实验性大鼠坐骨神经损伤与再生的病理学观察
作者：杨晓顺 杨举伦 王非 翁龙江 刘大荣 蔡学敏 蔡琳 权彤彤 李涛
单位：(成都军区昆明总医院病理科，昆明 650032)
关键词：坐骨神经损伤；神经再生；轴突；大鼠
临床与实验病理学杂志000117 摘要 目的：研究大鼠坐骨神经钳夹损伤后的病理学改变。方法：建立大鼠坐骨神经钳夹损伤模型，分别于术后1、2、3、4、6周取受损坐骨神经进行光镜电镜和免疫组化观察，用图像分析仪测量3、4、6周及对照组的坐骨神经轴突的等效直径、周长和面积等8项参数。结果：钳夹后1周损伤处远段神经发生华勒变性，钳夹后2周神经纤维开始再生。再生轴突在第3、4周时与正常轴突有显著差异(P<0.05或P<0.01)，第6周时无显著差异(P>0.05)。结论：坐骨神经钳夹损伤后第6周，远段神经完全再生。
中图分类号 R651.3 文献标识码 A
, 百拇医药
文章编号 1001-7399(2000)01-0055-03
Pathological observation on rats sciatic nerve crush lesion and regeneration
Yang Xiaoshun, Yang Julun, Liu Darong,Cai Xuemin, Cai Lin, Quan Tongtong, Li Tao
(Dept of Pathol, Kunming General Hospital of Chengdu Military Command, Kunming 650032)
Wang Fei, Weng Longjiang
(Dept of Osteopathy,Kunming General Hospital of Chengdu Military Command, Kunming 650032)
, 百拇医药
ABSTRACT Purpose To study the pathological characteristics of rat sciatic nerve crush lesion and regeneration. Methods Model of sciatic nerve crush lesion in 36 rats was made. The nerve samples were observed light and electron microscopically, and immunohistochemically at 1,2,3,4,6 weeks after crush. Axon diameter, perimeter and other parameters were measured by image analystic system. Results Wallerian degeneration in the distal nerve happened at weeks right after cush. Nerve regeneration was seen at 2 weeks. Diameter and perimeter of regeneration axon at 3,4 weeks after crush were different from normal axon. This difference disappeared at 6 weeks. Conclusion The distal nerve segment may regeneration completely at 6 weeks after crush.
, 百拇医药
KEY WORDS sciatic nerve; injuries; nerve regeneration;axons; rats
大鼠周围神经轴突断裂损伤实验是研究神经再生的有效模型〔1～3〕。既往未见有关坐骨神经断裂后细胞学参数改变的报道。作者对大鼠坐骨神经钳夹损伤后的变性和再生过程作了光镜电镜和免疫组化观察，还分别对损伤后3、4、6周之再生坐骨神经及正常坐骨神经轴突作了多项组织学参数计量检测。
1 材料和方法
1.1 动物模型 38只健康SD大鼠(滇实动证实9701号)，体重185±20 g，用0.5%戊巴比妥钠按30 mg/kg腹腔内麻醉。右股后正中切口显露坐骨神经，在手术显微镜下分离，于梨状肌下7 mm处1-0尼龙线缝合神经外膜一针作为标记，用上海手术器械厂SSW-3型微血管止血钳尖部垂直夹持神经，锁至第三牙维持60 s后松开(钳夹力为8.6～11.8N)，分层缝合切口。术后大鼠死亡1只、切口感染1只，均排除，余36只纳入检测、统计。
, 百拇医药
1.2 动物分组与取材 分别于术后第1、2、3、4、6周随机取9、9、6、6、6只大鼠处死并编为相应时间组，在大鼠坐骨神经钳夹标记处作纵切面取材，钳夹标记远端4 mm处作横切面取材。在每只大鼠对侧肢相同部位取材作为对照。全部标本分成两份，一份固定于10%福尔马林溶液中，制作常规石蜡切片；另一份以3%戊二醛固定后制作超薄切片。
1.3 光镜电镜观察 石蜡切片经HE染色观察其不同时间内坐骨神经的组织学结构变化。超薄切片经铅铀双染色，在PHILIPS CM-120电镜下观察轴突和雪旺细胞的超微结构变化。
1.4 免疫组化染色 石蜡切片脱蜡后用抗神经微丝蛋白(NF)的单克隆抗体作免疫组化染色。
1.5 计量分析 HE和改良三色法染色〔4〕，Olympus BX50生物显微镜观察，用同济医科大学HPIAS-1000病理图像分析系统在400倍镜下每例取4个视野进行自动盲测，其中髓鞘厚度为“双测法”[即：用HE染色测量神经纤维直径X1，用三色法染色测量轴突直径X2，其X=1/2(X1-X2),SD=1/2(SD1+SD2)]。测量数据作统计学处理。
, 百拇医药
2 结果
2.1 光镜观察 取材时见钳夹处神经与周围组织稍有粘连，无缩窄。光镜下对照组有髓神经纤维大中基本一致，轴突位于中央，较小，呈星状(图1)。损伤处远段神经术后1周时呈变性改变，表现为神经纤维变组，大小不一，髓鞘肿胀如泡沫状，轴突肿胀或消失，神经内膜连续性好。雪旺细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、成纤维细胞增多(图2)。2周时变性加剧，髓鞘大部分崩解，遗留坏死轮廓，轴突完全消失，神经内膜、神经束膜和神经外膜仍存在。第3周时由变性渐转为再生，新生的神经纤维较正常神经纤维小，髓鞘菲薄。第4周时纤维增生明显，新生神经纤维轴突细小，髓鞘稍为增厚(图3)。第6周时再生神经纤维明显增多，排列有成簇趋势，轴突直径和髓鞘厚度增加并接近正常，但大小不一。
2.2 免疫组化染色 正常的和再生的神经纤维之轴突与NF呈强阳性的反应(棕色)，雪旺细胞及髓鞘与NF呈阴性反应，变性神经纤维之轴突与NF呈弱阳性或阴性反应(图4)。NF免疫组化染色能有效地反映神经纤维损伤与修复的动态过程。
, 百拇医药
2.3 电镜观察 电镜下钳夹处近侧神经轴突及雪旺细胞超微结构正常，远侧呈变性及修复改变。术后第1周，轴突内神经微丝和微管崩解，线粒体肿胀甚至空泡变，嵴断裂，在轴突内出现由退变细胞器形成的髓鞘样结构。髓鞘之同心圆板层结构模糊，板层间隙增宽，松散，扭曲，形状不规则(图5)。术后第2周可见新生的髓神经纤维。髓鞘小，板层结构清晰，每层间的距离相等。轴突内微丝微管清晰(图6)。雪旺细胞粗面内质网丰富，细胞核异染色质增加。3周后新生神经纤维数量明显增多，其髓鞘的体积和厚度均增加。6周时新生神经纤维的大小和形态均接近正常，但仍见到残留的变性神经纤维。
2.4 计量分析 从神经纤维开始再生之3、4、6周测量以资对比。石蜡切片经改良三色染色后神经轴突呈蓝绿色，髓鞘呈枣红色，红细胞呈鲜红色，神经内膜呈绿色。用同济医科大学HPIAS-1000病理图像分析系统之“细胞测量”软件测量细胞参数。仪器经定标、调亮度、测背底后一次采图(每例标本采4×6幅图)，用RGB方式作全屏分割，经涂色、滤波、选择删除(圆度为0.6～1，细胞大小为0.50～17.0 μm)、涂色及其它二值处理后作自动测量，测量数据作统计分析。结果见表1。
, 百拇医药
表1 大鼠坐骨神经损伤后不同时间内再生轴突测量参数(
±s) 测量项目
3周组(n=6)
4周组(n=6)
6周组(n=6)
对照组
损伤组
对照组
损伤组
对照组
损伤组
轴突直径(μm)
, http://www.100md.com
2.40±0.48
1.78±0.46
2.44±0.48
1.95±0.45
2.36±0.48
2.26±0.42
周长(μm)
6.44±0.57
5.41±0.54△
6.64±0.53
5.88±0.53△
, 百拇医药
6.56±0.57
6.29±0.50
面积(μm2)
15.54±2.86
12.86±2.14
16.04±2.77
13.77±2.27
15.98±2.46
14.87±2.85
密度(/100 μm2)
0.09±0.07
, http://www.100md.com
0.06±0.09
0.08±0.08
0.07±0.06
0.09±0.08
0.08±0.07
密度变化数
0.23±0.17
0.16±0.13
0.22±0.15
0.19±0.14
0.24±0.16
0.21±0.15
, 百拇医药
平均投影
2.71±0.47
1.86±0.46△
2.70±0.45
1.93±0.45△
2.69±0.42
2.34±0.43
异形指数
3.77±0.39
2.96±0.31△△
3.90±0.36
, http://www.100md.com
3.46±0.34
3.68±0.38
3.61±0.32
髓鞘厚度(μm)
6.32±0.48
5.44±0.41△
6.51±0.52
5.87±0.51
6.39±0.50
6.21±0.53
注：△示t检验P<0.05，△△示t检验P<0.01；n为各组鼠数
, 百拇医药
图1 对照组坐骨神经横断面。神经纤维大小基本一致，髓鞘圆形，轴突小，位于中央。HE×200
图2 术后1周钳夹处远侧神经横断面。神经纤维大小不等，髓鞘形态不规则，轴突肿瘤，染色淡，雪旺细胞增生。HE×400
图3 术后4周钳夹处远侧神经横断面。可见较多的再生神经纤维，髓鞘小，椭圆形或三角形，轴突细。在再生神经纤维间残留
变性的神经纤维。HE×200
图4 术后4周钳夹处远侧神经横断面。NF单抗免疫组化染色。再生轴突与NF呈强阳性反应，变性轴突则呈阴性反应。HE×200
图5 变性的有髓神经纤维。轴突溶解，髓鞘不规则，扭曲，板层结构模糊。×1 300
图6 再生的有髓神经纤维。轴突内微丝微管结构清晰，髓鞘小，板层结构清楚，雪旺细胞增生。×22 0003 讨论
, 百拇医药
各种实验动物中，大鼠品系完备，可提供廉价的哺乳类动物神经组织，Mackinnon研究发现其坐骨神经组织结构与人的周围神经即使在电子显微镜下也没有差异〔5〕，现已成为研究周围神经再生的主要实验动物。本实验改进了Terzis〔1〕和Here〔2〕用普通血管钳制备坐骨神经损伤模型的方法，选用显微外科常用的微血管止血钳，钳夹神经后远段神经变性完全，不形成缩窄，较好地制作出周围神经轴突断裂损伤模型；且对钳夹力损伤和神经再生作了病理学观察和较为详尽参数测定。
病理观察发现，损伤处远段神经病理改变呈炎症过程，早期以变性、坏死为主，后期纤维增生和神经再生明显，各时相点神经内膜、神经束膜和神经外膜结构延续性均完整，完全符合Sunderland轴突损伤的定义〔6〕。术后1至2周，神经纤维变性坏死加重直至完全，第2周出现新生神经纤维，4周再生神经纤维渐增多，轴突直径、髓鞘厚度亦增加，至6周时基本接近正常，表明神经再生进行性发展。
, 百拇医药
神经轴突等效直径、周长、面积和密度等是神经再生数、质量的客观指标，其恢复程度随恢复时间延长而渐增，测量各种组织学参数的变化值有利于定量描述神经损伤后再生的过程。从表1可以看出，神经损伤后第3周再生轴突之等效直径、周长、平均投影及髓鞘厚度均远小于正常轴突，有非常显著的差异(P<0.01)；其密度、密度变化数、面积和异形指数亦有明显差异(P<0.05)。第4周时，再生轴突增多增大，但轴突直径及周长与正常轴突比较还有明显差异(P<0.05)。至第六周时所有指标均已接近正常(P>0.05)，表明其数、质量已与正常神经纤维无明显差别。
作者简介：杨晓顺，男，35岁，主治医师
参考文献
1，Terzis JK, Smith KJ. Repair of severed peripheral nerves:Comparation of the “De Medinaceli” and standard microsuturemethords. Exp Neurol,1987;96:672～684
, 百拇医药
2，Hare GMT, Evans PJ, Mackinnon SE et al. Walking track analysis:A long-term assessment of peripheral nerve recovery. Plast Reconstr Surg,1992;89:251～258
3，Van Meeteren NL, Brakkee JH, Helders PJ et al. Recovery of function after sciatic nerve crush lesion in rats selected diverging locomotor activity in the open field. Neurosci Lett,1997;238(3):131～134
4，邓 平，宋 璇，祝家镇.改良三色法显示石蜡切片中的神经轴突及神经髓鞘.中华病理学杂志，1998；27：235
5，Mackinnon SE, Hudson AR, Hunter DA. Histology assessment of regeneration in the rat. Plast Reconstr Surg,1985;75:384～388
6，冯传汉.现代骨科诊疗手册.北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1997：530
收稿日期：1999-07-27, http://www.100md.com
单位：(成都军区昆明总医院病理科，昆明 650032)
关键词：坐骨神经损伤；神经再生；轴突；大鼠
临床与实验病理学杂志000117 摘要 目的：研究大鼠坐骨神经钳夹损伤后的病理学改变。方法：建立大鼠坐骨神经钳夹损伤模型，分别于术后1、2、3、4、6周取受损坐骨神经进行光镜电镜和免疫组化观察，用图像分析仪测量3、4、6周及对照组的坐骨神经轴突的等效直径、周长和面积等8项参数。结果：钳夹后1周损伤处远段神经发生华勒变性，钳夹后2周神经纤维开始再生。再生轴突在第3、4周时与正常轴突有显著差异(P<0.05或P<0.01)，第6周时无显著差异(P>0.05)。结论：坐骨神经钳夹损伤后第6周，远段神经完全再生。
中图分类号 R651.3 文献标识码 A
, 百拇医药
文章编号 1001-7399(2000)01-0055-03
Pathological observation on rats sciatic nerve crush lesion and regeneration
Yang Xiaoshun, Yang Julun, Liu Darong,Cai Xuemin, Cai Lin, Quan Tongtong, Li Tao
(Dept of Pathol, Kunming General Hospital of Chengdu Military Command, Kunming 650032)
Wang Fei, Weng Longjiang
(Dept of Osteopathy,Kunming General Hospital of Chengdu Military Command, Kunming 650032)
, 百拇医药
ABSTRACT Purpose To study the pathological characteristics of rat sciatic nerve crush lesion and regeneration. Methods Model of sciatic nerve crush lesion in 36 rats was made. The nerve samples were observed light and electron microscopically, and immunohistochemically at 1,2,3,4,6 weeks after crush. Axon diameter, perimeter and other parameters were measured by image analystic system. Results Wallerian degeneration in the distal nerve happened at weeks right after cush. Nerve regeneration was seen at 2 weeks. Diameter and perimeter of regeneration axon at 3,4 weeks after crush were different from normal axon. This difference disappeared at 6 weeks. Conclusion The distal nerve segment may regeneration completely at 6 weeks after crush.
, 百拇医药
KEY WORDS sciatic nerve; injuries; nerve regeneration;axons; rats
大鼠周围神经轴突断裂损伤实验是研究神经再生的有效模型〔1～3〕。既往未见有关坐骨神经断裂后细胞学参数改变的报道。作者对大鼠坐骨神经钳夹损伤后的变性和再生过程作了光镜电镜和免疫组化观察，还分别对损伤后3、4、6周之再生坐骨神经及正常坐骨神经轴突作了多项组织学参数计量检测。
1 材料和方法
1.1 动物模型 38只健康SD大鼠(滇实动证实9701号)，体重185±20 g，用0.5%戊巴比妥钠按30 mg/kg腹腔内麻醉。右股后正中切口显露坐骨神经，在手术显微镜下分离，于梨状肌下7 mm处1-0尼龙线缝合神经外膜一针作为标记，用上海手术器械厂SSW-3型微血管止血钳尖部垂直夹持神经，锁至第三牙维持60 s后松开(钳夹力为8.6～11.8N)，分层缝合切口。术后大鼠死亡1只、切口感染1只，均排除，余36只纳入检测、统计。
, 百拇医药
1.2 动物分组与取材 分别于术后第1、2、3、4、6周随机取9、9、6、6、6只大鼠处死并编为相应时间组，在大鼠坐骨神经钳夹标记处作纵切面取材，钳夹标记远端4 mm处作横切面取材。在每只大鼠对侧肢相同部位取材作为对照。全部标本分成两份，一份固定于10%福尔马林溶液中，制作常规石蜡切片；另一份以3%戊二醛固定后制作超薄切片。
1.3 光镜电镜观察 石蜡切片经HE染色观察其不同时间内坐骨神经的组织学结构变化。超薄切片经铅铀双染色，在PHILIPS CM-120电镜下观察轴突和雪旺细胞的超微结构变化。
1.4 免疫组化染色 石蜡切片脱蜡后用抗神经微丝蛋白(NF)的单克隆抗体作免疫组化染色。
1.5 计量分析 HE和改良三色法染色〔4〕，Olympus BX50生物显微镜观察，用同济医科大学HPIAS-1000病理图像分析系统在400倍镜下每例取4个视野进行自动盲测，其中髓鞘厚度为“双测法”[即：用HE染色测量神经纤维直径X1，用三色法染色测量轴突直径X2，其X=1/2(X1-X2),SD=1/2(SD1+SD2)]。测量数据作统计学处理。
, 百拇医药
2 结果
2.1 光镜观察 取材时见钳夹处神经与周围组织稍有粘连，无缩窄。光镜下对照组有髓神经纤维大中基本一致，轴突位于中央，较小，呈星状(图1)。损伤处远段神经术后1周时呈变性改变，表现为神经纤维变组，大小不一，髓鞘肿胀如泡沫状，轴突肿胀或消失，神经内膜连续性好。雪旺细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、成纤维细胞增多(图2)。2周时变性加剧，髓鞘大部分崩解，遗留坏死轮廓，轴突完全消失，神经内膜、神经束膜和神经外膜仍存在。第3周时由变性渐转为再生，新生的神经纤维较正常神经纤维小，髓鞘菲薄。第4周时纤维增生明显，新生神经纤维轴突细小，髓鞘稍为增厚(图3)。第6周时再生神经纤维明显增多，排列有成簇趋势，轴突直径和髓鞘厚度增加并接近正常，但大小不一。
2.2 免疫组化染色 正常的和再生的神经纤维之轴突与NF呈强阳性的反应(棕色)，雪旺细胞及髓鞘与NF呈阴性反应，变性神经纤维之轴突与NF呈弱阳性或阴性反应(图4)。NF免疫组化染色能有效地反映神经纤维损伤与修复的动态过程。
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2.3 电镜观察 电镜下钳夹处近侧神经轴突及雪旺细胞超微结构正常，远侧呈变性及修复改变。术后第1周，轴突内神经微丝和微管崩解，线粒体肿胀甚至空泡变，嵴断裂，在轴突内出现由退变细胞器形成的髓鞘样结构。髓鞘之同心圆板层结构模糊，板层间隙增宽，松散，扭曲，形状不规则(图5)。术后第2周可见新生的髓神经纤维。髓鞘小，板层结构清晰，每层间的距离相等。轴突内微丝微管清晰(图6)。雪旺细胞粗面内质网丰富，细胞核异染色质增加。3周后新生神经纤维数量明显增多，其髓鞘的体积和厚度均增加。6周时新生神经纤维的大小和形态均接近正常，但仍见到残留的变性神经纤维。
2.4 计量分析 从神经纤维开始再生之3、4、6周测量以资对比。石蜡切片经改良三色染色后神经轴突呈蓝绿色，髓鞘呈枣红色，红细胞呈鲜红色，神经内膜呈绿色。用同济医科大学HPIAS-1000病理图像分析系统之“细胞测量”软件测量细胞参数。仪器经定标、调亮度、测背底后一次采图(每例标本采4×6幅图)，用RGB方式作全屏分割，经涂色、滤波、选择删除(圆度为0.6～1，细胞大小为0.50～17.0 μm)、涂色及其它二值处理后作自动测量，测量数据作统计分析。结果见表1。
, 百拇医药
表1 大鼠坐骨神经损伤后不同时间内再生轴突测量参数(
±s) 测量项目3周组(n=6)
4周组(n=6)
6周组(n=6)
对照组
损伤组
对照组
损伤组
对照组
损伤组
轴突直径(μm)
, http://www.100md.com
2.40±0.48
1.78±0.46
2.44±0.48
1.95±0.45
2.36±0.48
2.26±0.42
周长(μm)
6.44±0.57
5.41±0.54△
6.64±0.53
5.88±0.53△
, 百拇医药
6.56±0.57
6.29±0.50
面积(μm2)
15.54±2.86
12.86±2.14
16.04±2.77
13.77±2.27
15.98±2.46
14.87±2.85
密度(/100 μm2)
0.09±0.07
, http://www.100md.com
0.06±0.09
0.08±0.08
0.07±0.06
0.09±0.08
0.08±0.07
密度变化数
0.23±0.17
0.16±0.13
0.22±0.15
0.19±0.14
0.24±0.16
0.21±0.15
, 百拇医药
平均投影
2.71±0.47
1.86±0.46△
2.70±0.45
1.93±0.45△
2.69±0.42
2.34±0.43
异形指数
3.77±0.39
2.96±0.31△△
3.90±0.36
, http://www.100md.com
3.46±0.34
3.68±0.38
3.61±0.32
髓鞘厚度(μm)
6.32±0.48
5.44±0.41△
6.51±0.52
5.87±0.51
6.39±0.50
6.21±0.53
注：△示t检验P<0.05，△△示t检验P<0.01；n为各组鼠数
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图1 对照组坐骨神经横断面。神经纤维大小基本一致，髓鞘圆形，轴突小，位于中央。HE×200
图2 术后1周钳夹处远侧神经横断面。神经纤维大小不等，髓鞘形态不规则，轴突肿瘤，染色淡，雪旺细胞增生。HE×400
图3 术后4周钳夹处远侧神经横断面。可见较多的再生神经纤维，髓鞘小，椭圆形或三角形，轴突细。在再生神经纤维间残留
变性的神经纤维。HE×200
图4 术后4周钳夹处远侧神经横断面。NF单抗免疫组化染色。再生轴突与NF呈强阳性反应，变性轴突则呈阴性反应。HE×200
图5 变性的有髓神经纤维。轴突溶解，髓鞘不规则，扭曲，板层结构模糊。×1 300
图6 再生的有髓神经纤维。轴突内微丝微管结构清晰，髓鞘小，板层结构清楚，雪旺细胞增生。×22 0003 讨论
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各种实验动物中，大鼠品系完备，可提供廉价的哺乳类动物神经组织，Mackinnon研究发现其坐骨神经组织结构与人的周围神经即使在电子显微镜下也没有差异〔5〕，现已成为研究周围神经再生的主要实验动物。本实验改进了Terzis〔1〕和Here〔2〕用普通血管钳制备坐骨神经损伤模型的方法，选用显微外科常用的微血管止血钳，钳夹神经后远段神经变性完全，不形成缩窄，较好地制作出周围神经轴突断裂损伤模型；且对钳夹力损伤和神经再生作了病理学观察和较为详尽参数测定。
病理观察发现，损伤处远段神经病理改变呈炎症过程，早期以变性、坏死为主，后期纤维增生和神经再生明显，各时相点神经内膜、神经束膜和神经外膜结构延续性均完整，完全符合Sunderland轴突损伤的定义〔6〕。术后1至2周，神经纤维变性坏死加重直至完全，第2周出现新生神经纤维，4周再生神经纤维渐增多，轴突直径、髓鞘厚度亦增加，至6周时基本接近正常，表明神经再生进行性发展。
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神经轴突等效直径、周长、面积和密度等是神经再生数、质量的客观指标，其恢复程度随恢复时间延长而渐增，测量各种组织学参数的变化值有利于定量描述神经损伤后再生的过程。从表1可以看出，神经损伤后第3周再生轴突之等效直径、周长、平均投影及髓鞘厚度均远小于正常轴突，有非常显著的差异(P<0.01)；其密度、密度变化数、面积和异形指数亦有明显差异(P<0.05)。第4周时，再生轴突增多增大，但轴突直径及周长与正常轴突比较还有明显差异(P<0.05)。至第六周时所有指标均已接近正常(P>0.05)，表明其数、质量已与正常神经纤维无明显差别。
作者简介：杨晓顺，男，35岁，主治医师
参考文献
1，Terzis JK, Smith KJ. Repair of severed peripheral nerves:Comparation of the “De Medinaceli” and standard microsuturemethords. Exp Neurol,1987;96:672～684
, 百拇医药
2，Hare GMT, Evans PJ, Mackinnon SE et al. Walking track analysis:A long-term assessment of peripheral nerve recovery. Plast Reconstr Surg,1992;89:251～258
3，Van Meeteren NL, Brakkee JH, Helders PJ et al. Recovery of function after sciatic nerve crush lesion in rats selected diverging locomotor activity in the open field. Neurosci Lett,1997;238(3):131～134
4，邓 平，宋 璇，祝家镇.改良三色法显示石蜡切片中的神经轴突及神经髓鞘.中华病理学杂志，1998；27：235
5，Mackinnon SE, Hudson AR, Hunter DA. Histology assessment of regeneration in the rat. Plast Reconstr Surg,1985;75:384～388
6，冯传汉.现代骨科诊疗手册.北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1997：530
收稿日期：1999-07-27, http://www.100md.com