肺癌中增殖细胞核抗原表达的意义
作者：王昌明 曾锦荣 陈梅日 希 蒋述科 任格 林武洲
单位：王昌明(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)；曾锦荣(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)；陈梅晞(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)；蒋述科(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)；任格(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)；林武洲(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)
关键词：肺肿瘤；增殖细胞核抗原；单克隆抗体；免疫组织化学
临床内科杂志000217
摘 要：目的：研究肺癌中增殖细胞核抗原表达的意义。方法：应用抗增殖细胞核抗原(抗PCNA)单克隆抗体，采用链菌素亲生物素蛋白-过氧化酶连接(S-P)免疫组化方法对32例患者肺癌细胞中PCNA表达进行检测。结果：PCNA在肺癌组织中的表达与肺癌的分级、分期呈正相关(P<0.05)，有淋巴结转移组PCNA的表达率高于没有淋巴结转移组(P<0.05)。获随访的16例结果显示PCNA高表达与死亡率呈显著负相关。结论：检测肺癌组织中PCNA的表达对肺癌的分级、分期、预后以及生物学行为有重要意义。
, 百拇医药
分类号：R734.2 文献标识码：A
文章编号：1001-9057(2000)02-0107-02
Expression of proliferation cell nuclear antigen in patients with lung cancer and its significance
WANG Changming,ZENG Jinrong, CHEN Meixi et al.
Respiratory Department, Affiliated Hospital of Guilin Medical College, Guilin 541001，China
Abstract：Objective：To study the expression and its significance of proliferation cell nuclear antigen (PCNA) in patients with lung cancer. Methods：The expressions of PCNA in 32 cases of lung cancer were measrued by McAb of anti-PCNA and streptostacin-peroxidase (S-P) immunohisto chemical method. Results：The exprssion of PCNA was postively related to the grade and phase of lung cancer (P<0.05), and, in lymphaden metastasis group higher than that in non-lymphaden metastasis group (P<0.05). The high expression of PCNA is negtatively related to mortality.
, 百拇医药
Conclusion：The expression of PCNA is significant for the grade, phase, prognosis and biological behavior of lung cancer.
Key words：Lung neoplasma； Proliferation cell nuclear antigen； Monoclonal antibody； Immunohistochemistry method
增殖细胞核抗原(Proliferation cell nuclear antigen, PCAN)能真实地反映细胞增殖活动[1]。PCAN作为原位检测肿瘤细胞增殖状态的一种新技术，开始应用于肿瘤细胞动力学研究，并实验应用链菌素亲生物素蛋白-过氧化酶连接(S-P)免疫组化方法研究PCAN在肺癌中表达的临床意义。
, 百拇医药 对象与方法
一、对象：1988年～1998年间我院肺癌石蜡包埋标本32例，男性24例，女性8例，年龄38～74岁，平均年龄64.5岁，术前均未行放疗及化疗。按WHO标准分类为：非小细胞癌28例，其中鳞癌16例，腺癌10例，大细胞癌2例，小细胞癌4例。
病理分期：Ⅰ期6例，Ⅱ期12例，Ⅲ期14例。病理分级：Ⅰ级4例，Ⅱ级12例，Ⅲ级16例。取5例正常肺组织作对照。石蜡标本作连续切片(厚5 μm)备用。
二、抗体及染色方法：采用S-P免疫组化法，用华美生物技术公司生产的即用型试剂盒，第一抗体为抗PCNA单克隆抗体PC10(Maxin Biotech 公司生产)，反应60 min。
三、结果判定标准及计算方法：PCNA阳性着色表现为细胞核被染成棕黄色或棕褐色，高倍镜下呈细颗粒状。随机观察10个高倍视野，计每个高倍视野100个肿瘤细胞中阳性细胞数取其平均值，分为1～4级(1级=0～25%，2级=26%～50%，3级=51%～75%，4级=76%～100%)。所得数据采用Ridit合并频数统计，死亡率的相关分析采用Substraction graph系统进行分析，分为2级：弱级(1～2级)和强级(3～4级)。
, 百拇医药
结 果
S-P免疫组织化学染色结果：正常肺组织切片未见表达而肺癌组织切片中均有阳性反应，表现为细胞核被染成棕黄色或棕褐色。PCNA的表达与肺癌的分级、分期呈正相关，随着组织学分级及临床分期的增高，其染色强度增高，阳性细胞的检出率亦随之增高。各组之间比较行Ridit合并频数统计表明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级之间以及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间比较均有非常显著性差异(P<0.01)见表1。淋巴结转移阳性组PCNA表达亦显著高于淋巴结转移阴性组(P<0.05)见表2。对16例患者进行随访，随访时间2～96个月，按生存时间的长短分为4组，行Substraction graph相关检验呈显著负相关(r=-0.65,P<0.01)，肺癌PCNA强级者(3级+4级)，其术后死亡率明显高于弱级(1级+2级)见表3。
表1 肺癌中PCNA表达与分级、分期的关系 组 别
PCNA表达级别
, 百拇医药
例数
1
2
3
4
肺癌分期(TMN)
Ⅰ期
2
2
1
0
6
Ⅱ期
1
, 百拇医药
6
3
2
12
Ⅲ期
0
2
7
5
14
肺癌分级
Ⅰ级
3
1
, 百拇医药
0
0
4
Ⅱ级
1
4
7
0
12
Ⅲ级
0
2
6
7
, http://www.100md.com
16
表2 PCNA的表达与淋巴转移的关系 组 别
例数
PCNA表达级别
1
2
3
4
淋巴结转移阴性
18
5
8
3
, 百拇医药
2
淋巴结转移阳性
14
1
2
7
4
表3 PCNA表达与术后死亡率的相关分析 组 别
例数
PCNA表达级别
1
2
3
, http://www.100md.com
4
PCAN表达弱级
9
2
1
5
1
PCAN表达强级
7
2
4
1
0
讨 论 增殖细胞核抗原是近年来出现的反应细胞增殖的一种很好的标记物[2]。PCNA作为一种核内蛋白质，它的出现明显与细胞增殖有关，在静止期细胞其量很少，G1晚期开始增加，S期达到高峰，G2M期明显下降[3]，其量的变化与DNA合成相一致，因此认为PCNA可作为评价细胞增殖状态的一个主要指标。由于PCNA反映细胞增殖程度所处周期，因而可用于良恶性肿瘤的鉴别和肿瘤恶性程度及预后的评估[4，5]。
, 百拇医药
肺癌病人的预后与组织学类型、临床分期、病理学有很大关系，一般来说分化程度越差，恶性程度越高，预后也较差。我们研究了PCNA在肺癌组织中的表达与临床分期及病理分级的关系，发现Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间比较PCNA的阳性表达均存在显著性差异，而且病理分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级之间比较PCNA的阳性表达亦存在显著性差异，提示PCNA的表达与肺癌的临床分期和病理分级呈正相关，与报道相似。本组资料还发现淋巴结转移阳性组PCNA表达增多，明显高于淋巴结转移阴性组，说明增殖活性高的肺癌更易向周围淋巴结转移。本研究显示，PCNA阳性半定量分级与肺癌术后死亡率呈显著负相关(P<0.05)。
参考文献：
[1] Bravo R, Frand R, Binndell PA, et al. Cyclin/PCNA is the auxilliary protein of DNA polyerase delta. Nature, 1987，326∶515.
, http://www.100md.com
[2] FuJi M, Moton M, Saoki H, et al. Prognostic significance of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) expression in non small cell lung cancer. Acta Medica Okayama, 1993,47∶103-106.
[3] Theegarten D, Zorn M. Philippous Proliferative activity, P53 accumulation and neoangiogenesis in pulmonary carcinosancomas and pulmonary blastomas. Gen Diagn Pathol, 1998,143(5-6)∶265-270.
[4] Bellotti M, Eisner B,Paez A, et al. Neural networks as a prognostic tool for potients with non small cell carcinoma of the lung. Mod Pathol, 1997,10(12)∶1221-1227.
[5] Jensen TM, Steinberg SM, Linnoila RI. Bronchiolization of the alveoli in lungathology, patterns of differentiation and oncogene expression. Int J Cancer, 1998, 75(4)∶489-496.
收稿日期：1999-05-04
修回日期：1999-08-24, 百拇医药
单位：王昌明(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)；曾锦荣(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)；陈梅晞(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)；蒋述科(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)；任格(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)；林武洲(541001 广西桂林医学院附属医院呼吸内科)
关键词：肺肿瘤；增殖细胞核抗原；单克隆抗体；免疫组织化学
临床内科杂志000217
摘 要：目的：研究肺癌中增殖细胞核抗原表达的意义。方法：应用抗增殖细胞核抗原(抗PCNA)单克隆抗体，采用链菌素亲生物素蛋白-过氧化酶连接(S-P)免疫组化方法对32例患者肺癌细胞中PCNA表达进行检测。结果：PCNA在肺癌组织中的表达与肺癌的分级、分期呈正相关(P<0.05)，有淋巴结转移组PCNA的表达率高于没有淋巴结转移组(P<0.05)。获随访的16例结果显示PCNA高表达与死亡率呈显著负相关。结论：检测肺癌组织中PCNA的表达对肺癌的分级、分期、预后以及生物学行为有重要意义。
, 百拇医药
分类号：R734.2 文献标识码：A
文章编号：1001-9057(2000)02-0107-02
Expression of proliferation cell nuclear antigen in patients with lung cancer and its significance
WANG Changming,ZENG Jinrong, CHEN Meixi et al.
Respiratory Department, Affiliated Hospital of Guilin Medical College, Guilin 541001，China
Abstract：Objective：To study the expression and its significance of proliferation cell nuclear antigen (PCNA) in patients with lung cancer. Methods：The expressions of PCNA in 32 cases of lung cancer were measrued by McAb of anti-PCNA and streptostacin-peroxidase (S-P) immunohisto chemical method. Results：The exprssion of PCNA was postively related to the grade and phase of lung cancer (P<0.05), and, in lymphaden metastasis group higher than that in non-lymphaden metastasis group (P<0.05). The high expression of PCNA is negtatively related to mortality.
, 百拇医药
Conclusion：The expression of PCNA is significant for the grade, phase, prognosis and biological behavior of lung cancer.
Key words：Lung neoplasma； Proliferation cell nuclear antigen； Monoclonal antibody； Immunohistochemistry method
增殖细胞核抗原(Proliferation cell nuclear antigen, PCAN)能真实地反映细胞增殖活动[1]。PCAN作为原位检测肿瘤细胞增殖状态的一种新技术，开始应用于肿瘤细胞动力学研究，并实验应用链菌素亲生物素蛋白-过氧化酶连接(S-P)免疫组化方法研究PCAN在肺癌中表达的临床意义。
, 百拇医药 对象与方法
一、对象：1988年～1998年间我院肺癌石蜡包埋标本32例，男性24例，女性8例，年龄38～74岁，平均年龄64.5岁，术前均未行放疗及化疗。按WHO标准分类为：非小细胞癌28例，其中鳞癌16例，腺癌10例，大细胞癌2例，小细胞癌4例。
病理分期：Ⅰ期6例，Ⅱ期12例，Ⅲ期14例。病理分级：Ⅰ级4例，Ⅱ级12例，Ⅲ级16例。取5例正常肺组织作对照。石蜡标本作连续切片(厚5 μm)备用。
二、抗体及染色方法：采用S-P免疫组化法，用华美生物技术公司生产的即用型试剂盒，第一抗体为抗PCNA单克隆抗体PC10(Maxin Biotech 公司生产)，反应60 min。
三、结果判定标准及计算方法：PCNA阳性着色表现为细胞核被染成棕黄色或棕褐色，高倍镜下呈细颗粒状。随机观察10个高倍视野，计每个高倍视野100个肿瘤细胞中阳性细胞数取其平均值，分为1～4级(1级=0～25%，2级=26%～50%，3级=51%～75%，4级=76%～100%)。所得数据采用Ridit合并频数统计，死亡率的相关分析采用Substraction graph系统进行分析，分为2级：弱级(1～2级)和强级(3～4级)。
, 百拇医药
结 果
S-P免疫组织化学染色结果：正常肺组织切片未见表达而肺癌组织切片中均有阳性反应，表现为细胞核被染成棕黄色或棕褐色。PCNA的表达与肺癌的分级、分期呈正相关，随着组织学分级及临床分期的增高，其染色强度增高，阳性细胞的检出率亦随之增高。各组之间比较行Ridit合并频数统计表明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级之间以及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间比较均有非常显著性差异(P<0.01)见表1。淋巴结转移阳性组PCNA表达亦显著高于淋巴结转移阴性组(P<0.05)见表2。对16例患者进行随访，随访时间2～96个月，按生存时间的长短分为4组，行Substraction graph相关检验呈显著负相关(r=-0.65,P<0.01)，肺癌PCNA强级者(3级+4级)，其术后死亡率明显高于弱级(1级+2级)见表3。
表1 肺癌中PCNA表达与分级、分期的关系 组 别
PCNA表达级别
, 百拇医药
例数
1
2
3
4
肺癌分期(TMN)
Ⅰ期
2
2
1
0
6
Ⅱ期
1
, 百拇医药
6
3
2
12
Ⅲ期
0
2
7
5
14
肺癌分级
Ⅰ级
3
1
, 百拇医药
0
0
4
Ⅱ级
1
4
7
0
12
Ⅲ级
0
2
6
7
, http://www.100md.com
16
表2 PCNA的表达与淋巴转移的关系 组 别
例数
PCNA表达级别
1
2
3
4
淋巴结转移阴性
18
5
8
3
, 百拇医药
2
淋巴结转移阳性
14
1
2
7
4
表3 PCNA表达与术后死亡率的相关分析 组 别
例数
PCNA表达级别
1
2
3
, http://www.100md.com
4
PCAN表达弱级
9
2
1
5
1
PCAN表达强级
7
2
4
1
0
讨 论 增殖细胞核抗原是近年来出现的反应细胞增殖的一种很好的标记物[2]。PCNA作为一种核内蛋白质，它的出现明显与细胞增殖有关，在静止期细胞其量很少，G1晚期开始增加，S期达到高峰，G2M期明显下降[3]，其量的变化与DNA合成相一致，因此认为PCNA可作为评价细胞增殖状态的一个主要指标。由于PCNA反映细胞增殖程度所处周期，因而可用于良恶性肿瘤的鉴别和肿瘤恶性程度及预后的评估[4，5]。
, 百拇医药
肺癌病人的预后与组织学类型、临床分期、病理学有很大关系，一般来说分化程度越差，恶性程度越高，预后也较差。我们研究了PCNA在肺癌组织中的表达与临床分期及病理分级的关系，发现Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间比较PCNA的阳性表达均存在显著性差异，而且病理分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级之间比较PCNA的阳性表达亦存在显著性差异，提示PCNA的表达与肺癌的临床分期和病理分级呈正相关，与报道相似。本组资料还发现淋巴结转移阳性组PCNA表达增多，明显高于淋巴结转移阴性组，说明增殖活性高的肺癌更易向周围淋巴结转移。本研究显示，PCNA阳性半定量分级与肺癌术后死亡率呈显著负相关(P<0.05)。
参考文献：
[1] Bravo R, Frand R, Binndell PA, et al. Cyclin/PCNA is the auxilliary protein of DNA polyerase delta. Nature, 1987，326∶515.
, http://www.100md.com
[2] FuJi M, Moton M, Saoki H, et al. Prognostic significance of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) expression in non small cell lung cancer. Acta Medica Okayama, 1993,47∶103-106.
[3] Theegarten D, Zorn M. Philippous Proliferative activity, P53 accumulation and neoangiogenesis in pulmonary carcinosancomas and pulmonary blastomas. Gen Diagn Pathol, 1998,143(5-6)∶265-270.
[4] Bellotti M, Eisner B,Paez A, et al. Neural networks as a prognostic tool for potients with non small cell carcinoma of the lung. Mod Pathol, 1997,10(12)∶1221-1227.
[5] Jensen TM, Steinberg SM, Linnoila RI. Bronchiolization of the alveoli in lungathology, patterns of differentiation and oncogene expression. Int J Cancer, 1998, 75(4)∶489-496.
收稿日期：1999-05-04
修回日期：1999-08-24, 百拇医药