尿激酶型纤溶酶原激活物与乳腺癌淋巴结转移及预后的关系
作者：肖继平 张广德 夏文华 陈德基 凌长明
单位：肖继平(黄石市一医院肿瘤科，湖北 黄石 43500)；张广德(湖北医科大学附属第二医院肿瘤科，湖北 武汉 430071)；夏文华(湖北医科大学附属第二医院肿瘤科，湖北 武汉 430071)；陈德基(湖北医科大学附属第二医院病理教研室，湖北 武汉 430071)；凌长明(湖北医科大学附属第二医院病理教研室，湖北 武汉 430071)
关键词：尿激酶型纤溶酶原激活物；乳腺肿瘤；免疫组织化学；淋巴转移；预后
癌症000225
中图分类号：R737.9 文献标识码：A
文章编号：1000-467X(2000)02-0177-02
研究表明，uPA介导的纤维蛋白降解作用与恶性肿瘤的侵袭和转移密切相关〔1〕。临床上许多乳腺癌患者都死于肿瘤的复发和转移。然而，uPA在乳腺癌中的表达与淋巴结转移及预后的关系，国内至今未见报道。本研究将通过免疫组化SABC法观察uPA与乳腺癌淋巴结转移的关系，并探讨其在腋淋巴结阳性病人和阴性病人中的预后作用。
, http://www.100md.com
1 材料和方法
1.1 材料来源
收集我科1987年至1994年间收治的女性原发性乳腺癌患者100例，其中淋巴结阳性者56例，淋巴结阴性者44例。年龄19～74岁，平均年龄48岁。全组病例均行乳腺癌根治术或改良根治术，并经病理确诊。术后58例辅以化疗，36例接受放疗，61例ER阳性病人给予TAM治疗。全组病例随访99例，失访1例，随访率99%，随访期为48～120个月(中位82个月)。
1.2 试剂与方法
采用免疫组化SABC法。具体操作技术按说明书进行。uPA单克隆抗体为Oncogene science Inc公司产品，工作浓度为1∶400。一抗和SABC试剂盒(即用型)均购自武汉博士德生物工程公司，以TBS取代一抗作阴性对照。
1.3 结果判定
, 百拇医药
以癌细胞胞浆中出现棕色颗粒定为阳性。并以显色癌细胞占全部癌细胞的比例分uPA低表达为阳性细胞<50%，uPA高表达为阳性细胞≥50%。
1.4 统计学分析
uPA与淋巴结的关系采用χ2检验，Kaplan-Meier法分析生存率并经Log-rank检验。
2 结果
2.1 uPA与淋巴结的关系
由表1可见uPA与淋巴结转移及转移个数明显相关。淋巴结阳性病人的uPA表达明显强于淋巴结阴性者，而且淋巴结转移个数越多，uPA表达越强。
表1 uPA与淋巴结转移的关系 指标
n
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uPA低表达
uPA高表达
P
淋巴结状况
-
44
30
14
<0.005
+
56
15
41
, 百拇医药
(χ2=17.06)
淋巴结转移个数
1～3
26
10
16
<0.05
>3
30
5
25
(χ2=5.96)
, http://www.100md.com 2.2 uPA在淋巴结阴性病人和淋巴结阳性病人中的预后作用
在淋巴结阳性病人中，uPA高表达者的无病生存期显著短于uPA低表达者(见图1)，其差异有极其显著性(χ2=8.24，P<0.01)。同时uPA表达与该组病人的总生存期以及淋巴结阴性病人的无病生存期有明显相关性(P<0.01)，其中生存曲线与图1相似(图略)，但uPA与淋巴结阴性病人的总生存期无明显相关性(χ2=2.68，P>0.05)(见图2)。
图1 淋巴结阳性病人uPA表达与无病生存期的关系
图2 淋巴结阴性病人uPA表达与总生存期的关系
, http://www.100md.com
3 讨论
Reich等〔2〕研究表明，uPA是一种丝氨酸蛋白酶，它能使纤溶酶原激活成为纤溶酶，后者能进一步降解细胞外基质和基底膜的纤维蛋白、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成分，导致细胞外基质和基底膜成分的降解，促进肿瘤细胞发生侵袭、转移。本组资料表明，uPA表达与淋巴结状况及转移个数有明显相关性，随着淋巴结的转移及转移个数的增加，uPA的表达明显增强。这些结果提示uPA与乳腺癌的生物学行为密切相关，uPA高表达者更易出现淋巴结转移[1，2]。
关于uPA与乳腺癌预后的关系，国外已有较多报道。这些报道采用的都是酶联免疫测定法(ELISA法)，但应用免疫组化方法的报道却极少。采用ELISA法测定乳腺癌胞浆中的uPA含量，多数学者认为其高含量与患者高复发、生存期短呈正相关〔3～5〕。本组资料应用免疫组化方法，发现uPA与淋巴结阳性病人的高复发、生存期短呈正相关，也与淋巴结阴性病人复发期短呈正相关，但却与淋巴结阴性病人的总生存期无关。这与Duffy等〔6〕应用ELISA法取得的结果是一致的。在本研究中，我们和Dufty等〔6〕一样，未能发现uPA与淋巴结阴性病人总生存期有相关性，究其原因，可能与该组病人中死亡例数较少有关。但值得指出的是，在我们所研究的淋巴结阴性病人中，死亡者大多数仍为uPA高表达者，而且，在死亡患者中，uPA低表达者的总生存期大约为5年，而高表达者则大多于3年内死亡，虽然这种差异无显著性，但仍可看出uPA高表达者有死亡较早的趋势。这一结果使我们考虑uPA也可能是腋淋巴结阴性患者总生存期的预后因子，但其确切预后作用仍有待于增加病例进一步分析研究。
, 百拇医药
通讯作者：肖继平
[参考文献]
[1] Dano K , Andreasen PA , Grondahl-Hansen J, et al. Plasminogen activators,tissue degradation and cancer [J]. Advase Cancer Res, 1985,44： 139～266.
[2] Reich R, Thompson EW, Iwamoto Y, et al.Effects of inhibitors of plasminogen activator serine proteinases,and colla-genase Ⅳ on the invasion of basement membranes by metastatic cells [J].Cancer Res,1988,48(12)： 3307～12.
, 百拇医药
[3] Duffy MJ, Reilly D,O'Sullivan C, et al. Urokinase-plasminogen activator,a new and independent prognostic marker in breast cancer[J].Cancer Res,1990,50(21)：6827～9.
[4] Grondahl-Hansen J,Christensen IJ, Rose-nquist C, et al. High levels of urokin-type plasminogen activator and its inhibitor PAI-1 in cytosolic extracts of breast carci-no mas are associated with poor prognosis [J].Cance Res,1993,53(11)：2513～2521.
[5] Foekens JA, Schmitt M, Van Putten WLJ,et al.Prognostic value of urokinase-type plasminogen activator in 671 primary breast cancer patients [J]. Cancer Res,1992,52(1)：6101～6105.
[6] Duffy MJ, Reilly D, McDermott E, et al. Urokinase plasminogen activator as a prognostic marker in different subgroups of patients with breast cancer [J].Cancer,1994,74(8)：2276～2280.
收稿日期：1998-10-20；修回日期：1999-01-15, 百拇医药
单位：肖继平(黄石市一医院肿瘤科，湖北 黄石 43500)；张广德(湖北医科大学附属第二医院肿瘤科，湖北 武汉 430071)；夏文华(湖北医科大学附属第二医院肿瘤科，湖北 武汉 430071)；陈德基(湖北医科大学附属第二医院病理教研室，湖北 武汉 430071)；凌长明(湖北医科大学附属第二医院病理教研室，湖北 武汉 430071)
关键词：尿激酶型纤溶酶原激活物；乳腺肿瘤；免疫组织化学；淋巴转移；预后
癌症000225
中图分类号：R737.9 文献标识码：A
文章编号：1000-467X(2000)02-0177-02
研究表明，uPA介导的纤维蛋白降解作用与恶性肿瘤的侵袭和转移密切相关〔1〕。临床上许多乳腺癌患者都死于肿瘤的复发和转移。然而，uPA在乳腺癌中的表达与淋巴结转移及预后的关系，国内至今未见报道。本研究将通过免疫组化SABC法观察uPA与乳腺癌淋巴结转移的关系，并探讨其在腋淋巴结阳性病人和阴性病人中的预后作用。
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1 材料和方法
1.1 材料来源
收集我科1987年至1994年间收治的女性原发性乳腺癌患者100例，其中淋巴结阳性者56例，淋巴结阴性者44例。年龄19～74岁，平均年龄48岁。全组病例均行乳腺癌根治术或改良根治术，并经病理确诊。术后58例辅以化疗，36例接受放疗，61例ER阳性病人给予TAM治疗。全组病例随访99例，失访1例，随访率99%，随访期为48～120个月(中位82个月)。
1.2 试剂与方法
采用免疫组化SABC法。具体操作技术按说明书进行。uPA单克隆抗体为Oncogene science Inc公司产品，工作浓度为1∶400。一抗和SABC试剂盒(即用型)均购自武汉博士德生物工程公司，以TBS取代一抗作阴性对照。
1.3 结果判定
, 百拇医药
以癌细胞胞浆中出现棕色颗粒定为阳性。并以显色癌细胞占全部癌细胞的比例分uPA低表达为阳性细胞<50%，uPA高表达为阳性细胞≥50%。
1.4 统计学分析
uPA与淋巴结的关系采用χ2检验，Kaplan-Meier法分析生存率并经Log-rank检验。
2 结果
2.1 uPA与淋巴结的关系
由表1可见uPA与淋巴结转移及转移个数明显相关。淋巴结阳性病人的uPA表达明显强于淋巴结阴性者，而且淋巴结转移个数越多，uPA表达越强。
表1 uPA与淋巴结转移的关系 指标
n
, http://www.100md.com
uPA低表达
uPA高表达
P
淋巴结状况
-
44
30
14
<0.005
+
56
15
41
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(χ2=17.06)
淋巴结转移个数
1～3
26
10
16
<0.05
>3
30
5
25
(χ2=5.96)
, http://www.100md.com 2.2 uPA在淋巴结阴性病人和淋巴结阳性病人中的预后作用
在淋巴结阳性病人中，uPA高表达者的无病生存期显著短于uPA低表达者(见图1)，其差异有极其显著性(χ2=8.24，P<0.01)。同时uPA表达与该组病人的总生存期以及淋巴结阴性病人的无病生存期有明显相关性(P<0.01)，其中生存曲线与图1相似(图略)，但uPA与淋巴结阴性病人的总生存期无明显相关性(χ2=2.68，P>0.05)(见图2)。
图1 淋巴结阳性病人uPA表达与无病生存期的关系
图2 淋巴结阴性病人uPA表达与总生存期的关系
, http://www.100md.com
3 讨论
Reich等〔2〕研究表明，uPA是一种丝氨酸蛋白酶，它能使纤溶酶原激活成为纤溶酶，后者能进一步降解细胞外基质和基底膜的纤维蛋白、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成分，导致细胞外基质和基底膜成分的降解，促进肿瘤细胞发生侵袭、转移。本组资料表明，uPA表达与淋巴结状况及转移个数有明显相关性，随着淋巴结的转移及转移个数的增加，uPA的表达明显增强。这些结果提示uPA与乳腺癌的生物学行为密切相关，uPA高表达者更易出现淋巴结转移[1，2]。
关于uPA与乳腺癌预后的关系，国外已有较多报道。这些报道采用的都是酶联免疫测定法(ELISA法)，但应用免疫组化方法的报道却极少。采用ELISA法测定乳腺癌胞浆中的uPA含量，多数学者认为其高含量与患者高复发、生存期短呈正相关〔3～5〕。本组资料应用免疫组化方法，发现uPA与淋巴结阳性病人的高复发、生存期短呈正相关，也与淋巴结阴性病人复发期短呈正相关，但却与淋巴结阴性病人的总生存期无关。这与Duffy等〔6〕应用ELISA法取得的结果是一致的。在本研究中，我们和Dufty等〔6〕一样，未能发现uPA与淋巴结阴性病人总生存期有相关性，究其原因，可能与该组病人中死亡例数较少有关。但值得指出的是，在我们所研究的淋巴结阴性病人中，死亡者大多数仍为uPA高表达者，而且，在死亡患者中，uPA低表达者的总生存期大约为5年，而高表达者则大多于3年内死亡，虽然这种差异无显著性，但仍可看出uPA高表达者有死亡较早的趋势。这一结果使我们考虑uPA也可能是腋淋巴结阴性患者总生存期的预后因子，但其确切预后作用仍有待于增加病例进一步分析研究。
, 百拇医药
通讯作者：肖继平
[参考文献]
[1] Dano K , Andreasen PA , Grondahl-Hansen J, et al. Plasminogen activators,tissue degradation and cancer [J]. Advase Cancer Res, 1985,44： 139～266.
[2] Reich R, Thompson EW, Iwamoto Y, et al.Effects of inhibitors of plasminogen activator serine proteinases,and colla-genase Ⅳ on the invasion of basement membranes by metastatic cells [J].Cancer Res,1988,48(12)： 3307～12.
, 百拇医药
[3] Duffy MJ, Reilly D,O'Sullivan C, et al. Urokinase-plasminogen activator,a new and independent prognostic marker in breast cancer[J].Cancer Res,1990,50(21)：6827～9.
[4] Grondahl-Hansen J,Christensen IJ, Rose-nquist C, et al. High levels of urokin-type plasminogen activator and its inhibitor PAI-1 in cytosolic extracts of breast carci-no mas are associated with poor prognosis [J].Cance Res,1993,53(11)：2513～2521.
[5] Foekens JA, Schmitt M, Van Putten WLJ,et al.Prognostic value of urokinase-type plasminogen activator in 671 primary breast cancer patients [J]. Cancer Res,1992,52(1)：6101～6105.
[6] Duffy MJ, Reilly D, McDermott E, et al. Urokinase plasminogen activator as a prognostic marker in different subgroups of patients with breast cancer [J].Cancer,1994,74(8)：2276～2280.
收稿日期：1998-10-20；修回日期：1999-01-15, 百拇医药