表皮生长因子受体及nm23-H1在滋养细胞肿瘤中表达的相关性及临床意义
作者:李志英 向阳
单位:李志英(湖北三峡学院医学院附属医院妇产科 (宜昌 443001));向阳(中国医学科学院北京协和医院妇产科)
关键词:表皮生长因子受体;nm23-H1基因;滋养细胞肿瘤;免疫组织化学
实用医学进修杂志000107
摘 要:目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)及nm23-H1在滋养细胞肿瘤组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组化S-P法检测10例孕早期绒毛、20例葡萄胎(8例发生恶性变)、10例侵蚀性葡萄胎及8例绒毛膜癌组织EGFR及nm23-H1的蛋白表达量,并结合临床资料进行统计学分析 。结果:EGFR和nm23-H1在正常早孕绒毛及未恶变组葡萄胎组织的蛋白表达量明显高于发生恶变的葡萄胎组织及恶性滋养细胞肿瘤(P<0.05);单因素及多因素分析均表明EGFR蛋白表达与恶性滋养细胞肿瘤临床分期密切相关(P=0.026, OR=9.874);EGFR及nm23-H1在恶性滋养细胞肿瘤的表达呈正相关(rs=0.606,P<0.01)。结论:EGFR蛋白表达可作为恶性滋养细胞肿瘤临床分期的判断指标之一,与 nm23-H1一致性降低表达将预示葡萄胎预后不良。
, http://www.100md.com
Expression of Epidermal Growth Factor Receptor
and nm23-H1 in Gestational Trophoblastic Tumours
Li Zhiying Xiang Yang
(Department of Gyneacology,Affiliated Hospital of Hubei Three Gorges
University Medical College,Yichang 443001)
Abstract:Objective:To investigate the expression of epidermal growth factor receptor( EGFR)and nm23-H1 in gestational trophoblast tumours and its clinical significince.Method:Placentae of 20 normal early pregnancies,20 molar pregnancies, 10 samples from invasive mole and 8 samples of choriocarcinoma were used for the study.EGFR and nm23-H1 expressions were evaluated by immunohistochemistry using monoclonal antibody.Result:EGFR and nm23-H1 were expressed more strongly in normal chorionic villi and non-malignant transformed hydatidiform mole than in malignant transformed molar pregnancies and malignant trophoblastic tumours(P<0.05).Univariaanalysis and Multivariate analysis indicated that EGFR immunostainingintensity significantly related to the clinical stage in malignant trophoblastic tumours(P=0.026,OR=9.847). EGFR and nm23-H1 expressions were positive correlated in malignant trophoblastic tumours(rs=0.606,P<0.01).Conclusion:EGFR expression could be used as an index for staging of malignant trophoblastic tumours. Simultaneously decreased expression of EGFR and nm23-H1 indicated poor prognosis of hydatidiform mole.
, 百拇医药
Key Words:epidermal growth factor receptor;nm23-H1 nm23-H1 gene;trophoblastic tumour;immunohistochemistry▲
葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌是发生在育龄期妇女较常见的滋养细胞肿瘤。几乎所有的侵蚀性葡萄胎和50%的绒癌都是由葡萄胎恶变而来,而葡萄胎的恶变率可高达20%[1]。目前,葡萄胎转变为恶性滋养细胞肿瘤机理尚不明确。本研究采用免疫组化方法检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)及nm23-H1基因在正常早孕绒毛和滋养细胞肿瘤组织中的蛋白表达量,以探讨其与滋养细胞肿瘤的关系,特别是对葡萄胎恶性变的预测价值进行了分析。
1 材料与方法
, http://www.100md.com 1.1 材料
标本来源:恶性滋养细胞肿瘤18例(侵蚀性葡萄胎10例、绒毛膜癌8例)为北京协和医院1986年8月~1999年3月急症手术切除的子宫标本;葡萄胎为同期收治的部分患者,20例标本均为首次清宫的葡萄胎组织。所有标本均经本院病理组织学证实,并有完整的临床及病理资料。另取门诊正常早孕(6~12孕周)人工流产绒毛标本10例作为对照。所有标本经10%福尔马林固定,常规石蜡包埋。连续5μm 石蜡切片4张。
所有患者治愈出院后平均随诊时间为25.5月。葡萄胎患者发生恶性变的有8例。其诊断标准参照宋鸿钊教授所提出的侵蚀性葡萄胎及绒癌诊断标准[2]。
1.2 方法
1.2.1 免疫组织化学染色 应用S-P法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法)染色,鼠抗人EGFR单克隆抗体(Ab-10)为Dako公司产品,工作浓度为1∶60。鼠抗人nm23-H1单克隆抗体(MO139)为福州迈新公司产品,工作浓度为1∶40。严格按SP免疫试剂盒及DAB显色试剂盒(购自北京中山生物技术有限公司)说明书分别进行免疫组化染色。以0.01mol/L pH7.4的PBS代替一抗作为阴性对照。
, 百拇医药
1.2.2 结果判定 阳性信号为细胞膜或细胞浆呈淡黄(染色弱)、棕黄(中等强度染色)、棕褐色(强阳性),每张切片随机观察10个高倍视野,按显色强度及阳性细胞数分为3级:阴性―(无阳性细胞);弱阳性+(<50%细胞呈弱、中等强度染色,强阳性细胞数少于30%);强阳性++(≥50% 弱、中等强度阳性细胞, ≥30%强阳性细胞数)。
1.2.3 统计学处理 采用确切概率法,Spearman等级相关分析,Logistic逐步回归法进行统计学分析。
2 结果
2.1 EGFR的表达
EGFR在正常早孕绒毛及滋养细胞肿瘤组织中均有表达。在正常早孕绒毛及未恶变的葡萄胎组织中强阳性率分别为90%和83.3%, 与发生恶性变的葡萄胎组(强阳性率为25%)比较,具有显著性差异(P=0.043,P=0.019);与恶性滋养细胞肿瘤组(强阳性率为22.2%)比较,具有极显著性差异(P=0.001,P=0.002);可见,EGFR蛋白表达量在发生恶性变的葡萄胎组织及恶性滋养细胞肿瘤组织明显降低(见表1)。
, 百拇医药
表1 不同组织中EGFR及nm23-H1基因的表达 病例类型
例数
EGFR
nm23
-
+
++(%)
-
+
++(%)
正常早孕绒毛
10
, http://www.100md.com
0
1
9(90)*△
0
2
8(80)△
葡萄胎未恶变组
12
0
2
10(83.3)*△
0
2
, http://www.100md.com
10(83.3)*△
葡萄胎恶变组
8
0
6
2(25)
1
5
2(25)
恶性滋养细胞肿瘤
18
0
14
, http://www.100md.com
4(22.2)
3
11
4(22.2)
侵蚀性葡萄胎
10
0
8
2(20)
1
7
2(20)
绒毛膜癌
, http://www.100md.com
8
0
6
2(25)
2
4
2(25)
*与葡萄胎恶变组比较P<0.05 △与恶性滋养细胞肿瘤组比较P<0.01
2.2 nm23-H1的表达
nm23-H1基因在正常早孕绒毛及未发生恶性变的葡萄胎组织中均有表达 ,其蛋白表达的强阳性率分别为80%和83.3%。与恶性滋养细胞肿瘤组(强阳性率为22.2%)比较,具有极显著性差异(P=0.005,P=0.002); 未发生恶性变的葡萄胎组与发生恶性变的葡萄胎组比较,具有显著性差异(P=0.019);可见,nm23-H1基因在发生恶性变的葡萄胎组织及恶性滋养细胞肿瘤组织的蛋白表达量明显降低(见表1)。
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2.3 EGFR与nm23-H1基因在葡萄胎组织表达的一致性
EGFR与nm23-H1基因免疫组化阳性染色均以局限灶状和弥漫片状分布为主,在葡萄胎恶变的8例患者中,二者表达量共同减低者有5例;未发生恶性变的葡萄胎组无共同低表达(P=0.049)。
2.4 EGFR与nm23-H1基因表达与恶性滋养细胞肿瘤临床病理特征的关系
对恶性滋养细胞肿瘤患者的年龄、血β-hCG水平、临床分期、 术中所见(子宫是否穿孔)、临床治愈所需化疗疗程数及预后(是否复发)与EGFR、nm23-H1蛋白表达水平进行单因素确切概率法及多因素Logistic逐步回归分析,发现EGFR蛋白表达与临床分期有关(P=0.026,Wald卡方值=4.5844 OR=9.874 P=0.032);单因素分析nm23-H1蛋白表达水平与恶性滋养细胞肿瘤患者血β-hCG有关(P=0.025),而多因素分析显示nm23-H1基因蛋白表达与各指标间无明显相关性。但EGFR与nm23-H1基因蛋白表达经spearman等级相关分析呈正相关(rs=0.606,P=0.008)(见表2)。
, 百拇医药
表2 EGFR及nm23-H1基因蛋白表达水平与恶性滋养细胞肿瘤临床指标的关系 临床指标
EGFR(例)
nm23(例)
+
++
P值
-
+
++
P值
年龄(岁)
0.917
, 百拇医药
0.787
<35
10
2
2
8
2
≥35
4
2
1
3
2
血β-hCG(mIu/ml)
, http://www.100md.com
0.593
0.025*
<105
9
3
0
8
4
≥105
5
1
3
3
, 百拇医药
0
临床分期
0.026
0.570
Ⅰ
1
2
1
1
1
Ⅱ
2
2
0
, 百拇医药
2
2
Ⅲ
10
0
2
7
1
Ⅳ
1
0
0
1
0
, 百拇医药
化疗疗程数
0.794
0.647
<6
8
2
2
5
3
≥6
6
2
1
6
, 百拇医药
1
子宫穿孔
0.515
1.000
是
9
2
2
7
2
否
5
2
1
, 百拇医药
4
2
复发
0.778
0.167
是
1
0
1
0
0
否
13
4
, 百拇医药
2
11
4
注:*P<0.05
3 讨论
表皮生长因子受体(EGFR)是分子量为170kD的跨膜糖蛋白,是癌基因c-erbB1的蛋白表达产物。具有酪氨酸激酶活性,与其相应配体表皮生长因子(EGF)或转化生长因子(TGFα)结合后可加速DNA的合成,从而促进组织细胞的增殖和分化效应。nm23基因是美国国立癌症研究所Steeg等[3]从鼠黑色素瘤细胞株中分离克隆的一种与抑制肿瘤转移相关的基因。到目前为止,共发现三个亚型:nm23-H1、 nm23-H2 和nm23-H3,其中nm23-H1基因与肿瘤发生及转移的关系最为密切。
, 百拇医药
本研究表明EGFR在正常早孕胎盘及未恶变的葡萄胎组织含量丰富,在发生恶性变的葡萄胎及恶性滋养细胞肿瘤中表达明显减少,Ladines-Llave 及王新宇等[4,5]也报道了类似结果。因此我们认为EGFR在妊娠过程中发挥重要的生理调节作用,且与滋养细胞肿瘤中的细胞增殖及恶性转化有关。但在恶性滋养细胞肿瘤中的侵蚀性葡萄胎及绒癌组织中的表达量无明显差异,本研究进一步证实EGFR表达量与恶性滋养细胞肿瘤临床期别密切相关,可作为临床分期及预后的判断指标之一。
正常早孕绒毛滋养细胞具有类似于恶性肿瘤细胞的特点,因此作为肿瘤转移阻抑基因的nm23-H1可能也参与了胎盘的形成和发育。本研究证实正常早孕绒毛及未恶变的葡萄胎组织均有nm23-H1基因的表达,且其表达量明显高于发生恶性变的葡萄胎及恶性滋养细胞肿瘤,表明nm23-H1低表达与葡萄胎恶变及滋养细胞肿瘤的发生发展有一定的关系。
, 百拇医药 本研究组20例葡萄胎患者,平均随诊2年,8例发生恶性变,其中5例为EGFR及nm23-H1共同低表达者,而预后良好的葡萄胎患者均无该两项指标共同低表达。提示EGFR及nm23-H1共同低表达将预示葡萄胎预后不良,其作用机理有待更进一步的研究,但可能在滋养细胞肿瘤的发生和恶性转化中起协同作用。■
参考文献:
[1]向阳,杨秀玉.妊娠滋养细胞疾病的诊治进展.中华妇产科杂志,1998;33:441
[2]宋鸿钊. 滋养细胞肿瘤的诊断和治疗. 北京:人民卫生出版社,1981:124
[3]Steeg PS, Bevilacqua G, Kopper L,et al. Evidence for a novel gene associated with low tumor metastatic potential.J Natl Cancer Inst,1988;80:200
[4]Ladines-Llave CA, Maruo T, Manalo AM, et al. Decreased expression of EGFR and its receptor in the malignant transformation of trophoblasts. Cancer,1993;71:4118
[5]王新宇,石一复.妊娠滋养细胞疾病表皮生长因子受体的表达及其临床意义.癌症,1999;18:218
收稿日期:1999-11-24, http://www.100md.com
单位:李志英(湖北三峡学院医学院附属医院妇产科 (宜昌 443001));向阳(中国医学科学院北京协和医院妇产科)
关键词:表皮生长因子受体;nm23-H1基因;滋养细胞肿瘤;免疫组织化学
实用医学进修杂志000107
摘 要:目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)及nm23-H1在滋养细胞肿瘤组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组化S-P法检测10例孕早期绒毛、20例葡萄胎(8例发生恶性变)、10例侵蚀性葡萄胎及8例绒毛膜癌组织EGFR及nm23-H1的蛋白表达量,并结合临床资料进行统计学分析 。结果:EGFR和nm23-H1在正常早孕绒毛及未恶变组葡萄胎组织的蛋白表达量明显高于发生恶变的葡萄胎组织及恶性滋养细胞肿瘤(P<0.05);单因素及多因素分析均表明EGFR蛋白表达与恶性滋养细胞肿瘤临床分期密切相关(P=0.026, OR=9.874);EGFR及nm23-H1在恶性滋养细胞肿瘤的表达呈正相关(rs=0.606,P<0.01)。结论:EGFR蛋白表达可作为恶性滋养细胞肿瘤临床分期的判断指标之一,与 nm23-H1一致性降低表达将预示葡萄胎预后不良。
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Expression of Epidermal Growth Factor Receptor
and nm23-H1 in Gestational Trophoblastic Tumours
Li Zhiying Xiang Yang
(Department of Gyneacology,Affiliated Hospital of Hubei Three Gorges
University Medical College,Yichang 443001)
Abstract:Objective:To investigate the expression of epidermal growth factor receptor( EGFR)and nm23-H1 in gestational trophoblast tumours and its clinical significince.Method:Placentae of 20 normal early pregnancies,20 molar pregnancies, 10 samples from invasive mole and 8 samples of choriocarcinoma were used for the study.EGFR and nm23-H1 expressions were evaluated by immunohistochemistry using monoclonal antibody.Result:EGFR and nm23-H1 were expressed more strongly in normal chorionic villi and non-malignant transformed hydatidiform mole than in malignant transformed molar pregnancies and malignant trophoblastic tumours(P<0.05).Univariaanalysis and Multivariate analysis indicated that EGFR immunostainingintensity significantly related to the clinical stage in malignant trophoblastic tumours(P=0.026,OR=9.847). EGFR and nm23-H1 expressions were positive correlated in malignant trophoblastic tumours(rs=0.606,P<0.01).Conclusion:EGFR expression could be used as an index for staging of malignant trophoblastic tumours. Simultaneously decreased expression of EGFR and nm23-H1 indicated poor prognosis of hydatidiform mole.
, 百拇医药
Key Words:epidermal growth factor receptor;nm23-H1 nm23-H1 gene;trophoblastic tumour;immunohistochemistry▲
葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌是发生在育龄期妇女较常见的滋养细胞肿瘤。几乎所有的侵蚀性葡萄胎和50%的绒癌都是由葡萄胎恶变而来,而葡萄胎的恶变率可高达20%[1]。目前,葡萄胎转变为恶性滋养细胞肿瘤机理尚不明确。本研究采用免疫组化方法检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)及nm23-H1基因在正常早孕绒毛和滋养细胞肿瘤组织中的蛋白表达量,以探讨其与滋养细胞肿瘤的关系,特别是对葡萄胎恶性变的预测价值进行了分析。
1 材料与方法
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标本来源:恶性滋养细胞肿瘤18例(侵蚀性葡萄胎10例、绒毛膜癌8例)为北京协和医院1986年8月~1999年3月急症手术切除的子宫标本;葡萄胎为同期收治的部分患者,20例标本均为首次清宫的葡萄胎组织。所有标本均经本院病理组织学证实,并有完整的临床及病理资料。另取门诊正常早孕(6~12孕周)人工流产绒毛标本10例作为对照。所有标本经10%福尔马林固定,常规石蜡包埋。连续5μm 石蜡切片4张。
所有患者治愈出院后平均随诊时间为25.5月。葡萄胎患者发生恶性变的有8例。其诊断标准参照宋鸿钊教授所提出的侵蚀性葡萄胎及绒癌诊断标准[2]。
1.2 方法
1.2.1 免疫组织化学染色 应用S-P法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法)染色,鼠抗人EGFR单克隆抗体(Ab-10)为Dako公司产品,工作浓度为1∶60。鼠抗人nm23-H1单克隆抗体(MO139)为福州迈新公司产品,工作浓度为1∶40。严格按SP免疫试剂盒及DAB显色试剂盒(购自北京中山生物技术有限公司)说明书分别进行免疫组化染色。以0.01mol/L pH7.4的PBS代替一抗作为阴性对照。
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1.2.2 结果判定 阳性信号为细胞膜或细胞浆呈淡黄(染色弱)、棕黄(中等强度染色)、棕褐色(强阳性),每张切片随机观察10个高倍视野,按显色强度及阳性细胞数分为3级:阴性―(无阳性细胞);弱阳性+(<50%细胞呈弱、中等强度染色,强阳性细胞数少于30%);强阳性++(≥50% 弱、中等强度阳性细胞, ≥30%强阳性细胞数)。
1.2.3 统计学处理 采用确切概率法,Spearman等级相关分析,Logistic逐步回归法进行统计学分析。
2 结果
2.1 EGFR的表达
EGFR在正常早孕绒毛及滋养细胞肿瘤组织中均有表达。在正常早孕绒毛及未恶变的葡萄胎组织中强阳性率分别为90%和83.3%, 与发生恶性变的葡萄胎组(强阳性率为25%)比较,具有显著性差异(P=0.043,P=0.019);与恶性滋养细胞肿瘤组(强阳性率为22.2%)比较,具有极显著性差异(P=0.001,P=0.002);可见,EGFR蛋白表达量在发生恶性变的葡萄胎组织及恶性滋养细胞肿瘤组织明显降低(见表1)。
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表1 不同组织中EGFR及nm23-H1基因的表达 病例类型
例数
EGFR
nm23
-
+
++(%)
-
+
++(%)
正常早孕绒毛
10
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0
1
9(90)*△
0
2
8(80)△
葡萄胎未恶变组
12
0
2
10(83.3)*△
0
2
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10(83.3)*△
葡萄胎恶变组
8
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2(25)
1
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恶性滋养细胞肿瘤
18
0
14
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4(22.2)
3
11
4(22.2)
侵蚀性葡萄胎
10
0
8
2(20)
1
7
2(20)
绒毛膜癌
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8
0
6
2(25)
2
4
2(25)
*与葡萄胎恶变组比较P<0.05 △与恶性滋养细胞肿瘤组比较P<0.01
2.2 nm23-H1的表达
nm23-H1基因在正常早孕绒毛及未发生恶性变的葡萄胎组织中均有表达 ,其蛋白表达的强阳性率分别为80%和83.3%。与恶性滋养细胞肿瘤组(强阳性率为22.2%)比较,具有极显著性差异(P=0.005,P=0.002); 未发生恶性变的葡萄胎组与发生恶性变的葡萄胎组比较,具有显著性差异(P=0.019);可见,nm23-H1基因在发生恶性变的葡萄胎组织及恶性滋养细胞肿瘤组织的蛋白表达量明显降低(见表1)。
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2.3 EGFR与nm23-H1基因在葡萄胎组织表达的一致性
EGFR与nm23-H1基因免疫组化阳性染色均以局限灶状和弥漫片状分布为主,在葡萄胎恶变的8例患者中,二者表达量共同减低者有5例;未发生恶性变的葡萄胎组无共同低表达(P=0.049)。
2.4 EGFR与nm23-H1基因表达与恶性滋养细胞肿瘤临床病理特征的关系
对恶性滋养细胞肿瘤患者的年龄、血β-hCG水平、临床分期、 术中所见(子宫是否穿孔)、临床治愈所需化疗疗程数及预后(是否复发)与EGFR、nm23-H1蛋白表达水平进行单因素确切概率法及多因素Logistic逐步回归分析,发现EGFR蛋白表达与临床分期有关(P=0.026,Wald卡方值=4.5844 OR=9.874 P=0.032);单因素分析nm23-H1蛋白表达水平与恶性滋养细胞肿瘤患者血β-hCG有关(P=0.025),而多因素分析显示nm23-H1基因蛋白表达与各指标间无明显相关性。但EGFR与nm23-H1基因蛋白表达经spearman等级相关分析呈正相关(rs=0.606,P=0.008)(见表2)。
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表2 EGFR及nm23-H1基因蛋白表达水平与恶性滋养细胞肿瘤临床指标的关系 临床指标
EGFR(例)
nm23(例)
+
++
P值
-
+
++
P值
年龄(岁)
0.917
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0.787
<35
10
2
2
8
2
≥35
4
2
1
3
2
血β-hCG(mIu/ml)
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0.593
0.025*
<105
9
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0
8
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≥105
5
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3
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, 百拇医药
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临床分期
0.026
0.570
Ⅰ
1
2
1
1
1
Ⅱ
2
2
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Ⅲ
10
0
2
7
1
Ⅳ
1
0
0
1
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化疗疗程数
0.794
0.647
<6
8
2
2
5
3
≥6
6
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1
子宫穿孔
0.515
1.000
是
9
2
2
7
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否
5
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复发
0.778
0.167
是
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2
11
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注:*P<0.05
3 讨论
表皮生长因子受体(EGFR)是分子量为170kD的跨膜糖蛋白,是癌基因c-erbB1的蛋白表达产物。具有酪氨酸激酶活性,与其相应配体表皮生长因子(EGF)或转化生长因子(TGFα)结合后可加速DNA的合成,从而促进组织细胞的增殖和分化效应。nm23基因是美国国立癌症研究所Steeg等[3]从鼠黑色素瘤细胞株中分离克隆的一种与抑制肿瘤转移相关的基因。到目前为止,共发现三个亚型:nm23-H1、 nm23-H2 和nm23-H3,其中nm23-H1基因与肿瘤发生及转移的关系最为密切。
, 百拇医药
本研究表明EGFR在正常早孕胎盘及未恶变的葡萄胎组织含量丰富,在发生恶性变的葡萄胎及恶性滋养细胞肿瘤中表达明显减少,Ladines-Llave 及王新宇等[4,5]也报道了类似结果。因此我们认为EGFR在妊娠过程中发挥重要的生理调节作用,且与滋养细胞肿瘤中的细胞增殖及恶性转化有关。但在恶性滋养细胞肿瘤中的侵蚀性葡萄胎及绒癌组织中的表达量无明显差异,本研究进一步证实EGFR表达量与恶性滋养细胞肿瘤临床期别密切相关,可作为临床分期及预后的判断指标之一。
正常早孕绒毛滋养细胞具有类似于恶性肿瘤细胞的特点,因此作为肿瘤转移阻抑基因的nm23-H1可能也参与了胎盘的形成和发育。本研究证实正常早孕绒毛及未恶变的葡萄胎组织均有nm23-H1基因的表达,且其表达量明显高于发生恶性变的葡萄胎及恶性滋养细胞肿瘤,表明nm23-H1低表达与葡萄胎恶变及滋养细胞肿瘤的发生发展有一定的关系。
, 百拇医药 本研究组20例葡萄胎患者,平均随诊2年,8例发生恶性变,其中5例为EGFR及nm23-H1共同低表达者,而预后良好的葡萄胎患者均无该两项指标共同低表达。提示EGFR及nm23-H1共同低表达将预示葡萄胎预后不良,其作用机理有待更进一步的研究,但可能在滋养细胞肿瘤的发生和恶性转化中起协同作用。■
参考文献:
[1]向阳,杨秀玉.妊娠滋养细胞疾病的诊治进展.中华妇产科杂志,1998;33:441
[2]宋鸿钊. 滋养细胞肿瘤的诊断和治疗. 北京:人民卫生出版社,1981:124
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收稿日期:1999-11-24, http://www.100md.com