罗汉果甜苷的生物活性研究
作者：王霆 黄志江 蒋毅珉 周曙 苏玲 姜世英 刘国卿
单位：(蒋毅珉 周曙 苏玲 刘国卿)中国药科大学药理教研室(南京 210009)；(黄志江 姜世英)广西师范大学生物系
关键词：罗汉果甜苷；祛痰；镇咳
中草药991216 摘 要 报道了罗汉果 Siraitia grosvenorii (Swingle) C. Jeffery ex Lu et Z. Y. Zhang 提取物罗汉果甜苷(mogrosides,Mog)的祛痰、镇咳、平喘等药理作用。结果表明：Mog 能增加小鼠气管酚红的分泌量，抑制氨水诱发的小鼠咳嗽，促进青蛙食道粘液移动，但并不影响枸橼酸诱发的豚鼠哮喘。提示 Mog 有化痰镇咳作用，是罗汉果的有效活性成分。
Studies on the Pharmacological Profile of Mogrosides
, http://www.100md.com
Wang Ting Huang Zhijiang Jiang Yimin et al.
(Department of Pharmacology, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009)
Abstract The expectorant, antitussive and anti-asthmatic effects of mogrosides (Mog), extracted from traditional Chinese medicine Luohanguo [Siraitia grosvenorii (Swingle) C. Jeffery ex Lu et Z. Y. Zhang], was studied. Results of the study showed that Mog increased the secretion of PSP from mice bronchi, prompted the ciliary movement of frog esophagus and relieved cough caused by the irritation of ammonia water in mice, but did not alleviate the asthma induced by citric acid in mice. These data verified the truth of thousands years of Chinese medical practice in the use of the herb, and proved that MOG is the active composition of Luohanguo.
, 百拇医药
Key words mogrosides expectorant antitussive
罗汉果，学名光果木鳖 Siraitia grosvenorii (Swingle) C. Jeffery ex lu et Z. Y. Zhang 是我国南方特产药材，主产于广西北部，具有祛痰、止咳、润肺的功效，其甜味和无毒的特点，作药食两用材料[1]，目前以罗汉果为主要成分的中成药及食品饮料已经广泛应用。罗汉果甜苷(mogrosides,Mog)是罗汉果的甜味成分，植物含量较高且水溶性好，目前已经有纯度98%以上成品用作食品添加剂[2]，而对于 Mog 的药理作用未见报道，鉴于罗汉果的传统用法均采用水泡饮用和其功效为祛痰、镇咳的作用等资料，在此我们根据罗汉果的传统药用功效为 Mog 的生物活性进行了研究。
1 材料
昆明种小鼠，雌雄不限，体重(22±2) g；豚鼠，雄性，体重(170±20) g；青蛙，雌雄不限，体重(25±4) g，由中国药科大学实验动物室提供。Mog(纯度>98%)由广西师范大学提供，其它试剂为市售品。
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2 方法和结果
2.1 Mog 对小鼠气管酚红排泌量的影响：小鼠随机分为5组，每组12只，空白对照为等体积生理盐水，阳性药对照为 NH4Cl。按照文献[3]方法，ig 给药 30 min 后处死小鼠，取出气管，用比色法测定气管灌洗液中酚红含量。结果 NH4Cl (200 mg/kg,ig) 和 Mog (100,200 mg/kg,ig) 均使小鼠气管排泌的酚红量明显增加 (P<0.01)，并且 Mog 增加的小鼠气管酚红排泌量的作用呈剂量依赖性关系(表1)。
表1 Mog 对小鼠气管酚红排泌量的影响(
±s) 组别
剂量
(mg/kg)
, 百拇医药
动物数
分泌量
(μg/mL)
对照
-
12
3.40±1.54
NH4Cl
200
12
10.11±2.14**
Mog
, 百拇医药
50
12
4.12±2.54*
100
12
5.87±2.87**
200
12
9.76±2.36**
与对照组比：*P<0.05 **P<0.01
2.2 Mog 对氨水喷雾引咳小鼠的镇咳作用：小鼠随机分为5组，每组12只，ig 给药，空白对照用等体积生理盐水，阳性药对照用磷酸可待因 (Codein)。按照文献[4]方法，测定半数致咳喷雾时间 (EDT50)，根据公式：R=(给药组 EDT50/对照组EDT50)×100% 计算出 R 值。当 R>130% 时，认为药物有镇咳作用，当 R>150% 时认为药物有明显的镇咳作用。结果磷酸可待因 (30 mg/kg,ig) 和 Mog (80 mg/kg,ig) 均可增加小鼠 EDT50，两者 R 值相近(分别为134%和138%)，当 Mog 剂量增加到 160 和 320 mg/kg 时，其表现出明显的镇咳作用且呈剂量依赖关系(表2)。
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表2 Mog 对氨水喷雾引咳小鼠的镇咳作用 组别
剂量
(mg/kg)
动物数
EDT50
(s)
R
(%)
对照
-
12
27.54
, 百拇医药 Codein
30
12
36.86
134△
Mog
80
12
38.49
138△
160
12
43.65
, http://www.100md.com
158△△
320
12
45.70
165△△
△镇咳作用；△△明显镇咳作用
2.3 Mog 对青蛙食道粘液移动的影响：根据文献[3]方法，观察印度墨汁微粒移动 1 cm 需要的时间，计算出它的移动速度作为青蛙食道粘液运动速度，空白对照用 0.7% NaCl 溶液。结果 Mog 在以 20 mg/mL 的浓度滴加蛙食道 0.5 h 后，可以明显增加滴在食道表面的印度墨汁微粒移动速度，和给药前相比有明显差异。结果见表3。
, 百拇医药
表3 Mog 对青蛙食道粘液移动的影响 组别
剂量
(mg/kg)
动物数
移动速度
(mm/min)
对照
-
10
0.49±0.14
NaCl
7
10
, 百拇医药
0.53±0.16
Mog
20
10
0.58±0.16**##
与对照比：**P<0.01； 与 NaCl 组比：＃＃P<0.01
2.4 Mog 对枸橼酸诱发的豚鼠哮喘的影响：实验分急性实验和长期给药实验二组。急性实验在 ig 给药(200 mg/kg)0.5 h 后测定引喘潜伏期；慢性实验在连续 3 d，每天 ig 200 mg/kg的给药，在第3天给药 0.5 h 后，测定引喘潜伏期。实验方法参照文献[4]进行，结果在急性实验中，Mog (200 mg/kg,ig) 给药 0.5 h 后，枸橼酸喷雾诱发豚鼠哮喘潜伏期为(73.63±16.63) s (n=10)，与空白对照组 (65.60±11.23) s (n=10)相比增加约12% (P>0.05)；在慢性实验中，连续 3 d 给予 Mog (200 mg/kg,ig) 后，枸橼酸喷雾诱发豚鼠哮喘的潜伏期为 (98.80±18.00) s (n=6)，较空白对照组 (81.63±20.11) s (n=6) 延长了近20% (P>0.05)。在急性和慢性实验中，200 mg/kg (ig) Mog 均未能抑制枸橼酸诱发的豚鼠哮喘。
, 百拇医药
3 讨论
小鼠气管酚红排泌结果反映气管排泌量的变化，排泌量增加有利于气管表面水样层的形成或增加，从而稀释痰液并有利于痰液的排出；而青蛙食道粘膜有与人气管粘膜类似的纤毛细胞，这些纤毛细胞的运动是食道或气管表面粘液或痰运动的动力[3]。Mog 在气管酚红排泌实验、食道粘液移动实验及氨水引咳实验等3个模型中均表现出明显的作用，表明 Mog 有较好的祛痰、镇咳作用。罗汉果传统用于祛痰镇咳，民间用法采用开水泡饮方法。Mog 在原植物中含量很高且水溶性很好，实验证明其有明显的祛痰镇咳功效，且有较好的量效关系，提示其为罗汉果祛痰镇咳作用的有效成分。从本文报道的初步结果来看 Mog 的作用可能和其稀释痰液，促进痰液排出及抑制咳嗽反射环节有关。其明确的作用机制有待于进一步更深入的工作。
在豚鼠引喘实验中，慢性和急性实验均表明 Mog(200 mg/kg,ig) 延长枸橼酸诱发的豚鼠哮喘的潜伏期(统计学检验表明无显著性差异)，Mog 的平喘作用的进一步明确，还有待于更细致的实验来证实。本研究证明 Mog 对小鼠咳嗽有明显的抑制作用，说明它能对咳嗽反射的反射弧有影响；而文献报道罗汉果的粗提物有一定镇静作用[5]，且民间对它有安神醒脑功效的描述，这两者间是否有一定联系有待进一步的研究。
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致谢：本校季晖教授，孙滢川和李洁同学在实验过程中提供帮助。
基金项目：中国药科大学科研基金资助
通讯地址：王霆，上海市转基因研究中心药物研究部，邮编201300，Email：Wangt @ sihnoroad.com
参考文献
1 黄志江，等.广西师范大学学报(自然科学版)，1998，16(4)：75
2 竹本常松，他.药学杂志(日)，1983，103：1151
3 陈奇主编.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993：636，642
4 徐叔云，等主编.药理实验方法学.第二版.北京：人民卫生出版社，1994：1166
5 Kasai R，et al. Phytochemistry,1987,26:1371
收稿日期：1999-06-08, 百拇医药
单位：(蒋毅珉 周曙 苏玲 刘国卿)中国药科大学药理教研室(南京 210009)；(黄志江 姜世英)广西师范大学生物系
关键词：罗汉果甜苷；祛痰；镇咳
中草药991216 摘 要 报道了罗汉果 Siraitia grosvenorii (Swingle) C. Jeffery ex Lu et Z. Y. Zhang 提取物罗汉果甜苷(mogrosides,Mog)的祛痰、镇咳、平喘等药理作用。结果表明：Mog 能增加小鼠气管酚红的分泌量，抑制氨水诱发的小鼠咳嗽，促进青蛙食道粘液移动，但并不影响枸橼酸诱发的豚鼠哮喘。提示 Mog 有化痰镇咳作用，是罗汉果的有效活性成分。
Studies on the Pharmacological Profile of Mogrosides
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Wang Ting Huang Zhijiang Jiang Yimin et al.
(Department of Pharmacology, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009)
Abstract The expectorant, antitussive and anti-asthmatic effects of mogrosides (Mog), extracted from traditional Chinese medicine Luohanguo [Siraitia grosvenorii (Swingle) C. Jeffery ex Lu et Z. Y. Zhang], was studied. Results of the study showed that Mog increased the secretion of PSP from mice bronchi, prompted the ciliary movement of frog esophagus and relieved cough caused by the irritation of ammonia water in mice, but did not alleviate the asthma induced by citric acid in mice. These data verified the truth of thousands years of Chinese medical practice in the use of the herb, and proved that MOG is the active composition of Luohanguo.
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Key words mogrosides expectorant antitussive
罗汉果，学名光果木鳖 Siraitia grosvenorii (Swingle) C. Jeffery ex lu et Z. Y. Zhang 是我国南方特产药材，主产于广西北部，具有祛痰、止咳、润肺的功效，其甜味和无毒的特点，作药食两用材料[1]，目前以罗汉果为主要成分的中成药及食品饮料已经广泛应用。罗汉果甜苷(mogrosides,Mog)是罗汉果的甜味成分，植物含量较高且水溶性好，目前已经有纯度98%以上成品用作食品添加剂[2]，而对于 Mog 的药理作用未见报道，鉴于罗汉果的传统用法均采用水泡饮用和其功效为祛痰、镇咳的作用等资料，在此我们根据罗汉果的传统药用功效为 Mog 的生物活性进行了研究。
1 材料
昆明种小鼠，雌雄不限，体重(22±2) g；豚鼠，雄性，体重(170±20) g；青蛙，雌雄不限，体重(25±4) g，由中国药科大学实验动物室提供。Mog(纯度>98%)由广西师范大学提供，其它试剂为市售品。
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2 方法和结果
2.1 Mog 对小鼠气管酚红排泌量的影响：小鼠随机分为5组，每组12只，空白对照为等体积生理盐水，阳性药对照为 NH4Cl。按照文献[3]方法，ig 给药 30 min 后处死小鼠，取出气管，用比色法测定气管灌洗液中酚红含量。结果 NH4Cl (200 mg/kg,ig) 和 Mog (100,200 mg/kg,ig) 均使小鼠气管排泌的酚红量明显增加 (P<0.01)，并且 Mog 增加的小鼠气管酚红排泌量的作用呈剂量依赖性关系(表1)。
表1 Mog 对小鼠气管酚红排泌量的影响(
±s) 组别剂量
(mg/kg)
, 百拇医药
动物数
分泌量
(μg/mL)
对照
-
12
3.40±1.54
NH4Cl
200
12
10.11±2.14**
Mog
, 百拇医药
50
12
4.12±2.54*
100
12
5.87±2.87**
200
12
9.76±2.36**
与对照组比：*P<0.05 **P<0.01
2.2 Mog 对氨水喷雾引咳小鼠的镇咳作用：小鼠随机分为5组，每组12只，ig 给药，空白对照用等体积生理盐水，阳性药对照用磷酸可待因 (Codein)。按照文献[4]方法，测定半数致咳喷雾时间 (EDT50)，根据公式：R=(给药组 EDT50/对照组EDT50)×100% 计算出 R 值。当 R>130% 时，认为药物有镇咳作用，当 R>150% 时认为药物有明显的镇咳作用。结果磷酸可待因 (30 mg/kg,ig) 和 Mog (80 mg/kg,ig) 均可增加小鼠 EDT50，两者 R 值相近(分别为134%和138%)，当 Mog 剂量增加到 160 和 320 mg/kg 时，其表现出明显的镇咳作用且呈剂量依赖关系(表2)。
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表2 Mog 对氨水喷雾引咳小鼠的镇咳作用 组别
剂量
(mg/kg)
动物数
EDT50
(s)
R
(%)
对照
-
12
27.54
, 百拇医药 Codein
30
12
36.86
134△
Mog
80
12
38.49
138△
160
12
43.65
, http://www.100md.com
158△△
320
12
45.70
165△△
△镇咳作用；△△明显镇咳作用
2.3 Mog 对青蛙食道粘液移动的影响：根据文献[3]方法，观察印度墨汁微粒移动 1 cm 需要的时间，计算出它的移动速度作为青蛙食道粘液运动速度，空白对照用 0.7% NaCl 溶液。结果 Mog 在以 20 mg/mL 的浓度滴加蛙食道 0.5 h 后，可以明显增加滴在食道表面的印度墨汁微粒移动速度，和给药前相比有明显差异。结果见表3。
, 百拇医药
表3 Mog 对青蛙食道粘液移动的影响 组别
剂量
(mg/kg)
动物数
移动速度
(mm/min)
对照
-
10
0.49±0.14
NaCl
7
10
, 百拇医药
0.53±0.16
Mog
20
10
0.58±0.16**##
与对照比：**P<0.01； 与 NaCl 组比：＃＃P<0.01
2.4 Mog 对枸橼酸诱发的豚鼠哮喘的影响：实验分急性实验和长期给药实验二组。急性实验在 ig 给药(200 mg/kg)0.5 h 后测定引喘潜伏期；慢性实验在连续 3 d，每天 ig 200 mg/kg的给药，在第3天给药 0.5 h 后，测定引喘潜伏期。实验方法参照文献[4]进行，结果在急性实验中，Mog (200 mg/kg,ig) 给药 0.5 h 后，枸橼酸喷雾诱发豚鼠哮喘潜伏期为(73.63±16.63) s (n=10)，与空白对照组 (65.60±11.23) s (n=10)相比增加约12% (P>0.05)；在慢性实验中，连续 3 d 给予 Mog (200 mg/kg,ig) 后，枸橼酸喷雾诱发豚鼠哮喘的潜伏期为 (98.80±18.00) s (n=6)，较空白对照组 (81.63±20.11) s (n=6) 延长了近20% (P>0.05)。在急性和慢性实验中，200 mg/kg (ig) Mog 均未能抑制枸橼酸诱发的豚鼠哮喘。
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3 讨论
小鼠气管酚红排泌结果反映气管排泌量的变化，排泌量增加有利于气管表面水样层的形成或增加，从而稀释痰液并有利于痰液的排出；而青蛙食道粘膜有与人气管粘膜类似的纤毛细胞，这些纤毛细胞的运动是食道或气管表面粘液或痰运动的动力[3]。Mog 在气管酚红排泌实验、食道粘液移动实验及氨水引咳实验等3个模型中均表现出明显的作用，表明 Mog 有较好的祛痰、镇咳作用。罗汉果传统用于祛痰镇咳，民间用法采用开水泡饮方法。Mog 在原植物中含量很高且水溶性很好，实验证明其有明显的祛痰镇咳功效，且有较好的量效关系，提示其为罗汉果祛痰镇咳作用的有效成分。从本文报道的初步结果来看 Mog 的作用可能和其稀释痰液，促进痰液排出及抑制咳嗽反射环节有关。其明确的作用机制有待于进一步更深入的工作。
在豚鼠引喘实验中，慢性和急性实验均表明 Mog(200 mg/kg,ig) 延长枸橼酸诱发的豚鼠哮喘的潜伏期(统计学检验表明无显著性差异)，Mog 的平喘作用的进一步明确，还有待于更细致的实验来证实。本研究证明 Mog 对小鼠咳嗽有明显的抑制作用，说明它能对咳嗽反射的反射弧有影响；而文献报道罗汉果的粗提物有一定镇静作用[5]，且民间对它有安神醒脑功效的描述，这两者间是否有一定联系有待进一步的研究。
, http://www.100md.com
致谢：本校季晖教授，孙滢川和李洁同学在实验过程中提供帮助。
基金项目：中国药科大学科研基金资助
通讯地址：王霆，上海市转基因研究中心药物研究部，邮编201300，Email：Wangt @ sihnoroad.com
参考文献
1 黄志江，等.广西师范大学学报(自然科学版)，1998，16(4)：75
2 竹本常松，他.药学杂志(日)，1983，103：1151
3 陈奇主编.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993：636，642
4 徐叔云，等主编.药理实验方法学.第二版.北京：人民卫生出版社，1994：1166
5 Kasai R，et al. Phytochemistry,1987,26:1371
收稿日期：1999-06-08, 百拇医药