Bcl-2与增殖细胞核抗原在子宫内膜癌的表达及意义
作者：生秀杰 何秀琴 宋和存 王颖
单位：生秀杰(中国医科大学第一临床学院妇科，沈阳 11000经)；何秀琴(中国医科大学第一临床学院妇科，沈阳 110001)；宋和存(中国医科大学第一临床学院妇科，沈阳 110001)；王颖(中国医科大学第一临床学院妇科，沈阳 110001)
关键词：子宫内膜癌；增殖细胞核抗原；Bcl-2基因
中国医科大学学报000229 近来发现，细胞过度增殖与凋亡的失衡是肿瘤形成的重要机制。Bcl-2为广义的抗凋亡基因，增殖细胞核抗原(PCNA)是反映细胞增殖状态的指标。作者采用免疫组化方法检测Bcl-2和PCNA在子宫内膜样腺癌中的表达，探讨两者在子宫内膜癌形成中的作用。
1 材料与方法
1.1 标本 病例取自我科1984～1992年间存档的子宫内膜样腺癌石蜡包埋标本共50例，均经术后病理诊断证实。患者年龄31～65岁，术前未经放疗或化疗。根据FIGO标准分为Ⅰ期26例，Ⅱ期14例，Ⅲ、Ⅳ期10例。其中高分化28例，中分化13例，低分化9例。
, 百拇医药
1.2 免疫组化染色 采用免疫组化S—P法，第一抗体，抗Bcl-2单抗(1∶50)，抗PCNA单抗PC10(1∶50)；第二抗体为生物素标记的羊抗鼠IgG(1∶150)。以上抗体及S—P试剂盒均为美国Cruz公司产品。染色步骤按试剂盒说明书进行。对照：用PBS代替一抗作为阴性对照，已知阳性标本作为阳性对照。
1.3 结果判定 细胞浆内呈棕黄色细颗粒或弥漫成片着色(DAB显色)为Bcl-2蛋白阳性，无着色为阴性。PCNA阳性为细胞核染成棕黄色，所有切片均见PCNA阳性反应。每例切片随机选取肿瘤细胞密集的5个高倍视野，每视野计数100个细胞中阳性细胞数，取均值，以“%”表示。
1.4 统计学处理 采用χ2及t检验。
2 结果
2.1 Bcl-2蛋白表达与子宫内膜癌临床及病理特征的关系 50例子宫内膜癌中，Bcl-2阳性21例，阳性率为42.0%。其中Ⅰ期阳性率53.8%(14/26)，Ⅱ期为35.7%(5/14)，Ⅲ、Ⅳ期为20.0%(2/10)。随着临床分期的提高，Bcl-2表达阳性率逐渐降低(P＝0.02)。高分化腺癌阳性率为53.5%(15/28)，中分化为38.4%(5/13)，低分化仅见1例阳性(P＝0.02)。
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2.2 PCNA表达与子宫内膜癌临床及病理特征的关系，见表1。
表1 PCNA表达与子宫内膜癌临床及病理特点的关系
(
±s)
Table 1 Relationship between expression of PCNA and clinicopathological characteristic of endometrial carcinoma 分 类
n
PCNA指数
P
FIGO分期
, http://www.100md.com
Ⅰ
26
41.62±17.23
Ⅱ
14
51.78±26.89
Ⅲ、Ⅳ
10
74.81±23.62
<0.01
FIGO分期
G1
, 百拇医药 28
34.75±13.85
G2
13
65.76±19.27
G3
9
80.77±15.65
<0.01
3 讨论
肿瘤的发生是细胞凋亡与细胞增殖平衡失调所致。Bcl-2为拮抗细胞凋亡的基因，通过抑制细胞凋亡，延长细胞寿命而促进肿瘤的发生。目前对细胞凋亡发生的机制尚不清楚，有研究认为，Bcl-2基因是通过其表达产物阻断内源性核酸内切酶的活性而控制细胞凋亡的，而Bcl-2本身又受许多调控因子的调控[1]。Bcl-2蛋白在许多肿瘤中均可见阳性表达，而且与肿瘤发生的早期阶段有关[2，3]。本研究结果表明，Bcl-2在子宫内膜早期及高分化癌表达率较高，随着分期的提高及分化的降低其阳性表达率逐渐降低。提示Bcl-2与子宫内膜癌的形成有关，而且Bcl-2可能主要在子宫内膜癌形成的早期起作用。
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PCNA是一种分子量为36 kd的蛋白，位于细胞核内。其量在静止期(G0)细胞中很少，G1晚期开始增加，S期达高峰，G2、M期明显下降，是DNA聚合酶δ的辅助蛋白，为DNA合成所必需。PCNA在核内表达增加预示着该细胞进入S期或G1晚期，因此可作为细胞增殖状态的指标。有人研究在正常增生期子宫内膜，内膜增生过长、内膜腺癌中PCNA指数逐渐升高，而且PCNA指数与内膜癌分级有关[4]。本研究也发现PCNA在所有癌组织中均有表达，而且随分期的升高、分化的降低，PCNA指数逐渐升高。
有人在大肠癌中发现细胞凋亡减少，Bcl-2过度表达。而增殖细胞的比例随其恶性程度的升高而上升[5]。本研究结果表明，在子宫内膜癌形成的过程中，既有Bcl-2的参与，又有肿瘤细胞的过度增殖，可见子宫内膜癌的形成及发展是多因素的。Bcl-2可能主要在早期起作用，细胞的过度增殖却伴随在整个过程中，而且随着病情的进展，细胞的过度增殖可能为其主要表现。
, 百拇医药
参考文献
1，Hockenbery DM, Zutter M, Hickey W, et al. Bcl-2 protein is topographically restricted in tissues characterized apoptotic cell death. Proc Natl Acad Sci USA, 1991, 88: 6961-6965
2，Sinicrope FA, Ruan SB, Cleary KR, et al. Bcl-2 and p53 oncoprotein expression during colorectal tumorigenesis Cancer Res, 1995, 55: 237-241
3，庄小强，袁世珍，王晓怀，等.大肠肿瘤中抑制凋亡基因Bcl-2和p53蛋白产物的表达和意义.临床与实验病理学杂志，1996，12：23～26
4，杜兴贵，张丽，易建华，等.ER，PR及PCNA在子宫内膜增生过长和内膜腺癌中的表达.实用癌症杂志，1998，13：24～26
5，孙保存，赵秀兰，惠京，等.大肠癌及癌前病变中细胞凋亡与细胞增殖间关系的原位观察.中华医学杂志，1996，76：848～851
(1999-02-20收稿), 百拇医药
单位：生秀杰(中国医科大学第一临床学院妇科，沈阳 11000经)；何秀琴(中国医科大学第一临床学院妇科，沈阳 110001)；宋和存(中国医科大学第一临床学院妇科，沈阳 110001)；王颖(中国医科大学第一临床学院妇科，沈阳 110001)
关键词：子宫内膜癌；增殖细胞核抗原；Bcl-2基因
中国医科大学学报000229 近来发现，细胞过度增殖与凋亡的失衡是肿瘤形成的重要机制。Bcl-2为广义的抗凋亡基因，增殖细胞核抗原(PCNA)是反映细胞增殖状态的指标。作者采用免疫组化方法检测Bcl-2和PCNA在子宫内膜样腺癌中的表达，探讨两者在子宫内膜癌形成中的作用。
1 材料与方法
1.1 标本 病例取自我科1984～1992年间存档的子宫内膜样腺癌石蜡包埋标本共50例，均经术后病理诊断证实。患者年龄31～65岁，术前未经放疗或化疗。根据FIGO标准分为Ⅰ期26例，Ⅱ期14例，Ⅲ、Ⅳ期10例。其中高分化28例，中分化13例，低分化9例。
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1.2 免疫组化染色 采用免疫组化S—P法，第一抗体，抗Bcl-2单抗(1∶50)，抗PCNA单抗PC10(1∶50)；第二抗体为生物素标记的羊抗鼠IgG(1∶150)。以上抗体及S—P试剂盒均为美国Cruz公司产品。染色步骤按试剂盒说明书进行。对照：用PBS代替一抗作为阴性对照，已知阳性标本作为阳性对照。
1.3 结果判定 细胞浆内呈棕黄色细颗粒或弥漫成片着色(DAB显色)为Bcl-2蛋白阳性，无着色为阴性。PCNA阳性为细胞核染成棕黄色，所有切片均见PCNA阳性反应。每例切片随机选取肿瘤细胞密集的5个高倍视野，每视野计数100个细胞中阳性细胞数，取均值，以“%”表示。
1.4 统计学处理 采用χ2及t检验。
2 结果
2.1 Bcl-2蛋白表达与子宫内膜癌临床及病理特征的关系 50例子宫内膜癌中，Bcl-2阳性21例，阳性率为42.0%。其中Ⅰ期阳性率53.8%(14/26)，Ⅱ期为35.7%(5/14)，Ⅲ、Ⅳ期为20.0%(2/10)。随着临床分期的提高，Bcl-2表达阳性率逐渐降低(P＝0.02)。高分化腺癌阳性率为53.5%(15/28)，中分化为38.4%(5/13)，低分化仅见1例阳性(P＝0.02)。
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2.2 PCNA表达与子宫内膜癌临床及病理特征的关系，见表1。
表1 PCNA表达与子宫内膜癌临床及病理特点的关系
(
±s)Table 1 Relationship between expression of PCNA and clinicopathological characteristic of endometrial carcinoma 分 类
n
PCNA指数
P
FIGO分期
, http://www.100md.com
Ⅰ
26
41.62±17.23
Ⅱ
14
51.78±26.89
Ⅲ、Ⅳ
10
74.81±23.62
<0.01
FIGO分期
G1
, 百拇医药 28
34.75±13.85
G2
13
65.76±19.27
G3
9
80.77±15.65
<0.01
3 讨论
肿瘤的发生是细胞凋亡与细胞增殖平衡失调所致。Bcl-2为拮抗细胞凋亡的基因，通过抑制细胞凋亡，延长细胞寿命而促进肿瘤的发生。目前对细胞凋亡发生的机制尚不清楚，有研究认为，Bcl-2基因是通过其表达产物阻断内源性核酸内切酶的活性而控制细胞凋亡的，而Bcl-2本身又受许多调控因子的调控[1]。Bcl-2蛋白在许多肿瘤中均可见阳性表达，而且与肿瘤发生的早期阶段有关[2，3]。本研究结果表明，Bcl-2在子宫内膜早期及高分化癌表达率较高，随着分期的提高及分化的降低其阳性表达率逐渐降低。提示Bcl-2与子宫内膜癌的形成有关，而且Bcl-2可能主要在子宫内膜癌形成的早期起作用。
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PCNA是一种分子量为36 kd的蛋白，位于细胞核内。其量在静止期(G0)细胞中很少，G1晚期开始增加，S期达高峰，G2、M期明显下降，是DNA聚合酶δ的辅助蛋白，为DNA合成所必需。PCNA在核内表达增加预示着该细胞进入S期或G1晚期，因此可作为细胞增殖状态的指标。有人研究在正常增生期子宫内膜，内膜增生过长、内膜腺癌中PCNA指数逐渐升高，而且PCNA指数与内膜癌分级有关[4]。本研究也发现PCNA在所有癌组织中均有表达，而且随分期的升高、分化的降低，PCNA指数逐渐升高。
有人在大肠癌中发现细胞凋亡减少，Bcl-2过度表达。而增殖细胞的比例随其恶性程度的升高而上升[5]。本研究结果表明，在子宫内膜癌形成的过程中，既有Bcl-2的参与，又有肿瘤细胞的过度增殖，可见子宫内膜癌的形成及发展是多因素的。Bcl-2可能主要在早期起作用，细胞的过度增殖却伴随在整个过程中，而且随着病情的进展，细胞的过度增殖可能为其主要表现。
, 百拇医药
参考文献
1，Hockenbery DM, Zutter M, Hickey W, et al. Bcl-2 protein is topographically restricted in tissues characterized apoptotic cell death. Proc Natl Acad Sci USA, 1991, 88: 6961-6965
2，Sinicrope FA, Ruan SB, Cleary KR, et al. Bcl-2 and p53 oncoprotein expression during colorectal tumorigenesis Cancer Res, 1995, 55: 237-241
3，庄小强，袁世珍，王晓怀，等.大肠肿瘤中抑制凋亡基因Bcl-2和p53蛋白产物的表达和意义.临床与实验病理学杂志，1996，12：23～26
4，杜兴贵，张丽，易建华，等.ER，PR及PCNA在子宫内膜增生过长和内膜腺癌中的表达.实用癌症杂志，1998，13：24～26
5，孙保存，赵秀兰，惠京，等.大肠癌及癌前病变中细胞凋亡与细胞增殖间关系的原位观察.中华医学杂志，1996，76：848～851
(1999-02-20收稿), 百拇医药