可溶性肿瘤坏死因子受体55水平的检测及临床意义
作者：马善符 段全红 殷玉水 田波
单位：(261031 山东省潍坊医学院附属医院肛肠外科)
关键词：
中华医学杂志000215 可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)主要由肿瘤坏死因子受体(TNFR)的膜外链脱落产生，其中sTNFR55是其主要功能形式[1]。作者对48例消化系统恶性肿瘤病人血清sTNFR55水平进行了检测及动态观察，以探讨其诊断价值及与病情的关系。
一、对象和方法
1.标本来源：选取山东潍坊市1997至1998年消化系统恶性肿瘤病人48例，其中男30例，女18例，平均年龄42.9岁。其中结肠癌30例，胃癌12例，胰腺癌6例。结肠癌按1983年的国际TNM分期标准，其他肿瘤参照下列标准分期：Ⅰ期，局限性肿块直径<2 cm，无转移；Ⅱ期，局限性肿块直径>2 cm，无明确肉眼或显微镜下的转移灶；Ⅲ期：转移局限
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于淋巴结，无论肿块大小；Ⅳ期，有远处转移。正常对照组20例，为中心血站的健康献血员，男11例，女9例，平均年龄36.5岁。
2.血清标本：病人手术前、后采集静脉血，健康献血员在献血同时抽取血标本。血清-20℃冻存，一次融解后测定。所有病人采集标本前1个月均无感染性发热，亦未接受放、化疗。
3.血清sTNFR55测定：采用ELISA法，试剂为比利时Biosource Europe SA公司产品(由天津四方化工有限公司协助购买)。主要步骤：向抗体包被孔加50 μl不同浓度的标准品或待测血清，再向每孔加200 μl抗sTNFR55抗体-辣根过氧化物酶结合物，振动混匀，室温(24℃)培养1 h；洗涤3次，每孔各加50 μl底物(四甲基苯)，振动混匀，室温培养15 min；加0.36 mol/L硫酸200 μl终止反应。∑960酶标仪在波长450 nm下读吸光度(A)值。
4.其他检测指标：常规检测血清癌坯抗原(CEA)，肝肾功能、电解质及碱性磷酸酶(AKP)等指标。
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5.统计学处理：均数以
±s表示，各组病人与正常对照组的比较采用方差分析，百分率采用χ2检验，两参数间的相关性采用Spearman等级相关检验。
二、结果
1.各组病人血清sTNFR55水平：20例正常对照组为1.96 μg/L±0.84 μg/L(0.5～4.0)；6例胰腺癌为3.98 μg/L±2.01 μg/L(1.0～5.9)；12例胃癌为4.15 μg/L±1.68 μg/L(0.5～6.0)；30例结肠癌为4.73 μg/L±1.7 μg/L(0.65～6.9)。肿瘤病人血清sTNFR55水平显著高于正常对照组(P<0.05或0.01)。在本组标本中，血清sTNFR55>2.80 μg/L定为升高。
2.血清sTNFR55与临床分期的关系：分析发现，随病情进展，血清sTNFR55亦渐升高(表1)。
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表1 各期病人血清sTNFR55水平(μg/L,±s) 组别
例数
Ⅰ期
Ⅱ期
Ⅲ期
Ⅳ期
结肠癌
30
2.67±
0.96(4)
3.3±
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1.0(10)
4.6±
1.9*(9)
5.4±
2.2*(7)
胃癌
12
3.2±
1.1(3)
4.0±
1.3(3)
4.6±
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1.9△(6)
胰腺癌
6
1.00(1)
4.1±
2.1(5)
注：*与Ⅰ期或Ⅱ期比较，P<0.05(Ⅰ期与Ⅱ期比较，P>0.05)；△Ⅱ期比较P<0.05，括号中为例数
3.血清sTNFR55与其他指标的关系：对本组48例肿瘤病人的分析发现，血清sTNFR55水平与外周血红蛋白(Hb)、血清白蛋白、AKP呈负相关，相关系数分别为：-0.36，-0.69，-0.61，P值均<0.01或0.001，与外周血WBC、ESR、谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)及钙离子(Ca2+)的相关系数分别为：0.19，0.12，0.07，0.09，0.05。差异无显著意义。
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4.各期病人血清sTNFR55与CEA升高发生率的比较：血清sTNFR55升高的发生率，在结肠癌及全部病人的综合统计中，均显著高于CEA。
5.动态观察：对就诊时血清sTNFR55升高的9例Ⅰ、Ⅱ期病人进行了动态观察，术后7 d开始下降，术后14 d有4例降至正常范围，术后28天全部降至正常。
三、讨论
本研究显示，结肠癌、胃癌和胰腺癌病人血清sTNFR55水平显著高于正常对照组，其中73%的结肠癌、58%的胃癌就诊时发现血清sTNFR55升高。关于血清sTNFR55升高的原因，可能为：(1)肿瘤细胞自分泌产生。体外已发现多种消化系肿瘤细胞株可自分泌sTNFR[2]，加之本组结果：结肠癌Ⅲ、Ⅳ期高于Ⅰ、Ⅱ期，提示血清中的水平与高肿瘤负荷有关，也支持这一点。(2)肿瘤细胞激活正常的免疫细胞(主要为单核巨核细胞、淋巴细胞)，进而分泌过多sTNFR。本组病人中Ⅲ、Ⅳ期并非全部升高，而Ⅰ、Ⅱ期部分病人亦可见明显升高现象，故本观点仍要考虑。我们还发现，消化系恶性肿瘤病人血清sTNFR55水平与外周血Hb、AKP和血清白蛋白呈负相关，与外周血WBC、ESR、ALT、Cr、Ca2+等指标无关。
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尽管CEA在消化系统恶性肿瘤的诊断中缺乏特异性，但它仍是目前公认的常规检查项目。本组结果显示，结肠癌病人中，CEA的阳性率为37%，明显低于sTNFR55的阳性率(73%)，胃癌、胰腺癌亦有类似现象。我们还发现，在14例Ⅰ、Ⅱ期结肠癌病人中，CEA升高者2例，而sTNFR55升高者8例，sTNFR55在疾病早期阳性率较高，可考虑将其作为一个早期诊断指标。动态观察发现sTNFR55于手术后逐渐下降至正常，结合前述随病情进展(Ⅲ、Ⅳ期高于Ⅰ、Ⅱ期)而升高，故sTNFR亦可作为监测消化系统恶性肿瘤病情变化的一项指标。
参考文献
[1]Heaney ML, Golde D. Soluble cyookine receptors. Blood, 1996,87：847-852.
[2]Aderka D, Engelamann H, Hornik V, et al. Increased serurn levels of soluble receptors for tumor necrosis factor in cancer patients. Cancer Res, 1991,51：5602-5607.
收稿日期：1999-05-28, http://www.100md.com
单位：(261031 山东省潍坊医学院附属医院肛肠外科)
关键词：
中华医学杂志000215 可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)主要由肿瘤坏死因子受体(TNFR)的膜外链脱落产生，其中sTNFR55是其主要功能形式[1]。作者对48例消化系统恶性肿瘤病人血清sTNFR55水平进行了检测及动态观察，以探讨其诊断价值及与病情的关系。
一、对象和方法
1.标本来源：选取山东潍坊市1997至1998年消化系统恶性肿瘤病人48例，其中男30例，女18例，平均年龄42.9岁。其中结肠癌30例，胃癌12例，胰腺癌6例。结肠癌按1983年的国际TNM分期标准，其他肿瘤参照下列标准分期：Ⅰ期，局限性肿块直径<2 cm，无转移；Ⅱ期，局限性肿块直径>2 cm，无明确肉眼或显微镜下的转移灶；Ⅲ期：转移局限
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于淋巴结，无论肿块大小；Ⅳ期，有远处转移。正常对照组20例，为中心血站的健康献血员，男11例，女9例，平均年龄36.5岁。
2.血清标本：病人手术前、后采集静脉血，健康献血员在献血同时抽取血标本。血清-20℃冻存，一次融解后测定。所有病人采集标本前1个月均无感染性发热，亦未接受放、化疗。
3.血清sTNFR55测定：采用ELISA法，试剂为比利时Biosource Europe SA公司产品(由天津四方化工有限公司协助购买)。主要步骤：向抗体包被孔加50 μl不同浓度的标准品或待测血清，再向每孔加200 μl抗sTNFR55抗体-辣根过氧化物酶结合物，振动混匀，室温(24℃)培养1 h；洗涤3次，每孔各加50 μl底物(四甲基苯)，振动混匀，室温培养15 min；加0.36 mol/L硫酸200 μl终止反应。∑960酶标仪在波长450 nm下读吸光度(A)值。
4.其他检测指标：常规检测血清癌坯抗原(CEA)，肝肾功能、电解质及碱性磷酸酶(AKP)等指标。
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5.统计学处理：均数以
±s表示，各组病人与正常对照组的比较采用方差分析，百分率采用χ2检验，两参数间的相关性采用Spearman等级相关检验。二、结果
1.各组病人血清sTNFR55水平：20例正常对照组为1.96 μg/L±0.84 μg/L(0.5～4.0)；6例胰腺癌为3.98 μg/L±2.01 μg/L(1.0～5.9)；12例胃癌为4.15 μg/L±1.68 μg/L(0.5～6.0)；30例结肠癌为4.73 μg/L±1.7 μg/L(0.65～6.9)。肿瘤病人血清sTNFR55水平显著高于正常对照组(P<0.05或0.01)。在本组标本中，血清sTNFR55>2.80 μg/L定为升高。
2.血清sTNFR55与临床分期的关系：分析发现，随病情进展，血清sTNFR55亦渐升高(表1)。
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表1 各期病人血清sTNFR55水平(μg/L,
±s) 组别例数
Ⅰ期
Ⅱ期
Ⅲ期
Ⅳ期
结肠癌
30
2.67±
0.96(4)
3.3±
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1.0(10)
4.6±
1.9*(9)
5.4±
2.2*(7)
胃癌
12
3.2±
1.1(3)
4.0±
1.3(3)
4.6±
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1.9△(6)
胰腺癌
6
1.00(1)
4.1±
2.1(5)
注：*与Ⅰ期或Ⅱ期比较，P<0.05(Ⅰ期与Ⅱ期比较，P>0.05)；△Ⅱ期比较P<0.05，括号中为例数
3.血清sTNFR55与其他指标的关系：对本组48例肿瘤病人的分析发现，血清sTNFR55水平与外周血红蛋白(Hb)、血清白蛋白、AKP呈负相关，相关系数分别为：-0.36，-0.69，-0.61，P值均<0.01或0.001，与外周血WBC、ESR、谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)及钙离子(Ca2+)的相关系数分别为：0.19，0.12，0.07，0.09，0.05。差异无显著意义。
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4.各期病人血清sTNFR55与CEA升高发生率的比较：血清sTNFR55升高的发生率，在结肠癌及全部病人的综合统计中，均显著高于CEA。
5.动态观察：对就诊时血清sTNFR55升高的9例Ⅰ、Ⅱ期病人进行了动态观察，术后7 d开始下降，术后14 d有4例降至正常范围，术后28天全部降至正常。
三、讨论
本研究显示，结肠癌、胃癌和胰腺癌病人血清sTNFR55水平显著高于正常对照组，其中73%的结肠癌、58%的胃癌就诊时发现血清sTNFR55升高。关于血清sTNFR55升高的原因，可能为：(1)肿瘤细胞自分泌产生。体外已发现多种消化系肿瘤细胞株可自分泌sTNFR[2]，加之本组结果：结肠癌Ⅲ、Ⅳ期高于Ⅰ、Ⅱ期，提示血清中的水平与高肿瘤负荷有关，也支持这一点。(2)肿瘤细胞激活正常的免疫细胞(主要为单核巨核细胞、淋巴细胞)，进而分泌过多sTNFR。本组病人中Ⅲ、Ⅳ期并非全部升高，而Ⅰ、Ⅱ期部分病人亦可见明显升高现象，故本观点仍要考虑。我们还发现，消化系恶性肿瘤病人血清sTNFR55水平与外周血Hb、AKP和血清白蛋白呈负相关，与外周血WBC、ESR、ALT、Cr、Ca2+等指标无关。
, 百拇医药
尽管CEA在消化系统恶性肿瘤的诊断中缺乏特异性，但它仍是目前公认的常规检查项目。本组结果显示，结肠癌病人中，CEA的阳性率为37%，明显低于sTNFR55的阳性率(73%)，胃癌、胰腺癌亦有类似现象。我们还发现，在14例Ⅰ、Ⅱ期结肠癌病人中，CEA升高者2例，而sTNFR55升高者8例，sTNFR55在疾病早期阳性率较高，可考虑将其作为一个早期诊断指标。动态观察发现sTNFR55于手术后逐渐下降至正常，结合前述随病情进展(Ⅲ、Ⅳ期高于Ⅰ、Ⅱ期)而升高，故sTNFR亦可作为监测消化系统恶性肿瘤病情变化的一项指标。
参考文献
[1]Heaney ML, Golde D. Soluble cyookine receptors. Blood, 1996,87：847-852.
[2]Aderka D, Engelamann H, Hornik V, et al. Increased serurn levels of soluble receptors for tumor necrosis factor in cancer patients. Cancer Res, 1991,51：5602-5607.
收稿日期：1999-05-28, http://www.100md.com