www.100md.com
阿斯匹林
布洛芬组
12.5倍组*
25倍组
50倍组
100倍组
平均值
62.10
4.40
18.90
9.20
5.20
7.60
, 百拇医药
9.86
s
2.22
0.83
0.30
1.13
0.74
0.98
1.35
s
10
10
10
, 百拇医药
10
10
10
10
注：即按成人每公斤体重用药量的12.5倍给药(余同)。讨论
下面试从中西医结合及中医理论两方面，对Ⅰ号药疗效的机理进行一些探讨：
1 从中西医结合角度看，Ⅰ号药的临床疗效可以概括为：可以提高骨密度，有良好的止痛效应；可以改善关节的运动功能。这可能与该药在动物实验中显示的下述效应相关：Ⅰ号药具有激发骨小梁成骨与骨化的作用，从而纠正了骨质疏松的病理变化；Ⅰ号药具有优良的止痛效应和良好的消炎祛肿作用，这会在一定程度上使患者的退行性炎症受到抑制。因此，减轻或消除患者的症状是在情理之中的。至于Ⅰ号药何以有这种激发作用，则有待今后的研究。
, 百拇医药
2 从中医角度看，本方中当归为君药能补血活血，破恶血，养新血。川芎入血可分理血中之气。土鳖虫和自然铜等活血化瘀，辅助当归加强散瘀、定痛、消痛之功效。骨碎补补肾活血，推动血脉运行，与土鳖虫和自然铜配合具有较强的生骨作用，俱为臣药。用细辛和麝香为佐使，可以提升、开窍、通络、活血止痛。以上诸药配合，实现了生骨、活血、通络、止痛等功效。破除瘀血，新血则生；骨质修复，疏痹自愈。
参考文献
[1] Fairbank,Ac et al. long-term results of core decompression for i schaemic necrosis of the femoral head. J Bone Joint Surg[Br],1994,76B-:42-49 .
[2] Koo,K-H et al. Preventing collapse in early osteonecrosis of the femoral head. J Bone Joint Surg [Br],1995,77B-:870-874.
, 百拇医药
[3] 全国股骨头无菌性坏死学术研讨会论文汇编，北京.1992.11.
[4] 李仪奎.中药药理实验方法学，上海：上海科学技术出版社，1991.149，300，353.
[5] Ficat,RP,and Arlet,J. Necrosis of the femoral head.In:Hungerford DS. ed. 《Ischaemia and Necrosis of Bone》 Baltimore.Williams and Wilkins,1980,171-182.
[6] Ficat,RP.Idiopathic bone necrosis of the femoral head: early diagnosis an d treatment. J Bone Joint Surg.[Br],1985,67-B:3-9.
[7] Steinberg.ME. et al. A quantitative system for staging avascular necrosis . J Bone Joint Surg [Br],1995,77-:34-41.
(收稿日期 1999-04-07 修回日期 1999-05-06), 百拇医药