凝胶电泳法鉴别蒙药小茴香及其伪品孜然
作者:张昕原 巴根那 娜仁花 王志民
单位:张昕原(内蒙古蒙医学院,内蒙古 通辽 028041);巴根那(内蒙古蒙医学院,内蒙古 通辽 028041);娜仁花(内蒙古蒙医学院,内蒙古 通辽 028041);王志民(内蒙古蒙医学院,内蒙古 通辽 028041)
关键词:凝胶电泳;小茴香;孜然
时珍国医国药000237 摘 要:蛋白质在植物、动物细胞中普遍存在,具有种的特异性和稳定性。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对小茴香及其伪品孜然进行鉴别。
分类号:R282.5 文献标识码:A
文章编号:1008-0805(2000)02-0139-01
Identification of Mongolian Medicines Xiaohuixiang and Ziran by Gel Electrophoresis
, http://www.100md.com
ZHANG Xin-yuan, Bagenna, Narenhua, WANG Zhi-min
(Inner Mongolia College of Traditional Mongolian Medicine, Tongliao, Inner Mongolia 028041, China)
Abstract:In this paper,two umbelliferae Mongolian medicines Xiaohuixiang and Ziran were identified by gel eletrophoresis.Result showed that protein bands of the two medicines had obvious differences and distinguishing characteres. Ziran had two characteritic bands whose mobility were respectively 0.276 6 and 0.627 7, but the two bands had not been seen in Xiaohuixiang. The two Mongolian medicines had a few common bands, which shows possibly that either has common origin.
, http://www.100md.com
Key words:Gel eletrophoresis; Xiaohuixiang; Ziran▲
蒙药小茴香为伞形科植物Foeniculum vulgare Mill. 干燥成熟的果实,具理气止痛、温中健脾胃的功能。现发现小茴香药材中有果形较小,外形相似的另一种植物果实,经鉴定,为同科孜然芹属孜然芹Cuminum cyminum L.的果实。关于两者的性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别已有报道[1]。本文利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对二者进行鉴别。
1 实验材料与方法
1.1 实验材料:小茴香Fructus foeniculi(Mill.)采于本校药材基地、孜然(Cuminum cyminum L.的果实)购于医药采购供应站。两药均经蒙药系巴根那副教授鉴定。
1.2 试剂配制与凝胶的制备:见文献[2]。
, http://www.100md.com
1.3 样品液制备:取纯净蒙药材适量,加入 Tris-HCl 缓冲液,研磨成匀浆,置冰箱中备用。
1.4 电泳:取样品上清液加入等体积40%蔗糖液,用微量注射器上样,在上槽缓冲液中放入1~2滴溴酚蓝作指示剂。调节电流至20 mA 进行电泳。
1.5 染色与脱色:取出凝胶后,放入0.2%的考马斯亮蓝(R 250)染色液中,在36℃下染色1 h,再用含20%甲醇和7%醋酸的脱色液在36℃下进行脱色,常更换脱色液,直至背景清晰为止。
2 结果与讨论
2.1 小茴香与其伪品莳萝子及其混淆品蛇床子在电泳图谱上可见明显区别。孜然为新发现的一种小茴香的伪品,仍可利用电泳法进行鉴别,在电泳谱上孜然有两条带(见图1),迁移率分别为0.276 6,0.627 7。经过多次重复实验小茴香无这两条带。并且对不同产地的小茴香进行电泳分析,也未见这两条带。故这两条带可作为孜然的鉴别特征带。因二者为同科植物,故有迁移率为0.095 7,0.255 3,0.446 8,0.531 9等4条带(见图1)。说明它们可能亲缘关系较近。
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2.2 蛋白质是基因表达的直接产物,种子具丰富的蛋白,以蛋白质为标准,从分子水平对小茴香及其伪品进行鉴别可靠性大。■
作者简介:张昕原(1956-),女(蒙古族),内蒙古呼和浩特市人,现任内蒙古医学院中心实验室副教授.
参考文献:
[1]姚仲青,俞明霞.小茴香与其伪品孜然鉴别[J].时珍国医国药,1999,10(2)∶120
[2]袁晓华.植物生理生化实验[M].北京:高等教育出版社,1983∶57
收稿日期:1999-08-16
修稿日期:1999-09-12, 百拇医药
单位:张昕原(内蒙古蒙医学院,内蒙古 通辽 028041);巴根那(内蒙古蒙医学院,内蒙古 通辽 028041);娜仁花(内蒙古蒙医学院,内蒙古 通辽 028041);王志民(内蒙古蒙医学院,内蒙古 通辽 028041)
关键词:凝胶电泳;小茴香;孜然
时珍国医国药000237 摘 要:蛋白质在植物、动物细胞中普遍存在,具有种的特异性和稳定性。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对小茴香及其伪品孜然进行鉴别。
分类号:R282.5 文献标识码:A
文章编号:1008-0805(2000)02-0139-01
Identification of Mongolian Medicines Xiaohuixiang and Ziran by Gel Electrophoresis
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ZHANG Xin-yuan, Bagenna, Narenhua, WANG Zhi-min
(Inner Mongolia College of Traditional Mongolian Medicine, Tongliao, Inner Mongolia 028041, China)
Abstract:In this paper,two umbelliferae Mongolian medicines Xiaohuixiang and Ziran were identified by gel eletrophoresis.Result showed that protein bands of the two medicines had obvious differences and distinguishing characteres. Ziran had two characteritic bands whose mobility were respectively 0.276 6 and 0.627 7, but the two bands had not been seen in Xiaohuixiang. The two Mongolian medicines had a few common bands, which shows possibly that either has common origin.
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Key words:Gel eletrophoresis; Xiaohuixiang; Ziran▲
蒙药小茴香为伞形科植物Foeniculum vulgare Mill. 干燥成熟的果实,具理气止痛、温中健脾胃的功能。现发现小茴香药材中有果形较小,外形相似的另一种植物果实,经鉴定,为同科孜然芹属孜然芹Cuminum cyminum L.的果实。关于两者的性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别已有报道[1]。本文利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对二者进行鉴别。
1 实验材料与方法
1.1 实验材料:小茴香Fructus foeniculi(Mill.)采于本校药材基地、孜然(Cuminum cyminum L.的果实)购于医药采购供应站。两药均经蒙药系巴根那副教授鉴定。
1.2 试剂配制与凝胶的制备:见文献[2]。
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1.3 样品液制备:取纯净蒙药材适量,加入 Tris-HCl 缓冲液,研磨成匀浆,置冰箱中备用。
1.4 电泳:取样品上清液加入等体积40%蔗糖液,用微量注射器上样,在上槽缓冲液中放入1~2滴溴酚蓝作指示剂。调节电流至20 mA 进行电泳。
1.5 染色与脱色:取出凝胶后,放入0.2%的考马斯亮蓝(R 250)染色液中,在36℃下染色1 h,再用含20%甲醇和7%醋酸的脱色液在36℃下进行脱色,常更换脱色液,直至背景清晰为止。
2 结果与讨论
2.1 小茴香与其伪品莳萝子及其混淆品蛇床子在电泳图谱上可见明显区别。孜然为新发现的一种小茴香的伪品,仍可利用电泳法进行鉴别,在电泳谱上孜然有两条带(见图1),迁移率分别为0.276 6,0.627 7。经过多次重复实验小茴香无这两条带。并且对不同产地的小茴香进行电泳分析,也未见这两条带。故这两条带可作为孜然的鉴别特征带。因二者为同科植物,故有迁移率为0.095 7,0.255 3,0.446 8,0.531 9等4条带(见图1)。说明它们可能亲缘关系较近。
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2.2 蛋白质是基因表达的直接产物,种子具丰富的蛋白,以蛋白质为标准,从分子水平对小茴香及其伪品进行鉴别可靠性大。■
作者简介:张昕原(1956-),女(蒙古族),内蒙古呼和浩特市人,现任内蒙古医学院中心实验室副教授.
参考文献:
[1]姚仲青,俞明霞.小茴香与其伪品孜然鉴别[J].时珍国医国药,1999,10(2)∶120
[2]袁晓华.植物生理生化实验[M].北京:高等教育出版社,1983∶57
收稿日期:1999-08-16
修稿日期:1999-09-12, 百拇医药