小鼠生殖周期子宫、血生长抑素的变化
作者：高学勇 陈奕权 何为民
单位：高学勇(福建医科大学 组织学与胚胎学教研室,福州 350004); 陈奕权(福建医科大学 组织学与胚胎学教研室,福州 350004); 何为民(福建医科大学 组织学与胚胎学教研室,福州 350004)
关键词：生长抑素,血液；放射免疫法；生殖；子宫；小鼠
福建医科大学学报000109
摘要:目的 研究小鼠生殖周期子宫和血生长抑素的变化。方法 应用放射免疫方法检测小鼠生殖周期不同阶段子宫和血生长抑素的水平。结果 妊娠期子宫生长抑素明显下降，和间期比较，差异有显著性(P<0.05)；妊娠晚期和哺乳期血中生长抑素均明显升高，与间期比较，差异有显著性(P<0.05)。结论 小鼠妊娠期子宫生长抑素减少，妊娠晚期和哺乳期血中生长抑素增加。生殖周期子宫与血中生长抑素的变化不呈同步性。
, http://www.100md.com
中图分类号:R446.112;R392-33 文献标识码:A
文章编号:1000-2235(2000)01-0024-03
Changes on Somatostatin in Mouse Uterus and Blood during Genesial Cycle
GAO Xue-yong,CHEN Yi-quan,HE Wei-min
(Department of Histology and Embryology,Fujian Medical University,Fuzhou 350004,China)
ABSTRACT:Objective To study the changes of somatostatin in uterus and blood of mouse during genesial cycle.Methods The level of somatostatin was measured in uterus and blood of mouse during genesial cycle by radioimmunoassay.Results The level of somatostatin in uterus was significantly reduced during gestation,compared with interphase(P<0.05);the level of somatostatin in blood was significantly increased during gestation and lactation,compared with interphase(P<0.05).Conclusion The level of somatostatin in uterus of mouse was decreased during pregnancy.Somatostatin in blood was increased during gestation and lactation,the changes of somatostatin in uterus does not consistent with that in blood.
, 百拇医药
KEY WORDS:somatostatin,blood;radioimmunology mehtod;genesial;uterus;mouse
生长抑素是由14个氨基酸组成的环形多肽，应用放射免疫等技术证实该激素在体内分布十分广泛。其中下丘脑提取物含量最高，还存在于胰岛、胃肠粘膜等组织中。临床已开始运用生长抑素类似物治疗肿瘤和消化系统疾病，并取得一定效果[1]；同时，检测血中生长抑素水平变化，为某些疾病诊断和治疗提供帮助[2]。本文应用放射免疫技术研究小鼠生殖周期子宫和血生长抑素的水平变化，初步探讨生殖周期中不同生理状态下生长抑素水平变化的生物学意义。
1 材料与方法
1.1 材料 昆明种雌性成熟小鼠48只(福建医科大学动物中心提供)。雌性小鼠,9～11周龄，体重27～34 g，分为6组，每组8只: 间期组、动情期组、妊娠第7天组、妊娠第17天组、哺乳第7天组、哺乳第15天组。妊娠确定[3]: 将动情期或动情前期雌性小鼠当天傍晚与性成熟雄性小鼠一对一合笼，第2天早晨8点观察雌性小鼠阴道，发现阴栓者为妊娠首日。
, 百拇医药
1.2 试剂与仪器 抑肽酶(珠海丽珠公司产品)；生长抑素放免试剂盒(北京海科锐生物中心)；VC50-50W超声破碎仪(美国NBS公司)；高速低温离心机(美国BECKMAN公司)；SN-682放免γ计数器(中科院上海原子核研究所)；FJ-21010双道液闪计数器(国营262厂)。
1.3 检测方法 小鼠称重，10%氨基甲酸乙酯0.2～0.3 ml/只(1 mg/g体重)腹腔麻醉，摘取眼球，经眼眶留血1 ml于预冷的含抑肽酶(25 kIU/ml)10 μl及10% EDTA-Na2 15 μl的EPPENDORF管中,摇匀，低温离心，吸取血浆放置-20℃贮存待测。同时，剖腹剪取右侧子宫(妊娠组剥离胚胎与胎盘组织)，称重后于煮沸的生理盐水2 ml中煮沸3 min，冷却，加入1 mol/L冰醋酸0.5 ml应用超声破碎仪制成匀浆；NaOH中和低温离心取上清液，放置-20℃贮存待测。抽提血浆及样本的放免测定,按药盒说明书。
1.4 统计方法 检测结果经统计学处理，组间t检验，以P<0.05为有显著性意义。
, 百拇医药
2 结 果
与间期子宫生长抑素的水平比较，在妊娠期(第7,17天)小鼠子宫生长抑素的水平明显下降(P<0.05有显著性差异；与间期血中生长抑素的水平比较，妊娠晚期(第17天)和哺乳期(第7,15天)小鼠血中生长抑素的水平明显升高(P<0.05，附表)。
附表 小鼠血、子宫生长抑素含量 分 组
血
(pg/ml)
子宫
(pg/mg)
间期
50.479±12.820
, http://www.100md.com 2.225±1.039
动情期
47.704±17.735
2.279±0.802
妊娠
第7天
52.443±29.306
0.864±0.265*
第17天
104.990±29.230*
0.520±0.160*
, http://www.100md.com
哺乳
第7天
129.413±39.780*
1.663±0.389
第15天
111.552±21.175*
2.357±1.363
与间期组比较,*:P<0.05.
3 讨 论
生长抑素(somatostatin,SS)是一种脑肠肽、广泛存在于中枢神经系统和胃肠道组织中，属于弥散性神经内分泌系统，有神经递质或激素的作用。研究表明,生长抑素几乎抑制体内所有的内、外分泌活动，有明显的旁分泌调节作用；而且，也抑制体内许多细胞的增殖活性[4]。SS最初是从羊下丘脑中分离出来的一种14环肽。一般认为，下丘脑SS含量很高，大脑皮质、中脑含量也相当丰富，小脑SS含量很少；在神经细胞的胞体和末梢中均可见SS分布，且在神经末梢含量很高[5]。在胃肠、胰岛组织中含有丰富SS阳性细胞(D细胞)，在旁分泌调节中起相当重要的作用[6]。
, 百拇医药
本研究生殖周期中雌性小鼠血SS浓度变化，显示在妊娠晚期、哺乳期SS水平升高。妊娠期胃酸分泌减少[7]，胃酸由胃粘膜上皮壁细胞分泌的，多种物质可调节壁细胞的泌酸功能，以迷走神经分布于胃壁内节后纤维释放乙酰胆碱、胃泌素等为主，它们通过壁细胞上各自的受体而发挥功效[6]。妊娠期机体处于相对静息状态，副交感神经活动加强，内脏运动(副交感)纤维是迷走神经的重要成分，控制消化系统的活动，包括腺体的分泌活动。迷走神经兴奋可提高血中SS水平[10],同时，迷走神经兴奋有促进壁细胞分泌盐酸趋势，且局部低pH值有利D细胞分泌SS[6]。胃壁上D细胞可伸出长的基底突起，与附近的壁细胞相接触。D细胞的分泌活动具有明显的旁分泌性质，即所释放SS调节周围细胞的机能活动，如抑制G 细胞释放胃泌素降低壁细胞胃酸分泌。妊娠期胃酸分泌减少，可能与D细胞分泌大量SS有关。
在妊娠期，黄体、胎盘由于分泌大量雌激素及孕激素，对下丘脑及垂体的负反馈作用，使促性腺激素(FSH、LH)分泌减少，低水平FSH、LH刺激促性腺激素释放激素(GnRH)的分泌，但SS可抑制下丘脑GnRH的释放[8]，因此分泌大量SS有利在FSH、LH 低水平下对下丘脑内GnRH 的调控。哺乳期母体乳头受吮吸刺激，可引起迷走神经兴奋[11]。总之，机体主要通过胃肠、下丘脑分泌SS影响血SS 水平。
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对子宫SS 的研究报道较少。本研究应用放免法测定子宫SS，含量很少，其中妊娠期含量最少，子宫SS 与血中SS平变化不一致。子宫存在SS 阳性纤维已有报道[9]，笔者应用免疫细胞化学法研究小鼠子宫SS阳性细胞，发现子宫固有层含SS 阳性细胞，形态圆形或卵圆形，子宫腺周围多见，在生殖周期各阶段均可观察到。SS 具有广泛抑制体内许多细胞的增殖活动[4]，妊娠期子宫体积增大，细胞增殖活跃，胎盘滋养层细胞大量增殖分化，因此，笔者认为子宫低水平SS 有利子宫生长和绒毛组织的发育。至于子宫内SS 来源有待进一步研究。
基金项目:福建省卫生厅青年基金资助项目(Q9731)
作者简介:高学勇，男，1966年1月生，讲师.
参考文献:
[1]Delpozo E.Clinical applications of somatostatin[J].Horm Res,1988;29:89
, 百拇医药
[2]张临洪,陶 冶,经 屏.脑白质疏松患者血浆生长抑素含量的变化[J].中华核医学杂志， 1997；17: 232
[3]钟品仁.哺乳类实验动物[M].北京: 人民卫生出版社， 1983: 181
[4]Toro MJ,Birnbaumer L,Redon MC,et al.Menchanism of action of somatostatin[J].Horm Res,1988;29:59
[5]Mivsoshi R,Kito S,Katagama S,et al.Somatostatin increases intracellular Ca2+ concentration in cultured rat hippocampus neurons[J].Brain Res,1989;489:361
, http://www.100md.com
[6]成令忠.组织学[M].第2版.北京: 人民卫生出版社,1992: 1097，1127
[7]乐 杰.妇产科学[M].第4版.北京: 人民卫生出版社， 1994: 44
[8]Chiodera P,Volpi R,Fatone M,et al.Inhibition by somatostatin of LH-RH-induced LH release in normal menstruating wonmen[J].Gynecol Obstet Invest,1986;22:17
[9]Happola O,Lakomy M,Majewski M,et al.Distribution of somatostatin and neuropeptide Y-immunoreactive nerve fibers in the porcine female reproductive system[J].Neurosci Lett,1991;122:273
[10]Lucey MR.Endogenous somatostatin and gut[J].Gut,1986;27:457
[11]Uvnas-Moberg K,Eriksson M,Blomquist LE,et al.Influence of sucking and feeding on insulin,gastrin,somatostatin and VIP levels in peripheral venous blood of lactation sons[J].Acta Physiol Scand,1984;121:31
收稿日期:1999-11-03, 百拇医药
单位：高学勇(福建医科大学 组织学与胚胎学教研室,福州 350004); 陈奕权(福建医科大学 组织学与胚胎学教研室,福州 350004); 何为民(福建医科大学 组织学与胚胎学教研室,福州 350004)
关键词：生长抑素,血液；放射免疫法；生殖；子宫；小鼠
福建医科大学学报000109
摘要:目的 研究小鼠生殖周期子宫和血生长抑素的变化。方法 应用放射免疫方法检测小鼠生殖周期不同阶段子宫和血生长抑素的水平。结果 妊娠期子宫生长抑素明显下降，和间期比较，差异有显著性(P<0.05)；妊娠晚期和哺乳期血中生长抑素均明显升高，与间期比较，差异有显著性(P<0.05)。结论 小鼠妊娠期子宫生长抑素减少，妊娠晚期和哺乳期血中生长抑素增加。生殖周期子宫与血中生长抑素的变化不呈同步性。
, http://www.100md.com
中图分类号:R446.112;R392-33 文献标识码:A
文章编号:1000-2235(2000)01-0024-03
Changes on Somatostatin in Mouse Uterus and Blood during Genesial Cycle
GAO Xue-yong,CHEN Yi-quan,HE Wei-min
(Department of Histology and Embryology,Fujian Medical University,Fuzhou 350004,China)
ABSTRACT:Objective To study the changes of somatostatin in uterus and blood of mouse during genesial cycle.Methods The level of somatostatin was measured in uterus and blood of mouse during genesial cycle by radioimmunoassay.Results The level of somatostatin in uterus was significantly reduced during gestation,compared with interphase(P<0.05);the level of somatostatin in blood was significantly increased during gestation and lactation,compared with interphase(P<0.05).Conclusion The level of somatostatin in uterus of mouse was decreased during pregnancy.Somatostatin in blood was increased during gestation and lactation,the changes of somatostatin in uterus does not consistent with that in blood.
, 百拇医药
KEY WORDS:somatostatin,blood;radioimmunology mehtod;genesial;uterus;mouse
生长抑素是由14个氨基酸组成的环形多肽，应用放射免疫等技术证实该激素在体内分布十分广泛。其中下丘脑提取物含量最高，还存在于胰岛、胃肠粘膜等组织中。临床已开始运用生长抑素类似物治疗肿瘤和消化系统疾病，并取得一定效果[1]；同时，检测血中生长抑素水平变化，为某些疾病诊断和治疗提供帮助[2]。本文应用放射免疫技术研究小鼠生殖周期子宫和血生长抑素的水平变化，初步探讨生殖周期中不同生理状态下生长抑素水平变化的生物学意义。
1 材料与方法
1.1 材料 昆明种雌性成熟小鼠48只(福建医科大学动物中心提供)。雌性小鼠,9～11周龄，体重27～34 g，分为6组，每组8只: 间期组、动情期组、妊娠第7天组、妊娠第17天组、哺乳第7天组、哺乳第15天组。妊娠确定[3]: 将动情期或动情前期雌性小鼠当天傍晚与性成熟雄性小鼠一对一合笼，第2天早晨8点观察雌性小鼠阴道，发现阴栓者为妊娠首日。
, 百拇医药
1.2 试剂与仪器 抑肽酶(珠海丽珠公司产品)；生长抑素放免试剂盒(北京海科锐生物中心)；VC50-50W超声破碎仪(美国NBS公司)；高速低温离心机(美国BECKMAN公司)；SN-682放免γ计数器(中科院上海原子核研究所)；FJ-21010双道液闪计数器(国营262厂)。
1.3 检测方法 小鼠称重，10%氨基甲酸乙酯0.2～0.3 ml/只(1 mg/g体重)腹腔麻醉，摘取眼球，经眼眶留血1 ml于预冷的含抑肽酶(25 kIU/ml)10 μl及10% EDTA-Na2 15 μl的EPPENDORF管中,摇匀，低温离心，吸取血浆放置-20℃贮存待测。同时，剖腹剪取右侧子宫(妊娠组剥离胚胎与胎盘组织)，称重后于煮沸的生理盐水2 ml中煮沸3 min，冷却，加入1 mol/L冰醋酸0.5 ml应用超声破碎仪制成匀浆；NaOH中和低温离心取上清液，放置-20℃贮存待测。抽提血浆及样本的放免测定,按药盒说明书。
1.4 统计方法 检测结果经统计学处理，组间t检验，以P<0.05为有显著性意义。
, 百拇医药
2 结 果
与间期子宫生长抑素的水平比较，在妊娠期(第7,17天)小鼠子宫生长抑素的水平明显下降(P<0.05有显著性差异；与间期血中生长抑素的水平比较，妊娠晚期(第17天)和哺乳期(第7,15天)小鼠血中生长抑素的水平明显升高(P<0.05，附表)。
附表 小鼠血、子宫生长抑素含量 分 组
血
(pg/ml)
子宫
(pg/mg)
间期
50.479±12.820
, http://www.100md.com 2.225±1.039
动情期
47.704±17.735
2.279±0.802
妊娠
第7天
52.443±29.306
0.864±0.265*
第17天
104.990±29.230*
0.520±0.160*
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哺乳
第7天
129.413±39.780*
1.663±0.389
第15天
111.552±21.175*
2.357±1.363
与间期组比较,*:P<0.05.
3 讨 论
生长抑素(somatostatin,SS)是一种脑肠肽、广泛存在于中枢神经系统和胃肠道组织中，属于弥散性神经内分泌系统，有神经递质或激素的作用。研究表明,生长抑素几乎抑制体内所有的内、外分泌活动，有明显的旁分泌调节作用；而且，也抑制体内许多细胞的增殖活性[4]。SS最初是从羊下丘脑中分离出来的一种14环肽。一般认为，下丘脑SS含量很高，大脑皮质、中脑含量也相当丰富，小脑SS含量很少；在神经细胞的胞体和末梢中均可见SS分布，且在神经末梢含量很高[5]。在胃肠、胰岛组织中含有丰富SS阳性细胞(D细胞)，在旁分泌调节中起相当重要的作用[6]。
, 百拇医药
本研究生殖周期中雌性小鼠血SS浓度变化，显示在妊娠晚期、哺乳期SS水平升高。妊娠期胃酸分泌减少[7]，胃酸由胃粘膜上皮壁细胞分泌的，多种物质可调节壁细胞的泌酸功能，以迷走神经分布于胃壁内节后纤维释放乙酰胆碱、胃泌素等为主，它们通过壁细胞上各自的受体而发挥功效[6]。妊娠期机体处于相对静息状态，副交感神经活动加强，内脏运动(副交感)纤维是迷走神经的重要成分，控制消化系统的活动，包括腺体的分泌活动。迷走神经兴奋可提高血中SS水平[10],同时，迷走神经兴奋有促进壁细胞分泌盐酸趋势，且局部低pH值有利D细胞分泌SS[6]。胃壁上D细胞可伸出长的基底突起，与附近的壁细胞相接触。D细胞的分泌活动具有明显的旁分泌性质，即所释放SS调节周围细胞的机能活动，如抑制G 细胞释放胃泌素降低壁细胞胃酸分泌。妊娠期胃酸分泌减少，可能与D细胞分泌大量SS有关。
在妊娠期，黄体、胎盘由于分泌大量雌激素及孕激素，对下丘脑及垂体的负反馈作用，使促性腺激素(FSH、LH)分泌减少，低水平FSH、LH刺激促性腺激素释放激素(GnRH)的分泌，但SS可抑制下丘脑GnRH的释放[8]，因此分泌大量SS有利在FSH、LH 低水平下对下丘脑内GnRH 的调控。哺乳期母体乳头受吮吸刺激，可引起迷走神经兴奋[11]。总之，机体主要通过胃肠、下丘脑分泌SS影响血SS 水平。
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对子宫SS 的研究报道较少。本研究应用放免法测定子宫SS，含量很少，其中妊娠期含量最少，子宫SS 与血中SS平变化不一致。子宫存在SS 阳性纤维已有报道[9]，笔者应用免疫细胞化学法研究小鼠子宫SS阳性细胞，发现子宫固有层含SS 阳性细胞，形态圆形或卵圆形，子宫腺周围多见，在生殖周期各阶段均可观察到。SS 具有广泛抑制体内许多细胞的增殖活动[4]，妊娠期子宫体积增大，细胞增殖活跃，胎盘滋养层细胞大量增殖分化，因此，笔者认为子宫低水平SS 有利子宫生长和绒毛组织的发育。至于子宫内SS 来源有待进一步研究。
基金项目:福建省卫生厅青年基金资助项目(Q9731)
作者简介:高学勇，男，1966年1月生，讲师.
参考文献:
[1]Delpozo E.Clinical applications of somatostatin[J].Horm Res,1988;29:89
, 百拇医药
[2]张临洪,陶 冶,经 屏.脑白质疏松患者血浆生长抑素含量的变化[J].中华核医学杂志， 1997；17: 232
[3]钟品仁.哺乳类实验动物[M].北京: 人民卫生出版社， 1983: 181
[4]Toro MJ,Birnbaumer L,Redon MC,et al.Menchanism of action of somatostatin[J].Horm Res,1988;29:59
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, http://www.100md.com
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[7]乐 杰.妇产科学[M].第4版.北京: 人民卫生出版社， 1994: 44
[8]Chiodera P,Volpi R,Fatone M,et al.Inhibition by somatostatin of LH-RH-induced LH release in normal menstruating wonmen[J].Gynecol Obstet Invest,1986;22:17
[9]Happola O,Lakomy M,Majewski M,et al.Distribution of somatostatin and neuropeptide Y-immunoreactive nerve fibers in the porcine female reproductive system[J].Neurosci Lett,1991;122:273
[10]Lucey MR.Endogenous somatostatin and gut[J].Gut,1986;27:457
[11]Uvnas-Moberg K,Eriksson M,Blomquist LE,et al.Influence of sucking and feeding on insulin,gastrin,somatostatin and VIP levels in peripheral venous blood of lactation sons[J].Acta Physiol Scand,1984;121:31
收稿日期:1999-11-03, 百拇医药