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编号:10236275
胡芦巴对急性化学性肝损伤的保护作用
http://www.100md.com 《中国工业医学杂志》 2000年第1期
     作者:朱宝立 班永宏 段金廒

    单位:朱宝立(江苏省职业病防治研究所,江苏 南京 210028);班永宏(江苏省职业病防治研究所,江苏 南京 210028);段金廒(中国药科大学,江苏 南京 210009)

    关键词:胡芦巴;化学性肝损伤;保护作用;脂质过氧化

    中国工业医学杂志000107 摘 要:目的 探讨胡芦巴对急性化学性肝损伤的保护作用及其机理。方法 采用四氯化碳和D-氨基半乳糖所致小鼠急性肝损伤的模型,染毒前不同时间、不同剂量给药对小鼠肝功能指标ALT和AST的影响,同时观察脂质过氧化水平。结果 胡芦巴有效地抑制CCl4和D-氨基半乳糖所致小鼠急性肝损伤的血清ALT和AST的升高,并呈现良好的剂量-效应关系;不同治疗时间、每日给药次数对疗效有很大影响,每日3次给药,治疗3天以上效果较好;给药后,肝脏MDA水平降低,GSH-Px升高,呈现剂量-反应关系,以上各指标与对照组(不给药组)均有显著性差异。结论 胡芦巴提取物能有效地保护小鼠急性化学性肝损伤,其机理可能是抑制脂质过氧化,增加GSH-Px酶活力而发生作用。
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    分类号:Q949.751.9;R595;R322.4+7 文献标识码:A

    文章编号:1002-221X(2000)01-0019-03

    Protective effect of Fenugreek Seed on Acute Chemical Liver Injury

    ZHU Bao-li BAN Yong-hong

    (Jiangsu Provincial Institute for Occupational Medicine,Nanjing 210028,China)

    DUAN Jin-ao

    (China Pharmaceutical University,Nanjing 210009,China)
, 百拇医药
    Abstract:Objective To study protective effect of fenugreek seed(Trigonella foenum-graecum L.)against acute chemical liver injury and its mechanism.Methods An animal model with acute liver injury was reproduced by carbon tetrachloride and D-chondrosamine in mice.Liver function indicators,serum alanine aminotransferase(ALT)and aspartate aminotransferase(AST),were determined in mice with different chemical dose at varied time periods,as well as level of lipid peroxide.Results Increase in serum ALT and AST in mice caused by carbon tetrachloride and D-chondrosamine could be inhibited by fenugreek seed,with a good dose-response pattern.Therapeutic effect was based on period of treatment and times of drug administration,with better result in those with a daily dose dividing into three times for three days.Liver MDA level reduced and GSH-Px increased after treatment with a dose-response pattern.There was significant difference in all indicators mentioned above between them and controls.Conclusion It suggests that the extract from fenugreek seed can protect mice from acute chemical liver injury with its mechanism of inhibiting lipid peroxide and increasing activity of GSH-Px.
, 百拇医药
    Key words:Fenugreek seed(Trigonella foenum-graecum L.);Chemical liver injury;Protection;Lipid peroxide

    随着现代化工业的发展,肝毒性化合物的种类越来越多,由此造成的化学性肝损伤大大增加,因此寻找具有抑制这一损伤作用的有效药物对保护人群健康有着重要意义。胡芦巴为豆科植物,其种子性温、味苦、气香,入肝、肾,是中医常用的补肾阳、祛寒湿药物,也是我国西部地区回族通常食用的香料和补品;在德国及欧洲其他一些地区也是民间常用的保肝药。

    本文用四氯化碳和D-氨基半乳糖制作急性肝损伤模型,观察胡芦巴对四氯化碳和D-氨基半乳糖所致急性肝损伤的保护作用,并对这一作用的机理从自由基学说方面进行初步探讨。

    1 材料和方法

    1.1 受试药物
, 百拇医药
    1.1.1 胡芦巴提取物由中国药科大学提供,使用前用0.5%羧甲基纤维素配成5%混悬液,阳性药物联苯双酯由江苏宜兴制药厂生产。

    1.1.2 动物分组及处理 健康的昆明种小鼠体质量20~21g,随机分为6组,即胡芦巴高、中、低剂量组,阳性对照组,对照组(染毒不给药)和正常组,口服给药连续3天,每日3次,末次给药1小时后,除正常组外各组腹腔注射染毒(CCl4模型:0.1% CCl4 10ml/kg,D-氨基半乳糖模型:D-氨基半乳糖800mg/kg),18小时后眼眶采血,分离血清作ALT和AST检验。

    1.1.3 不同给药时间急性肝损伤的治疗作用 选用正交试验设计方案,观察不同给药时间(1、3、7天),每日不同给药次数(1、2、3次),观察对CCl4急性肝损伤治疗效果。

    1.1.4 小鼠肝匀浆、微粒体及线粒体的制备 在动物处死后,立即取出肝脏放入4℃生理盐水中洗去浮血,剔除脂肪及结缔组织,吸干水分,称质量,剪碎,按1g组织加入9ml sucrose(0.25mol/L)-Tris-HCl(0.01mol/L)缓冲液、匀浆。取部分肝匀浆经500g离心20分钟去除胞核片后,经104g离心10分钟,沉淀物为线粒体,取上清液105g离心65分钟,沉淀物为微粒体。
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    1.1.5 检测方法 肝匀浆、微粒体、线粒体脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)检测试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。用酶法测定血清ALT和AST。

    1.1.6 统计方法 采用SAS统计软件进行单因素方差分析。

    2 结果

    2.1 胡芦巴对小鼠急性肝损伤的保护作用

    表1表明,对照组小鼠的ALT和AST显著高于正常组(P<0.01),说明CC14和D-氨基半乳糖染毒后肝细胞严重损伤,而胡芦巴高、中、低剂量组显著低于对照组(P<0.01),与阳性药物相近,并存在剂量-效应关系,说明胡芦巴提取物能有效地抑制毒物对肝细胞的作用。

    表1 胡芦巴提取物对小鼠急性肝损伤肝功能的影响 (±s) 模型
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    组别

    剂量

    (g/kg)

    ALT(U/L)

    AST(U/L)

    胡芦巴组

    2.0

    61.5±19.3**

    74.7±11.0**

    1.0

    80.5±11.0**

    95.4±8.0**
, 百拇医药
    CCl4

    0.5

    108.7±23.1**

    127.8±19.3**

    阳性对照组

    0.5

    80.8±16.2**

    95.7±11.4**

    对照组

    —

    241.5±40.7##
, 百拇医药
    182.5±18.1##

    正常组

    —

    32.9±8.6

    49.2±6.1

    胡芦巴组

    2.0

    66.7±7.4**

    72.7±8.4**

    D-氨基

    1.0

    78.7±8.3**
, 百拇医药
    95.4±8.9**

    半乳糖

    0.5

    100.4±18.4**

    113.8±13.1**

    阳性对照组

    0.5

    81.3±13.4**

    91.4±8.3**

    对照组

    —
, 百拇医药
    289.4±36.4##

    213.5±23.1##

    正常组

    —

    28.3±3.3

    39.3±4.2

    与对照组比较 P<0.01,##与正常组比较P<0.01。2.2 胡芦巴对肝脏MDA和GSH-Px的影响

    表2表明,对照组小鼠肝脏匀浆、线粒体和微粒体MDA含量显著高于正常组,而GSH-Px活性低于正常组(P<0.01);胡芦巴高、中、低剂量组的MDA明显低于对照组,而GSH-Px高于对照组(P<0.01),与阳性对照组和正常组相近,存在剂量-效应
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    表2 胡芦巴对小鼠肝脏MDA和GSH-Px的影响(±s) 动物

    模型

    组别

    剂量

    (g/kg)

    MDA(nmol/mg)

    GSH-Px[U/(min.mg)]

    肝匀浆

    微粒体

    线粒体

, 百拇医药     肝匀浆

    微粒体

    线粒体

    CCl4

    胡芦巴组

    2.0

    19.4±1.4*

    17.4±1.7*

    11.3±1.4

    10.7±1.1*

    9.2±1.3*
, 百拇医药
    6.4±0.9*

    1.0

    21.5±2.9*

    20.4±1.8*

    13.4±1.0

    19.6±1.2*

    8.1±0.8*

    5.0±1.3*

    0.5

    23.1±2.9*
, 百拇医药
    22.7±2.1*

    15.3±1.5

    8.8±1.3*

    7.1±1.1*

    4.5±0.9*

    阳性对照组

    0.5

    22.4±2.0*

    21.8±1.6*

    15.4±1.2

, http://www.100md.com     9.1±1.0*

    7.8±1.3*

    4.6±0.7*

    对照组

    —

    31.2±2.7

    27.9±2.0

    19.7±1.3

    7.0±0.8

    4.7±0.5
, http://www.100md.com
    4.0±0.7

    正常组

    —

    18.0±0.9

    16.7±1.1

    9.4±0.7

    10.8±0.9

    10.2±0.8

    6.8±0.9

    D-氨基

    胡芦巴组

    2.0
, 百拇医药
    20.4±1.8*

    17.3±1.4*

    11.4±1.6*

    14.7±1.2*

    12.6±1.0*

    8.3±0.7*

    半乳糖

    1.0

    22.8±1.6*

    20.5±1.6*
, 百拇医药
    14.3±1.3*

    13.1±1.1*

    11.8±0.9*

    7.6±0.5*

    0.5

    25.3±2.1*

    22.1±2.0*

    6.3±1.5*

    10.1±0.8*

    9.3±0.7*
, http://www.100md.com
    6.1±0.4*

    阳性对照组

    0.5

    23.1±2.3*

    20.8±1.9*

    13.9±1.2*

    12.4±0.9*

    10.7±0.7*

    7.8±0.7*

    对照组
, 百拇医药
    —

    40.5±3.8

    31.4±2.4

    29.1±2.4

    5.4±0.7

    4.7±0.5*

    3.8±0.5

    正常组

    —

    12.5±1.1

    16.4±1.4
, 百拇医药
    11.0±0.8

    12.9±0.9

    12.3±1.4

    7.8±0.9

    与对照组比较P<0.01,#与正常组比较P<0.01。关系,说明胡芦巴提取物能有效地抑制毒物所致小鼠肝脏脂质过氧化的作用。2.3 不同给药时间对急性肝损伤疗效观察

    表3表明,连续1、3、7天给药,小鼠ALT和AST均有不同程度降低,并存在时间-效应关系,3天以上治疗组ALT和AST显著低于对照组(P<0.05),但高于正常组,说明不同治疗周期对小鼠急性CCl4肝损伤的疗效有较大的影响。同时每日给药1、2、3次,小鼠肝功能ALT和AST均有不同程度降低,每日2次以上效果较好。从上述结果可以推测,胡芦巴有效成分在体内代谢可能较快,要维持有效成分的正常浓度,应采取每日多次给药方式。
, 百拇医药
    表3 不同给药时间对小鼠急性肝损伤的疗效(±s) 组别

    每次剂量

    (g/kg)

    每日

    次数

    1天

    3天

    7天

    ALT

    AST

    ALT

, 百拇医药     AST

    ALT

    AST

    胡芦巴组

    2.0

    1

    307±31.6

    201±18.4

    181±20.1*

    143±16.3*

    178±16.3

    138±15.1
, 百拇医药
    2.0

    2

    263±25.1

    181±17.4

    90.3±10.4**

    97.2±11.3**

    83.1±8.1**

    81.4±7.9**

    2.0

    3

    217±20.3*
, 百拇医药
    104±9.5*

    62.7±6.3**

    69.1±7.1**

    61.8±5.4**

    60.7±7.3**

    对照组

    —

    —

    318±28.7

    227±23.1

    正常组
, 百拇医药
    —

    —

    29.7±2.7

    33.8±3.9

    与对照组比较:P<0.05,P<0.01。3 讨论

    胡芦巴提取物能有效地保护小鼠急性化学性肝损伤,其有效成分可能为胡芦巴总甙,其给药剂量、时间和每日给药次数对肝功能的抑制有较大影响,可能由于其在体内代谢较快,需采取每日多次给药,以达到疗效。其作用机理与抗脂质过氧化反应有着密切的关系。机体内存在着抵御自由基损伤的防御系统,其中GSH-Px是该系统中重要的抗氧化酶类之一,它能还原过氧化物,保护组织细胞免受损害。本次研究证实,CCl4和D-氨基半乳糖均能使小鼠肝匀浆、线粒体和线粒体的MDA含量增加,GSH-Px活力降低,肝功能指标ALT和AST显著升高;而胡芦巴能明显逆转上述指标,表明胡芦巴可能活化小鼠的抗氧化酶系统,减少自由基作用于肝细胞膜的脂质过氧化作用,从而抑制CCl4和D-氨基半乳糖对肝脏的急性损伤。因此,胡芦巴提取物是一种有价值的保肝药物,对有效地防治化学毒物对人群健康影响方面有着重要的价值。
, 百拇医药
    作者简介:朱宝立(1966—),男,江苏泰县人,主管医师。

    参考文献:

    [1]中华人民共和国卫生部.新药临床前实验指导原则汇编[C].1993.

    [2]李淑玉,等.问荆硅化物对实验性肝损伤的保护作用[J].中国药理学与毒理学杂志,1992,6(1):67~70.

    [3]叶正君.胶股蓝减弱四氯化碳所致大鼠肝脏脂质过氧化作用[J].工业卫生与职业病,1998,24(2):74~76.

    收稿日期:1999-09-20, http://www.100md.com


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