缺血性卒中患者血清可溶性P-选择素的变化及其意义
作者：夏斌 陈秋生 邵福源 赵忠新
单位：夏斌(第二军医大学长征医院神经内科，上海 200003)；邵福源(第二军医大学长征医院神经内科，上海 200003)；赵忠新(第二军医大学长征医院神经内科，上海 200003)；陈秋生(血液科)
关键词：脑血管意外；脑缺血；暂时性；可溶性P-选择素；巴曲酶
摘 要摘 要：目的：观察可溶性P-选择素(sP-选择素)在急性缺血性脑卒中和短暂性脑缺血发作(TIA)患者中的变化及巴曲酶对其的影响。方法：用酶联免疫吸附法对16例卒中患者在发病后6 h，1，3和7 d连续测定，8例TIA患者发病1 d内测定，14例卒中患者予巴曲酶治疗后血清中sP-选择素水平测定。结果：急性缺血性脑卒中患者血清中sP-选择素升高，在发病后6 h和1 d时最明显；TIA患者无变化；巴曲酶治疗对其无影响；sP-选择素水平与神经功能缺损程度无关。结论： 缺血性脑卒中急性期sP-选择素升高，且与发病后的时间有关。
, 百拇医药
分类号：R 743.3 文献标识码：A
文章编号：0258-879X(2000)02-0124-03
Changes of serum sP-selectin levels in patients
with acute ischemic stroke
XIA Bin
(Department of Neurology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University,Shanghai 200003, China)
SHAO Fu-Yuan
(Department of Neurology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University,Shanghai 200003, China)
, 百拇医药
ZHAO Zhong-Xin
(Department of Neurology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University,Shanghai 200003, China)
CHEN Qiu-Sheng
(Department of Hematology)
ABSTRACT：Objective: To observe the changes of serum soluble P-selectin (sP-selectin) in acute ischemic stroke and transient ischemic attack(TIA) patients and the effect of bartroxobin on it. Methods: sP-selectin was measured in 16 consecutive patients (within 6 hours, 1,3,7 days after stroke) with acute ischemic stroke, in 8 patients with TIA(within 1 day after attack),in 14 patients with acute ischemic stroke after treatment with bartroxobin by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results: Serum sP-selectin in patients with acute ischemic stroke was increased within 6 hours, on the first day, the third day and the seventh day，especially within 6 hours and the first day. There was no significant difference between TIA patients and controls, between stroke patient treated with bartroxobin and without bartroxobin. There was no significant correlation between sP-selectin levels and the extent of neurological deficits. Conclusion：Serum level of sP-selectin is elevated in acute ischemic stroke and these changes are correlated with the time after stroke.
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KEY WORDS：cerebrovascular disorders; cerebral ischemia, transient； soluble P-selectin；bartroxobin▲
粘附分子在血栓性疾病中起重要作用，P-选择素(CD62p,GMP-140)，属粘附分子中的选择素家族。国内外的研究显示，可溶性P-选择素(sP-选择素)在缺血性脑卒患者中是升高的[1，2]，是血管内皮细胞和血小板激活的标志。本研究旨在观察sP-选择素在缺血性脑卒中后的动态变化和在短暂性脑缺血发作(TIA)后的变化，以及降纤药物巴曲酶对其有无影响。
1 材料和方法
1.1 研究对象及分组 (1)缺血性卒中组16例,年龄55～82岁,平均(67.6±8.2)岁,伤残程度：中型10例,重型6例,神经功能缺损平均评分(21.3±5.7)；(2)TIA组8例,年龄48～76岁,平均(60.6±9.2)岁；(3)巴曲酶治疗组14例,年龄49～71岁,平均(60.0±6.8)岁,伤残程度:中型11例,重型3例,神经功能缺损平均评分是(22.9±7.0)，发病时间在24 h内。以上各组患者均为我科1997年7月至1998年12月收治的患者。所有病例符合1995年全国第四次脑血管病学术会议制定的诊断标准,神经功能缺损程度按此次会议的标准评分[3]。脑梗死部位均属颈内动脉系统，进展性卒中除外。(4)对照组16例,年龄50～77岁,平均(63.9±8.8)岁,为我科同期其他疾病的住院患者。患者和对照组除外标准：感染、肿瘤、组织损伤(如：心肌梗死、外科手术)和近期应用免疫抑制剂等患者。
, 百拇医药
1.2 方法 卒中组于发病6 h，第1，3和7天，TIA组于发病1 d内，巴曲酶治疗组予巴曲酶10 U静脉滴注后的第2天，与对照组分别抽取肘静脉血2 ml，室温下放置30～60 min，3 000 r/min离心15 min，将分离的血清置-25℃冰箱中备检。同时查血常规、血糖、血脂。采用由抗人活化血小板α颗粒蛋白单抗和兔抗人CD62p多抗建立的酶联夹心法测定血清sP-选择素。GMP-140酶标试剂盒购自苏州医学院血栓研究室，按说明书操作：GMP-140单抗SZ-51包被，4℃过夜，洗涤后每孔加入100 μl标本，37℃温育2 h后洗涤，加入E-IgG，洗净，OPD显色，酶标光度计(492 nm)测定各孔光密度D值。
1.3 统计学处理 所有资料均用SPSS7.5统计软件进行分析。采用χ2检验，t检验，方差分析，直线相关分析,两两比较用LSD检验。
2 结 果
, 百拇医药 2.1 研究组和对照组临床一般特征 除卒中组白细胞数高于对照组外(P<0.05), 卒中组和TIA组的年龄、性别、血管病危险因素、血糖、三酰甘油、总胆固醇、血小板水平等情况与对照组相比均无明显差异(P>0.05)。巴曲酶治疗组的一般特征与卒中组也无明显差异(P>0.05)。
2.2 卒中组和TIA组sP-选择素水平 卒中后6 h，1，3和7 d血清中sP-选择素水平均高于对照组和TIA组(P<0.05，0.01)。TIA组与对照组之间无显著性差异(P>0.05，图1)。经LSD检验，血清中sP-选择素水平在发病后6 h时最高，第7天最低。
2.3 巴曲酶对sP-选择素的影响 卒中后第1天用巴曲酶治疗的sP-选择素平均为(39.2±11.7) ng/ml,不用巴曲酶治疗的平均为(34.2±10.6) ng/ml，两者无显著性差异(P>0.05)
2.4 sP-选择素水平与病情程度关系 卒中后6 h，1，3和7 d血清中sP-选择素水平与临床伤残程度无明显相关性(P>0.05)。发病第1天的sP-选择素与白细胞和血小板数无相关性(P>0.05)。
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图1 卒中后不同时间和TIA患者血清sP-选择素的变化
Fig 1 The changes of serum sP-selectin levels in
different time after stroke and TIA patients
A：Control (n=16); B: Stroke (6 h, n=16);
C： Strock (1 d, n=16);D: Strock (3 d, n=16);
E: Strock (7 d, n=16); F: TIA (1 d, n=8)
*P<0.05;**P<0.01 vs control and TIA
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3 讨 论
Frijns等[2]的研究发现，急性缺血性脑卒中患者血中sP-选择素水平是升高的。我们的结果证实了这一点，此外还显示：卒中后不同时间的sP-选择素水平是不一样的，6 h最高，其次是第1天，第3和7天时仍高于对照组。TIA与对照组相比较无变化。
由于mRNA不同的剪接，P-选择素有膜型和可溶型两种，后者没有跨膜区，由血小板α颗粒或内皮细胞Weibel-Palade体中分泌而来[4]。sP-选择素水平的升高可以代表在内皮细胞和血小板的总P-选择素水平的升高，反映了内皮细胞和血小板的激活，是血小板激活的体内标志[2，5]。用ELISA方法在高血压、动脉粥样硬化等患者中发现sP-选择素升高[6,7]，因此在对照组的选择上要充分考虑到这个因素。
动物实验已证实，在脑缺血和再灌注后内皮细胞P-选择素的表达增强和血中sP-选择素水平升高，升高的时间主要在缺血和再灌注后1 d内[8,9]，这与我们的结果相吻合。脑缺血时产生的凝血酶、氧自由基和其他刺激物可刺激内皮细胞和血小板，并使之P-选择素的增强，P-选择素的表达增强更进一步促使白细胞的粘附，释放细胞因子和氧自由基，增加组织损伤。在这一循环中，粘附分子起重要作用，通过阻滞粘附分子将为卒中的治疗提供新的途径。
, http://www.100md.com
巴曲酶有溶解纤维蛋白原的作用，在缺血性卒中治疗中取得一定的疗效。尽管Shimomura等[5]报道心肌梗死患者溶栓治疗后血中sP-选择素水平升高，我们在脑梗死患者中未能发现此现象。sP-选择素水平是否能作为溶栓效果评定的指标，还需更强的溶栓药物在发病后超急性期应用的研究来证实。尽管在我们的研究中不同时间卒中患者sP-选择素水平与病情无相关性，但卒中组sP-选择素水平仍高于TIA组，说明其变化还是与缺血程度有关，进一步的研究需要更精确的评定方法和增加病例数。有报道心血管疾病患者中sP-选择素升高者再发血管病变的机会远远高于sP-选择素正常者[10]，这提示sP-选择素可作为心脑血管病的预测指标。
作者简介：夏斌(1964～)，男( 汉族)，硕士，主治医师
参考文献：
[1]张 晨，郭英华，赵慧元. 缺血性脑血管病患者血浆D-二聚体和GMP-140含量的变化及临床意义[J]. 临床神经病学杂志，1996，9(4)：202-205.
, http://www.100md.com
[2]Frijns CJM，Kappelle LJ,van Gijn J, et al. Soluble adhesion molecule reflect endothelial cell activation in ischemic stroke and in carotid atherosclerosis[J]. Stroke,1997,28(11):2214-2218.
[3]中华神经科学会中华神经外科学会.各类脑血管疾病诊断要点[J].中华神经科杂志,1996，29(6)：379-381.
[4]Blann AD,Lip GY. Hypothesis:is soluble P-selectin a new marker of platelet activation[J]. Atherosclerosis,1997,128(2):135-138.
[5]Shimomura H,Ogawa H,Arai H, et al.Serial changes in plasma levels of soluble P-selectin in patients with acute myocardial infarction[J]. Am J Cardiol, 1998,81(4):397-400.
, 百拇医药
[6]Lip GY, Blann AD, Zarifis J, et al.Soluble adhesion molecule P-selectin and endothelial dysfunction in essential hypertension:implications for atherogenesis? A preliminary report[J]. J Hypertens,1995,13(12 pt 2):1674-1678.
[7]Davi G,Romano M,Mezzetti A, et al. Increased levels of soluble P-selectin in hypercholesterolemic patients[J]. Circulation,1998,97(10):953-957.
[8]Okada Y, Copeland BR, Mori E, et al. P-selectin and intercellular adhesion molecule-1 expression after focal brain ischemic and reperfusion[J]. Stroke, 1994, 25(1):202-211.
[9]杨金升，高福兴，张如富，等.血浆GMP-140在实验性急性兔脑缺血的变迁[J].中风与神经疾病杂志，1996，13(2)：81-82.
[10]Blann AD,McCollum CN. Increased soluble P-selectin:a new marker for the progression of vascular disease[J]. Br J Haematol,1996,93(Suppl 1):25.
收稿日期：1999-06-28
修稿日期：1999-11-02, http://www.100md.com
单位：夏斌(第二军医大学长征医院神经内科，上海 200003)；邵福源(第二军医大学长征医院神经内科，上海 200003)；赵忠新(第二军医大学长征医院神经内科，上海 200003)；陈秋生(血液科)
关键词：脑血管意外；脑缺血；暂时性；可溶性P-选择素；巴曲酶
摘 要摘 要：目的：观察可溶性P-选择素(sP-选择素)在急性缺血性脑卒中和短暂性脑缺血发作(TIA)患者中的变化及巴曲酶对其的影响。方法：用酶联免疫吸附法对16例卒中患者在发病后6 h，1，3和7 d连续测定，8例TIA患者发病1 d内测定，14例卒中患者予巴曲酶治疗后血清中sP-选择素水平测定。结果：急性缺血性脑卒中患者血清中sP-选择素升高，在发病后6 h和1 d时最明显；TIA患者无变化；巴曲酶治疗对其无影响；sP-选择素水平与神经功能缺损程度无关。结论： 缺血性脑卒中急性期sP-选择素升高，且与发病后的时间有关。
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分类号：R 743.3 文献标识码：A
文章编号：0258-879X(2000)02-0124-03
Changes of serum sP-selectin levels in patients
with acute ischemic stroke
XIA Bin
(Department of Neurology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University,Shanghai 200003, China)
SHAO Fu-Yuan
(Department of Neurology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University,Shanghai 200003, China)
, 百拇医药
ZHAO Zhong-Xin
(Department of Neurology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University,Shanghai 200003, China)
CHEN Qiu-Sheng
(Department of Hematology)
ABSTRACT：Objective: To observe the changes of serum soluble P-selectin (sP-selectin) in acute ischemic stroke and transient ischemic attack(TIA) patients and the effect of bartroxobin on it. Methods: sP-selectin was measured in 16 consecutive patients (within 6 hours, 1,3,7 days after stroke) with acute ischemic stroke, in 8 patients with TIA(within 1 day after attack),in 14 patients with acute ischemic stroke after treatment with bartroxobin by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results: Serum sP-selectin in patients with acute ischemic stroke was increased within 6 hours, on the first day, the third day and the seventh day，especially within 6 hours and the first day. There was no significant difference between TIA patients and controls, between stroke patient treated with bartroxobin and without bartroxobin. There was no significant correlation between sP-selectin levels and the extent of neurological deficits. Conclusion：Serum level of sP-selectin is elevated in acute ischemic stroke and these changes are correlated with the time after stroke.
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KEY WORDS：cerebrovascular disorders; cerebral ischemia, transient； soluble P-selectin；bartroxobin▲
粘附分子在血栓性疾病中起重要作用，P-选择素(CD62p,GMP-140)，属粘附分子中的选择素家族。国内外的研究显示，可溶性P-选择素(sP-选择素)在缺血性脑卒患者中是升高的[1，2]，是血管内皮细胞和血小板激活的标志。本研究旨在观察sP-选择素在缺血性脑卒中后的动态变化和在短暂性脑缺血发作(TIA)后的变化，以及降纤药物巴曲酶对其有无影响。
1 材料和方法
1.1 研究对象及分组 (1)缺血性卒中组16例,年龄55～82岁,平均(67.6±8.2)岁,伤残程度：中型10例,重型6例,神经功能缺损平均评分(21.3±5.7)；(2)TIA组8例,年龄48～76岁,平均(60.6±9.2)岁；(3)巴曲酶治疗组14例,年龄49～71岁,平均(60.0±6.8)岁,伤残程度:中型11例,重型3例,神经功能缺损平均评分是(22.9±7.0)，发病时间在24 h内。以上各组患者均为我科1997年7月至1998年12月收治的患者。所有病例符合1995年全国第四次脑血管病学术会议制定的诊断标准,神经功能缺损程度按此次会议的标准评分[3]。脑梗死部位均属颈内动脉系统，进展性卒中除外。(4)对照组16例,年龄50～77岁,平均(63.9±8.8)岁,为我科同期其他疾病的住院患者。患者和对照组除外标准：感染、肿瘤、组织损伤(如：心肌梗死、外科手术)和近期应用免疫抑制剂等患者。
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1.2 方法 卒中组于发病6 h，第1，3和7天，TIA组于发病1 d内，巴曲酶治疗组予巴曲酶10 U静脉滴注后的第2天，与对照组分别抽取肘静脉血2 ml，室温下放置30～60 min，3 000 r/min离心15 min，将分离的血清置-25℃冰箱中备检。同时查血常规、血糖、血脂。采用由抗人活化血小板α颗粒蛋白单抗和兔抗人CD62p多抗建立的酶联夹心法测定血清sP-选择素。GMP-140酶标试剂盒购自苏州医学院血栓研究室，按说明书操作：GMP-140单抗SZ-51包被，4℃过夜，洗涤后每孔加入100 μl标本，37℃温育2 h后洗涤，加入E-IgG，洗净，OPD显色，酶标光度计(492 nm)测定各孔光密度D值。
1.3 统计学处理 所有资料均用SPSS7.5统计软件进行分析。采用χ2检验，t检验，方差分析，直线相关分析,两两比较用LSD检验。
2 结 果
, 百拇医药 2.1 研究组和对照组临床一般特征 除卒中组白细胞数高于对照组外(P<0.05), 卒中组和TIA组的年龄、性别、血管病危险因素、血糖、三酰甘油、总胆固醇、血小板水平等情况与对照组相比均无明显差异(P>0.05)。巴曲酶治疗组的一般特征与卒中组也无明显差异(P>0.05)。
2.2 卒中组和TIA组sP-选择素水平 卒中后6 h，1，3和7 d血清中sP-选择素水平均高于对照组和TIA组(P<0.05，0.01)。TIA组与对照组之间无显著性差异(P>0.05，图1)。经LSD检验，血清中sP-选择素水平在发病后6 h时最高，第7天最低。
2.3 巴曲酶对sP-选择素的影响 卒中后第1天用巴曲酶治疗的sP-选择素平均为(39.2±11.7) ng/ml,不用巴曲酶治疗的平均为(34.2±10.6) ng/ml，两者无显著性差异(P>0.05)
2.4 sP-选择素水平与病情程度关系 卒中后6 h，1，3和7 d血清中sP-选择素水平与临床伤残程度无明显相关性(P>0.05)。发病第1天的sP-选择素与白细胞和血小板数无相关性(P>0.05)。
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图1 卒中后不同时间和TIA患者血清sP-选择素的变化
Fig 1 The changes of serum sP-selectin levels in
different time after stroke and TIA patients
A：Control (n=16); B: Stroke (6 h, n=16);
C： Strock (1 d, n=16);D: Strock (3 d, n=16);
E: Strock (7 d, n=16); F: TIA (1 d, n=8)
*P<0.05;**P<0.01 vs control and TIA
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3 讨 论
Frijns等[2]的研究发现，急性缺血性脑卒中患者血中sP-选择素水平是升高的。我们的结果证实了这一点，此外还显示：卒中后不同时间的sP-选择素水平是不一样的，6 h最高，其次是第1天，第3和7天时仍高于对照组。TIA与对照组相比较无变化。
由于mRNA不同的剪接，P-选择素有膜型和可溶型两种，后者没有跨膜区，由血小板α颗粒或内皮细胞Weibel-Palade体中分泌而来[4]。sP-选择素水平的升高可以代表在内皮细胞和血小板的总P-选择素水平的升高，反映了内皮细胞和血小板的激活，是血小板激活的体内标志[2，5]。用ELISA方法在高血压、动脉粥样硬化等患者中发现sP-选择素升高[6,7]，因此在对照组的选择上要充分考虑到这个因素。
动物实验已证实，在脑缺血和再灌注后内皮细胞P-选择素的表达增强和血中sP-选择素水平升高，升高的时间主要在缺血和再灌注后1 d内[8,9]，这与我们的结果相吻合。脑缺血时产生的凝血酶、氧自由基和其他刺激物可刺激内皮细胞和血小板，并使之P-选择素的增强，P-选择素的表达增强更进一步促使白细胞的粘附，释放细胞因子和氧自由基，增加组织损伤。在这一循环中，粘附分子起重要作用，通过阻滞粘附分子将为卒中的治疗提供新的途径。
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巴曲酶有溶解纤维蛋白原的作用，在缺血性卒中治疗中取得一定的疗效。尽管Shimomura等[5]报道心肌梗死患者溶栓治疗后血中sP-选择素水平升高，我们在脑梗死患者中未能发现此现象。sP-选择素水平是否能作为溶栓效果评定的指标，还需更强的溶栓药物在发病后超急性期应用的研究来证实。尽管在我们的研究中不同时间卒中患者sP-选择素水平与病情无相关性，但卒中组sP-选择素水平仍高于TIA组，说明其变化还是与缺血程度有关，进一步的研究需要更精确的评定方法和增加病例数。有报道心血管疾病患者中sP-选择素升高者再发血管病变的机会远远高于sP-选择素正常者[10]，这提示sP-选择素可作为心脑血管病的预测指标。
作者简介：夏斌(1964～)，男( 汉族)，硕士，主治医师
参考文献：
[1]张 晨，郭英华，赵慧元. 缺血性脑血管病患者血浆D-二聚体和GMP-140含量的变化及临床意义[J]. 临床神经病学杂志，1996，9(4)：202-205.
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[2]Frijns CJM，Kappelle LJ,van Gijn J, et al. Soluble adhesion molecule reflect endothelial cell activation in ischemic stroke and in carotid atherosclerosis[J]. Stroke,1997,28(11):2214-2218.
[3]中华神经科学会中华神经外科学会.各类脑血管疾病诊断要点[J].中华神经科杂志,1996，29(6)：379-381.
[4]Blann AD,Lip GY. Hypothesis:is soluble P-selectin a new marker of platelet activation[J]. Atherosclerosis,1997,128(2):135-138.
[5]Shimomura H,Ogawa H,Arai H, et al.Serial changes in plasma levels of soluble P-selectin in patients with acute myocardial infarction[J]. Am J Cardiol, 1998,81(4):397-400.
, 百拇医药
[6]Lip GY, Blann AD, Zarifis J, et al.Soluble adhesion molecule P-selectin and endothelial dysfunction in essential hypertension:implications for atherogenesis? A preliminary report[J]. J Hypertens,1995,13(12 pt 2):1674-1678.
[7]Davi G,Romano M,Mezzetti A, et al. Increased levels of soluble P-selectin in hypercholesterolemic patients[J]. Circulation,1998,97(10):953-957.
[8]Okada Y, Copeland BR, Mori E, et al. P-selectin and intercellular adhesion molecule-1 expression after focal brain ischemic and reperfusion[J]. Stroke, 1994, 25(1):202-211.
[9]杨金升，高福兴，张如富，等.血浆GMP-140在实验性急性兔脑缺血的变迁[J].中风与神经疾病杂志，1996，13(2)：81-82.
[10]Blann AD,McCollum CN. Increased soluble P-selectin:a new marker for the progression of vascular disease[J]. Br J Haematol,1996,93(Suppl 1):25.
收稿日期：1999-06-28
修稿日期：1999-11-02, http://www.100md.com