氧氟沙星缓释药栓的研制及体外药物释放实验研究
作者：贺乐荷 陈建斌 曾水清 吴颖南 邓勇峥
单位：贺乐荷(深圳市宝安人民医院，深圳 518101)；陈建斌(武汉同 济医科大学协和医院眼科教研组，武汉 430030)；曾水清(武汉同 济医科大学协和医院眼科教研组，武汉 430030)；吴颖南(武汉大学化学系，武汉 430070)；邓勇峥(深圳市宝安人民医院，深圳 518101)
关键词：氧氟沙星缓释药栓；聚乳酸；体外释放实验
广东医学院学报000203 摘要 目的：研究可 植入眼内的氧氟沙星缓释药栓的体外药物缓释过程和效果。方法：将分子量(MW)各为 6 120和 12 550的聚乳酸分别混 载 5 %和 10% 氧氟沙星制成药栓，并作体外药物释放以及高效液相色谱法药物浓度测定。 结果： 30 d内氧氟沙星体外释放率为 70%～90%，释 药时间 与聚合物分子量呈正相关，结论：由氧氟 沙星和聚乳酸制成的缓释药栓满足眼内炎治疗的基本要求。
, 百拇医药
【中图分类号】 R 758.25 【文献标识码】 A
文章编号：1005-4057 (2000) 02-0124-02
In vitro study on the release pr ocess of implantable ofloxacin
sustained-released suppositoria
He Leho，Chen Jianbin，Zeng Shuiqing，et al
(Department of Ophthalmology，People’ Hospital of Bao’an，Shenzhen 518101)
Abstract Objective：To st udy the release process of the implantab le ofloxacin sustained released supposit oria in vitro.Methods： Two ki nds of p olylactic acid with molecular weight(MW) 6 120 and 12 550 were loaded with of loxacine，and the percentage of oflox acin in the suppositoria were 5% and 10%，respectively.The concentration of ofloxacin was measured by high p erformance liquid chromatography (HP LC) at different times.Result：The precentage of ofloxacin released in v itro was 70%～90% within 30 days.There was positive relations between the duration of drug release and molecul ar weight of polylactic acid.Conclusion：Implantable sustained re leas ed suppositoria made from ofloxacin and polylactic acid meet the basic deman d for the treatment of endophthalmit is.
, http://www.100md.com
Key words：implantable ofloxacine sustained released suppositoria；polylac tic acid；release test in vitro.
细菌性眼内炎是较严重的感染性眼病，常继发于眼球 穿孔、内眼手术等。 由于血眼屏障存在，全身系统给药和局部眼外给药难以达到有效治疗浓度[1，2] ，如多次玻璃腔内注射给药，以获得较长时间的眼内有效药物浓度，会给临床工作带来极 大的风险和不便。为此，我们设计一种一次性植入眼内并能逐步降解吸收，混载氧 氟沙星聚乳酸高分子缓释药栓，以解决这治疗上的难题。现将缓释药栓的制作和体 外缓释药物实验过程和结果报道如下：
1 材料与方法
1.1 聚乳酸缓释药栓的制备
以高分子聚乳酸为原料，锌粉为催化剂，高温裂解合成丙交酯，在分别加入物质量 之比为1∶1000、1∶2000的引发剂辛酸亚锡，本体聚合得到分子量各为 6 120和 12 550 的聚乳酸。在聚乳酸中分别以重量比重为 10%、 5%加入氧氟沙星原药(昆山制药厂)，溶于丙晴和醋酸(5∶1)混合溶液，使 氧氟沙星均匀分布于聚乳酸载体材料中，然后真空抽吸溶剂呈胶状，取 10 mg 置入特制钢锭具槽中在 60大气压下成巩膜栓样，再进一步抽干溶剂呈固状，最 后 γ射线灭菌消毒而制作完备。
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1.2 体外药物释放实验
将两种分别含氧氟沙星 10% 和 5%的聚乳酸(MW＝12 550 和MW ＝6 120) 植栓分别置入 2 mL、pH＝7.4 的平衡盐 (PBS)液 中，并保存在 37℃ 振荡温浴中，在规定的时间点检测释放的药物含量 (H PLC)法，然后去掉含药的介质溶液，换以等量的 PBS 液，持续观测 3 0 d。
1.3 氧氟沙星药浓的高效液相检测 (HPLC)
(1) 采用 Waters 484型高效液相色谱仪，476积分仪，美国产 7 125型进样器。其色谱条件为YNG-C18反相层析栓 (46×250 mn， 10 μm)，流动相：甲醇-水-醋酸盐缓冲液(pH 3.6)-四氢呋喃137 ：11：37：137；流速：0.5 mL/min，检测波长： 294 nm； 灵敏度 0.01 AUFS；栓温：室温。 (2) 配制浓度 0.05，0.25，0.5，1，2，4，8，16 μ g/ mL 的氧氟沙星标准液，进行 PHLC检测。根据各自相应得到的峰面积，进 行函数相关分析，得到浓度(x)——峰面积(Y)标准曲线方程。在相同条件下， 将各时间点所取待测标本样检测，得峰面积数值，应用标准曲线方程计算出相应药 物浓度，再根据玻璃体体积换算成原玻璃体液(稀释前)药物浓度，最后取药物浓 度均值，作药物时间曲线分析。在体外释放实验中，将各时间点所测药量依次累积 相加，再与缓释药栓所含药物总量相比，可得不同时间点的药物释放比率。
, 百拇医药
2 结果
经测试药物浓度分别为 0.05，0.25，0.5，1，2，4，8，16 μ g/mL的氧氟沙星外标液，其峰面积分别为 30 561，49 535，116 485，185 504，414 888，520 052，1 015 743，2 0 06 814，得其线性方程 Y＝121 691X+58 723，r＝ 0 .997。
氧氟沙星体外释放曲线如图1。
时间(t /d)
图1 体外释药曲线
图1中显示 4种标本 A、B、C、D(分子量分别为 6 120，6 120， 12 550，12 550，药物浓度分别为 10%，5%，10%，5%)呈现 缓慢释放，30 d内药物累积释放比率为 70%～90%。聚乳酸分子量大的 (MW＝12 550)其释放比率较低，即释药较慢。载药量大，含氧氟沙星 10%的其释药前期速度较快。
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3 讨论
本研究的目的在于制作一种在眼内作用时间长、疗效好、无或极少副作用使用简便的 治疗眼内炎的药剂。药物载体聚乳酸为一种高分子生物材料，业已证实对机体无毒 性作用，且在体内可不断水解成为小分子乳酸，然后参与体内正常的物质代谢，其最 终产物为 CO2和 H2O。因而利用聚乳酸为载体做成缓释制剂植入眼内释放 药后可自行降解吸收而不需再次取出[3]。采用一次性植入术可以减少患者痛苦。 因眼内细菌性感染绝大多数由革兰氏阳性菌引起[3]。氟喹诺酮类抗菌药物具有 较强的广谱抗菌作用，且对大多数耐氨基甙类和多级耐药菌株有效，其中氧氟沙星 的一般常见最小抑菌浓度 (MIC90)为 0.20～2.0 ug/mL，在 眼科应用日趋势广泛[4]。因此选择氧氟沙星是一种理想的抗生药物。药物释放 速度可通过改变聚合物分子量大小而改变[5]。如图1所示，我们进行的体外释 放实验也证实了这一点。释药速度慢可以延长释药时间，同时可以通过增加药物在 药剂中的百分含量来增加药物的释放量，从而提高释药浓度。尽管体外释药介质与 眼内生物环境不同，但可以先依据体外释药特点，调整聚合物的分子量和药物百分 含量，使体内的药物缓释放浓度和时间更合乎治疗要求。基于上述各点的完成，达 到了本实验预期的目的，为下一步动物实验和临床应用打下了坚实的基础。
, 百拇医药
基金项目：深圳市科技局立项资助(编号：199805017)
作者简介：贺乐荷，女，1952年3月出生，学士，副主任医师
参考文献
[1] Peyman GA，Schulman JA.Intravit real drug therapy.Jpn J Ophthalmol，198 9，33：392
[2]Baum J.Peyman GA.and Barza M.Intravitreal administration of antibio tic in the treatment of bacterial endophthalmitis Ⅲ：consensus.SurvOphth almol，1982，26(2)：204
[3] Maritera T.Ogura Y，Honda Y，et al. Microspheres of biode-gradable polym ers as a drug delivery system in the vitreous.In evest Ophthalmol Vis Sci， 1991，32：1785
[4] 陈祖基：氟喹诺酮类抗菌素药及其在眼科应用.国外医学眼科分册，19 90，14(5)：273
[5] Oormuno A. Intravitreal injection of ofloxacine：Ocular pharmacokinect ics.Atarashil Gauka，1994，112：1380
收稿日期：1999-12-03；修订日期：2000-03-10, 百拇医药
单位：贺乐荷(深圳市宝安人民医院，深圳 518101)；陈建斌(武汉同 济医科大学协和医院眼科教研组，武汉 430030)；曾水清(武汉同 济医科大学协和医院眼科教研组，武汉 430030)；吴颖南(武汉大学化学系，武汉 430070)；邓勇峥(深圳市宝安人民医院，深圳 518101)
关键词：氧氟沙星缓释药栓；聚乳酸；体外释放实验
广东医学院学报000203 摘要 目的：研究可 植入眼内的氧氟沙星缓释药栓的体外药物缓释过程和效果。方法：将分子量(MW)各为 6 120和 12 550的聚乳酸分别混 载 5 %和 10% 氧氟沙星制成药栓，并作体外药物释放以及高效液相色谱法药物浓度测定。 结果： 30 d内氧氟沙星体外释放率为 70%～90%，释 药时间 与聚合物分子量呈正相关，结论：由氧氟 沙星和聚乳酸制成的缓释药栓满足眼内炎治疗的基本要求。
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【中图分类号】 R 758.25 【文献标识码】 A
文章编号：1005-4057 (2000) 02-0124-02
In vitro study on the release pr ocess of implantable ofloxacin
sustained-released suppositoria
He Leho，Chen Jianbin，Zeng Shuiqing，et al
(Department of Ophthalmology，People’ Hospital of Bao’an，Shenzhen 518101)
Abstract Objective：To st udy the release process of the implantab le ofloxacin sustained released supposit oria in vitro.Methods： Two ki nds of p olylactic acid with molecular weight(MW) 6 120 and 12 550 were loaded with of loxacine，and the percentage of oflox acin in the suppositoria were 5% and 10%，respectively.The concentration of ofloxacin was measured by high p erformance liquid chromatography (HP LC) at different times.Result：The precentage of ofloxacin released in v itro was 70%～90% within 30 days.There was positive relations between the duration of drug release and molecul ar weight of polylactic acid.Conclusion：Implantable sustained re leas ed suppositoria made from ofloxacin and polylactic acid meet the basic deman d for the treatment of endophthalmit is.
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Key words：implantable ofloxacine sustained released suppositoria；polylac tic acid；release test in vitro.
细菌性眼内炎是较严重的感染性眼病，常继发于眼球 穿孔、内眼手术等。 由于血眼屏障存在，全身系统给药和局部眼外给药难以达到有效治疗浓度[1，2] ，如多次玻璃腔内注射给药，以获得较长时间的眼内有效药物浓度，会给临床工作带来极 大的风险和不便。为此，我们设计一种一次性植入眼内并能逐步降解吸收，混载氧 氟沙星聚乳酸高分子缓释药栓，以解决这治疗上的难题。现将缓释药栓的制作和体 外缓释药物实验过程和结果报道如下：
1 材料与方法
1.1 聚乳酸缓释药栓的制备
以高分子聚乳酸为原料，锌粉为催化剂，高温裂解合成丙交酯，在分别加入物质量 之比为1∶1000、1∶2000的引发剂辛酸亚锡，本体聚合得到分子量各为 6 120和 12 550 的聚乳酸。在聚乳酸中分别以重量比重为 10%、 5%加入氧氟沙星原药(昆山制药厂)，溶于丙晴和醋酸(5∶1)混合溶液，使 氧氟沙星均匀分布于聚乳酸载体材料中，然后真空抽吸溶剂呈胶状，取 10 mg 置入特制钢锭具槽中在 60大气压下成巩膜栓样，再进一步抽干溶剂呈固状，最 后 γ射线灭菌消毒而制作完备。
, http://www.100md.com
1.2 体外药物释放实验
将两种分别含氧氟沙星 10% 和 5%的聚乳酸(MW＝12 550 和MW ＝6 120) 植栓分别置入 2 mL、pH＝7.4 的平衡盐 (PBS)液 中，并保存在 37℃ 振荡温浴中，在规定的时间点检测释放的药物含量 (H PLC)法，然后去掉含药的介质溶液，换以等量的 PBS 液，持续观测 3 0 d。
1.3 氧氟沙星药浓的高效液相检测 (HPLC)
(1) 采用 Waters 484型高效液相色谱仪，476积分仪，美国产 7 125型进样器。其色谱条件为YNG-C18反相层析栓 (46×250 mn， 10 μm)，流动相：甲醇-水-醋酸盐缓冲液(pH 3.6)-四氢呋喃137 ：11：37：137；流速：0.5 mL/min，检测波长： 294 nm； 灵敏度 0.01 AUFS；栓温：室温。 (2) 配制浓度 0.05，0.25，0.5，1，2，4，8，16 μ g/ mL 的氧氟沙星标准液，进行 PHLC检测。根据各自相应得到的峰面积，进 行函数相关分析，得到浓度(x)——峰面积(Y)标准曲线方程。在相同条件下， 将各时间点所取待测标本样检测，得峰面积数值，应用标准曲线方程计算出相应药 物浓度，再根据玻璃体体积换算成原玻璃体液(稀释前)药物浓度，最后取药物浓 度均值，作药物时间曲线分析。在体外释放实验中，将各时间点所测药量依次累积 相加，再与缓释药栓所含药物总量相比，可得不同时间点的药物释放比率。
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2 结果
经测试药物浓度分别为 0.05，0.25，0.5，1，2，4，8，16 μ g/mL的氧氟沙星外标液，其峰面积分别为 30 561，49 535，116 485，185 504，414 888，520 052，1 015 743，2 0 06 814，得其线性方程 Y＝121 691X+58 723，r＝ 0 .997。
氧氟沙星体外释放曲线如图1。
时间(t /d)
图1 体外释药曲线
图1中显示 4种标本 A、B、C、D(分子量分别为 6 120，6 120， 12 550，12 550，药物浓度分别为 10%，5%，10%，5%)呈现 缓慢释放，30 d内药物累积释放比率为 70%～90%。聚乳酸分子量大的 (MW＝12 550)其释放比率较低，即释药较慢。载药量大，含氧氟沙星 10%的其释药前期速度较快。
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3 讨论
本研究的目的在于制作一种在眼内作用时间长、疗效好、无或极少副作用使用简便的 治疗眼内炎的药剂。药物载体聚乳酸为一种高分子生物材料，业已证实对机体无毒 性作用，且在体内可不断水解成为小分子乳酸，然后参与体内正常的物质代谢，其最 终产物为 CO2和 H2O。因而利用聚乳酸为载体做成缓释制剂植入眼内释放 药后可自行降解吸收而不需再次取出[3]。采用一次性植入术可以减少患者痛苦。 因眼内细菌性感染绝大多数由革兰氏阳性菌引起[3]。氟喹诺酮类抗菌药物具有 较强的广谱抗菌作用，且对大多数耐氨基甙类和多级耐药菌株有效，其中氧氟沙星 的一般常见最小抑菌浓度 (MIC90)为 0.20～2.0 ug/mL，在 眼科应用日趋势广泛[4]。因此选择氧氟沙星是一种理想的抗生药物。药物释放 速度可通过改变聚合物分子量大小而改变[5]。如图1所示，我们进行的体外释 放实验也证实了这一点。释药速度慢可以延长释药时间，同时可以通过增加药物在 药剂中的百分含量来增加药物的释放量，从而提高释药浓度。尽管体外释药介质与 眼内生物环境不同，但可以先依据体外释药特点，调整聚合物的分子量和药物百分 含量，使体内的药物缓释放浓度和时间更合乎治疗要求。基于上述各点的完成，达 到了本实验预期的目的，为下一步动物实验和临床应用打下了坚实的基础。
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基金项目：深圳市科技局立项资助(编号：199805017)
作者简介：贺乐荷，女，1952年3月出生，学士，副主任医师
参考文献
[1] Peyman GA，Schulman JA.Intravit real drug therapy.Jpn J Ophthalmol，198 9，33：392
[2]Baum J.Peyman GA.and Barza M.Intravitreal administration of antibio tic in the treatment of bacterial endophthalmitis Ⅲ：consensus.SurvOphth almol，1982，26(2)：204
[3] Maritera T.Ogura Y，Honda Y，et al. Microspheres of biode-gradable polym ers as a drug delivery system in the vitreous.In evest Ophthalmol Vis Sci， 1991，32：1785
[4] 陈祖基：氟喹诺酮类抗菌素药及其在眼科应用.国外医学眼科分册，19 90，14(5)：273
[5] Oormuno A. Intravitreal injection of ofloxacine：Ocular pharmacokinect ics.Atarashil Gauka，1994，112：1380
收稿日期：1999-12-03；修订日期：2000-03-10, 百拇医药