HPLC法测定复方甘草合剂中吗啡的含量
作者：赵永新 徐乃焕
单位：赵永新 徐乃焕(湖南怀化市第一人民医院 怀化 418000)
关键词：复方甘草合剂；吗啡；固相萃取；高效液相色谱法
西北药学杂志000104 摘要 采用固相萃取技术和反相高效液相色谱法测定复方甘草合剂中吗啡 含量：样品经PT-C18萃取小柱纯化后进样；Thim-pack CLC-ODS柱，流动相为甲醇 -水-醋酸(24∶72∶1)，含5mmol/L庚烷磺酸钠，检测波长为286nm。平均回收率为95.3% ，RSD为1.92%。
复方甘草合剂主要成分为甘草流浸膏、复方樟脑酊(添加氯化铵者又 称棕铵合剂〔1〕)。制剂规范中〔1，2〕对复方樟脑酊中吗啡尚未规定含 量检查。本文采用固相萃取-高效液相色谱法测定该制剂中吗啡的含量。
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1 仪器与试药
1.1 仪器 LC-10AD输液泵，SPD-10A紫外检测器(日本 岛津)；色谱工作站(大连江申分离科学技术公司)。
1.2 试药 吗啡对照品及庚烷磺酸钠(中国药品生物制品 检定所)；PT-C18预处理小柱(河北津杨滤材厂)；复方甘草合剂(自制)。
2 方法
2.1 色谱条件〔3〕 色谱柱为Shim-pack CLC-ODS(150mm×4.6mm，5μm)；流动相为甲醇-水-醋酸(24∶72 ∶1)，含5mmol/L庚烷磺酸钠；流速为1.0ml/min；AUFS为0.01；检测波长为286nm。
2.2 试液的配制 取吗啡对照品约1mg，精密称定，置于10ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度作对照品溶液 。
, 百拇医药
精密量取复方甘草合剂5ml，通过已经甲醇5ml和水5ml处理的PT-C18萃取柱，用10% 甲醇5ml清洗一次，再用70%甲醇4ml洗脱，收集于5ml量瓶中，加70%甲醇至刻度〔4〕 ，为样品溶液。
3 结果
3.1 线性关系 分别精密吸取对照品溶液2，5，10，15 ，2 0μl注入色谱系统，测定峰面积，以峰面积Y(×10-5)对进样量X(μg)作线性回归， 线性方程为Y＝30.77X+0.37(n＝5)，r＝0.9989。重复进样5次(20μl)，测定峰面积， RSD为1.17%。
3.2 回收率试验 在复方甘草合剂中加入其标示量80%～ 120%的吗啡，按“2.2项”作回收率试验，结果见图1、表1。
3.3 含量测定 取“2.2项”下样品溶液，进样20μl， 依法测定，结果见表2。
, 百拇医药
图1 复方甘草合剂中吗啡( a)HPLC谱图
表1 吗啡加样回收率试验(n＝5) 加入量
(μg)
回收量
(μg)
回 收率
(%)
平均回收率
(%)
240
498
94.7
, 百拇医药
270
548
98.5
300
550
93.9
(RSD＝1.92%)
330
563
94.4
360
615
95.2
, 百拇医药
表2 复方甘草合剂含量测定结果 批 号
吗啡(标示量%)
981115
96.3
981123
101.2
981216
95.7
990121
97.5
990129
99.1
, 百拇医药
4 讨论
复方甘草合剂为常用止咳祛痰药。中国药典对复方甘草片中的吗啡含量已明确规定控制标准 。复方甘草合剂亦应作相应的质量控制。建议《中国医院制剂规范》修订时，增加该制剂吗 啡含量测定，标准可定为标示量90%～110%。
参考文献
【1】 卫生部药政局编.中国医院制剂规范(西药制剂). 北京：中国医药科技出版社，1995：55
【2】 总后卫生部编.医疗单位制剂规范.北京：人民军 医出版社，1993：88
【3】 安登魁主编.药物分析.济南：济南出版社，1992 ：1267
【4】 王勇，曾洁.固相萃取技术-HPLC测定复方甘草片 中吗啡的含量.色谱，1998，16(3)：229
(收稿：1999-08-27), 百拇医药
单位：赵永新 徐乃焕(湖南怀化市第一人民医院 怀化 418000)
关键词：复方甘草合剂；吗啡；固相萃取；高效液相色谱法
西北药学杂志000104 摘要 采用固相萃取技术和反相高效液相色谱法测定复方甘草合剂中吗啡 含量：样品经PT-C18萃取小柱纯化后进样；Thim-pack CLC-ODS柱，流动相为甲醇 -水-醋酸(24∶72∶1)，含5mmol/L庚烷磺酸钠，检测波长为286nm。平均回收率为95.3% ，RSD为1.92%。
复方甘草合剂主要成分为甘草流浸膏、复方樟脑酊(添加氯化铵者又 称棕铵合剂〔1〕)。制剂规范中〔1，2〕对复方樟脑酊中吗啡尚未规定含 量检查。本文采用固相萃取-高效液相色谱法测定该制剂中吗啡的含量。
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1 仪器与试药
1.1 仪器 LC-10AD输液泵，SPD-10A紫外检测器(日本 岛津)；色谱工作站(大连江申分离科学技术公司)。
1.2 试药 吗啡对照品及庚烷磺酸钠(中国药品生物制品 检定所)；PT-C18预处理小柱(河北津杨滤材厂)；复方甘草合剂(自制)。
2 方法
2.1 色谱条件〔3〕 色谱柱为Shim-pack CLC-ODS(150mm×4.6mm，5μm)；流动相为甲醇-水-醋酸(24∶72 ∶1)，含5mmol/L庚烷磺酸钠；流速为1.0ml/min；AUFS为0.01；检测波长为286nm。
2.2 试液的配制 取吗啡对照品约1mg，精密称定，置于10ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度作对照品溶液 。
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精密量取复方甘草合剂5ml，通过已经甲醇5ml和水5ml处理的PT-C18萃取柱，用10% 甲醇5ml清洗一次，再用70%甲醇4ml洗脱，收集于5ml量瓶中，加70%甲醇至刻度〔4〕 ，为样品溶液。
3 结果
3.1 线性关系 分别精密吸取对照品溶液2，5，10，15 ，2 0μl注入色谱系统，测定峰面积，以峰面积Y(×10-5)对进样量X(μg)作线性回归， 线性方程为Y＝30.77X+0.37(n＝5)，r＝0.9989。重复进样5次(20μl)，测定峰面积， RSD为1.17%。
3.2 回收率试验 在复方甘草合剂中加入其标示量80%～ 120%的吗啡，按“2.2项”作回收率试验，结果见图1、表1。
3.3 含量测定 取“2.2项”下样品溶液，进样20μl， 依法测定，结果见表2。
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图1 复方甘草合剂中吗啡( a)HPLC谱图
表1 吗啡加样回收率试验(n＝5) 加入量
(μg)
回收量
(μg)
回 收率
(%)
平均回收率
(%)
240
498
94.7
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270
548
98.5
300
550
93.9
(RSD＝1.92%)
330
563
94.4
360
615
95.2
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表2 复方甘草合剂含量测定结果 批 号
吗啡(标示量%)
981115
96.3
981123
101.2
981216
95.7
990121
97.5
990129
99.1
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4 讨论
复方甘草合剂为常用止咳祛痰药。中国药典对复方甘草片中的吗啡含量已明确规定控制标准 。复方甘草合剂亦应作相应的质量控制。建议《中国医院制剂规范》修订时，增加该制剂吗 啡含量测定，标准可定为标示量90%～110%。
参考文献
【1】 卫生部药政局编.中国医院制剂规范(西药制剂). 北京：中国医药科技出版社，1995：55
【2】 总后卫生部编.医疗单位制剂规范.北京：人民军 医出版社，1993：88
【3】 安登魁主编.药物分析.济南：济南出版社，1992 ：1267
【4】 王勇，曾洁.固相萃取技术-HPLC测定复方甘草片 中吗啡的含量.色谱，1998，16(3)：229
(收稿：1999-08-27), 百拇医药