温清饮免疫双向调节作用的实验研究
作者：杜 旭 仉 雁 李玉文 杨雪艳 杨桂英
单位：杜 旭 仉 雁 李玉文 哈尔滨医科大学第一临床医院，黑龙江 哈尔滨 150001；杨雪艳 杨桂英 黑龙江省中医研究院，黑龙江 哈尔滨 150036
关键词：温清饮；免疫；双向调节作用
中国中医基础医学杂志991110 摘 要：目的 探讨古方温清饮免疫双向调节的作用和机理。方法 用对大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)、对致敏豚鼠离体回肠平滑肌过敏性收缩、对二硝基氯苯(DNCB)接触性皮炎及对小鼠T淋巴细胞酸性酯酶活性，对环磷酰胺免疫抑制作用，对小鼠血浆内CAmp等的影响，观察温清饮的免疫双向调节作用。结果 古方温清饮具有免疫双向调节作用，能增强小鼠T淋巴细胞酸性酯酶活性，增强网状内皮系统的吞噬功能，并能对抗环磷酰胺所致的免疫抑制作用，增高小鼠血浆CAmp含量，对Ⅰ型及Ⅳ型变态反应均有抑制作用。结果表明对古方温清饮的研究具有很重要的意义。
, 百拇医药
古方温清饮出自公元1587年，明代太医院龚廷贤所著《万病回春》，是由四物汤与黄连解毒汤组成。《医方集解》、《妇科玉尺》、《中医大辞典》等均有记载。临床用于治疗各种血症、口疮及狐惑症等。日本汉方界对本方很重视，为12种疾病的首选方剂。我们曾用此方对口腔溃疡进行了疗效观察，收到了满意的效果。为进一步探讨温清饮的作用机理，我们从抗变态反应及免疫调节作用方面进行了实验研究。
实验材料
1 药物
温清饮由当归、生地、赤芍、川芎、黄连、黄芩、黄柏及栀子8味中药组成，制成水煎膏备用。
2 试剂
卵白蛋白：英国进口产品，百日咳杆菌菌苗为长春生物制品厂生产。伊文思兰及2.4--二硝基氯苯由上海化学试剂厂生产。CAmp药盒：放射强度1毫居里/毫升，由中国医学科学院基础医学研究所提供。
, 百拇医药
3 实验动物
Wistar大白鼠，豚鼠、昆明种小白鼠由医大一院动物室提供。
方法与结果
1 对大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)的影响[1]
取健康大鼠2只，肌肉注射10mg/kg卵白蛋白，同时腹腔注射2×1010百日咳杆菌致敏10d后，心脏取血，制备抗血清。另取90g～110g雄性大鼠10只，随机分为两组，给药组灌胃温清饮40g/kg，每日1次，连续7d，对照组灌胃等容积生理盐水。将稀释度1∶1，1∶10的抗血清皮内注射于各组大鼠背部，每稀释度注射2点，每点0.1ml,48h后抗原攻击，每鼠静脉注射含有卵白蛋白1mg的伊文思兰溶液1ml，30min后处死，计算PCA抑制百分率。抗血清稀释度为1∶1组PCA抑制率为18.9%，与对照组相比P<0.05。1∶10组PCA抑制率为31.7%，与对照组相比P<0.01。表明温清饮对PCA有明显的抑制作用。
, http://www.100md.com
2 对致敏豚鼠离体回肠平滑肌过敏性收缩的影响[1]
取150g～200g豚鼠4只，雄雌兼用，对照组、致敏组各2只。以5%卵白蛋白溶液0.4ml注射于后腿肌肉，同时腹腔注射卵白蛋白溶液1ml。3周后处死取回肠，按Magnus法比较两组肠段收缩曲线的变化。实验结果表明，卵白蛋白对正常肠段不引起痉性收缩，对致敏组肠段能引起痉挛性收缩，若先使温清饮与致敏肠段接触，可抑制过敏性收缩，其作用与药物浓度相关。
3 对二硝基氯苯(DNCB)接触性皮炎的保护作用[1]
取18g～22g体重昆明种小白鼠30只，雌雄各半，随机分三组。给药组分别灌胃温清饮20～40g/kg，每日1次，连续7d，对照组给予等容积生理盐水。以7%DNCB丙酮溶液给各组小鼠背部皮下注射0.02ml，8d后再以1%DNCB甘油溶液0.03ml涂于小鼠左耳，16h后处死取耳，求两耳重量差作为炎症肿胀度，并计算其抑制率。结果20g/kg组抑制率为34.2%(P<0.01)；40g/kg组为55.1%(P<0.01)，表明温清饮对迟发型变态反应炎症具有明显的保护作用，作用强度随剂量增加而加强。
, http://www.100md.com
4 对小鼠T淋巴细胞酸性酯酶活性的影响[2]
取18g～22g昆明种小白鼠20只，雌雄各半，随机分为两组。给药组温清饮40g/kg灌胃7d，对照组给予生理盐水。取小鼠外周血推片，做酯酶染色，镜检。结果表明：温清饮对小鼠T淋巴细胞酸性脂酶活性有明显的增强作用，对照组为44.7±3.2；给药组为51.3±2.05(P<0.05)。
5 对环磷酰胺免疫抑制作用的影响
取雄性小白鼠32只，随机分为四组。对照组：温清饮40g/kg组，灌胃5d。环磷酰胺组：环磷酰胺70mg/kg皮下注射1次。温清饮+环磷酰胺组：温清饮40g/kg灌胃5d，环磷酰胺70mg/kg皮下注射1次；第5d处死取胸腺、脾。结果表明,温清饮能对抗环磷酰胺所致胸腺、脾的萎缩。
6 对小鼠血浆内CAmp含量的影响
, 百拇医药
取体重20g～24g小鼠20只，分为对照组、给药组(20g/kg)，连续给药10d。眶静脉采血，分离血浆，按竞争性蛋白质结合分析法程序绘制标准曲线，测定CAmp含量。血浆CAmp含量(
±s)pmol/ml对照组为28.7±6.56；给药组为35.9±6.49(P<0.05)。温清饮小鼠血浆CAmp含量增高。
讨论
温清饮出自《万病回春》，是明朝太医院治疗月经病、更年期症侯群的古验方。本方具有清热解毒、补血活血的独特功效，现用于治疗复发性口疮[3]、白塞氏病、口干症等。本方在日本临床应用范围较广泛，多用于子宫出血、口疮、白塞氏综合症、过敏性疾病等。现代研究已证明，四物汤能刺激细胞免疫及抗体生成，被列为中药免疫促进剂，黄连解毒汤能清除抗原抑制免疫反应，促使淋巴细胞转化。由两方组成的温清饮药理作用的研究，国内报道尚少。我们通过对Ⅰ型变态反应模型的PCA反应与Schultz-Dale反应以及Ⅳ型变态反应DNCB接触性皮炎等实验均表明具有抑制变态反应的作用。已知CAmp水平增高能稳定靶细胞膜，从而抑制肥大细胞等靶细胞脱颗粒和组胺等活性介质的释放，防止变态反应的发生。温清饮能使小鼠血浆CAmp含量增高等。表明温清饮具有免疫双向调节作用，有望成为对免疫性疾病的治疗优于西药的新制剂。本文只是对温清饮免疫作用的初步探讨。在此基础上有必要继续深入研究，进一步阐明其作用机理，扩大温清饮的适用范围，使更多的患者解除病痛。
参考文献
[1] 徐叔云.药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1994.1196.
[2] 赵桂芝.临床检验学.成都：四川科技出版社，1995.361.
[3] 傅有铎.中国医学论坛报，1987，(5)-5-5.
(收稿日期 1999-06-26 修回日期 1999-07-21), http://www.100md.com
单位：杜 旭 仉 雁 李玉文 哈尔滨医科大学第一临床医院，黑龙江 哈尔滨 150001；杨雪艳 杨桂英 黑龙江省中医研究院，黑龙江 哈尔滨 150036
关键词：温清饮；免疫；双向调节作用
中国中医基础医学杂志991110 摘 要：目的 探讨古方温清饮免疫双向调节的作用和机理。方法 用对大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)、对致敏豚鼠离体回肠平滑肌过敏性收缩、对二硝基氯苯(DNCB)接触性皮炎及对小鼠T淋巴细胞酸性酯酶活性，对环磷酰胺免疫抑制作用，对小鼠血浆内CAmp等的影响，观察温清饮的免疫双向调节作用。结果 古方温清饮具有免疫双向调节作用，能增强小鼠T淋巴细胞酸性酯酶活性，增强网状内皮系统的吞噬功能，并能对抗环磷酰胺所致的免疫抑制作用，增高小鼠血浆CAmp含量，对Ⅰ型及Ⅳ型变态反应均有抑制作用。结果表明对古方温清饮的研究具有很重要的意义。
, 百拇医药
古方温清饮出自公元1587年，明代太医院龚廷贤所著《万病回春》，是由四物汤与黄连解毒汤组成。《医方集解》、《妇科玉尺》、《中医大辞典》等均有记载。临床用于治疗各种血症、口疮及狐惑症等。日本汉方界对本方很重视，为12种疾病的首选方剂。我们曾用此方对口腔溃疡进行了疗效观察，收到了满意的效果。为进一步探讨温清饮的作用机理，我们从抗变态反应及免疫调节作用方面进行了实验研究。
实验材料
1 药物
温清饮由当归、生地、赤芍、川芎、黄连、黄芩、黄柏及栀子8味中药组成，制成水煎膏备用。
2 试剂
卵白蛋白：英国进口产品，百日咳杆菌菌苗为长春生物制品厂生产。伊文思兰及2.4--二硝基氯苯由上海化学试剂厂生产。CAmp药盒：放射强度1毫居里/毫升，由中国医学科学院基础医学研究所提供。
, 百拇医药
3 实验动物
Wistar大白鼠，豚鼠、昆明种小白鼠由医大一院动物室提供。
方法与结果
1 对大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)的影响[1]
取健康大鼠2只，肌肉注射10mg/kg卵白蛋白，同时腹腔注射2×1010百日咳杆菌致敏10d后，心脏取血，制备抗血清。另取90g～110g雄性大鼠10只，随机分为两组，给药组灌胃温清饮40g/kg，每日1次，连续7d，对照组灌胃等容积生理盐水。将稀释度1∶1，1∶10的抗血清皮内注射于各组大鼠背部，每稀释度注射2点，每点0.1ml,48h后抗原攻击，每鼠静脉注射含有卵白蛋白1mg的伊文思兰溶液1ml，30min后处死，计算PCA抑制百分率。抗血清稀释度为1∶1组PCA抑制率为18.9%，与对照组相比P<0.05。1∶10组PCA抑制率为31.7%，与对照组相比P<0.01。表明温清饮对PCA有明显的抑制作用。
, http://www.100md.com
2 对致敏豚鼠离体回肠平滑肌过敏性收缩的影响[1]
取150g～200g豚鼠4只，雄雌兼用，对照组、致敏组各2只。以5%卵白蛋白溶液0.4ml注射于后腿肌肉，同时腹腔注射卵白蛋白溶液1ml。3周后处死取回肠，按Magnus法比较两组肠段收缩曲线的变化。实验结果表明，卵白蛋白对正常肠段不引起痉性收缩，对致敏组肠段能引起痉挛性收缩，若先使温清饮与致敏肠段接触，可抑制过敏性收缩，其作用与药物浓度相关。
3 对二硝基氯苯(DNCB)接触性皮炎的保护作用[1]
取18g～22g体重昆明种小白鼠30只，雌雄各半，随机分三组。给药组分别灌胃温清饮20～40g/kg，每日1次，连续7d，对照组给予等容积生理盐水。以7%DNCB丙酮溶液给各组小鼠背部皮下注射0.02ml，8d后再以1%DNCB甘油溶液0.03ml涂于小鼠左耳，16h后处死取耳，求两耳重量差作为炎症肿胀度，并计算其抑制率。结果20g/kg组抑制率为34.2%(P<0.01)；40g/kg组为55.1%(P<0.01)，表明温清饮对迟发型变态反应炎症具有明显的保护作用，作用强度随剂量增加而加强。
, http://www.100md.com
4 对小鼠T淋巴细胞酸性酯酶活性的影响[2]
取18g～22g昆明种小白鼠20只，雌雄各半，随机分为两组。给药组温清饮40g/kg灌胃7d，对照组给予生理盐水。取小鼠外周血推片，做酯酶染色，镜检。结果表明：温清饮对小鼠T淋巴细胞酸性脂酶活性有明显的增强作用，对照组为44.7±3.2；给药组为51.3±2.05(P<0.05)。
5 对环磷酰胺免疫抑制作用的影响
取雄性小白鼠32只，随机分为四组。对照组：温清饮40g/kg组，灌胃5d。环磷酰胺组：环磷酰胺70mg/kg皮下注射1次。温清饮+环磷酰胺组：温清饮40g/kg灌胃5d，环磷酰胺70mg/kg皮下注射1次；第5d处死取胸腺、脾。结果表明,温清饮能对抗环磷酰胺所致胸腺、脾的萎缩。
6 对小鼠血浆内CAmp含量的影响
, 百拇医药
取体重20g～24g小鼠20只，分为对照组、给药组(20g/kg)，连续给药10d。眶静脉采血，分离血浆，按竞争性蛋白质结合分析法程序绘制标准曲线，测定CAmp含量。血浆CAmp含量(
±s)pmol/ml对照组为28.7±6.56；给药组为35.9±6.49(P<0.05)。温清饮小鼠血浆CAmp含量增高。讨论
温清饮出自《万病回春》，是明朝太医院治疗月经病、更年期症侯群的古验方。本方具有清热解毒、补血活血的独特功效，现用于治疗复发性口疮[3]、白塞氏病、口干症等。本方在日本临床应用范围较广泛，多用于子宫出血、口疮、白塞氏综合症、过敏性疾病等。现代研究已证明，四物汤能刺激细胞免疫及抗体生成，被列为中药免疫促进剂，黄连解毒汤能清除抗原抑制免疫反应，促使淋巴细胞转化。由两方组成的温清饮药理作用的研究，国内报道尚少。我们通过对Ⅰ型变态反应模型的PCA反应与Schultz-Dale反应以及Ⅳ型变态反应DNCB接触性皮炎等实验均表明具有抑制变态反应的作用。已知CAmp水平增高能稳定靶细胞膜，从而抑制肥大细胞等靶细胞脱颗粒和组胺等活性介质的释放，防止变态反应的发生。温清饮能使小鼠血浆CAmp含量增高等。表明温清饮具有免疫双向调节作用，有望成为对免疫性疾病的治疗优于西药的新制剂。本文只是对温清饮免疫作用的初步探讨。在此基础上有必要继续深入研究，进一步阐明其作用机理，扩大温清饮的适用范围，使更多的患者解除病痛。
参考文献
[1] 徐叔云.药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1994.1196.
[2] 赵桂芝.临床检验学.成都：四川科技出版社，1995.361.
[3] 傅有铎.中国医学论坛报，1987，(5)-5-5.
(收稿日期 1999-06-26 修回日期 1999-07-21), http://www.100md.com