nm23-H1 NDPK在胃癌中表达的研究
作者：王志伟 黄健 李厚祥 沈洪薰 朱铭岩
单位：王志伟(226001 南通医学院附属医院普外科)； 黄健(226001 南通医学院附属医院普外科)； 李厚祥(226001 南通医学院附属医院普外科)； 沈洪薰(226001 南通医学院附属医院普外科)； 朱铭岩(226001 南通医学院附属医院普外科)
关键词：
江苏医药000129 nm23基因被多数学者认为是肿瘤转移抑制基因，它对胃癌转移抑制功能尚有争论。我们对1998年1月～11月期间收治的58例胃癌，免疫组化法检测其nm23-H1、NDPK表达差异，现报告如下。
一、材料与方法
1.一般资料：58例胃癌中，男38例，女20例，男女之比为1.9∶1。年龄最小者18岁，最大者92岁，平均年龄56.7岁。58例均施行胃切除术，根治性胃切除术39例(67.2%)，姑息性胃切除术19例(32.8%)，PTNM分期Ⅰ期4例(6.9%)，Ⅱ期14例(24.1%)，Ⅲ期21例(36.2%)，Ⅳ期19例(32.8%)，全组无手术死亡，均治愈出院。
, 百拇医药
2.标本来源与处理 胃癌切除标本取部分胃癌组织和转移淋巴结置10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，以备检测nm23-H1 NDPK。
3.免疫组化(S-P法)检测nm23-H1 NDPK(福州迈新试剂盒)。
(1)将胃癌组织切片经脱蜡水化，H2O2阻断，血清封闭，nm23抗体，4℃水箱孵育过夜，生物素标记二抗，链菌素亲生物蛋白-过氧化物酶溶液，DAB显色，阴性对照用TBS替代一抗。
(2)肿瘤细胞阳性表达以细胞浆内出现明显的棕色颗粒沉淀为标准，切片中超过20%肿瘤细胞阳性表达，则定为nm23-H1 NDPK反应阳性。
4.统计方法：确切概率法。
, http://www.100md.com 二、结果
nm23-H1 NDPK表达
(1)胃癌原发灶组(n＝58) 58例胃癌原发灶中，33例(56.89%)nm23-H1 NDPK呈高表达(>20%肿瘤细胞阳性表达)，比较T1、T2、T3、T4之间nm23-H1 NDPK表达差异，P＝0.419(P>0.05)，显示nm23-H1 NDPK表达与肿瘤浸润深度无关。
(2)淋巴结转移组(n＝31)，nm23-H1 NDPK高表达占41.94%(13/31)，淋巴结无转移组(n＝27)nm23-H1 NDPK高表达占74.07%(20/27)，比较淋巴结无转移组与转移组之间nm23-H1 NDPK表达差异，P<0.05，显示nm23-H1 NDPK表达与淋巴结转移呈负相关(见表1)
, 百拇医药
三、讨论
影响肿瘤转移的因素很多，有宿主的因素如AIF、EGIF、FCM、PAI及性激素等，还有肿瘤细胞本身，包括肿瘤细胞的运动性、肿瘤细胞粘连性、肿瘤细胞分泌物如TIMP的减少或缺乏，肿瘤转移相关基因和肿瘤转移抑制基因等。nm23基因是肿瘤转移抑制基因，由Steeg-PS等从K1735鼠黑色瘤细胞株分离出来的，与肿瘤转移过程有关。在低转移细胞株中表达水平最高。nm23基因定位于人染色体17q21-3，nm23-H1和nm23-H2两种，它们受两个独立的调控系统所调节，其中nm23-H1 mRNA水平与肿瘤转移更为密切，其编码产物二磷核苷激酶(Nucleoside diphosphokinase，NDPK)，此酶通过调节细胞内信号传递、分化等代谢过程，影响微管、微丝等细胞骨架蛋白的生物活性而发挥生长抑制的负性调节。
表1 胃癌原发灶与淋巴结转移灶中nm23-H1 NDPK表达
, 百拇医药
阳性
例数
阴性
例数
P
原发癌
T1
T2
T3
T4
2
8
12
, 百拇医药
11
1
2
12
11
0.419
淋巴结
转移灶
+
-
13
20
18
7
, 百拇医药
0.018
研究nm23基因始于黑色瘤细胞株和N-nitroso-N-methylurea诱发鼠乳腺癌。胃癌中nm23基因表达研究报告不多。胃癌原发灶中nm23基因高表达报告不一，国外学者报告介于75%～85%之间。国内黄明哲报告88.9%。本组胃癌原发灶nm23-H1 NDPK高表达为56.89%(33/58)，比国内外各家报告为低，推测本组胃癌中晚期(Ⅲ期36.2%，Ⅳ期32.8%)病例偏多，高转移细胞比例可能过多所致，有人报告低转移细胞株中nm23基因表达水平为高转移细胞株的10倍。
nm23基因表达与胃癌转移关系报告仍有争论，Ura-H和Aoyagik报告nm23-H1表达水平与淋巴结转移呈负相关，Wang-CS报告与此相反，nm23-H1表达水平与胃癌淋巴结转移无明显抑制作用。本研究结果nm23-H1 NDPK高表达水平在淋巴结转移组为41.9%，显著低于淋巴结无转移组的74.07%，P<0.05，与Ura-H和Aoyagik报告相一致，证实nm23-H1 NDPK在胃癌转移过程中起着重要的抑制作用。
nm23-H1 NDPK表达与胃癌原发灶浸润深度无关，与淋巴结转移呈负相关。它在胃癌淋巴结转移过程中起着重要的抑制作用。■, 百拇医药
单位：王志伟(226001 南通医学院附属医院普外科)； 黄健(226001 南通医学院附属医院普外科)； 李厚祥(226001 南通医学院附属医院普外科)； 沈洪薰(226001 南通医学院附属医院普外科)； 朱铭岩(226001 南通医学院附属医院普外科)
关键词：
江苏医药000129 nm23基因被多数学者认为是肿瘤转移抑制基因，它对胃癌转移抑制功能尚有争论。我们对1998年1月～11月期间收治的58例胃癌，免疫组化法检测其nm23-H1、NDPK表达差异，现报告如下。
一、材料与方法
1.一般资料：58例胃癌中，男38例，女20例，男女之比为1.9∶1。年龄最小者18岁，最大者92岁，平均年龄56.7岁。58例均施行胃切除术，根治性胃切除术39例(67.2%)，姑息性胃切除术19例(32.8%)，PTNM分期Ⅰ期4例(6.9%)，Ⅱ期14例(24.1%)，Ⅲ期21例(36.2%)，Ⅳ期19例(32.8%)，全组无手术死亡，均治愈出院。
, 百拇医药
2.标本来源与处理 胃癌切除标本取部分胃癌组织和转移淋巴结置10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，以备检测nm23-H1 NDPK。
3.免疫组化(S-P法)检测nm23-H1 NDPK(福州迈新试剂盒)。
(1)将胃癌组织切片经脱蜡水化，H2O2阻断，血清封闭，nm23抗体，4℃水箱孵育过夜，生物素标记二抗，链菌素亲生物蛋白-过氧化物酶溶液，DAB显色，阴性对照用TBS替代一抗。
(2)肿瘤细胞阳性表达以细胞浆内出现明显的棕色颗粒沉淀为标准，切片中超过20%肿瘤细胞阳性表达，则定为nm23-H1 NDPK反应阳性。
4.统计方法：确切概率法。
, http://www.100md.com 二、结果
nm23-H1 NDPK表达
(1)胃癌原发灶组(n＝58) 58例胃癌原发灶中，33例(56.89%)nm23-H1 NDPK呈高表达(>20%肿瘤细胞阳性表达)，比较T1、T2、T3、T4之间nm23-H1 NDPK表达差异，P＝0.419(P>0.05)，显示nm23-H1 NDPK表达与肿瘤浸润深度无关。
(2)淋巴结转移组(n＝31)，nm23-H1 NDPK高表达占41.94%(13/31)，淋巴结无转移组(n＝27)nm23-H1 NDPK高表达占74.07%(20/27)，比较淋巴结无转移组与转移组之间nm23-H1 NDPK表达差异，P<0.05，显示nm23-H1 NDPK表达与淋巴结转移呈负相关(见表1)
, 百拇医药
三、讨论
影响肿瘤转移的因素很多，有宿主的因素如AIF、EGIF、FCM、PAI及性激素等，还有肿瘤细胞本身，包括肿瘤细胞的运动性、肿瘤细胞粘连性、肿瘤细胞分泌物如TIMP的减少或缺乏，肿瘤转移相关基因和肿瘤转移抑制基因等。nm23基因是肿瘤转移抑制基因，由Steeg-PS等从K1735鼠黑色瘤细胞株分离出来的，与肿瘤转移过程有关。在低转移细胞株中表达水平最高。nm23基因定位于人染色体17q21-3，nm23-H1和nm23-H2两种，它们受两个独立的调控系统所调节，其中nm23-H1 mRNA水平与肿瘤转移更为密切，其编码产物二磷核苷激酶(Nucleoside diphosphokinase，NDPK)，此酶通过调节细胞内信号传递、分化等代谢过程，影响微管、微丝等细胞骨架蛋白的生物活性而发挥生长抑制的负性调节。
表1 胃癌原发灶与淋巴结转移灶中nm23-H1 NDPK表达
, 百拇医药
阳性
例数
阴性
例数
P
原发癌
T1
T2
T3
T4
2
8
12
, 百拇医药
11
1
2
12
11
0.419
淋巴结
转移灶
+
-
13
20
18
7
, 百拇医药
0.018
研究nm23基因始于黑色瘤细胞株和N-nitroso-N-methylurea诱发鼠乳腺癌。胃癌中nm23基因表达研究报告不多。胃癌原发灶中nm23基因高表达报告不一，国外学者报告介于75%～85%之间。国内黄明哲报告88.9%。本组胃癌原发灶nm23-H1 NDPK高表达为56.89%(33/58)，比国内外各家报告为低，推测本组胃癌中晚期(Ⅲ期36.2%，Ⅳ期32.8%)病例偏多，高转移细胞比例可能过多所致，有人报告低转移细胞株中nm23基因表达水平为高转移细胞株的10倍。
nm23基因表达与胃癌转移关系报告仍有争论，Ura-H和Aoyagik报告nm23-H1表达水平与淋巴结转移呈负相关，Wang-CS报告与此相反，nm23-H1表达水平与胃癌淋巴结转移无明显抑制作用。本研究结果nm23-H1 NDPK高表达水平在淋巴结转移组为41.9%，显著低于淋巴结无转移组的74.07%，P<0.05，与Ura-H和Aoyagik报告相一致，证实nm23-H1 NDPK在胃癌转移过程中起着重要的抑制作用。
nm23-H1 NDPK表达与胃癌原发灶浸润深度无关，与淋巴结转移呈负相关。它在胃癌淋巴结转移过程中起着重要的抑制作用。■, 百拇医药