黄甲棒牙周缓释剂毒理学研究*
作者：杨健 周汝俊 吕辉章 陈涟如 黄敬跃
单位：杨健(江西医学院口腔系)；周汝俊(江西中医学院药学系， 江西 南昌 330006)；吕辉章(江西中医学院药学系， 江西 南昌 330006)；陈涟如(江西中医学院药学系， 江西 南昌 330006)；黄敬跃(江西中医学院药学系， 江西 南昌 330006)
关键词：中药；缓释剂；毒理学；牙周炎
牙体牙髓牙周病学杂志000107 摘 要：目的：为确保临床用药的安全，对中药牙周缓释剂黄甲棒进行毒理学检测。方法：按新药的有关要求作如下实验：①IRC小鼠最大耐受量(MTD)试验。②IRC小鼠致死量(LD50)测定。③Wistar大鼠慢性毒理学试验。④Wistar大鼠口腔粘膜毒性及刺激试验。⑤豚鼠皮肤过敏试验。结果：动物对该药物有很大耐受性，MTD=5.3g/kg体重，ipLD50=(192.7±29.3)mg/kg体重(P=0.95)，对动物15项血液学及其生化指标，13个重要脏器均无明显影响，对皮肤和口腔粘膜无刺激和致敏作用。结论：该制剂临床应用是安全的。
, 百拇医药
分类号：R781.4 文献标识码：A
文章编号：1005-2593(2000)01-0019-03
[牙体牙髓牙周病学杂志，2000，10(1)：19]
The toxicological study of the local slow-release
delivery agent, Huang Jia bang
YANG Jian, ZHOU Ru-jun, LU Hui-zhang, et al
(Department of Stomatology, Jiangxi Medical College，Nanchang 330006)
, 百拇医药
Abstract：AIM：In order to assure the safety of clinical application of new drug, the toxicological study of the local delivery agent, Huangjiabang, which is a traditional Chinese medical herb compound, was done. METHODS：The following tests were done according to the requirements of developing new drug. ① The MTD(maximal tolerance dose)test on IRC rats;②The ipLD50 measruement of IRC rats; ③The chronic toxicological test on wistar rats; ④ The oral mucosa toxic and irritating tests on wistar rats; ⑤The skin allergic test on gainea pigs. RESULTS：The resullts showed that the animals had big tolerance of this drug. Their MTD and ipLD 50 were 5.3g/kg body weight and (192.7±29.3)mg/kg body weight(P=0.95) respectively. It had no evident impact on 15 haemological and biochemical indices and 13 important organs of the animal, and it also has no irritating and allergic effects on skin and oral mucosa. CONCLUSION：The clinical application of this agent is safe.
, http://www.100md.com
Key words：traditional chinese medical herb, slow-release delivery agent, toxicology, periodontitis
[Chinese Journal of Conservative Dentistry, 2000,10(1):19]▲
黄甲棒是一种复方中药牙周缓释剂，研究证明[1，2]，该药具有抑制牙周菌斑中细菌、消炎镇痛等作用，在牙周临床上取得了满意疗效。本研究按照新药的有关要求，对该药进行了毒理学研究，为进一步开发应用提供依据。
1 材料和方法
1.1 实验材料
黄甲棒(江西中医学院药学系提供)；
, 百拇医药
IRC小白鼠，Wistar大鼠和豚鼠(江西医学院实验动物科学部供给)。
1.2 实验方法
1.2.1 急性毒理学研究
最大耐受量(maximal tolerance dose, MTD)试验：将小白鼠60只(雌雄各半)随机平均分为3组，分别给75、150、300g/L黄甲棒混悬剂，按0.7ml/10g体重1次灌胃，观察7d，注意其活动状态。
ipLD50测定：取IRC小白鼠60只，随机分为5组，分别按每公斤体重326、245、184、138、103mg腹腔注射黄甲棒混悬剂，观察7d，记录动物死亡数，计算LD50。
1.2.2 慢性毒理学研究
将Wistar大鼠100只(雌雄各半)平分到5个组中，各组分别按每公斤体重0.2、2、20、200mg黄甲棒和等容量生理盐水灌胃，每天1次，连续35d，每周称体重1次，于末次给药后24h颈动脉取血作血液学和血液生化学检测，断头处死动物，检查脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、小肠、结肠、膀胱、睾丸或卵巢、视神经、肾上腺等脏器病理学改变情况。
, 百拇医药
1.2.3 口腔粘膜毒性及刺激试验
将20只Wistar大鼠下唇缝成一盲袋，然后将其平分为5组，分别用75、150、300g/L黄甲棒及360g/L甲醛、生理盐水0.15ml注入袋内并涂抹其下牙龈粘膜，每天1次，连续6d，每次给药后3h观察其局部改变，最后取粘膜作病理检查。
1.2.4 皮肤过敏试验
20只豚鼠平均分为4组，将其背部脱毛，分别用75、150、300g/L黄甲棒及生理盐水0.2ml涂擦该部，每天1次，共6d，观察局部反应，2周后再用0.05ml新配试药在原涂药部位作皮内注射，观察并记录6、12、24、48、96h皮肤及心率、呼吸、血压情况。
2 结果
2.1 急性毒理学研究
, http://www.100md.com
2.1.1 MTD实验观察结果，低、中剂量(75～150g/L)动物全部正常；大剂量(300g/L)组动物活动减少，嗜睡，但无其它异常。3组动物无1死亡，经测试，小鼠对黄甲棒的MTD为5.3g/kg体重。
2.1.2 经综合法求得小鼠ipLD50=(192.7±29.3)mg/kg体重(P=0.95)。
2.2 慢性毒理学研究
2.2.1 慢性毒理学实验表明，4个给药组与对照组比较，其食量较大，体重增加，各种活动未见异常。
2.2.2 血液学及血液生化学检查结果，与对照组比较，15项指标均在正常生理范围内(表1)。
表1 黄甲棒慢性毒性试验血液学和生化指标检测结果 组别
血液学检测指标
, 百拇医药
血液生化检测指标
Hb(g/L)
RBC(1012/L)
WBC(109/L)
BPL(S)
CI(μmol/L)
T-BIL(U)
ALT(U)
AST(U)
TP(g/L)
ALB(g/L)
, 百拇医药
ALP(U)
GLU(mmol/L)
Tc(mmol/L)
BUN(mmol/L)
Cr(mmol/L)
对照组
136.5±10.5
7.3±0.9
4.4±2.4
243.3±35.3
45.0±15.4
2.0±0.20
, http://www.100md.com
25.2±8.2
455.0±32.0
67.3±2.8
28.3±3.0
61.3±8.5
6.46±1.40
3.1±0.18
17.8±1.1
112.9±16.8
低剂量组
137.6±7.6
7.8±1.1
, http://www.100md.com
9.96±2.8
234.5±36.3
52.2±19.6
2.0±0.28
22.7±8.3
159.9±22.1
67.8±2.5
31.5±1.4
66.3±4.6
6.86±0.29
3.1±0.10
18.1±1.8
, http://www.100md.com
102.8±10.2
中剂量组
131.8±21.4
7.8±1.0
8.0±1.4
250.2±54.0
49.5±26.3
2.45±0.30
27.8±9.7
168.2±16.3
66.0±2.9
33.2±2.8
, 百拇医药
64.9±4.2
6.85±0.21
2.96±0.10
16.2±1.8
87.9±10.1
高剂量组
136.8±14.3
8.3±1.0
8.7±1.3
209.6±54.4
61.5±24.8
2.31±0.28
, 百拇医药
15.7±9.1
168.4±22.3
67.3±3.2
33.2±3.6
65.6±8.3
6.9±0.30
3.1±0.18
16.18±1.9
104.6±14.6
2.2.3 病理学检查，经肉眼和病理切片镜检查，动物脑、心、肝、脾、肺、肾、膀胱、胃、小肠、结肠、视神经、肾上腺、卵巢或睾丸等13个脏器均未见明显病理改变。
, 百拇医药
2.3 口腔粘膜毒性及刺激试验表明，低、中剂量黄甲棒组与对照组无差异，粘膜完整，未见病理改变。高剂量黄甲棒组中第3天时有2只动物口腔粘膜轻度充血水肿，但以后又渐恢复正常，以上各组动物活动无异常。甲醛组给药第1天即出现粘膜红肿，且逐渐严重和溃烂，镜下见大量的细胞浸润、肉芽增生、上皮溃疡等。
2.4 皮肤过敏试验表明，黄甲棒对豚鼠无致敏作用，在观察期间，其呼吸、进食等活动正常，皮肤无红肿、溃烂等异常反应(表2)。表2 黄甲棒豚鼠皮肤过敏试验 组别
指标
1号鼠
2号鼠
3号鼠
6h
12h
, 百拇医药
24h
48h
96h
6h
12h
24h
48h
96h
6h
12h
24h
48h
96h
, 百拇医药
低剂量组
皮肤反应
-
-
±
±
±
-
-
±
±
±
-
-
, http://www.100md.com
±
±
±
活动
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, http://www.100md.com
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呼吸
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, 百拇医药
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饮食
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中剂量组
皮肤反应
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, 百拇医药
±
±
±
±
±
±
±
±
±
±
±
±
活动
-
, http://www.100md.com
-
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-
-
-
-
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, 百拇医药
呼吸
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-
-
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, 百拇医药
-
-
饮食
-
-
-
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-
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, 百拇医药
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高剂量组
皮肤反应
±
±
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±
±
±
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±
±
±
±
±
±
±
活动
-
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呼吸
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饮食
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, 百拇医药
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3 讨论
, http://www.100md.com
黄甲棒急性药物毒性实验表明，实验动物对该药有很大耐毒性，小鼠对其最大耐受量为5.3g/kg体重，ipLD50为(192.7±29.3)mg/kg是临床用量的2.5万倍。而慢性毒性实验说明，使用该药后35d，其血液学及血液生化学的15项指标无明显变化。对动物的13个主要脏器进行病理学检查也无任何异常改变。口腔粘膜毒性和皮肤过敏试验也证明此药对口腔粘膜无刺激，无皮肤致敏作用，在各组实验中均未见动物生理活动有何异常改变。对动物进行黄甲棒毒理学研究表明，该制剂临床应用是安全的，可以在临床上推广使用。■
*江西省科委资助课题
参考文献：
[1]周汝俊，陈涟如，黄敬跃，等. 黄甲棒缓释剂的研究. 中华口腔医学杂志，1996，31：159
[2]周汝俊，吕辉章，黄敬跃，等. 黄甲棒镇痛作用研究. 华西口腔医学杂志，1997，15：117
收稿日期：1997-19-12, 百拇医药
单位：杨健(江西医学院口腔系)；周汝俊(江西中医学院药学系， 江西 南昌 330006)；吕辉章(江西中医学院药学系， 江西 南昌 330006)；陈涟如(江西中医学院药学系， 江西 南昌 330006)；黄敬跃(江西中医学院药学系， 江西 南昌 330006)
关键词：中药；缓释剂；毒理学；牙周炎
牙体牙髓牙周病学杂志000107 摘 要：目的：为确保临床用药的安全，对中药牙周缓释剂黄甲棒进行毒理学检测。方法：按新药的有关要求作如下实验：①IRC小鼠最大耐受量(MTD)试验。②IRC小鼠致死量(LD50)测定。③Wistar大鼠慢性毒理学试验。④Wistar大鼠口腔粘膜毒性及刺激试验。⑤豚鼠皮肤过敏试验。结果：动物对该药物有很大耐受性，MTD=5.3g/kg体重，ipLD50=(192.7±29.3)mg/kg体重(P=0.95)，对动物15项血液学及其生化指标，13个重要脏器均无明显影响，对皮肤和口腔粘膜无刺激和致敏作用。结论：该制剂临床应用是安全的。
, 百拇医药
分类号：R781.4 文献标识码：A
文章编号：1005-2593(2000)01-0019-03
[牙体牙髓牙周病学杂志，2000，10(1)：19]
The toxicological study of the local slow-release
delivery agent, Huang Jia bang
YANG Jian, ZHOU Ru-jun, LU Hui-zhang, et al
(Department of Stomatology, Jiangxi Medical College，Nanchang 330006)
, 百拇医药
Abstract：AIM：In order to assure the safety of clinical application of new drug, the toxicological study of the local delivery agent, Huangjiabang, which is a traditional Chinese medical herb compound, was done. METHODS：The following tests were done according to the requirements of developing new drug. ① The MTD(maximal tolerance dose)test on IRC rats;②The ipLD50 measruement of IRC rats; ③The chronic toxicological test on wistar rats; ④ The oral mucosa toxic and irritating tests on wistar rats; ⑤The skin allergic test on gainea pigs. RESULTS：The resullts showed that the animals had big tolerance of this drug. Their MTD and ipLD 50 were 5.3g/kg body weight and (192.7±29.3)mg/kg body weight(P=0.95) respectively. It had no evident impact on 15 haemological and biochemical indices and 13 important organs of the animal, and it also has no irritating and allergic effects on skin and oral mucosa. CONCLUSION：The clinical application of this agent is safe.
, http://www.100md.com
Key words：traditional chinese medical herb, slow-release delivery agent, toxicology, periodontitis
[Chinese Journal of Conservative Dentistry, 2000,10(1):19]▲
黄甲棒是一种复方中药牙周缓释剂，研究证明[1，2]，该药具有抑制牙周菌斑中细菌、消炎镇痛等作用，在牙周临床上取得了满意疗效。本研究按照新药的有关要求，对该药进行了毒理学研究，为进一步开发应用提供依据。
1 材料和方法
1.1 实验材料
黄甲棒(江西中医学院药学系提供)；
, 百拇医药
IRC小白鼠，Wistar大鼠和豚鼠(江西医学院实验动物科学部供给)。
1.2 实验方法
1.2.1 急性毒理学研究
最大耐受量(maximal tolerance dose, MTD)试验：将小白鼠60只(雌雄各半)随机平均分为3组，分别给75、150、300g/L黄甲棒混悬剂，按0.7ml/10g体重1次灌胃，观察7d，注意其活动状态。
ipLD50测定：取IRC小白鼠60只，随机分为5组，分别按每公斤体重326、245、184、138、103mg腹腔注射黄甲棒混悬剂，观察7d，记录动物死亡数，计算LD50。
1.2.2 慢性毒理学研究
将Wistar大鼠100只(雌雄各半)平分到5个组中，各组分别按每公斤体重0.2、2、20、200mg黄甲棒和等容量生理盐水灌胃，每天1次，连续35d，每周称体重1次，于末次给药后24h颈动脉取血作血液学和血液生化学检测，断头处死动物，检查脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、小肠、结肠、膀胱、睾丸或卵巢、视神经、肾上腺等脏器病理学改变情况。
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1.2.3 口腔粘膜毒性及刺激试验
将20只Wistar大鼠下唇缝成一盲袋，然后将其平分为5组，分别用75、150、300g/L黄甲棒及360g/L甲醛、生理盐水0.15ml注入袋内并涂抹其下牙龈粘膜，每天1次，连续6d，每次给药后3h观察其局部改变，最后取粘膜作病理检查。
1.2.4 皮肤过敏试验
20只豚鼠平均分为4组，将其背部脱毛，分别用75、150、300g/L黄甲棒及生理盐水0.2ml涂擦该部，每天1次，共6d，观察局部反应，2周后再用0.05ml新配试药在原涂药部位作皮内注射，观察并记录6、12、24、48、96h皮肤及心率、呼吸、血压情况。
2 结果
2.1 急性毒理学研究
, http://www.100md.com
2.1.1 MTD实验观察结果，低、中剂量(75～150g/L)动物全部正常；大剂量(300g/L)组动物活动减少，嗜睡，但无其它异常。3组动物无1死亡，经测试，小鼠对黄甲棒的MTD为5.3g/kg体重。
2.1.2 经综合法求得小鼠ipLD50=(192.7±29.3)mg/kg体重(P=0.95)。
2.2 慢性毒理学研究
2.2.1 慢性毒理学实验表明，4个给药组与对照组比较，其食量较大，体重增加，各种活动未见异常。
2.2.2 血液学及血液生化学检查结果，与对照组比较，15项指标均在正常生理范围内(表1)。
表1 黄甲棒慢性毒性试验血液学和生化指标检测结果 组别
血液学检测指标
, 百拇医药
血液生化检测指标
Hb(g/L)
RBC(1012/L)
WBC(109/L)
BPL(S)
CI(μmol/L)
T-BIL(U)
ALT(U)
AST(U)
TP(g/L)
ALB(g/L)
, 百拇医药
ALP(U)
GLU(mmol/L)
Tc(mmol/L)
BUN(mmol/L)
Cr(mmol/L)
对照组
136.5±10.5
7.3±0.9
4.4±2.4
243.3±35.3
45.0±15.4
2.0±0.20
, http://www.100md.com
25.2±8.2
455.0±32.0
67.3±2.8
28.3±3.0
61.3±8.5
6.46±1.40
3.1±0.18
17.8±1.1
112.9±16.8
低剂量组
137.6±7.6
7.8±1.1
, http://www.100md.com
9.96±2.8
234.5±36.3
52.2±19.6
2.0±0.28
22.7±8.3
159.9±22.1
67.8±2.5
31.5±1.4
66.3±4.6
6.86±0.29
3.1±0.10
18.1±1.8
, http://www.100md.com
102.8±10.2
中剂量组
131.8±21.4
7.8±1.0
8.0±1.4
250.2±54.0
49.5±26.3
2.45±0.30
27.8±9.7
168.2±16.3
66.0±2.9
33.2±2.8
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64.9±4.2
6.85±0.21
2.96±0.10
16.2±1.8
87.9±10.1
高剂量组
136.8±14.3
8.3±1.0
8.7±1.3
209.6±54.4
61.5±24.8
2.31±0.28
, 百拇医药
15.7±9.1
168.4±22.3
67.3±3.2
33.2±3.6
65.6±8.3
6.9±0.30
3.1±0.18
16.18±1.9
104.6±14.6
2.2.3 病理学检查，经肉眼和病理切片镜检查，动物脑、心、肝、脾、肺、肾、膀胱、胃、小肠、结肠、视神经、肾上腺、卵巢或睾丸等13个脏器均未见明显病理改变。
, 百拇医药
2.3 口腔粘膜毒性及刺激试验表明，低、中剂量黄甲棒组与对照组无差异，粘膜完整，未见病理改变。高剂量黄甲棒组中第3天时有2只动物口腔粘膜轻度充血水肿，但以后又渐恢复正常，以上各组动物活动无异常。甲醛组给药第1天即出现粘膜红肿，且逐渐严重和溃烂，镜下见大量的细胞浸润、肉芽增生、上皮溃疡等。
2.4 皮肤过敏试验表明，黄甲棒对豚鼠无致敏作用，在观察期间，其呼吸、进食等活动正常，皮肤无红肿、溃烂等异常反应(表2)。表2 黄甲棒豚鼠皮肤过敏试验 组别
指标
1号鼠
2号鼠
3号鼠
6h
12h
, 百拇医药
24h
48h
96h
6h
12h
24h
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96h
6h
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24h
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, 百拇医药
低剂量组
皮肤反应
-
-
±
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, http://www.100md.com
±
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活动
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, http://www.100md.com
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呼吸
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, 百拇医药
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饮食
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, 百拇医药
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中剂量组
皮肤反应
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, 百拇医药
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活动
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, 百拇医药
呼吸
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高剂量组
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呼吸
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3 讨论
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黄甲棒急性药物毒性实验表明，实验动物对该药有很大耐毒性，小鼠对其最大耐受量为5.3g/kg体重，ipLD50为(192.7±29.3)mg/kg是临床用量的2.5万倍。而慢性毒性实验说明，使用该药后35d，其血液学及血液生化学的15项指标无明显变化。对动物的13个主要脏器进行病理学检查也无任何异常改变。口腔粘膜毒性和皮肤过敏试验也证明此药对口腔粘膜无刺激，无皮肤致敏作用，在各组实验中均未见动物生理活动有何异常改变。对动物进行黄甲棒毒理学研究表明，该制剂临床应用是安全的，可以在临床上推广使用。■
*江西省科委资助课题
参考文献：
[1]周汝俊，陈涟如，黄敬跃，等. 黄甲棒缓释剂的研究. 中华口腔医学杂志，1996，31：159
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收稿日期：1997-19-12, 百拇医药