缺血性脑卒中患者凝血酶原基因3′-UTG20210A 变异频度的研究
作者：常建华 张广森
单位：常建华(第二附属医院血液研究室 长沙 410011)；张广森(第二附属医院血液研究室 长沙 410011)
关键词：脑血栓与血栓形成；脑缺血；凝血酶原；基因；G202；10A突变；中国；人群
湖南医科大学学报000112 摘 要：目的：了解FⅡ基因3′-UTG20210A变异在中国人 的分布频率及在脑血栓病人中是否具有突变“优势”，试图证明该突变点是否与动脉血栓形 成相关。方法：通过小规模的“群体-对照”研究，应用聚合酶链式反应限制性酶切分析方 法，调查了49例首次发作缺血性脑卒中患者及46例无血栓病史健康对照者的FⅡG20210A变异 。结果：病人及健康对照均为FⅡG20210G纯合子，未发现任何FⅡG20210A变异者。结论：46 例汉族正常人及49例缺血性脑卒中患者中不存在FⅡ3′-UTG20210A变异；FⅡG20210A变异 不足以作为中国人种血栓形成的危险因素。
, http://www.100md.com
分类号：R743.33 Q754 文献标识码：A
文章编号：1000-5625(2000)01-0036-03
Frequency of prothrombin gene G20210A variant in the 3′- untranslated
region in Chinese people with ischemic stroke
CHANG Jian-hua, ZHANG Guang-sen
The Second Affiliated Hospital, Hunan Medical University(Changsha 410011)
Abstract：Objective: To ascertain the frequency of prothrombi n(FⅡ) gene 3′-untranslated region(3′-UT) G20210A variant and to explore whe ther this mutation is related to arterial thrombosis in Chinese people. Methods: We studied 49 patients with thrombosis and 46 healthy Chinese persons. The pati ents had a first ischemic stroke. The G20210A mutant allele of the prothrombin g ene in all blood specimens was investigated by DNA extraction, polymerase chain reaction amplification, Hind Ⅲ digestion and polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). Results: The patients and nromal control subjects were all homozygous fo r the normal G20210G allele, and there was no any FⅡ G20210A variant. Conclusio n: Factor Ⅱ gene 3′-UT G20210A mutant allele is absent in Chinese patients wi th iscehmic stroke and normal subjects; its mutation may not be a major risk fac tor for thrombogenesis in Chinese people.
, 百拇医药
Key words：cerebral embolism and thrombosis;cerebral;prothrombin;gene;G20210A mutation;China;ethnic group▲
凝血酶原即凝血因子Ⅱ，是凝血酶的前体蛋白，对 于机体促凝作用及抗凝作用的平衡有着重要作用。1996年，荷兰Poort等[1]首次 报道在凝血酶原基因3′-端非翻译区的第20210位核苷酸G→A(FⅡG20210A)的突变与血浆凝 血酶原水平增高有关，并伴有易发静脉血栓的风险。随后，欧美几个研究组的研究结果认为 该基因突变不仅是静脉血栓，而且也是动脉血栓形成的独立危险因子。Zivelin等[2 ]发现FⅡG20210A变异在欧美人群中，尤其在白种人中发生率较高，提示该基因突变是一 种“单一群体”效应，其分布与人种及地理区域有关。我国目前尚无此类报道。本研究通过 分析部分脑血栓形成病人及正常人的FⅡG20210A变异，以了解该种变异在中国人中的分布频 率并试图确定该突变点与脑血栓病发病之间的关系。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 研究对象 脑血栓形成组：选择1998年10月～1999年4月在我院住院 的脑梗塞及短暂性脑缺血发作(TIA)患者49例；其中男26例，女23例，年龄44～85(平均65. 05±10.18)岁。排除糖尿病，严重肝肾机能损害和心肌梗死、手术及外伤史等。患者均 经神经内科专科医师通过临床表现、头颅CT扫描及脑血管超声检查明确诊断。正常人组：选 择门诊体检者中无心、脑及外周动静脉血栓病史的健康个体46人；男20人，女26人，年龄45 ～78(平均58.18±8.11)岁。
1.2 DNA制备 按常规经蛋白酶消化与酚，氯仿抽提DNA。
1.3 PCR引物 由上海Sangon公司合成。正义引物：5′-TCTAGAAACAGTTGC CTGGC-3′(nt 19889-19908)；反义引物：5′-ATAGCACTGGGAGCATTGAAGC-3′(nt 20233 -20212)。
, 百拇医药
1.4 PCR反应体系 dNTP mix 4μl(终浓度0.2mM)，10×Buffer 5 μl，MgCl2 4μl(终浓度1.5mM)，Taq酶0.5μl(2U)，正义引物0.5μl(0.5 μmol.L-1)，反义引物0.5μl(0.5μmol.L-1)，DNA模板10μl(20 μg)ddH2O补至终体积50μl。使用美国PE-2400型PCR扩增仪，95℃预变性5min，9 4℃变性1min，58℃退火1min，72℃延伸2min。重复32个循环后，72℃再延伸7min ，PCR产物冷却至4℃保存。取扩增产物作1.5%琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭(EB)染色，核定P CR产物片段的大小。
1.5 限制性内切酶消化 PCR产物10μl，10×Hind Ⅲ Buffer 2μl， HindⅢ限制性内切酶0.5μl(5U)，无菌去离子水补充至终体积20μl。置37℃水浴，分 别孵育2h,5h和10h，以最大限度地保证产生酶切效果，排除可能出现的假阴性结果。
, 百拇医药
1.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 用8%非变性胶在100V恒压电泳2h，结果 经银染后照相保存。
1.7 PCR产物核苷酸序列测定 为证实PCR产物所包含的HindⅢ酶切位点所 含核苷酸序列的正确性，随机选择一例经PCR扩增，HindⅢ酶切消化的DNA作模板，在200 μl体系中二次扩增，按常规方法从8%聚丙烯酰胺凝胶中回收345bp的DNA片段，用该DNA片 段及正义引物，在Taq Dyedeoxy Termintor Cycles测序盒提供的反应体系中进行测序反应 ，用ABI公司产377型自动测序仪完成电泳及序列分析，并打印结果。
2 结 果
2.1 PCR产物鉴定 95例正常人及缺血性脑卒中患者的DNA均扩增出一条345 bp DNA片段，与预期的片段大小相符。
2.2 HindⅢ消化PCR产物后结果判定 作为G20210A突变或无突变者，其区 别标准如下：①正常(无突变基因者G/G)，即消化前后PCR产物电泳带不改变，只有345bp 一条带；②基因突变杂合子(G/A)，即HindⅢ消化后PCR产物电泳出现2条DNA带，除原有345 bp处一条带以外，在322bp处亦有一条带。③基因突变纯合子(A/A)，即HindⅢ消化后PC R产物电泳只在322bp处有一条带，原345bp处的DNA带消失。
, 百拇医药
2.3 FⅡG 20210A的突变频率 49例脑血栓形成组及46例正常人的PCR扩增 产物，经HindⅢ消化后作聚丙烯酰 胺凝胶电泳，所有标本均只出现一条345bp DNA带型，即G20210G(正常无突变者)；未检出 1例G20210A突变基因，说明本组病例及正常人FⅡG20210A突变频率为0。
2.4 PCR产物测序结果 在345bp DNA片段的第310测序位点(相当于FⅡ基 因3′-UT20210位点)处的核苷酸为“G”而非“A”，证实该等位基因不存在“G”→“A” 突变，故不会构成HindⅢ切割所要求的核苷酸序列(-A/AGCTT)(附图)。
附图 PCR产物直接测序图
箭头示FⅡ基因3′-UT20210位点处 的核苷酸为“G”，而非“A”，不能成HindⅢ酶切位点(-A/AGCTT)
, 百拇医药
Fig. Direct sequencing of the PCR products
3 讨 论
FⅡ3′-UTG20210A变异是近2年鉴定的与血栓形成相关新的遗传危险因子。1996年，荷兰人 Poort等[1]应用人工合成引物直接测序的方法[3]，检测凝血酶原基因 的所有14个外显子及5′-和3′-端非翻译区，发现凝血酶原基因3′-端非翻译区的第202 10核苷酸位点G→A的替换与血浆凝血酶原水平增高有关，且可能是静脉血栓形成的危险因素 之一。该突变是否与动脉血栓形成有关，文献报告结果仍不一致。一般而言，患有遗传性静 脉血栓形成倾向的病人所具备的危险因素并不都适用于动脉血栓形成。Rosendaal[4 ] 等研究了79名患急性心肌梗死的年青妇女，其携带FⅡG20210A突变基因发生率较高(5%)， 但患者往往同时存在另一种主要的心血管危险因素，如吸烟，或伴有一种或一种以上的代谢 性危险因素(肥胖、高血脂症、糖尿病)。说明在青年妇女心肌梗死的发生中FⅡG20210A基因 突变与其他危险因素相互作用并具有协同作用。Corral[5]等研究了101位冠心病( CHD)患者，104位急性脑血管病(CVD)患者及82位深静脉血栓(DVT)患者的FⅡG20210A变异， 发现该突变基因仅与DVT有关，而与CHD及CVD无关，即认为它并非动脉血栓的主要发 病因素。Longstreth[6]等研究了106例动脉血栓形成患者及391例正常人，显示实 验组脑血栓患者及心肌梗死患者与正常人的FⅡG20210A检出率差异无显著性(分别为1.9%和 1.6%)。本研究在49例脑血栓及TIA患者和46例正常人中均未检出一例FⅡG20210A突变基因 。笔者将所有标本的PCR产物用5U浓度的HindⅢ限制性内切酶分别消化2h,5h和10h三 个阶段，酶切产物行聚丙烯酰胺凝胶电泳，均未发现322bp的DNA片段。上述结果说明所有 标本不存在HindⅢ切割位点(-A/AGCTT)，亦证实该序列为-G/AGCTT，未发生“G”→“A” 的突变。提示FⅡG20210A突变基因可能在中国人种中发生率极低，不足以构成血栓性疾病的 独立危险因素。
, 百拇医药
Zivelin等[2]人的资料显示，FⅡG20210A突变基因杂合子发生率白种人为1%～6% ，而在非白种人群中，该等位基因杂合子的发生率非常罕见，甚至缺如，认为该基因变异为 单一遗传起源。Arruda[7]认为G20210A突变基因在美洲印地安人中罕见。有报道 在40位索马里人中未发现该突变基因(待发表)。Rosendaal[8]等亦 报道：在 有非洲人种起源的300名美国黑人、巴西人及在以色列的埃塞俄比亚犹太人中只有2人携带该 基因，G20210A发生频率仅为0.67%；而在103位有亚洲人遗传背景的美洲印地安人及巴西亚 马逊地区的人群中，分布频率为0。Franco[9]调查了420名白人、非洲黑人、巴 西黑人、亚洲人及美洲印地安人，结果只在120名白人中发现2例FⅡG20210A基因携带者，分 布频率为1.6%，而在黑人、亚洲人及美洲印地安人中该基因缺如。上述资料可见，FⅡG202 10A变异似乎仅见于白种人，其他人种的发生率极低。
, http://www.100md.com
本研究结果显示，在有中国汉族人遗传背景的49例脑血栓病患者及46例正常人中，FⅡG2021 0A 的发生率为0%，提示FⅡG20210A突变存在着人种及地域差异。既然在正常人群中基本不存在 该基因变异位点，推测其与血栓性疾病之间的联系可能并不明显。研究有待扩大分析的样本 量，方能更精确地界定FⅡG20210A变异的群体中的发生率，明确其与血栓性疾病发生的联系 。本课题的深入研究，对于了解在人种起源迁移过程中基因变化的多样性，可望能提供有价 值的资料。
基金项目：部分受国家自然科学基金重点项目资助(39890180)
作者简介：常建华(1965-)，男，主治医师，本院血液科硕士研究生，现在桂林医学院附属医院血液科工作
参考文献：
[1]Poort SR, Rosendaal FR. Reitsma PH, et al. A common genetic variation in the 3′-untranslated region of the prothrombin gene is ass ociated with elevated plasma prothrombin levels and an increase in venous thromb osis[J]. Blood, 1996,88:3698-3703.
, http://www.100md.com
[2]Zivelin A, Rosenberg N, Faier S, et al. A single genetic origin for t he common prothrombotic G20210A polymorphism in the prothrombin gene[J]. Blood , 1998,92:1119-1124.
[3]Poort SR, Michiels JJ, Reitsma PH. Homozygosity for a novel missense muta tion in the prothrombin gene causing a severe bleeding disorder[J]. Thromb Hae most, 1994,72:819-824.
[4]Rosendaal FR, Siscovicr DS, Schwartx SM, et al. A common prothrombin variant(20210G to A) increase the risk of myocardial infarction in young women [J]. Blood, 1997,90(5):147-1750.
, 百拇医药
[5]Corral J, Gonzalez CR, Lozano ML, et al. The venous thrombosis risk f actor 20210A allele of the prothrombin gene is not a major risk factor for arter ial thrombotic disease[J]. B J Haematol, 1997,99:304-307.
[6]Longstreth WT, Rosendaal FR, Siscovick DS, et al. Risk of stroke in y oung women and two prothrombotic mutations: Factor V leiden and prothrombin gene variant(G20210A)[J]. Stroke, 1998,29:577-580.
[7]Arruda VR, Annichino BJM, Goncalves MS, et al. Prevalence of the prot hrombin gene variant(nt 20210A) in venous thrombosis and arterial disease[J]. Thromb Haemost, 1997,78:1430-1433.
, 百拇医药
[8]Rosendaal FR, Doggen CJM, Zivelin A, et al. Geographic distribution o f the 20210G to A prothrombin variant[J]. Thromb Haemost, 1998,79:706-708.
[9]Franco RF, Elion J, Tavella MH, et al. Heterogeneous distributi on of the 20210G→A prothrombin and 677 C→T methylenetetrahydrofolate reductase mutations in different human populations: Relevance for vascular disease risk[J]. Blood, 1997,90:3131a(abstr).
收稿日期：1999-11-18, 百拇医药
单位：常建华(第二附属医院血液研究室 长沙 410011)；张广森(第二附属医院血液研究室 长沙 410011)
关键词：脑血栓与血栓形成；脑缺血；凝血酶原；基因；G202；10A突变；中国；人群
湖南医科大学学报000112 摘 要：目的：了解FⅡ基因3′-UTG20210A变异在中国人 的分布频率及在脑血栓病人中是否具有突变“优势”，试图证明该突变点是否与动脉血栓形 成相关。方法：通过小规模的“群体-对照”研究，应用聚合酶链式反应限制性酶切分析方 法，调查了49例首次发作缺血性脑卒中患者及46例无血栓病史健康对照者的FⅡG20210A变异 。结果：病人及健康对照均为FⅡG20210G纯合子，未发现任何FⅡG20210A变异者。结论：46 例汉族正常人及49例缺血性脑卒中患者中不存在FⅡ3′-UTG20210A变异；FⅡG20210A变异 不足以作为中国人种血栓形成的危险因素。
, http://www.100md.com
分类号：R743.33 Q754 文献标识码：A
文章编号：1000-5625(2000)01-0036-03
Frequency of prothrombin gene G20210A variant in the 3′- untranslated
region in Chinese people with ischemic stroke
CHANG Jian-hua, ZHANG Guang-sen
The Second Affiliated Hospital, Hunan Medical University(Changsha 410011)
Abstract：Objective: To ascertain the frequency of prothrombi n(FⅡ) gene 3′-untranslated region(3′-UT) G20210A variant and to explore whe ther this mutation is related to arterial thrombosis in Chinese people. Methods: We studied 49 patients with thrombosis and 46 healthy Chinese persons. The pati ents had a first ischemic stroke. The G20210A mutant allele of the prothrombin g ene in all blood specimens was investigated by DNA extraction, polymerase chain reaction amplification, Hind Ⅲ digestion and polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). Results: The patients and nromal control subjects were all homozygous fo r the normal G20210G allele, and there was no any FⅡ G20210A variant. Conclusio n: Factor Ⅱ gene 3′-UT G20210A mutant allele is absent in Chinese patients wi th iscehmic stroke and normal subjects; its mutation may not be a major risk fac tor for thrombogenesis in Chinese people.
, 百拇医药
Key words：cerebral embolism and thrombosis;cerebral;prothrombin;gene;G20210A mutation;China;ethnic group▲
凝血酶原即凝血因子Ⅱ，是凝血酶的前体蛋白，对 于机体促凝作用及抗凝作用的平衡有着重要作用。1996年，荷兰Poort等[1]首次 报道在凝血酶原基因3′-端非翻译区的第20210位核苷酸G→A(FⅡG20210A)的突变与血浆凝 血酶原水平增高有关，并伴有易发静脉血栓的风险。随后，欧美几个研究组的研究结果认为 该基因突变不仅是静脉血栓，而且也是动脉血栓形成的独立危险因子。Zivelin等[2 ]发现FⅡG20210A变异在欧美人群中，尤其在白种人中发生率较高，提示该基因突变是一 种“单一群体”效应，其分布与人种及地理区域有关。我国目前尚无此类报道。本研究通过 分析部分脑血栓形成病人及正常人的FⅡG20210A变异，以了解该种变异在中国人中的分布频 率并试图确定该突变点与脑血栓病发病之间的关系。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 研究对象 脑血栓形成组：选择1998年10月～1999年4月在我院住院 的脑梗塞及短暂性脑缺血发作(TIA)患者49例；其中男26例，女23例，年龄44～85(平均65. 05±10.18)岁。排除糖尿病，严重肝肾机能损害和心肌梗死、手术及外伤史等。患者均 经神经内科专科医师通过临床表现、头颅CT扫描及脑血管超声检查明确诊断。正常人组：选 择门诊体检者中无心、脑及外周动静脉血栓病史的健康个体46人；男20人，女26人，年龄45 ～78(平均58.18±8.11)岁。
1.2 DNA制备 按常规经蛋白酶消化与酚，氯仿抽提DNA。
1.3 PCR引物 由上海Sangon公司合成。正义引物：5′-TCTAGAAACAGTTGC CTGGC-3′(nt 19889-19908)；反义引物：5′-ATAGCACTGGGAGCATTGAAGC-3′(nt 20233 -20212)。
, 百拇医药
1.4 PCR反应体系 dNTP mix 4μl(终浓度0.2mM)，10×Buffer 5 μl，MgCl2 4μl(终浓度1.5mM)，Taq酶0.5μl(2U)，正义引物0.5μl(0.5 μmol.L-1)，反义引物0.5μl(0.5μmol.L-1)，DNA模板10μl(20 μg)ddH2O补至终体积50μl。使用美国PE-2400型PCR扩增仪，95℃预变性5min，9 4℃变性1min，58℃退火1min，72℃延伸2min。重复32个循环后，72℃再延伸7min ，PCR产物冷却至4℃保存。取扩增产物作1.5%琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭(EB)染色，核定P CR产物片段的大小。
1.5 限制性内切酶消化 PCR产物10μl，10×Hind Ⅲ Buffer 2μl， HindⅢ限制性内切酶0.5μl(5U)，无菌去离子水补充至终体积20μl。置37℃水浴，分 别孵育2h,5h和10h，以最大限度地保证产生酶切效果，排除可能出现的假阴性结果。
, 百拇医药
1.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 用8%非变性胶在100V恒压电泳2h，结果 经银染后照相保存。
1.7 PCR产物核苷酸序列测定 为证实PCR产物所包含的HindⅢ酶切位点所 含核苷酸序列的正确性，随机选择一例经PCR扩增，HindⅢ酶切消化的DNA作模板，在200 μl体系中二次扩增，按常规方法从8%聚丙烯酰胺凝胶中回收345bp的DNA片段，用该DNA片 段及正义引物，在Taq Dyedeoxy Termintor Cycles测序盒提供的反应体系中进行测序反应 ，用ABI公司产377型自动测序仪完成电泳及序列分析，并打印结果。
2 结 果
2.1 PCR产物鉴定 95例正常人及缺血性脑卒中患者的DNA均扩增出一条345 bp DNA片段，与预期的片段大小相符。
2.2 HindⅢ消化PCR产物后结果判定 作为G20210A突变或无突变者，其区 别标准如下：①正常(无突变基因者G/G)，即消化前后PCR产物电泳带不改变，只有345bp 一条带；②基因突变杂合子(G/A)，即HindⅢ消化后PCR产物电泳出现2条DNA带，除原有345 bp处一条带以外，在322bp处亦有一条带。③基因突变纯合子(A/A)，即HindⅢ消化后PC R产物电泳只在322bp处有一条带，原345bp处的DNA带消失。
, 百拇医药
2.3 FⅡG 20210A的突变频率 49例脑血栓形成组及46例正常人的PCR扩增 产物，经HindⅢ消化后作聚丙烯酰 胺凝胶电泳，所有标本均只出现一条345bp DNA带型，即G20210G(正常无突变者)；未检出 1例G20210A突变基因，说明本组病例及正常人FⅡG20210A突变频率为0。
2.4 PCR产物测序结果 在345bp DNA片段的第310测序位点(相当于FⅡ基 因3′-UT20210位点)处的核苷酸为“G”而非“A”，证实该等位基因不存在“G”→“A” 突变，故不会构成HindⅢ切割所要求的核苷酸序列(-A/AGCTT)(附图)。
附图 PCR产物直接测序图
箭头示FⅡ基因3′-UT20210位点处 的核苷酸为“G”，而非“A”，不能成HindⅢ酶切位点(-A/AGCTT)
, 百拇医药
Fig. Direct sequencing of the PCR products
3 讨 论
FⅡ3′-UTG20210A变异是近2年鉴定的与血栓形成相关新的遗传危险因子。1996年，荷兰人 Poort等[1]应用人工合成引物直接测序的方法[3]，检测凝血酶原基因 的所有14个外显子及5′-和3′-端非翻译区，发现凝血酶原基因3′-端非翻译区的第202 10核苷酸位点G→A的替换与血浆凝血酶原水平增高有关，且可能是静脉血栓形成的危险因素 之一。该突变是否与动脉血栓形成有关，文献报告结果仍不一致。一般而言，患有遗传性静 脉血栓形成倾向的病人所具备的危险因素并不都适用于动脉血栓形成。Rosendaal[4 ] 等研究了79名患急性心肌梗死的年青妇女，其携带FⅡG20210A突变基因发生率较高(5%)， 但患者往往同时存在另一种主要的心血管危险因素，如吸烟，或伴有一种或一种以上的代谢 性危险因素(肥胖、高血脂症、糖尿病)。说明在青年妇女心肌梗死的发生中FⅡG20210A基因 突变与其他危险因素相互作用并具有协同作用。Corral[5]等研究了101位冠心病( CHD)患者，104位急性脑血管病(CVD)患者及82位深静脉血栓(DVT)患者的FⅡG20210A变异， 发现该突变基因仅与DVT有关，而与CHD及CVD无关，即认为它并非动脉血栓的主要发 病因素。Longstreth[6]等研究了106例动脉血栓形成患者及391例正常人，显示实 验组脑血栓患者及心肌梗死患者与正常人的FⅡG20210A检出率差异无显著性(分别为1.9%和 1.6%)。本研究在49例脑血栓及TIA患者和46例正常人中均未检出一例FⅡG20210A突变基因 。笔者将所有标本的PCR产物用5U浓度的HindⅢ限制性内切酶分别消化2h,5h和10h三 个阶段，酶切产物行聚丙烯酰胺凝胶电泳，均未发现322bp的DNA片段。上述结果说明所有 标本不存在HindⅢ切割位点(-A/AGCTT)，亦证实该序列为-G/AGCTT，未发生“G”→“A” 的突变。提示FⅡG20210A突变基因可能在中国人种中发生率极低，不足以构成血栓性疾病的 独立危险因素。
, 百拇医药
Zivelin等[2]人的资料显示，FⅡG20210A突变基因杂合子发生率白种人为1%～6% ，而在非白种人群中，该等位基因杂合子的发生率非常罕见，甚至缺如，认为该基因变异为 单一遗传起源。Arruda[7]认为G20210A突变基因在美洲印地安人中罕见。有报道 在40位索马里人中未发现该突变基因(待发表)。Rosendaal[8]等亦 报道：在 有非洲人种起源的300名美国黑人、巴西人及在以色列的埃塞俄比亚犹太人中只有2人携带该 基因，G20210A发生频率仅为0.67%；而在103位有亚洲人遗传背景的美洲印地安人及巴西亚 马逊地区的人群中，分布频率为0。Franco[9]调查了420名白人、非洲黑人、巴 西黑人、亚洲人及美洲印地安人，结果只在120名白人中发现2例FⅡG20210A基因携带者，分 布频率为1.6%，而在黑人、亚洲人及美洲印地安人中该基因缺如。上述资料可见，FⅡG202 10A变异似乎仅见于白种人，其他人种的发生率极低。
, http://www.100md.com
本研究结果显示，在有中国汉族人遗传背景的49例脑血栓病患者及46例正常人中，FⅡG2021 0A 的发生率为0%，提示FⅡG20210A突变存在着人种及地域差异。既然在正常人群中基本不存在 该基因变异位点，推测其与血栓性疾病之间的联系可能并不明显。研究有待扩大分析的样本 量，方能更精确地界定FⅡG20210A变异的群体中的发生率，明确其与血栓性疾病发生的联系 。本课题的深入研究，对于了解在人种起源迁移过程中基因变化的多样性，可望能提供有价 值的资料。
基金项目：部分受国家自然科学基金重点项目资助(39890180)
作者简介：常建华(1965-)，男，主治医师，本院血液科硕士研究生，现在桂林医学院附属医院血液科工作
参考文献：
[1]Poort SR, Rosendaal FR. Reitsma PH, et al. A common genetic variation in the 3′-untranslated region of the prothrombin gene is ass ociated with elevated plasma prothrombin levels and an increase in venous thromb osis[J]. Blood, 1996,88:3698-3703.
, http://www.100md.com
[2]Zivelin A, Rosenberg N, Faier S, et al. A single genetic origin for t he common prothrombotic G20210A polymorphism in the prothrombin gene[J]. Blood , 1998,92:1119-1124.
[3]Poort SR, Michiels JJ, Reitsma PH. Homozygosity for a novel missense muta tion in the prothrombin gene causing a severe bleeding disorder[J]. Thromb Hae most, 1994,72:819-824.
[4]Rosendaal FR, Siscovicr DS, Schwartx SM, et al. A common prothrombin variant(20210G to A) increase the risk of myocardial infarction in young women [J]. Blood, 1997,90(5):147-1750.
, 百拇医药
[5]Corral J, Gonzalez CR, Lozano ML, et al. The venous thrombosis risk f actor 20210A allele of the prothrombin gene is not a major risk factor for arter ial thrombotic disease[J]. B J Haematol, 1997,99:304-307.
[6]Longstreth WT, Rosendaal FR, Siscovick DS, et al. Risk of stroke in y oung women and two prothrombotic mutations: Factor V leiden and prothrombin gene variant(G20210A)[J]. Stroke, 1998,29:577-580.
[7]Arruda VR, Annichino BJM, Goncalves MS, et al. Prevalence of the prot hrombin gene variant(nt 20210A) in venous thrombosis and arterial disease[J]. Thromb Haemost, 1997,78:1430-1433.
, 百拇医药
[8]Rosendaal FR, Doggen CJM, Zivelin A, et al. Geographic distribution o f the 20210G to A prothrombin variant[J]. Thromb Haemost, 1998,79:706-708.
[9]Franco RF, Elion J, Tavella MH, et al. Heterogeneous distributi on of the 20210G→A prothrombin and 677 C→T methylenetetrahydrofolate reductase mutations in different human populations: Relevance for vascular disease risk[J]. Blood, 1997,90:3131a(abstr).
收稿日期：1999-11-18, 百拇医药