大黄对烫伤大鼠肠粘膜上皮细胞线粒体呼吸链的影响
作者：乔林 陈德昌 景炳文
单位：乔林(解放军二炮总医院骨科，北京 100088)；陈德昌 景炳文(第二军医大学长征医院急救科，上海 200003)
关键词：烧伤；大黄；大鼠；线粒体；小肠；呼吸链
中国中西医结合急救杂志000105摘 要：目的：研究大黄对烫伤后大鼠肠粘膜上皮细胞线粒体呼吸链的影响。方法：采用大鼠背部25%Ⅲ度烫伤模型，分离小肠粘膜上皮细胞内线粒体，监测细胞色素aa3、b、c和c1的水平，并观察大黄在其中的影响。结果：烫伤后2小时肠粘膜上皮细胞线粒体细胞色素aa3、b和c1较为稳定，而在伤后6小时出现明显丢失，与烫伤组0.5和2小时及对照组比较，P均<0.05，而细胞色素c在烫伤后早期即有明显丢失，于伤后6小时最为严重，与对照组比较P<0.05；大黄治疗后细胞色素aa3、b、c和c1丢失显著减少，与烫伤组比较P均<0.05。结论：烫伤能导致肠粘膜上皮细胞线粒体呼吸链明显受损，而大黄对其有很好的保护作用。
, 百拇医药
分类号：Q252；R644 文献标识码：A
文章编号：1008-9691(2000)01-0017-04
Influences of rhubarb on respiratory chain of mitochondria of epithelial cells of intestinal mucosa in burned rats
CHEN De-chang,JING Bing-wen
(Department of Emergency,Changzheng Hospital,Second Military Medical University,Shanghai 200003)
QIAO Lin
, 百拇医药
Abstract：Objective：To study the effect of rhubarb on respiratory chain of mitochondria of epithelial cells of intestinal mucosa in burned rats.Methods：25% Ⅲdegree burn injury on back area of rat model was used and the mitochondria in epithelial cells of intestinal mucosa was isolated.The levels of cytochrome aa3,b,c and c1 were monitored and the influences of rhubarb on them were observed.Results：2 hours after burns the cytochrome aa3，b,and c1 in mitochondria of epithelial cells of small intestinal mucosa were relatively stable but 6 hours after burn their loss obviously appeared in comparison to that 30 minutes and 2 hours after burns in burned group and that in control group (all P<0.05),otherwise the cytochrome c was markedly lost at the early stage and 6 hours after burn its loss was the most severe in comparison with that in control group (P<0.05).After treatment with rhubarb the loss of cytochrome aa3,b,c and c1 was significantly decreased in comparison with that in burned group (all P<0.05).Conclusions：Burn is able to lead to obvious injury of respiratory chain of mitochondria of epithelial cells of intestinal mucosa,but the rhubarb possesses very good protective effects on it.
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Key words：burn;rhubarb;rat;mitochondria;small intestine;NADH respiratory chain▲
胃肠粘膜的功能状况对危重症患者病理生理反应的转归有重要影响，而上皮细胞内线粒体呼吸链是胃肠粘膜功能发挥的重要物质基础。病理情况下，线粒体的结构和功能破坏导致细胞能量代谢障碍，能源物质被耗竭，肠粘膜的消化、吸收、屏障和分泌等功能严重受损，促发和加剧危重病患者体内的病理生理反应。我们过去的工作证明大黄对危重症患者胃肠粘膜有明显的保护作用[1，2]，但其药理作用的机制尚未完全阐明。本实验旨在研究大黄对创伤后肠粘膜上皮细胞线粒体呼吸链的影响。
1 材料与方法
1.1 动物模型制备：SD大鼠42只(上海西普尔必凯实验动物中心)，体重220～250 g，禁食不禁水过夜，氯胺酮(80 mg/kg)腹腔麻醉，脱毛剂背部脱毛，右侧股静脉插管。按文献[3]方法进行烫伤模型制备。大鼠固定于烫伤模型架上，将背部浸泡于沸水12秒，造成25%体表面积Ⅲ度烫伤，即用100 ml/kg平衡盐液由股静脉输注复苏，开始时15 ml/h，0.5小时后改为5 ml/h。
, 百拇医药
1.2 实验设计：动物随机分为大黄治疗组(18只)、烫伤组(18只)、对照组(6只)。大黄治疗组大鼠于烫伤后即刻经胃管灌入大黄50 mg/kg(精制大黄片由上海香山中医医院大黄研究室研制，上海中药制药一厂生产，1 g精黄片相当于生药4 g)，大黄片研成粉溶于1 ml生理盐水，预实验证明大黄50 mg/kg在其最佳剂量范围内。烫伤组制模后以1 ml生理盐水替代大黄治疗。对照组大鼠除不予烫伤外，其它处理同烫伤组。于烫伤后0.5、2和6小时采集小肠标本，测定肠粘膜上皮细胞线粒体内细胞色素aa3、b、c和c1含量。
1.3 肠粘膜上皮细胞线粒体分离方法：按改良Lamrence和Davies方法进行[4]。线粒体蛋白的定量测定参照潘家秀方法[5]。
1.4 细胞色素aa3、b、c和c1含量测定：根据Williams′方法改良而成[6]。
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1.5 统计学方法：数据以均数±标准误(
±
)表示，计量资料采用方差分析，组内比较采用多组间方差分析，以P<0.05为差异有显著性。
2 结 果
2.1 烫伤对细胞色素aa3的影响：烫伤后2小时内肠粘膜上皮细胞线粒体细胞色素aa3较稳定，伤后6小时出现明显丢失，与烫伤后0.5、2小时及对照组比较：P均<0.05。大黄治疗后细胞色素aa3丢失显著减少，与烫伤组比较：P<0.05(图1)。
图1 大黄对烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素aa3的影响
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2.2 烫伤对细胞色素b的影响：烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素b变化与细胞色素aa3相似(图2)。
图2 大黄对烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素b的影响
2.3 烫伤对细胞色素c的影响：烫伤后0.5小时肠粘膜上皮细胞内细胞色素c即有明显的丢失，随时间而加重，于伤后6小时最显著。大黄治疗后各时间点细胞色素c水平明显高于烫伤组，但伤后6小时大黄治疗组细胞色素c仍有轻度丢失(图3)。
图3 大黄对烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素c的影响
2.4 烫伤对细胞色素c1影响：烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素c1的变化与细胞色素aa3的变化相似，即伤后6小时出现明显丢失，而大黄能显著提高其水平(图4)。
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注：与对照组比较：aP<0.05；与烫伤组比较：bP<0.05
图4 大黄对烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素c1的影响
3 讨 论
生理情况下线粒体的主要功能是进行生物氧化，为细胞提供所需的生物能，而NADH呼吸链是线粒体的主要组成部分，由其内膜上的多种酶和辅酶组成的酶系构成，其功能是传递代谢物脱下的氢，结合氧而化合成水，并随着电位降低而释放出能量。呼吸链有3个环节：底物脱电子环节，由谷氨酸和苹果酸等组成；递电子中间环节，由黄素二核苷酸、辅酶Q和细胞色素b、c、c1组成；呼吸链终末环节，由细胞色素aa3和O2组成。上述3个环节任一出现障碍即可导致“细胞窒息”。病理情况下缺氧可损伤线粒体，而线粒体受损又可导致细胞缺氧，两者互为因果，形成恶性循环。当线粒体内氧分压降至临界点0.133 kPa(1 kPa=7.5 mmHg)时，可抑制线粒体呼吸功能和氧化磷酸化的过程，持续较长时间的缺氧导致线粒体超微结构改变，线粒体内氧化磷酸化耦联功能障碍，维持细胞生命的“能源供应站”破坏，其后果是：①细胞内各种耗能的生物反应中断；②膜电位降低或丧失，细胞膜对离子的通透性增高，离子泵功能受损，细胞内外离子浓度梯度消失，细胞水肿而死亡；③氧自由基生成增加：由于氧利用障碍，呼吸链中断、氧化磷酸化过程减弱或消失，以致进入细胞内的氧经单价还原形成氧自由基的数量增加，经破损的线粒体泄漏至细胞质，氧化蛋白质、核酸和生物膜等。本实验中选用细胞色素aa3、b、c、c1等指标，即递电子中间环节和呼吸链终末环节作为评价肠粘膜上皮细胞线粒体内呼吸链的功能。
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结果显示：烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素aa3、b、c1在伤后早期无明显改变，但在伤后6小时显著下降，而细胞色素c在伤后0.5小时即有明显丢失。细胞色素aa3、b、c、c1是线粒体呼吸链的重要组成部分，aa3、b、c1为膜结合蛋白，不易丢失，而c是水溶性膜外周蛋白，较易丢失，病理情况下尤甚[7]。上述解剖上的差异与本实验的结果是一致的。无论是早期丢失，还是晚期丢失，由于它们是同一呼吸链上的不同环节，只要一个环节出现问题就会影响整条呼吸链的功能，亦即烫伤后早期肠粘膜上皮细胞内呼吸链即有显著的功能障碍。烫伤后肠粘膜低灌注可能是导致上述病理改变的主要原因之一，研究表明烫伤后由于全身血流重新分布而使内脏处于缺血、缺氧状态，而这种烫伤后内脏器官低灌注往往对液体复苏效果较差[8]，在其它类型的创伤中亦可能存在类似的现象，这可能亦是临床上危重症患者常出现顽固的应激性胃肠粘膜病变的原因之一。另一种导致线粒体受损的病理因素可能是氧自由基损伤。组织器官在缺血、缺氧过程中，血管内皮细胞内黄嘌呤脱氢酶转化为黄嘌呤氧化酶[9]，而在机体组织中以肠粘膜内的黄嘌呤氧化酶含量最高，因此胃肠道对部分缺血最为敏感[10]，肠缺血期间，细胞内大量ATP分解为次黄嘌呤和黄嘌呤，黄嘌呤氧化酶在氧化黄嘌呤或次黄嘌呤的过程中生成大量氧自由基[11]，并继而可产生其它活性氧。氧自由基是生物活性极强的化学基团，能氧化线粒体生物膜，导致膜通透性增加，线粒体肿胀、破裂。而在部分缺氧情况下，线粒体本身亦是氧自由基的主要来源。上述病理反应的意义在于肠粘膜屏障破坏引起的肠源性感染，加重或促发系统炎症反应和多器官功能失常综合征。
, 百拇医药
本实验显示大黄能显著提高各时间点细胞色素aa3、b、c、c1含量，对线粒体内膜和呼吸链有明显的保护作用。大黄具有泻下、活血化瘀和清热解毒等功效，祖国医学中常用于治疗感染性疾病。我们在临床实践中发现大黄对应激性胃肠粘膜病变和中毒性肠麻痹有较好的疗效[12]；动物实验也证明大黄对低血容量性和内毒素性休克动物肠粘膜屏障有显著保护作用，能抑制肠道内细菌和毒素易位[1，2]。大黄对肠粘膜屏障的作用机制可能与保护细胞呼吸链有关，而后者可能通过下列机制实现：①活血化瘀，改善微循环。氧气是线粒体内生物氧化反应的基质，所以缺氧是线粒体最敏感的损伤因素之一。大黄能改善胃肠粘膜的血流灌注[12]，对缓解胃肠粘膜的缺血、缺氧有重要作用。②氧自由基清除作用。氧自由基是组织器官不完全缺氧和缺血再灌注后的主要损伤因素，大黄对氧化反应的抑制率达70%以上，且对氧自由基有显著的清除作用[13]。③清热解毒作用。大黄清热解毒的实质是清除组织和血浆内的炎性介质[14]。大黄对胃肠粘膜的保护作用为危重症患者肠源性感染的防治提供了重要方法。
, 百拇医药
4 小 结
25%的Ⅲ度烫伤导致肠粘膜上皮细胞线粒体呼吸链功能受损，大黄对肠粘膜上皮细胞内呼吸链有显著的保护作用，其药理机制可能与改善胃肠粘膜的血流灌注、清除氧自由基和体内炎性介质有关。
基金项目：国家自然科学基金资助项目(39370666)
作者简介：乔林(1971-)，男(汉族)，山东省人，硕士，医师。
参考文献：
[1]陈德昌，景炳文.大黄对肠粘膜屏障的保护作用.中国危重病急救医学，1994，6(6)：329-331.
[2]陈德昌，杨建东，杨兴易，等.大黄对大鼠肠粘膜及肠血管通透性的影响.中国危重病急救医学，1997，9(7)：385-388.
, 百拇医药
[3]Walker H L,Mason A D.A standard animal burn model.J Trauma,1968,8:1049-1051.
[4]Lawrence C B,Davies N T.A novel,simple and rapid method for the isolation of mitochondria,which exhibit respiratory control from rat small intestinal mucosa.Biochem Biophys Acta,1986,848:35-40.
[5]潘家秀主编.蛋白质化学研究技术.第1版.北京：北京科学出版社，1962.12.
[6]Williams J W.A method for the simultaneous quantitative estimation of cytochrome a,b,c and c1 in mitochondria.Arch Biochem Biophys,1964,107:537-543.
, 百拇医药
[7]Capaldi R A.Arrangement of protein in the mitochondria inner membrane.Biochem Biophys Acta,1982,694:291-306.
[8]Wachtel T L,Macahan G R,Monato W W.Fluid resuscitation in a porcine burn shock model.J Surg Res,1977,23:405-410.
[9]Parks D W.Conversion of xanthine dehydrogenase to oxidase in ischemic rat intestine.Am J Physiol,1988,254(G):768-774.
[10]Granger D N.Superoxide radicals in feline intestinal ischemia.Gastroenterology,1981,81:22-29.
, http://www.100md.com
[11]Nilsson V A,Olsson L I,Hjordi T,et al.Detection of oxygen radicals during reperfusion of intestinal cells in vitro.Free Radic Biol Med,1989,6:251-259.
[12]陈德昌，景炳文，杨兴易，等.大黄对胃肠功能衰竭的治疗作用.解放军医学杂志，1996，21(2)：24-26.
[13]陈德昌，景炳文，陈基岱，等.大黄对内毒素所致肠源性感染治疗作用的实验研究.中国中医急症，1994，3：84.
[14]杨建东，陈德昌，景炳文，等.大黄抗内毒素性休克大鼠炎性介质作用的实验研究.中国危重病急救医学，1998，10(9)：470-473.
收稿日期：1999-11-05
修稿日期：1999-12-06, 百拇医药
单位：乔林(解放军二炮总医院骨科，北京 100088)；陈德昌 景炳文(第二军医大学长征医院急救科，上海 200003)
关键词：烧伤；大黄；大鼠；线粒体；小肠；呼吸链
中国中西医结合急救杂志000105摘 要：目的：研究大黄对烫伤后大鼠肠粘膜上皮细胞线粒体呼吸链的影响。方法：采用大鼠背部25%Ⅲ度烫伤模型，分离小肠粘膜上皮细胞内线粒体，监测细胞色素aa3、b、c和c1的水平，并观察大黄在其中的影响。结果：烫伤后2小时肠粘膜上皮细胞线粒体细胞色素aa3、b和c1较为稳定，而在伤后6小时出现明显丢失，与烫伤组0.5和2小时及对照组比较，P均<0.05，而细胞色素c在烫伤后早期即有明显丢失，于伤后6小时最为严重，与对照组比较P<0.05；大黄治疗后细胞色素aa3、b、c和c1丢失显著减少，与烫伤组比较P均<0.05。结论：烫伤能导致肠粘膜上皮细胞线粒体呼吸链明显受损，而大黄对其有很好的保护作用。
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分类号：Q252；R644 文献标识码：A
文章编号：1008-9691(2000)01-0017-04
Influences of rhubarb on respiratory chain of mitochondria of epithelial cells of intestinal mucosa in burned rats
CHEN De-chang,JING Bing-wen
(Department of Emergency,Changzheng Hospital,Second Military Medical University,Shanghai 200003)
QIAO Lin
, 百拇医药
Abstract：Objective：To study the effect of rhubarb on respiratory chain of mitochondria of epithelial cells of intestinal mucosa in burned rats.Methods：25% Ⅲdegree burn injury on back area of rat model was used and the mitochondria in epithelial cells of intestinal mucosa was isolated.The levels of cytochrome aa3,b,c and c1 were monitored and the influences of rhubarb on them were observed.Results：2 hours after burns the cytochrome aa3，b,and c1 in mitochondria of epithelial cells of small intestinal mucosa were relatively stable but 6 hours after burn their loss obviously appeared in comparison to that 30 minutes and 2 hours after burns in burned group and that in control group (all P<0.05),otherwise the cytochrome c was markedly lost at the early stage and 6 hours after burn its loss was the most severe in comparison with that in control group (P<0.05).After treatment with rhubarb the loss of cytochrome aa3,b,c and c1 was significantly decreased in comparison with that in burned group (all P<0.05).Conclusions：Burn is able to lead to obvious injury of respiratory chain of mitochondria of epithelial cells of intestinal mucosa,but the rhubarb possesses very good protective effects on it.
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Key words：burn;rhubarb;rat;mitochondria;small intestine;NADH respiratory chain▲
胃肠粘膜的功能状况对危重症患者病理生理反应的转归有重要影响，而上皮细胞内线粒体呼吸链是胃肠粘膜功能发挥的重要物质基础。病理情况下，线粒体的结构和功能破坏导致细胞能量代谢障碍，能源物质被耗竭，肠粘膜的消化、吸收、屏障和分泌等功能严重受损，促发和加剧危重病患者体内的病理生理反应。我们过去的工作证明大黄对危重症患者胃肠粘膜有明显的保护作用[1，2]，但其药理作用的机制尚未完全阐明。本实验旨在研究大黄对创伤后肠粘膜上皮细胞线粒体呼吸链的影响。
1 材料与方法
1.1 动物模型制备：SD大鼠42只(上海西普尔必凯实验动物中心)，体重220～250 g，禁食不禁水过夜，氯胺酮(80 mg/kg)腹腔麻醉，脱毛剂背部脱毛，右侧股静脉插管。按文献[3]方法进行烫伤模型制备。大鼠固定于烫伤模型架上，将背部浸泡于沸水12秒，造成25%体表面积Ⅲ度烫伤，即用100 ml/kg平衡盐液由股静脉输注复苏，开始时15 ml/h，0.5小时后改为5 ml/h。
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1.2 实验设计：动物随机分为大黄治疗组(18只)、烫伤组(18只)、对照组(6只)。大黄治疗组大鼠于烫伤后即刻经胃管灌入大黄50 mg/kg(精制大黄片由上海香山中医医院大黄研究室研制，上海中药制药一厂生产，1 g精黄片相当于生药4 g)，大黄片研成粉溶于1 ml生理盐水，预实验证明大黄50 mg/kg在其最佳剂量范围内。烫伤组制模后以1 ml生理盐水替代大黄治疗。对照组大鼠除不予烫伤外，其它处理同烫伤组。于烫伤后0.5、2和6小时采集小肠标本，测定肠粘膜上皮细胞线粒体内细胞色素aa3、b、c和c1含量。
1.3 肠粘膜上皮细胞线粒体分离方法：按改良Lamrence和Davies方法进行[4]。线粒体蛋白的定量测定参照潘家秀方法[5]。
1.4 细胞色素aa3、b、c和c1含量测定：根据Williams′方法改良而成[6]。
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1.5 统计学方法：数据以均数±标准误(
±)表示，计量资料采用方差分析，组内比较采用多组间方差分析，以P<0.05为差异有显著性。2 结 果
2.1 烫伤对细胞色素aa3的影响：烫伤后2小时内肠粘膜上皮细胞线粒体细胞色素aa3较稳定，伤后6小时出现明显丢失，与烫伤后0.5、2小时及对照组比较：P均<0.05。大黄治疗后细胞色素aa3丢失显著减少，与烫伤组比较：P<0.05(图1)。
图1 大黄对烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素aa3的影响
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2.2 烫伤对细胞色素b的影响：烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素b变化与细胞色素aa3相似(图2)。
图2 大黄对烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素b的影响
2.3 烫伤对细胞色素c的影响：烫伤后0.5小时肠粘膜上皮细胞内细胞色素c即有明显的丢失，随时间而加重，于伤后6小时最显著。大黄治疗后各时间点细胞色素c水平明显高于烫伤组，但伤后6小时大黄治疗组细胞色素c仍有轻度丢失(图3)。
图3 大黄对烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素c的影响
2.4 烫伤对细胞色素c1影响：烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素c1的变化与细胞色素aa3的变化相似，即伤后6小时出现明显丢失，而大黄能显著提高其水平(图4)。
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注：与对照组比较：aP<0.05；与烫伤组比较：bP<0.05
图4 大黄对烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素c1的影响
3 讨 论
生理情况下线粒体的主要功能是进行生物氧化，为细胞提供所需的生物能，而NADH呼吸链是线粒体的主要组成部分，由其内膜上的多种酶和辅酶组成的酶系构成，其功能是传递代谢物脱下的氢，结合氧而化合成水，并随着电位降低而释放出能量。呼吸链有3个环节：底物脱电子环节，由谷氨酸和苹果酸等组成；递电子中间环节，由黄素二核苷酸、辅酶Q和细胞色素b、c、c1组成；呼吸链终末环节，由细胞色素aa3和O2组成。上述3个环节任一出现障碍即可导致“细胞窒息”。病理情况下缺氧可损伤线粒体，而线粒体受损又可导致细胞缺氧，两者互为因果，形成恶性循环。当线粒体内氧分压降至临界点0.133 kPa(1 kPa=7.5 mmHg)时，可抑制线粒体呼吸功能和氧化磷酸化的过程，持续较长时间的缺氧导致线粒体超微结构改变，线粒体内氧化磷酸化耦联功能障碍，维持细胞生命的“能源供应站”破坏，其后果是：①细胞内各种耗能的生物反应中断；②膜电位降低或丧失，细胞膜对离子的通透性增高，离子泵功能受损，细胞内外离子浓度梯度消失，细胞水肿而死亡；③氧自由基生成增加：由于氧利用障碍，呼吸链中断、氧化磷酸化过程减弱或消失，以致进入细胞内的氧经单价还原形成氧自由基的数量增加，经破损的线粒体泄漏至细胞质，氧化蛋白质、核酸和生物膜等。本实验中选用细胞色素aa3、b、c、c1等指标，即递电子中间环节和呼吸链终末环节作为评价肠粘膜上皮细胞线粒体内呼吸链的功能。
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结果显示：烫伤后肠粘膜上皮细胞内细胞色素aa3、b、c1在伤后早期无明显改变，但在伤后6小时显著下降，而细胞色素c在伤后0.5小时即有明显丢失。细胞色素aa3、b、c、c1是线粒体呼吸链的重要组成部分，aa3、b、c1为膜结合蛋白，不易丢失，而c是水溶性膜外周蛋白，较易丢失，病理情况下尤甚[7]。上述解剖上的差异与本实验的结果是一致的。无论是早期丢失，还是晚期丢失，由于它们是同一呼吸链上的不同环节，只要一个环节出现问题就会影响整条呼吸链的功能，亦即烫伤后早期肠粘膜上皮细胞内呼吸链即有显著的功能障碍。烫伤后肠粘膜低灌注可能是导致上述病理改变的主要原因之一，研究表明烫伤后由于全身血流重新分布而使内脏处于缺血、缺氧状态，而这种烫伤后内脏器官低灌注往往对液体复苏效果较差[8]，在其它类型的创伤中亦可能存在类似的现象，这可能亦是临床上危重症患者常出现顽固的应激性胃肠粘膜病变的原因之一。另一种导致线粒体受损的病理因素可能是氧自由基损伤。组织器官在缺血、缺氧过程中，血管内皮细胞内黄嘌呤脱氢酶转化为黄嘌呤氧化酶[9]，而在机体组织中以肠粘膜内的黄嘌呤氧化酶含量最高，因此胃肠道对部分缺血最为敏感[10]，肠缺血期间，细胞内大量ATP分解为次黄嘌呤和黄嘌呤，黄嘌呤氧化酶在氧化黄嘌呤或次黄嘌呤的过程中生成大量氧自由基[11]，并继而可产生其它活性氧。氧自由基是生物活性极强的化学基团，能氧化线粒体生物膜，导致膜通透性增加，线粒体肿胀、破裂。而在部分缺氧情况下，线粒体本身亦是氧自由基的主要来源。上述病理反应的意义在于肠粘膜屏障破坏引起的肠源性感染，加重或促发系统炎症反应和多器官功能失常综合征。
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本实验显示大黄能显著提高各时间点细胞色素aa3、b、c、c1含量，对线粒体内膜和呼吸链有明显的保护作用。大黄具有泻下、活血化瘀和清热解毒等功效，祖国医学中常用于治疗感染性疾病。我们在临床实践中发现大黄对应激性胃肠粘膜病变和中毒性肠麻痹有较好的疗效[12]；动物实验也证明大黄对低血容量性和内毒素性休克动物肠粘膜屏障有显著保护作用，能抑制肠道内细菌和毒素易位[1，2]。大黄对肠粘膜屏障的作用机制可能与保护细胞呼吸链有关，而后者可能通过下列机制实现：①活血化瘀，改善微循环。氧气是线粒体内生物氧化反应的基质，所以缺氧是线粒体最敏感的损伤因素之一。大黄能改善胃肠粘膜的血流灌注[12]，对缓解胃肠粘膜的缺血、缺氧有重要作用。②氧自由基清除作用。氧自由基是组织器官不完全缺氧和缺血再灌注后的主要损伤因素，大黄对氧化反应的抑制率达70%以上，且对氧自由基有显著的清除作用[13]。③清热解毒作用。大黄清热解毒的实质是清除组织和血浆内的炎性介质[14]。大黄对胃肠粘膜的保护作用为危重症患者肠源性感染的防治提供了重要方法。
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4 小 结
25%的Ⅲ度烫伤导致肠粘膜上皮细胞线粒体呼吸链功能受损，大黄对肠粘膜上皮细胞内呼吸链有显著的保护作用，其药理机制可能与改善胃肠粘膜的血流灌注、清除氧自由基和体内炎性介质有关。
基金项目：国家自然科学基金资助项目(39370666)
作者简介：乔林(1971-)，男(汉族)，山东省人，硕士，医师。
参考文献：
[1]陈德昌，景炳文.大黄对肠粘膜屏障的保护作用.中国危重病急救医学，1994，6(6)：329-331.
[2]陈德昌，杨建东，杨兴易，等.大黄对大鼠肠粘膜及肠血管通透性的影响.中国危重病急救医学，1997，9(7)：385-388.
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[3]Walker H L,Mason A D.A standard animal burn model.J Trauma,1968,8:1049-1051.
[4]Lawrence C B,Davies N T.A novel,simple and rapid method for the isolation of mitochondria,which exhibit respiratory control from rat small intestinal mucosa.Biochem Biophys Acta,1986,848:35-40.
[5]潘家秀主编.蛋白质化学研究技术.第1版.北京：北京科学出版社，1962.12.
[6]Williams J W.A method for the simultaneous quantitative estimation of cytochrome a,b,c and c1 in mitochondria.Arch Biochem Biophys,1964,107:537-543.
, 百拇医药
[7]Capaldi R A.Arrangement of protein in the mitochondria inner membrane.Biochem Biophys Acta,1982,694:291-306.
[8]Wachtel T L,Macahan G R,Monato W W.Fluid resuscitation in a porcine burn shock model.J Surg Res,1977,23:405-410.
[9]Parks D W.Conversion of xanthine dehydrogenase to oxidase in ischemic rat intestine.Am J Physiol,1988,254(G):768-774.
[10]Granger D N.Superoxide radicals in feline intestinal ischemia.Gastroenterology,1981,81:22-29.
, http://www.100md.com
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收稿日期：1999-11-05
修稿日期：1999-12-06, 百拇医药