肌红蛋白染色对实验性心肌梗死应用价值的探讨
作者：李宝山 魏守礼 陈英敏 吴育锦
单位：(河北省人民医院医学影像中心，石家庄 050051)
关键词：心肌梗死；肌红蛋白；染色法
临床与实验病理学杂志000229 中图分类号 R542.22；R446.8 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(2000)02-0167-01
1 材料与方法
采用结扎冠状动脉左前降支近侧段的方法制成25只犬心肌梗死动物模型。分别于结扎冠状动脉术后的不同时期将犬处死，取出心脏。心脏标本按纵切法分别于近心瓣端、中间段和心尖部及左冠状动脉的左旋支、右冠状动脉主支、右后降支及左、右心耳取30块心肌标本。采用常规HE染色及ABC免疫组化染色法。
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2 结果
2.1 冠状动脉结扎术后3 h组 病变HE染色显示以心肌浊肿为主，表现为心肌细胞肿胀，染色深浅不一，纹理不清，核浅染或消失。间质较大血管可见淤血。肌红蛋白染色显示普遍性肌红蛋白脱失，着色浅。
2.2 冠状动脉结扎术后10 h组 病变HE染色显示间质血管扩张淤血，有大量嗜中性粒细胞渗出，心肌细胞大部分以浊肿为主，偶见个别肌纤维有肌溶病灶。肌红蛋白染色显示普遍性肌红蛋白脱失，着色不均匀，其间偶见一空化区(即不着色的透明区)，且范围较HE染色的肌溶灶为大。
2.3 冠状动脉结扎术后18 h组 病变HE染色显示间质血管高度淤血，间质内可见大量白细胞渗出，于梗死区可见散在小的肌溶性病灶和小片状凝固性坏死灶，于一视野中HE显示心肌间质内可见大量红细胞渗出，所见心肌无肌溶灶表现，但肌红蛋白染色显示散在不着色空化灶，说明有肌溶性梗死灶。
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2.4 冠状动脉结扎术后48 h组 病变HE染色显示炎性渗出仍很明显，心肌细胞除浊肿外均有典型的大片凝固性坏死区，其中仍可见小片的肌溶性病灶，肌红蛋白染色显示普遍大片不着色区，但无空化现象，与HE染色的心肌梗死区相对应但较前者范围大。
2.5 冠状动脉结扎术后4天组 病变HE染色显示大片的凝固性坏死区伴有间质炎性渗出，肌红蛋白染色显示大片状的不着色无空化区(与HE染色凝固性坏死相对应区)，此外还可见到HE染色未显示的界线清楚的不着色空化区(与HE染色肌溶灶相对应)。
2.6 冠状动脉结扎术后12天组 病变HE染色显示为大
片凝固性坏死与少量肌溶性病灶并存，心肌大量坏死与少量心肌纤维化并存。间质内中性白细胞浸润减轻。肌红蛋白染色显示在心肌纤维化周围可见较HE染色范围更大的不着色无空化区。
2.7 冠状动脉结扎术后31天组 病变HE染色显示以瘢痕形成为主，表现为大量纤维母细胞并有胶原形成，成束状分布，其间可见残留小片状坏死区。肌红蛋白染色除显示心肌纤维化不着色外，于纤维化心肌间还可见到较HE染色范围更大、数量更多的不着色区。
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3 讨论
常规HE染色依据其典型的梗死区坏死图像，即肌溶性坏死和凝固性坏死来明确心肌梗死的病理诊断，但典型的梗死区坏死区图像出现较晚。而心肌早期坏死出现前的病变包括水肿、肌原纤维肿胀、变粗、横纹模糊、糖原减少至消失、染色性质异常等改变，仅凭HE染色光镜观察，有时难以明确早期心肌梗死〔1〕。但应用肌红蛋白染色法，依据其免疫组化原理，通过对肌红蛋白脱失及其程度的了解，能够敏感地反映出心肌坏死及坏死的程度。国内学者通过对结扎犬冠状动脉后24 h内心肌早期病变的研究〔2，3〕，已证实心肌缺血缺氧30 min左右即可观察到肌红蛋白的减少，并与损伤时间呈正相关。本组冠状动脉结扎术后3～18 h的实验结果也证实了肌红蛋白染色法较HE染色法能更早地判定与显示早期心肌梗死。此外本组实验通过对同视野肌红蛋白和HE染色的对比，还发现冠状动脉结扎术后各组肌红蛋白染色所标示的心肌坏死区均较HE染色所标示的范围大或多。这是由肌红蛋白染色法的高度敏感性所决定的。
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心肌细胞不易再生，梗死的修复靠肉芽组织和形成瘢痕，3周后已见修复期的肉芽组织，其中可见较多的胶原纤维，4～6周后坏死的心肌组织已基本上为纤维瘢痕组织所代替，标志着临床治愈〔1〕。本组实验冠脉结扎术后31天，HE染色结果瘢痕中偶见小梗死灶，但肌红蛋白染色在瘢痕组织中能发现较多的心肌梗死灶。说明31天HE染色标示的心肌瘢痕并不稳定，仍需继续延长观察治疗时间。因此，这一实验结果对指导临床重新认识心肌梗死临床上的稳定期，制定相应的治疗方案也具有十分重要的意义。
参考文献
1，谷伯起主编.心血管病理学.北京：人民卫生出版社，1992：63～66
2，姚季生，姚 申，应爱娣等.用肌红蛋白免疫组化法检测实验性早期心肌梗塞.上海第二医科大学学报，1993；13(2)：136
3，黎 允，李成库，孙 波.心肌早期病变的肌红蛋白免疫组化研究.白求恩医科大学学报，1994；20(4)：336
收稿日期：1999-05-07, 百拇医药
单位：(河北省人民医院医学影像中心，石家庄 050051)
关键词：心肌梗死；肌红蛋白；染色法
临床与实验病理学杂志000229 中图分类号 R542.22；R446.8 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(2000)02-0167-01
1 材料与方法
采用结扎冠状动脉左前降支近侧段的方法制成25只犬心肌梗死动物模型。分别于结扎冠状动脉术后的不同时期将犬处死，取出心脏。心脏标本按纵切法分别于近心瓣端、中间段和心尖部及左冠状动脉的左旋支、右冠状动脉主支、右后降支及左、右心耳取30块心肌标本。采用常规HE染色及ABC免疫组化染色法。
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2 结果
2.1 冠状动脉结扎术后3 h组 病变HE染色显示以心肌浊肿为主，表现为心肌细胞肿胀，染色深浅不一，纹理不清，核浅染或消失。间质较大血管可见淤血。肌红蛋白染色显示普遍性肌红蛋白脱失，着色浅。
2.2 冠状动脉结扎术后10 h组 病变HE染色显示间质血管扩张淤血，有大量嗜中性粒细胞渗出，心肌细胞大部分以浊肿为主，偶见个别肌纤维有肌溶病灶。肌红蛋白染色显示普遍性肌红蛋白脱失，着色不均匀，其间偶见一空化区(即不着色的透明区)，且范围较HE染色的肌溶灶为大。
2.3 冠状动脉结扎术后18 h组 病变HE染色显示间质血管高度淤血，间质内可见大量白细胞渗出，于梗死区可见散在小的肌溶性病灶和小片状凝固性坏死灶，于一视野中HE显示心肌间质内可见大量红细胞渗出，所见心肌无肌溶灶表现，但肌红蛋白染色显示散在不着色空化灶，说明有肌溶性梗死灶。
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2.4 冠状动脉结扎术后48 h组 病变HE染色显示炎性渗出仍很明显，心肌细胞除浊肿外均有典型的大片凝固性坏死区，其中仍可见小片的肌溶性病灶，肌红蛋白染色显示普遍大片不着色区，但无空化现象，与HE染色的心肌梗死区相对应但较前者范围大。
2.5 冠状动脉结扎术后4天组 病变HE染色显示大片的凝固性坏死区伴有间质炎性渗出，肌红蛋白染色显示大片状的不着色无空化区(与HE染色凝固性坏死相对应区)，此外还可见到HE染色未显示的界线清楚的不着色空化区(与HE染色肌溶灶相对应)。
2.6 冠状动脉结扎术后12天组 病变HE染色显示为大
片凝固性坏死与少量肌溶性病灶并存，心肌大量坏死与少量心肌纤维化并存。间质内中性白细胞浸润减轻。肌红蛋白染色显示在心肌纤维化周围可见较HE染色范围更大的不着色无空化区。
2.7 冠状动脉结扎术后31天组 病变HE染色显示以瘢痕形成为主，表现为大量纤维母细胞并有胶原形成，成束状分布，其间可见残留小片状坏死区。肌红蛋白染色除显示心肌纤维化不着色外，于纤维化心肌间还可见到较HE染色范围更大、数量更多的不着色区。
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3 讨论
常规HE染色依据其典型的梗死区坏死图像，即肌溶性坏死和凝固性坏死来明确心肌梗死的病理诊断，但典型的梗死区坏死区图像出现较晚。而心肌早期坏死出现前的病变包括水肿、肌原纤维肿胀、变粗、横纹模糊、糖原减少至消失、染色性质异常等改变，仅凭HE染色光镜观察，有时难以明确早期心肌梗死〔1〕。但应用肌红蛋白染色法，依据其免疫组化原理，通过对肌红蛋白脱失及其程度的了解，能够敏感地反映出心肌坏死及坏死的程度。国内学者通过对结扎犬冠状动脉后24 h内心肌早期病变的研究〔2，3〕，已证实心肌缺血缺氧30 min左右即可观察到肌红蛋白的减少，并与损伤时间呈正相关。本组冠状动脉结扎术后3～18 h的实验结果也证实了肌红蛋白染色法较HE染色法能更早地判定与显示早期心肌梗死。此外本组实验通过对同视野肌红蛋白和HE染色的对比，还发现冠状动脉结扎术后各组肌红蛋白染色所标示的心肌坏死区均较HE染色所标示的范围大或多。这是由肌红蛋白染色法的高度敏感性所决定的。
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心肌细胞不易再生，梗死的修复靠肉芽组织和形成瘢痕，3周后已见修复期的肉芽组织，其中可见较多的胶原纤维，4～6周后坏死的心肌组织已基本上为纤维瘢痕组织所代替，标志着临床治愈〔1〕。本组实验冠脉结扎术后31天，HE染色结果瘢痕中偶见小梗死灶，但肌红蛋白染色在瘢痕组织中能发现较多的心肌梗死灶。说明31天HE染色标示的心肌瘢痕并不稳定，仍需继续延长观察治疗时间。因此，这一实验结果对指导临床重新认识心肌梗死临床上的稳定期，制定相应的治疗方案也具有十分重要的意义。
参考文献
1，谷伯起主编.心血管病理学.北京：人民卫生出版社，1992：63～66
2，姚季生，姚 申，应爱娣等.用肌红蛋白免疫组化法检测实验性早期心肌梗塞.上海第二医科大学学报，1993；13(2)：136
3，黎 允，李成库，孙 波.心肌早期病变的肌红蛋白免疫组化研究.白求恩医科大学学报，1994；20(4)：336
收稿日期：1999-05-07, 百拇医药