高血压病患者血浆GMP-140及vWF的变化和非洛地平治疗对其影响的研究
作者：卢岑 汤立军 王小朝
单位：卢岑(529000 广东省江门市人民医院血液内科)；汤立军(心血管科)；王小朝(检验科)
关键词：高血压；血小板膜糖蛋白类；von；Willebrand因子；非洛地平▲
实用医学杂志000117摘 要：目的：探讨高血压病(EH)患者体内血小板活化程度和血管内皮细胞受损情况，了解钙通道阻滞剂(CCB)对其的影响。方法：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法分别测定正常对照组和EH各期患者血浆中血小板α颗粒膜蛋白(GMP-140)及血管性假血友病因子(vWF)的含量。并对EHⅡ期患者用非洛地平缓释片治疗4周后，再次测定二者的含量。结果：EHⅡ，Ⅲ期患者的血浆GMP-140和vWF的含量均高于正常对照组(P<0.01)，Ⅰ期患者的血浆GMP-140也高于正常对照组(P<0.01)。Ⅱ期患者经非洛地平治疗后，血浆GMP-140和vWF的含量均明显下降(P<0.01)。结论：EH患者存在血小板高度活化和血管内皮细胞受损的情况。非洛地平有抑制血小板活化和保护血管内皮细胞的作用，可能有助于预防血栓的形成。
, 百拇医药
高血压病(EH)是脑卒中、冠心病最重要的危险因素。国内外研究发现，血小板活化在冠心病、脑卒中等疾病的发生发展过程中起着重要作用[1，2]，而钙通道阻滞剂(CCB)对血小板粘附、聚集和释放等活化反应有明显抑制作用[3]。1998年1月～1999年6月，我们测定了各期EH患者血浆中血小板α颗粒膜蛋白(GMP-140)和血管性假血友病因子(vWF)的含量，以了解EH患者血小板活化功能和血管内皮细胞损伤等方面的变化，并观察非洛地平缓释片在降压的同时对两者的影响。旨在探讨它们在心脑血管疾病中的病理生理学意义及其相关的预防机制。
1 对象与方法
1.1 研究对象 EH组105例，按1979年我国修订的EH临床分期标准分为Ⅰ期37例，男17例，女20例，年龄35～68岁，平均52.2岁；Ⅱ期56例，男26例，女30例，年龄38～78岁，平均58.1岁；Ⅲ期12例，男5例，女7例，年龄54～90岁，平均63.2岁。均排除了继发性高血压病、恶性肿瘤、肝肾疾病、感染等。正常对照组37例，男16例，女21例，年龄35～68岁，平均53.9岁，均为健康体检者。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 标本采集 所有被检测者在采血前2周内停服各种CCB和对血小板功能有影响的药物。空腹采静脉血并严格按试剂盒说明书进行处理。
1.2.2 给药方法 所有EHⅡ期患者均给予非洛地平缓释片治疗，剂量以每日2.5mg开始，定量测血压并根据血压等情况调整剂量为每日5mg，10mg，20mg等不同的剂量进行降压治疗。治疗期间停用其它降压药和对血小板功能有影响的药物。服药4周后再次采血复查。EHⅠ期患者由于病情轻在门诊治疗后多数失访，而EHⅢ期患者则由于病情重而且复杂，在临床上难于单独用非洛地平治疗。因而Ⅰ，Ⅲ期患者均难做到追踪观察。
1.2.3 检测方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法分别测定血浆GMP-140及vWF的含量，试剂盒由苏州医学院血栓与止血研究室提供。
1.3 统计学方法 结果用POMS统计软件处理后采用方差分析，组间两两比较用q检验。
, 百拇医药
2 结果
2.1 EHⅠ，Ⅱ，Ⅲ期患者血浆GMP-140和vWF的变化 见表1。
表1 各组血浆GMP-140和vWF含量的比较(
±s) 组别
例数
血浆GMP-140(μ g/L)
vWF(%)
正常对照组
37
12.17±5.33
117.35±36.37
, 百拇医药
高血压病Ⅰ期
37
32.89±30.66*
158.43±94.25
高血压病Ⅱ期
56
55.92±30.37*△
214.18±102.24*△
高血压病Ⅲ期
12
51.89±24.47*
, 百拇医药
269.67±117.44*△
与正常对照组比较*P<0.01，与高血压病Ⅰ期比较△P<0.01
2.2 EHⅡ期患者在非洛地平缓释片治疗前后血浆GMP-140和vWF含量的变化 见表2。
表2 高血压病Ⅱ期患者在非洛地平治疗前后血浆GMP-140和vWF的检测结果(±s) 组别
例数
血浆GMP-140(μg/L)
vWF(%)
正常对照组
, 百拇医药
37
12.17±5.33
117.35±36.37
治疗前
56
55.92±30.37*
214.18±102.24*
治疗后
56
29.72±21.60*△
148.50±85.17△
, 百拇医药
与正常对照组比较*P<0.01，与治疗前比较△P<0.01
2.3 56例EHⅡ期患者在非洛地平缓释片治疗4周后情况 血压下降明显而稳定，收缩压/舒张压平均下降(3.6±1.3/1.5±0.5)kPa，总有效率85.7%。6例患者出现头痛，睡眠困难等不良反应。
3 讨论
GMP-140是分子量为14万的糖蛋白，主要存在于静息血小板α颗粒膜上。当血小板被激活时，GMP-140可与开放管道系统的膜融合而整合至活化血小板膜的表面上即为血小板表面GMP-140，也可游离至血浆中即为血浆GMP-140，这是血浆GMP-140的主要来源。此外，还有少部分来源于活化、衰老或破坏的血小板碎片。测定血浆GMP-140被认为能特异地反映血小板活化和破坏的程度，GMP-140有介导活化血小板与中性粒细胞及单核细胞粘附的功能[1，2]。vWF是一种大分子糖蛋白，分子量从60万至200万，主要在血管内皮细胞的Weibel-Palade小体中合成和储存。当血管内皮细胞受损时，该小体发生变形或损害，其内容物释放，因此vWF是反映内皮细胞受损的分子标志物。vWF释放增加时，有介导血小板聚集和粘附的作用。vWF和血栓形成或动脉粥样硬化形成过程中有着密切联系，高水平的vWF可能能间接地反映动脉粥样硬化或血栓形成，故有人认为测定vWF是辅助临床诊断和提示疾病进展的一种非损伤性的方法[4]。
, 百拇医药
本研究发现，EHⅡ、Ⅲ期患者血浆GMP-140和vWF的含量均高于正常对照组，但Ⅱ，Ⅲ期之间差异无显著意义。正常对照组，EHⅠ，Ⅱ期患者的血浆GMP-140和vWF含量依次增加，仅EHⅠ期和正常对照组的vWF含量差异无显著意义。说明EH患者体内存在血小板高度活化和血管内皮细胞受损的情况，而且与病情严重程度有关。这些因素可能协同作用增加了EH患者出现动脉粥样硬化形成的机会，可以解释EH患者出现动脉粥样硬化性血管病变的高危险性[5]。这也许是EH患者易合并冠心病和脑卒中的一个发病机制。
EH患者出现血浆GMP-140和vWF含量增加的可能机制有：(1)血压高时出现湍流和切应力改变等血流动力学因素的变化，使得血管内皮细胞外形变长、簇集及细胞内骨架重新排列而造成血管内皮细胞受损，同时也有使血小板活化功能增加的作用。(2)高血压时超氧化物歧化酶(SOD)下降、过氧化脂质(LPO)上升，自由基促使血管内皮细胞受损，刺激胞质内亚细胞器Weibel-Palade小体释放vWF入血，并刺激血小板膜使之活化[6]。(3)血压高时，血小板内基础钙水平增加并参与到血小板活化的多个环节[7]。在血管内皮细胞受损后，通过vWF的桥联作用促使内皮下腔原与血小板膜糖蛋白Ib结合，使血小板发生形态变化，释放其颗粒内容物，包括GMP-140，又进一步促进血小板的粘附和聚集。
, 百拇医药
非洛地平缓释片是一种长效双氢吡啶类CCB。我们选用非洛地平缓释片治疗56例EHⅡ病人，不仅血压得到良好控制，副作用少，还发现能降低血浆GMP-140和vWF的含量，说明非洛地平缓释片能抑制血小板活性并有保护血管内皮细胞的作用，可能有助于预防血栓形成。可能的机制是：(1)血压控制后，血流平稳，对血管内皮细胞和血小板的刺激减小。(2)CCB有抑制钙通道的作用[3]，降低血小板内钙浓度和血管内皮细胞内钙浓度，从而抑制血小板活性和保护血管内皮细胞。(3)CCB能使SOD活性升高和LPO降低[8]，减小自由基的影响。(4)CCB通过抑制花生四烯酸代谢，减少血栓烷A2生成来实现对血小板功能的抑制作用[3]和对血管内皮细胞的影响。
总之，EH患者存在血小板高度活化和血管内皮细胞受损的现象，两者可能会促使动脉粥样硬化和血栓形成。CCB在降压的同时有抑制血小板活性和保护血管内皮细胞的作用，可能有助于防止EH患者合并心脑血管病的发生。
, http://www.100md.com
(本课题得到我院心血管科全体医务人员和信息科王国强主任医师大力支持，特此志谢)■
本课题受广东省卫生厅科研基金资助(基金编号：A1997455)
参考文献：
[1]阮健，赵相印，李清朗，等.血小板α颗粒膜蛋白140在治疗急性心肌梗塞的动态监测.中华内科杂志，1995，34(4)：253.
[2]宋玉强，邹宏丽，韩仲岩.脑血管病患者血小板α颗粒膜蛋白140的变化及临床意义.中风与神经疾病杂志，1997，14(3)：149.
[3]Rybak MEM,Renzulli LA. Effect of calcium channel blockers on platel et GP Ⅱb/Ⅲa as a calcium channel in liposomes:comparison with effects on the intact platelet. Thromb Haemost,1992,67:131.
, 百拇医药
[4]Lip GY,Blann A.von Willebrand factor:a marker of endothelial dysfun ction in vascular disorders? Cardiovasc Res,1997,34(2):255.
[5]Lip GY,Blann AD,Zarifis J,et al. Soluble adhesion molecule P-selectin and endothelial dysfunction in essential hypertension:implications for ather ogenesis? a preliminary report. J Hypertens,1995,13(12 pt 2):1674.
[6]韩崇旭，李锦堂，韩月玲，等. 血小板GMP-140、vWF、SOD、LPO与高血压病关系的研究. 综合临床医学，1997，13(6)：503.
[7]戴田娥，孙明，周宏研，等. 高血压病患者血小板活化状态和纤溶活性的变化.中华内科杂志，1998，37(5)：302.
[8]丁宝芬，张文，陈靑，等. 钙通道阻滞剂对高血 压冠心病脂质过氧化反应的抑制作用. 江苏医药，1995，21(1)：45., 百拇医药
单位：卢岑(529000 广东省江门市人民医院血液内科)；汤立军(心血管科)；王小朝(检验科)
关键词：高血压；血小板膜糖蛋白类；von；Willebrand因子；非洛地平▲
实用医学杂志000117摘 要：目的：探讨高血压病(EH)患者体内血小板活化程度和血管内皮细胞受损情况，了解钙通道阻滞剂(CCB)对其的影响。方法：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法分别测定正常对照组和EH各期患者血浆中血小板α颗粒膜蛋白(GMP-140)及血管性假血友病因子(vWF)的含量。并对EHⅡ期患者用非洛地平缓释片治疗4周后，再次测定二者的含量。结果：EHⅡ，Ⅲ期患者的血浆GMP-140和vWF的含量均高于正常对照组(P<0.01)，Ⅰ期患者的血浆GMP-140也高于正常对照组(P<0.01)。Ⅱ期患者经非洛地平治疗后，血浆GMP-140和vWF的含量均明显下降(P<0.01)。结论：EH患者存在血小板高度活化和血管内皮细胞受损的情况。非洛地平有抑制血小板活化和保护血管内皮细胞的作用，可能有助于预防血栓的形成。
, 百拇医药
高血压病(EH)是脑卒中、冠心病最重要的危险因素。国内外研究发现，血小板活化在冠心病、脑卒中等疾病的发生发展过程中起着重要作用[1，2]，而钙通道阻滞剂(CCB)对血小板粘附、聚集和释放等活化反应有明显抑制作用[3]。1998年1月～1999年6月，我们测定了各期EH患者血浆中血小板α颗粒膜蛋白(GMP-140)和血管性假血友病因子(vWF)的含量，以了解EH患者血小板活化功能和血管内皮细胞损伤等方面的变化，并观察非洛地平缓释片在降压的同时对两者的影响。旨在探讨它们在心脑血管疾病中的病理生理学意义及其相关的预防机制。
1 对象与方法
1.1 研究对象 EH组105例，按1979年我国修订的EH临床分期标准分为Ⅰ期37例，男17例，女20例，年龄35～68岁，平均52.2岁；Ⅱ期56例，男26例，女30例，年龄38～78岁，平均58.1岁；Ⅲ期12例，男5例，女7例，年龄54～90岁，平均63.2岁。均排除了继发性高血压病、恶性肿瘤、肝肾疾病、感染等。正常对照组37例，男16例，女21例，年龄35～68岁，平均53.9岁，均为健康体检者。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 标本采集 所有被检测者在采血前2周内停服各种CCB和对血小板功能有影响的药物。空腹采静脉血并严格按试剂盒说明书进行处理。
1.2.2 给药方法 所有EHⅡ期患者均给予非洛地平缓释片治疗，剂量以每日2.5mg开始，定量测血压并根据血压等情况调整剂量为每日5mg，10mg，20mg等不同的剂量进行降压治疗。治疗期间停用其它降压药和对血小板功能有影响的药物。服药4周后再次采血复查。EHⅠ期患者由于病情轻在门诊治疗后多数失访，而EHⅢ期患者则由于病情重而且复杂，在临床上难于单独用非洛地平治疗。因而Ⅰ，Ⅲ期患者均难做到追踪观察。
1.2.3 检测方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法分别测定血浆GMP-140及vWF的含量，试剂盒由苏州医学院血栓与止血研究室提供。
1.3 统计学方法 结果用POMS统计软件处理后采用方差分析，组间两两比较用q检验。
, 百拇医药
2 结果
2.1 EHⅠ，Ⅱ，Ⅲ期患者血浆GMP-140和vWF的变化 见表1。
表1 各组血浆GMP-140和vWF含量的比较(
±s) 组别例数
血浆GMP-140(μ g/L)
vWF(%)
正常对照组
37
12.17±5.33
117.35±36.37
, 百拇医药
高血压病Ⅰ期
37
32.89±30.66*
158.43±94.25
高血压病Ⅱ期
56
55.92±30.37*△
214.18±102.24*△
高血压病Ⅲ期
12
51.89±24.47*
, 百拇医药
269.67±117.44*△
与正常对照组比较*P<0.01，与高血压病Ⅰ期比较△P<0.01
2.2 EHⅡ期患者在非洛地平缓释片治疗前后血浆GMP-140和vWF含量的变化 见表2。
表2 高血压病Ⅱ期患者在非洛地平治疗前后血浆GMP-140和vWF的检测结果(
±s) 组别例数
血浆GMP-140(μg/L)
vWF(%)
正常对照组
, 百拇医药
37
12.17±5.33
117.35±36.37
治疗前
56
55.92±30.37*
214.18±102.24*
治疗后
56
29.72±21.60*△
148.50±85.17△
, 百拇医药
与正常对照组比较*P<0.01，与治疗前比较△P<0.01
2.3 56例EHⅡ期患者在非洛地平缓释片治疗4周后情况 血压下降明显而稳定，收缩压/舒张压平均下降(3.6±1.3/1.5±0.5)kPa，总有效率85.7%。6例患者出现头痛，睡眠困难等不良反应。
3 讨论
GMP-140是分子量为14万的糖蛋白，主要存在于静息血小板α颗粒膜上。当血小板被激活时，GMP-140可与开放管道系统的膜融合而整合至活化血小板膜的表面上即为血小板表面GMP-140，也可游离至血浆中即为血浆GMP-140，这是血浆GMP-140的主要来源。此外，还有少部分来源于活化、衰老或破坏的血小板碎片。测定血浆GMP-140被认为能特异地反映血小板活化和破坏的程度，GMP-140有介导活化血小板与中性粒细胞及单核细胞粘附的功能[1，2]。vWF是一种大分子糖蛋白，分子量从60万至200万，主要在血管内皮细胞的Weibel-Palade小体中合成和储存。当血管内皮细胞受损时，该小体发生变形或损害，其内容物释放，因此vWF是反映内皮细胞受损的分子标志物。vWF释放增加时，有介导血小板聚集和粘附的作用。vWF和血栓形成或动脉粥样硬化形成过程中有着密切联系，高水平的vWF可能能间接地反映动脉粥样硬化或血栓形成，故有人认为测定vWF是辅助临床诊断和提示疾病进展的一种非损伤性的方法[4]。
, 百拇医药
本研究发现，EHⅡ、Ⅲ期患者血浆GMP-140和vWF的含量均高于正常对照组，但Ⅱ，Ⅲ期之间差异无显著意义。正常对照组，EHⅠ，Ⅱ期患者的血浆GMP-140和vWF含量依次增加，仅EHⅠ期和正常对照组的vWF含量差异无显著意义。说明EH患者体内存在血小板高度活化和血管内皮细胞受损的情况，而且与病情严重程度有关。这些因素可能协同作用增加了EH患者出现动脉粥样硬化形成的机会，可以解释EH患者出现动脉粥样硬化性血管病变的高危险性[5]。这也许是EH患者易合并冠心病和脑卒中的一个发病机制。
EH患者出现血浆GMP-140和vWF含量增加的可能机制有：(1)血压高时出现湍流和切应力改变等血流动力学因素的变化，使得血管内皮细胞外形变长、簇集及细胞内骨架重新排列而造成血管内皮细胞受损，同时也有使血小板活化功能增加的作用。(2)高血压时超氧化物歧化酶(SOD)下降、过氧化脂质(LPO)上升，自由基促使血管内皮细胞受损，刺激胞质内亚细胞器Weibel-Palade小体释放vWF入血，并刺激血小板膜使之活化[6]。(3)血压高时，血小板内基础钙水平增加并参与到血小板活化的多个环节[7]。在血管内皮细胞受损后，通过vWF的桥联作用促使内皮下腔原与血小板膜糖蛋白Ib结合，使血小板发生形态变化，释放其颗粒内容物，包括GMP-140，又进一步促进血小板的粘附和聚集。
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非洛地平缓释片是一种长效双氢吡啶类CCB。我们选用非洛地平缓释片治疗56例EHⅡ病人，不仅血压得到良好控制，副作用少，还发现能降低血浆GMP-140和vWF的含量，说明非洛地平缓释片能抑制血小板活性并有保护血管内皮细胞的作用，可能有助于预防血栓形成。可能的机制是：(1)血压控制后，血流平稳，对血管内皮细胞和血小板的刺激减小。(2)CCB有抑制钙通道的作用[3]，降低血小板内钙浓度和血管内皮细胞内钙浓度，从而抑制血小板活性和保护血管内皮细胞。(3)CCB能使SOD活性升高和LPO降低[8]，减小自由基的影响。(4)CCB通过抑制花生四烯酸代谢，减少血栓烷A2生成来实现对血小板功能的抑制作用[3]和对血管内皮细胞的影响。
总之，EH患者存在血小板高度活化和血管内皮细胞受损的现象，两者可能会促使动脉粥样硬化和血栓形成。CCB在降压的同时有抑制血小板活性和保护血管内皮细胞的作用，可能有助于防止EH患者合并心脑血管病的发生。
, http://www.100md.com
(本课题得到我院心血管科全体医务人员和信息科王国强主任医师大力支持，特此志谢)■
本课题受广东省卫生厅科研基金资助(基金编号：A1997455)
参考文献：
[1]阮健，赵相印，李清朗，等.血小板α颗粒膜蛋白140在治疗急性心肌梗塞的动态监测.中华内科杂志，1995，34(4)：253.
[2]宋玉强，邹宏丽，韩仲岩.脑血管病患者血小板α颗粒膜蛋白140的变化及临床意义.中风与神经疾病杂志，1997，14(3)：149.
[3]Rybak MEM,Renzulli LA. Effect of calcium channel blockers on platel et GP Ⅱb/Ⅲa as a calcium channel in liposomes:comparison with effects on the intact platelet. Thromb Haemost,1992,67:131.
, 百拇医药
[4]Lip GY,Blann A.von Willebrand factor:a marker of endothelial dysfun ction in vascular disorders? Cardiovasc Res,1997,34(2):255.
[5]Lip GY,Blann AD,Zarifis J,et al. Soluble adhesion molecule P-selectin and endothelial dysfunction in essential hypertension:implications for ather ogenesis? a preliminary report. J Hypertens,1995,13(12 pt 2):1674.
[6]韩崇旭，李锦堂，韩月玲，等. 血小板GMP-140、vWF、SOD、LPO与高血压病关系的研究. 综合临床医学，1997，13(6)：503.
[7]戴田娥，孙明，周宏研，等. 高血压病患者血小板活化状态和纤溶活性的变化.中华内科杂志，1998，37(5)：302.
[8]丁宝芬，张文，陈靑，等. 钙通道阻滞剂对高血 压冠心病脂质过氧化反应的抑制作用. 江苏医药，1995，21(1)：45., 百拇医药