星形细胞瘤p16、Rb、cyclin D1、EGFR表达和DNA含量测定
作者：范智勇 杨鑫 赵玉宁 曹晓哲 朱峰 黄克斌
单位：范智勇(解放军第82医院病理科，淮阴 223001)；杨鑫 赵玉宁 朱峰 黄克斌(解放军第三医院病理科，宝鸡 721004)；曹晓哲(兰州军区总医院病理科，兰州 730050)
关键词：脑肿瘤；星形细胞瘤；癌基因蛋白；DNA含量；图像解释；免疫组织化学
临床与实验病理学杂志000114 摘要 目的：探讨p16、Rb、cyclin D1和EGFR在星形细胞肿瘤发生、发展中的作用及其与预后的关系。方法：免疫组化染色采用即用型S-P法，用图像分析系统对80例星形细胞肿瘤瘤细胞进行DNA含量测定。结果：80例星形细胞肿瘤：p16、Rb、cyclin D1和EGFR的阳性率分别为43.8%、71.3%、55.0%和85.0%，4种蛋白阳性率及DNA含量与组织学分级均有统计学意义；p16、Rb、cyclin D1阳性率和瘤细胞DNA含量与预后有关，EGFR阳性率与预后无关；Rb失表达时，p16表达增强。结论：p16和Rb在抑制星形细胞肿瘤的生长及EGFR和cyclin D1促使其生长中起着重要作用，p16表达同DNA含量相结合评估星形细胞瘤预后有一定价值。
, http://www.100md.com
中图分类号 R739.41 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(2000)01-0044-04
DNA content and expression of p16、Rb、cyclin D1 and EGFR in human astrocytic tumors
Fan Zhiyong
(Dept of Pathol, the 82nd Hospital of the PLA, Huaiyin 223001)
Yang Xin, Zhao Yuning,Zhu Feng,Huang Kebin
(Dept of Pathol, Third Hospital of the PLA 721004)
, 百拇医药
Cao Xiaozhe
(Dept of Pathol,General Hospital of Lanzhuo Military Command,Lanzhou 730050)
ABSTRACT Purpose To study the DNA contents and the expressions of p16, Rb, cycli2n D1 and EGFR in the human astrocytic tumors. Methods Immunohistochemical study by S-P kit. In order to analyze DNA contents of tumor cells, the tissue slices were stained by Feulgen method and analyzed using CMIAS Ⅱ in 80 cases astrocytic tumors. Results ①The positivity rates of p16, Rb, cyclin D1 and EGFR in the 80 cases of astrocytic tumors were 43.8%， 71.3%， 55.0% and 85.0% respectively; the DNA content and positivity rates were correlated to the pathological grading of these tumors. ②The DNA content and the expressions of p16, Rb and cyclin D1 were correlated to the patient survival rate, but EGFR was not. ③ Both p16 and Rb could be simultaneously detected in 13 of 80 case. p16 expression could be intensive in some cases that Rb were not expression. Conclusion The abnormal expression of p16, Rb, cyclin D1 and EGFR may play an important role in the pathogenesis of human astrocytic tumors. Both the DNA content and expression of p16 might be used as a valuable marker to determine the prognosis of this tumor.
, http://www.100md.com
KEY WORDS brain neoplasms;astrocytoma; oncoprotein; p16 protein; prognosis; immunohistochemistry
分子生物学的研究结果表明：肿瘤属于多基因异常变化的疾病〔1〕。细胞周期素(cyclin) D1、p16/MTS1和视网膜母细胞瘤基因(Rb gene)在cyclins-CDKs (cyclins dependent kinase)-CDKIs(cyclins dependent kinase inhibitors)的网络调控系统中起重要作用，这些基因及其所编码的蛋白发生改变均可能导致肿瘤的发生〔2，3〕。表皮生长因子受体(EGFR)在星形细胞肿瘤的表达及其与预后的关系有争议。据此，我们采用免疫组织化学法在蛋白水平对80例星形细胞肿瘤中p16、Rb、cyclin D1和EGFR蛋白表达进行研究，测量肿瘤细胞的DNA含量，以探讨它们在星形细胞肿瘤发生、发展中的作用及其与预后的关系。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 一般资料 从我科1980～1996年外检星形细胞肿瘤标本中随机抽取有完整随访资料者80例。其中，男48例，女32例，年龄4～66岁，平均42.1岁，按WHO分级标准分级：Ⅰ级12例，Ⅱ级25例，Ⅲ级20例，Ⅳ级23例。肿瘤均位于大脑半球，诊断均经GFAP和vimentin证实，随访资料以年为单位。
1.2 免疫组化染色 常规石蜡连续4 μm切片，微波抗原修复后，采用S-P法，按试剂盒说明书操作，DAB显色，苏木精复染。所用一抗包括：vimentin为鼠单抗，cyclin D1为兔单抗，p16、Rb、cyclin D1和EGFR为兔多抗。上述一抗和S-P试剂盒均为Maxim公司产品，阳性对照片购自福州迈新公司，以0.01 mol*L-1 PBS液作空白对照。免疫组化染色结果判断参照Barnes半定量法〔4〕。
1.3 DNA含量测定 瘤组织石蜡切片经Feulgen染色，用CMIAS Ⅱ图像分析系统对瘤细胞进行DNA含量定量分析，每例随机测量100～150个瘤细胞，得出DNA的相对含量，以任意单位(Arbitary unit, AU)表示。
, 百拇医药
1.4 统计学处理 采用SPSS 8.0统计软件进行分析。随访资料Kaplan-Meier生存率曲线处理并进行时序检验(Log rank test)。
2 结果
2.1 p16、Rb、cyclin D1和EGFR的表达及相互关系 p16、Rb和cyclin D1以胞核着色为主，EGFR以胞浆和胞膜着色为主；4种蛋白阳性率分别为43.8%、71.3%、55.0%和85.0%。p16和Rb共同表达13例，未观察到同一例肿瘤中同时存在二者表达阴性，而在一部分Rb阴性病例中可见p16强阳性表达。p16蛋白阳性病例中cyclin D1阳性率48.6%(17/35)。p16阴性病例中cyclin D1阳性率为60.0%(27/45)，这两种蛋白Ⅰ～Ⅳ级阳性率之间存在负相关关系(r=-0.950， P<0.005)，见表1，2和图1～4。p16与Rb、cyclin D1和EGFR阳性率之间的关系见表3。
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2.2 p16、Rb、cyclin D1和EGFR的表达及DNA含量(AU)与星形细胞瘤组织学分级的关系 p16阳性率与组织学分级呈负相关(r=-0.748， P<0.05)，EGFR的阳性率与组织学分级呈正相关(r=0.850， P<0.05)；Rb和cyclin D1阳性率与分级无相关关系(P>0.05)；p16和Rb蛋白阳性率均随组织学分级增高而降低(表2)。4种蛋白在低级别(Ⅰ～Ⅱ级)与高级别(Ⅲ～Ⅳ级)星形细胞瘤之间差异有显著性(P<0.01)。组织学分级越高，DNA含量AU值越大(χ2=3.974， P<0.05)。
表1 p16、Rb、cyclin D1和EGFR在
星形细胞瘤中的表达(n=80) 表达程度
p16阳性
例数(%)
, 百拇医药
Rb阳性
例数(%)
cyclin D1
阳性例数(%)
EGFR阳性
例数(%)
-
45(56.3)
22(27.5)
36(45.0)
12(15.0)
+
, http://www.100md.com 9(11.3)
16(20.0)
11(13.8)
18(22.5)
17(21.3)
27(33.8)
19(23.8)
30(37.5)
9(11.3)
15(18.8)
, 百拇医药
14(17.5)
20(25.0)
表2 星形细胞瘤p16、Rb、cyclin D1和EGFR
表达与组织学分级的关系(n=80)
WHO
分级
n
p16阳性
例数(%)
Rb阳性
例数(%)
cyclin D1阳性
, 百拇医药
例数(%)
EGFR阳性
例数(%)
Ⅰ
12
10(83.3)
10(83.3)
2(16.7)
7(58.3)
Ⅱ
25
13(52.0)
21(84.0)
, 百拇医药
11(44.0)
21(84.0)
Ⅲ
20
7(35.0)
15(75.0)
11(55.0)
18(90.0)
Ⅳ
23
5(21.7)
11(43.8)
, http://www.100md.com 20(87.0)
22(95.7)
χ2值
10.914
23.353
35.692
49.319
P值
<0.05
<0.005
<0.005
<0.005
, 百拇医药
2.3 p16、Rb、cyclin D1和EGFR的表达和DNA含量与星形细胞瘤预后的关系 p16阳性组生存率曲线显著高于阴性组，(P<0.01，见图5)。Rb阳性组5年生存率高于阴性组，cyclin D1阴性组5年生存率高于阳性组(P均<0.05)。EGFR与预后无关(P>0.05)。术后生存5年以上者19例，其中18例p16阳性，12例Rb阳性，16例p16阳性而cyclin D1阴性；12例p16和Rb共同阳性，且其5年生存率高于单独p16或Rb阳性组(P均<0.05)。在对术后生存1～5年病例DNA含量分析中发现，随生存时间延长而DNA含量降低(P<0.05)。
表3 星形细胞瘤p16与Rb、cyclin D1和EGFR阳性率的比较(n=80) p16表达
Rb
cyclin D1
EGFR
, 百拇医药
+
例数(%)
-
例数(%)
+
例数(%)
-
例数(%)
+
例数(%)
-
例数(%)
+
, 百拇医药
13(16.3)
22(27.5)
17(21.3)
18(22.5)
28(35.0)
7(8.8)
-
45(56.3)
0(0)
27(33.8)
18(22.5)
40(50.0)
, 百拇医药
5(6.3)
χ2值
7.89
1.8
23.17
P值
<0.01
>0.05
<0.005
, 百拇医药
图1 星形细胞瘤Ⅰ级，p16蛋白表达阳性。S-P×400 图2 星形细胞瘤Ⅰ级，Rb蛋白表达阳性。S-P×400
图3 星形细胞瘤Ⅱ级，cyclin D1蛋白表达阳性。S-P×400 图4 星形细胞瘤Ⅱ级，EGFR蛋白表达阳性。S-P×400
图5 p16阳性组和p16阴性组星形细胞肿瘤患者术后生存率曲线
3 讨论
近年研究表明〔5〕，cyclin D1与CDK4结合成复合物使CDK4活化；活化的CDK4可使Rb蛋白磷酸化，促使转录因子E2F解离，使细胞由G1期进入S期。p16可特异性地与CDK4或cyclin D1-CDK4复合物结合，抑制CDK4活性，从而抑制细胞G1～S期的转变，对细胞周期起负调节作用〔6〕。目前，p16、Rb、cyclin D1和EGFR在星形细胞瘤发生及发展中的作用已有报道。
, 百拇医药
本组80例星形细胞瘤中，抑癌基因p16和Rb阳性率随组织学分级的增高而降低，提示p16和Rb基因在抑制星形细胞瘤生长中起重要作用，一旦二者发生变异，将导致胶质细胞的异常增殖。13例p16和Rb共同阳性表达，无二者同时失表达，并且在一部分Rb阴性病例中见到p16强阳性表达；Aagaard在蛋白水平对p16和Rb进行研究，发现无Rb活性的细胞中呈现p16强阳性表达；Walker等证实了当Rb失活时，p16表达增强，但不能阻止细胞增殖，p16和Rb之间存在负相关〔7，8〕。EGFR和cyclin D1阳性率均随组织学分级增高而增高，提示这两种蛋白在星形细胞瘤的发生、发展中起着重要作用。本研究结果显示：p16、Rb和cyclin D1 3种蛋白阳性组与阴性组预后之间差异有显著性，随生存时间延长DNA含量明显减少，提示3种蛋白的表达及DNA含量与星形细胞瘤预后有关。EGFR与预后无关，与文献报道一致〔9，10〕。
众多研究表明：星形细胞瘤的形成和发展是一个涉及多重基因事件的复杂过程，多个激活的癌基因之间，失活的抑癌基因之间，以及癌基因与抑癌基因之间的综合作用最终导致了肿瘤的发生并影响其发展。因此，研究过程中重视它们之间的综合作用，将有助于提高对肿瘤的认识水平。
, 百拇医药
(本研究得到首都医科大学宣武医院徐庆中教授、第三军医大学卞修武教授指导，特此致谢)
作者简介：范智勇，男，28岁，医师
参考文献
1，Weinbeerg RA. Oncogene, anti-oncogenes and the molecular bases of multitep carcinogenesis. Cancer Res, 1989;49:3713～3718
2，Kamb A, Grnuis NA, wearer-Feldhaus J et al. A cell cycle regulator poteneially involved in genesis of many tumor types. Science, 1994;264:436～440
, 百拇医药
3，Weichselbaum RR, Beckett M, Diamond A. Some Retinoblastoma, osteosarcoma, and soft tissue sarcomas may share a common etiology. Proc Natl Acad Sci USA, 1988;85:2106～2111
4，Barnes DM, Dublin EA, Fisher CJ et al. Immunohistochemical detection of p53 protein in mammary carcinoma: an important new independent indictor of prognosis. Hum Pathol, 1993;24:469～476
5，Marx J. New tumor suppressor may rival p53. Science, 1994;264:344～348
, http://www.100md.com
6，Serrano M, Hannon G, Beach D. A new regulatory modify in cell cycle control causing specific inhition of cyclin D/CDK. Nature, 1993;366(16):704～709
7，Walker DG, Duan WR, Prpovic EA et al. Homzygous deletions of the mutiple tumor suppressor gene 1 in the progression of human astrocytomas. Carcer Res, 1995;55:20～26
8，Li Y, Nichols MA, Shng JW et al. Transcriptional repression of the D-type cyclin dependent kinase inhibitor p16 by the retmoblastoma susceptibility gene pRb. Cancer Res, 1994;54:6078～6083
9，Pigott TJ, Robson DK, Palmer J et al. Expression of epidermal growth facfor receptor in human glioblastoma multiform. Br J Neurosurg, 1993;7:261～264
10，卞修武，史景泉，柳凤轩等.胶质瘤增殖活性和肿瘤癌基因蛋白表达及意义.中华病理学杂志，1997；26：89～91
收稿日期：1999-10-22, http://www.100md.com
单位：范智勇(解放军第82医院病理科，淮阴 223001)；杨鑫 赵玉宁 朱峰 黄克斌(解放军第三医院病理科，宝鸡 721004)；曹晓哲(兰州军区总医院病理科，兰州 730050)
关键词：脑肿瘤；星形细胞瘤；癌基因蛋白；DNA含量；图像解释；免疫组织化学
临床与实验病理学杂志000114 摘要 目的：探讨p16、Rb、cyclin D1和EGFR在星形细胞肿瘤发生、发展中的作用及其与预后的关系。方法：免疫组化染色采用即用型S-P法，用图像分析系统对80例星形细胞肿瘤瘤细胞进行DNA含量测定。结果：80例星形细胞肿瘤：p16、Rb、cyclin D1和EGFR的阳性率分别为43.8%、71.3%、55.0%和85.0%，4种蛋白阳性率及DNA含量与组织学分级均有统计学意义；p16、Rb、cyclin D1阳性率和瘤细胞DNA含量与预后有关，EGFR阳性率与预后无关；Rb失表达时，p16表达增强。结论：p16和Rb在抑制星形细胞肿瘤的生长及EGFR和cyclin D1促使其生长中起着重要作用，p16表达同DNA含量相结合评估星形细胞瘤预后有一定价值。
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中图分类号 R739.41 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(2000)01-0044-04
DNA content and expression of p16、Rb、cyclin D1 and EGFR in human astrocytic tumors
Fan Zhiyong
(Dept of Pathol, the 82nd Hospital of the PLA, Huaiyin 223001)
Yang Xin, Zhao Yuning,Zhu Feng,Huang Kebin
(Dept of Pathol, Third Hospital of the PLA 721004)
, 百拇医药
Cao Xiaozhe
(Dept of Pathol,General Hospital of Lanzhuo Military Command,Lanzhou 730050)
ABSTRACT Purpose To study the DNA contents and the expressions of p16, Rb, cycli2n D1 and EGFR in the human astrocytic tumors. Methods Immunohistochemical study by S-P kit. In order to analyze DNA contents of tumor cells, the tissue slices were stained by Feulgen method and analyzed using CMIAS Ⅱ in 80 cases astrocytic tumors. Results ①The positivity rates of p16, Rb, cyclin D1 and EGFR in the 80 cases of astrocytic tumors were 43.8%， 71.3%， 55.0% and 85.0% respectively; the DNA content and positivity rates were correlated to the pathological grading of these tumors. ②The DNA content and the expressions of p16, Rb and cyclin D1 were correlated to the patient survival rate, but EGFR was not. ③ Both p16 and Rb could be simultaneously detected in 13 of 80 case. p16 expression could be intensive in some cases that Rb were not expression. Conclusion The abnormal expression of p16, Rb, cyclin D1 and EGFR may play an important role in the pathogenesis of human astrocytic tumors. Both the DNA content and expression of p16 might be used as a valuable marker to determine the prognosis of this tumor.
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KEY WORDS brain neoplasms;astrocytoma; oncoprotein; p16 protein; prognosis; immunohistochemistry
分子生物学的研究结果表明：肿瘤属于多基因异常变化的疾病〔1〕。细胞周期素(cyclin) D1、p16/MTS1和视网膜母细胞瘤基因(Rb gene)在cyclins-CDKs (cyclins dependent kinase)-CDKIs(cyclins dependent kinase inhibitors)的网络调控系统中起重要作用，这些基因及其所编码的蛋白发生改变均可能导致肿瘤的发生〔2，3〕。表皮生长因子受体(EGFR)在星形细胞肿瘤的表达及其与预后的关系有争议。据此，我们采用免疫组织化学法在蛋白水平对80例星形细胞肿瘤中p16、Rb、cyclin D1和EGFR蛋白表达进行研究，测量肿瘤细胞的DNA含量，以探讨它们在星形细胞肿瘤发生、发展中的作用及其与预后的关系。
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1 材料和方法
1.1 一般资料 从我科1980～1996年外检星形细胞肿瘤标本中随机抽取有完整随访资料者80例。其中，男48例，女32例，年龄4～66岁，平均42.1岁，按WHO分级标准分级：Ⅰ级12例，Ⅱ级25例，Ⅲ级20例，Ⅳ级23例。肿瘤均位于大脑半球，诊断均经GFAP和vimentin证实，随访资料以年为单位。
1.2 免疫组化染色 常规石蜡连续4 μm切片，微波抗原修复后，采用S-P法，按试剂盒说明书操作，DAB显色，苏木精复染。所用一抗包括：vimentin为鼠单抗，cyclin D1为兔单抗，p16、Rb、cyclin D1和EGFR为兔多抗。上述一抗和S-P试剂盒均为Maxim公司产品，阳性对照片购自福州迈新公司，以0.01 mol*L-1 PBS液作空白对照。免疫组化染色结果判断参照Barnes半定量法〔4〕。
1.3 DNA含量测定 瘤组织石蜡切片经Feulgen染色，用CMIAS Ⅱ图像分析系统对瘤细胞进行DNA含量定量分析，每例随机测量100～150个瘤细胞，得出DNA的相对含量，以任意单位(Arbitary unit, AU)表示。
, 百拇医药
1.4 统计学处理 采用SPSS 8.0统计软件进行分析。随访资料Kaplan-Meier生存率曲线处理并进行时序检验(Log rank test)。
2 结果
2.1 p16、Rb、cyclin D1和EGFR的表达及相互关系 p16、Rb和cyclin D1以胞核着色为主，EGFR以胞浆和胞膜着色为主；4种蛋白阳性率分别为43.8%、71.3%、55.0%和85.0%。p16和Rb共同表达13例，未观察到同一例肿瘤中同时存在二者表达阴性，而在一部分Rb阴性病例中可见p16强阳性表达。p16蛋白阳性病例中cyclin D1阳性率48.6%(17/35)。p16阴性病例中cyclin D1阳性率为60.0%(27/45)，这两种蛋白Ⅰ～Ⅳ级阳性率之间存在负相关关系(r=-0.950， P<0.005)，见表1，2和图1～4。p16与Rb、cyclin D1和EGFR阳性率之间的关系见表3。
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2.2 p16、Rb、cyclin D1和EGFR的表达及DNA含量(AU)与星形细胞瘤组织学分级的关系 p16阳性率与组织学分级呈负相关(r=-0.748， P<0.05)，EGFR的阳性率与组织学分级呈正相关(r=0.850， P<0.05)；Rb和cyclin D1阳性率与分级无相关关系(P>0.05)；p16和Rb蛋白阳性率均随组织学分级增高而降低(表2)。4种蛋白在低级别(Ⅰ～Ⅱ级)与高级别(Ⅲ～Ⅳ级)星形细胞瘤之间差异有显著性(P<0.01)。组织学分级越高，DNA含量AU值越大(χ2=3.974， P<0.05)。
表1 p16、Rb、cyclin D1和EGFR在
星形细胞瘤中的表达(n=80) 表达程度
p16阳性
例数(%)
, 百拇医药
Rb阳性
例数(%)
cyclin D1
阳性例数(%)
EGFR阳性
例数(%)
-
45(56.3)
22(27.5)
36(45.0)
12(15.0)
+
, http://www.100md.com 9(11.3)
16(20.0)
11(13.8)
18(22.5)
17(21.3)
27(33.8)
19(23.8)
30(37.5)
9(11.3)
15(18.8)
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14(17.5)
20(25.0)
表2 星形细胞瘤p16、Rb、cyclin D1和EGFR
表达与组织学分级的关系(n=80)
WHO
分级
n
p16阳性
例数(%)
Rb阳性
例数(%)
cyclin D1阳性
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例数(%)
EGFR阳性
例数(%)
Ⅰ
12
10(83.3)
10(83.3)
2(16.7)
7(58.3)
Ⅱ
25
13(52.0)
21(84.0)
, 百拇医药
11(44.0)
21(84.0)
Ⅲ
20
7(35.0)
15(75.0)
11(55.0)
18(90.0)
Ⅳ
23
5(21.7)
11(43.8)
, http://www.100md.com 20(87.0)
22(95.7)
χ2值
10.914
23.353
35.692
49.319
P值
<0.05
<0.005
<0.005
<0.005
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2.3 p16、Rb、cyclin D1和EGFR的表达和DNA含量与星形细胞瘤预后的关系 p16阳性组生存率曲线显著高于阴性组，(P<0.01，见图5)。Rb阳性组5年生存率高于阴性组，cyclin D1阴性组5年生存率高于阳性组(P均<0.05)。EGFR与预后无关(P>0.05)。术后生存5年以上者19例，其中18例p16阳性，12例Rb阳性，16例p16阳性而cyclin D1阴性；12例p16和Rb共同阳性，且其5年生存率高于单独p16或Rb阳性组(P均<0.05)。在对术后生存1～5年病例DNA含量分析中发现，随生存时间延长而DNA含量降低(P<0.05)。
表3 星形细胞瘤p16与Rb、cyclin D1和EGFR阳性率的比较(n=80) p16表达
Rb
cyclin D1
EGFR
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+
例数(%)
-
例数(%)
+
例数(%)
-
例数(%)
+
例数(%)
-
例数(%)
+
, 百拇医药
13(16.3)
22(27.5)
17(21.3)
18(22.5)
28(35.0)
7(8.8)
-
45(56.3)
0(0)
27(33.8)
18(22.5)
40(50.0)
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5(6.3)
χ2值
7.89
1.8
23.17
P值
<0.01
>0.05
<0.005
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图1 星形细胞瘤Ⅰ级，p16蛋白表达阳性。S-P×400 图2 星形细胞瘤Ⅰ级，Rb蛋白表达阳性。S-P×400
图3 星形细胞瘤Ⅱ级，cyclin D1蛋白表达阳性。S-P×400 图4 星形细胞瘤Ⅱ级，EGFR蛋白表达阳性。S-P×400
图5 p16阳性组和p16阴性组星形细胞肿瘤患者术后生存率曲线
3 讨论
近年研究表明〔5〕，cyclin D1与CDK4结合成复合物使CDK4活化；活化的CDK4可使Rb蛋白磷酸化，促使转录因子E2F解离，使细胞由G1期进入S期。p16可特异性地与CDK4或cyclin D1-CDK4复合物结合，抑制CDK4活性，从而抑制细胞G1～S期的转变，对细胞周期起负调节作用〔6〕。目前，p16、Rb、cyclin D1和EGFR在星形细胞瘤发生及发展中的作用已有报道。
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本组80例星形细胞瘤中，抑癌基因p16和Rb阳性率随组织学分级的增高而降低，提示p16和Rb基因在抑制星形细胞瘤生长中起重要作用，一旦二者发生变异，将导致胶质细胞的异常增殖。13例p16和Rb共同阳性表达，无二者同时失表达，并且在一部分Rb阴性病例中见到p16强阳性表达；Aagaard在蛋白水平对p16和Rb进行研究，发现无Rb活性的细胞中呈现p16强阳性表达；Walker等证实了当Rb失活时，p16表达增强，但不能阻止细胞增殖，p16和Rb之间存在负相关〔7，8〕。EGFR和cyclin D1阳性率均随组织学分级增高而增高，提示这两种蛋白在星形细胞瘤的发生、发展中起着重要作用。本研究结果显示：p16、Rb和cyclin D1 3种蛋白阳性组与阴性组预后之间差异有显著性，随生存时间延长DNA含量明显减少，提示3种蛋白的表达及DNA含量与星形细胞瘤预后有关。EGFR与预后无关，与文献报道一致〔9，10〕。
众多研究表明：星形细胞瘤的形成和发展是一个涉及多重基因事件的复杂过程，多个激活的癌基因之间，失活的抑癌基因之间，以及癌基因与抑癌基因之间的综合作用最终导致了肿瘤的发生并影响其发展。因此，研究过程中重视它们之间的综合作用，将有助于提高对肿瘤的认识水平。
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(本研究得到首都医科大学宣武医院徐庆中教授、第三军医大学卞修武教授指导，特此致谢)
作者简介：范智勇，男，28岁，医师
参考文献
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收稿日期：1999-10-22, http://www.100md.com