尼麦角林及片剂的HPLC测定
作者：李建珍 赵江
单位：李建珍 赵江(普强苏州制药有限公司质监部 苏州 215011)
关键词：尼麦角林；HPLC；尼麦角林片
药物分析杂志000219 摘要 目的：采用HPLC法测定尼麦角林原材料及其片剂的含量。方法：以LUNA C8为色谱柱，磷酸盐溶液-乙腈(420∶580)为流动相，检测波长为280 nm。结果：线性关系r=0.999 99，平均回收率为100.0%，RSD=0.75%(n=5)。结论：方法简便，准确，适合于该产品的质量检验分析。
HPLC Determination of Nicergoline and Its Tablets
Li Jianzhen and Zhao Jiang
, 百拇医药
(Upjohn Suzhou Pharmaceutical Company Limited,Suzhou 215011)
Abstract Objective：Nicergoline and its tablets were determined by a new HPLC method.Methods:The separation was performed on a LUNA C8 column.The mobile phase was composed of acetonitrile-phosphate salt solution(580∶420).The UV detector was set at 280 nm.Results:The average recovery was 100.0%,RSD=0.75%(n=5),with good linear relationship(r=0.999 99).Conclusion:The method was simple and accurate and can be used for the quality control of nicergoline and its tablets.
, 百拇医药
Key words nicergoline,HPLC,nicergoline tablets
尼麦角林是一种麦角林的衍生物。其化学式见图1，分子式为C24H26O3N3Br。尼麦角林药物在胃肠道外途径给药时具有拮抗α-肾上腺素的作用，主要治疗急性或慢性脑血管障碍或脑血管代谢功能不良，急性或慢性周围循环障碍。本文改进了尼麦角林及片剂HPLC测定的色谱条件，结果满意。
图1 尼麦角林化学式
1 仪器与试药
HP1050高效液相色谱仪，MWD检测器，HP化学工作站及HP LaserJet 4 Plus打印机。
, http://www.100md.com
尼麦角林对照品，法玛西亚&普强美国总部提供，含量99.3%(按麦角溴烟酯计)；尼麦角林原料及片剂，由意大利爱宝大药厂提供；乙腈为色谱纯试剂，磷酸氢二钾、85%磷酸、三乙胺均为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱：LUNA C8柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：乙腈-磷酸盐溶液(取磷酸氢二钾1.74 g，溶解于900 mL水中，用85%磷酸调pH为6，再用水稀释到1 000 mL(580∶420)；流速：1.0 mL.min-1；检测波长：280 nm；进样量：10 μL。在本色谱条件下得到的主药与杂质色谱图见图2-A、B，按麦角溴烟酯计算理论板数为11 181。
图2 色谱图
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A.尼麦角林 B.原料药有关物质检查 C.空白辅料
1. 甲基光麦角醇(3.03 min) 2. 1-去甲基尼麦角林(4.04 min)
3. 尼麦角林(5.01 min) 4. 去甲氧基尼麦角林(8.12 min)
3 专属性
3.1 原料 根据生产工艺，其可能引入的杂质主要有1-去甲基尼麦角林，甲基光麦角醇，去甲氧基尼麦角林。取该3种杂质照含量测定项下方法进样，记录色谱图。保留时间1-去甲基尼麦角林为4.03 min，甲基光麦角醇为3.03 min，去甲氧基尼麦角林为8.12 min。在该色谱条件下尼麦角林(保留时间为5.0 min)与这3种杂质能完全分离。
3.2 高温试验 样品在120 ℃加热6 h，在4.03 min产生一分解产物，即1-去甲基尼麦角林，与主峰完全分离。
, 百拇医药
3.3 光照试验 样品在澄明度测定仪下，以3 000 lx光照度放置1 d，在保留时间为4.07 min处产生一分解产物，即1-去甲基尼麦角林，与主峰完全分离。
3.4 空白辅料 根据尼麦角林片的处方，制备不含尼麦角林测定空白片，照含量测定项下方法处理，进样，结果表明辅料不干扰尼麦角林的测定，见图2-C。
4 杂质峰归属
前述专属性试验表明，原料样品中保留时间为4.03 min的杂质与1-去甲基尼麦角林的保留时间一致，证明此杂质为1-去甲基尼麦角林。
5 线性关系
取尼麦角林对照品适量，精密称定，加流动相制成0.83 mg.mL-1的溶液，分别精密量取此液1，2，3，4，5 mL，用流动相稀释到25 mL，精密量取10 μL注入色谱仪，测定。在30～200 μg.mL-1范围内色谱峰面积(A)与对照品浓度(X)呈良好的线性关系，回归方程：
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A=-0.38+1.5×104X r=0.999 99
6 重复性试验
取同一样品，分别进行样品溶液的制备、测定，重复6次，结果RSD为0.18%。
7 回收率试验
取尼麦角林适量，精密称定，按照尼麦角林片处方制备模拟样品5份。各份均依片剂含量测定项下方法操作，计算回收率。平均回收率为100.0%，RSD为0.75%(n=5)。
8 原料药有关物质及其含量测定
取尼麦角林原料药适量，精密称定，加流动相制成每1 mL中约含0.8 mg的溶液，照前述色谱条件进行分离测定，记录色谱图至主峰保留时间的1倍。结果见表1。
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表1 原料药有关物质及其含量(%，n=2) 批号
有关物质
主药(按麦角溴烟酯计)
1998-132
0.64
100.8
1998-061
0.72
96.0
1998-062
0.70
100.0
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9 片剂含量测定
取本品20片，精密称定，碾细，精密称取适量(约相当于麦角溴烟酯30 mg)，置50 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释到刻度，摇匀，滤过，取续滤液进行HPLC测定，外标法计算。3批样品测定结果(标示量%)分别为98.9%，102.0%，100.7%。
10 讨论
10.1 本品合成过程中可能会带进原料、中间体、副产物等杂质，且本品遇光、遇热均不稳定，易产生分解产物。据知主要的杂质为1-去甲基尼麦角林、甲基光麦角醇、去甲氧基尼麦角林和未知杂质[1]。专属性研究表明，本法能有效分离这些杂质，原料、中间体、分解产物均不干扰尼麦角林测定。
10.2 本法色谱条件简单，在乙腈-磷酸盐溶液流动相中，色谱峰扩散、拖尾，加入三乙胺1 mL于每1 000 mL流动相中后，色谱峰变窄，拖尾现象消失。
, 百拇医药
10.3 本品用流动相溶解后立即进样，测定主峰峰面积为12 696.5，24 h后再进样测定主峰峰面积为12 842.6，表明用本流动相配制的样品溶液稳定。
10.4 尼麦角林的活性是通过吸收水解成麦角溴烟酯进入体内后起作用的，含量应以有效部分麦角溴烟酯计，因此原料药的含量及片剂的规格均按麦角溴烟酯计。原料药的含量为含麦角溴烟酯不得低于95%，其片剂的含量应为标示量的90%到120%(如标示量为10 mg，则含量为9 mg到12 mg，如标示量为30 mg，则含量为27 mg到36 mg)。
10.5 尼麦角林含量的测定在开发的早期采用紫外分光光度法，在280 nm处的吸收度与浓度成线性关系，其杂质的测定采用TLC法[2]。因尼麦角林的杂质在280 nm处有较大的吸收度，对含量的测定有较大的影响，测定结果的准确度较差。本文采用HPLC法能有效地分离杂质，测定结果的准确度较好。
参考文献
1，尼麦角林进口药品质量标准.BX19990006
2，USP.Ⅹ Ⅹ Ⅲ.621
(本文于1999年9月6日收到), http://www.100md.com
单位：李建珍 赵江(普强苏州制药有限公司质监部 苏州 215011)
关键词：尼麦角林；HPLC；尼麦角林片
药物分析杂志000219 摘要 目的：采用HPLC法测定尼麦角林原材料及其片剂的含量。方法：以LUNA C8为色谱柱，磷酸盐溶液-乙腈(420∶580)为流动相，检测波长为280 nm。结果：线性关系r=0.999 99，平均回收率为100.0%，RSD=0.75%(n=5)。结论：方法简便，准确，适合于该产品的质量检验分析。
HPLC Determination of Nicergoline and Its Tablets
Li Jianzhen and Zhao Jiang
, 百拇医药
(Upjohn Suzhou Pharmaceutical Company Limited,Suzhou 215011)
Abstract Objective：Nicergoline and its tablets were determined by a new HPLC method.Methods:The separation was performed on a LUNA C8 column.The mobile phase was composed of acetonitrile-phosphate salt solution(580∶420).The UV detector was set at 280 nm.Results:The average recovery was 100.0%,RSD=0.75%(n=5),with good linear relationship(r=0.999 99).Conclusion:The method was simple and accurate and can be used for the quality control of nicergoline and its tablets.
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Key words nicergoline,HPLC,nicergoline tablets
尼麦角林是一种麦角林的衍生物。其化学式见图1，分子式为C24H26O3N3Br。尼麦角林药物在胃肠道外途径给药时具有拮抗α-肾上腺素的作用，主要治疗急性或慢性脑血管障碍或脑血管代谢功能不良，急性或慢性周围循环障碍。本文改进了尼麦角林及片剂HPLC测定的色谱条件，结果满意。
图1 尼麦角林化学式
1 仪器与试药
HP1050高效液相色谱仪，MWD检测器，HP化学工作站及HP LaserJet 4 Plus打印机。
, http://www.100md.com
尼麦角林对照品，法玛西亚&普强美国总部提供，含量99.3%(按麦角溴烟酯计)；尼麦角林原料及片剂，由意大利爱宝大药厂提供；乙腈为色谱纯试剂，磷酸氢二钾、85%磷酸、三乙胺均为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱：LUNA C8柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：乙腈-磷酸盐溶液(取磷酸氢二钾1.74 g，溶解于900 mL水中，用85%磷酸调pH为6，再用水稀释到1 000 mL(580∶420)；流速：1.0 mL.min-1；检测波长：280 nm；进样量：10 μL。在本色谱条件下得到的主药与杂质色谱图见图2-A、B，按麦角溴烟酯计算理论板数为11 181。
图2 色谱图
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A.尼麦角林 B.原料药有关物质检查 C.空白辅料
1. 甲基光麦角醇(3.03 min) 2. 1-去甲基尼麦角林(4.04 min)
3. 尼麦角林(5.01 min) 4. 去甲氧基尼麦角林(8.12 min)
3 专属性
3.1 原料 根据生产工艺，其可能引入的杂质主要有1-去甲基尼麦角林，甲基光麦角醇，去甲氧基尼麦角林。取该3种杂质照含量测定项下方法进样，记录色谱图。保留时间1-去甲基尼麦角林为4.03 min，甲基光麦角醇为3.03 min，去甲氧基尼麦角林为8.12 min。在该色谱条件下尼麦角林(保留时间为5.0 min)与这3种杂质能完全分离。
3.2 高温试验 样品在120 ℃加热6 h，在4.03 min产生一分解产物，即1-去甲基尼麦角林，与主峰完全分离。
, 百拇医药
3.3 光照试验 样品在澄明度测定仪下，以3 000 lx光照度放置1 d，在保留时间为4.07 min处产生一分解产物，即1-去甲基尼麦角林，与主峰完全分离。
3.4 空白辅料 根据尼麦角林片的处方，制备不含尼麦角林测定空白片，照含量测定项下方法处理，进样，结果表明辅料不干扰尼麦角林的测定，见图2-C。
4 杂质峰归属
前述专属性试验表明，原料样品中保留时间为4.03 min的杂质与1-去甲基尼麦角林的保留时间一致，证明此杂质为1-去甲基尼麦角林。
5 线性关系
取尼麦角林对照品适量，精密称定，加流动相制成0.83 mg.mL-1的溶液，分别精密量取此液1，2，3，4，5 mL，用流动相稀释到25 mL，精密量取10 μL注入色谱仪，测定。在30～200 μg.mL-1范围内色谱峰面积(A)与对照品浓度(X)呈良好的线性关系，回归方程：
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A=-0.38+1.5×104X r=0.999 99
6 重复性试验
取同一样品，分别进行样品溶液的制备、测定，重复6次，结果RSD为0.18%。
7 回收率试验
取尼麦角林适量，精密称定，按照尼麦角林片处方制备模拟样品5份。各份均依片剂含量测定项下方法操作，计算回收率。平均回收率为100.0%，RSD为0.75%(n=5)。
8 原料药有关物质及其含量测定
取尼麦角林原料药适量，精密称定，加流动相制成每1 mL中约含0.8 mg的溶液，照前述色谱条件进行分离测定，记录色谱图至主峰保留时间的1倍。结果见表1。
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表1 原料药有关物质及其含量(%，n=2) 批号
有关物质
主药(按麦角溴烟酯计)
1998-132
0.64
100.8
1998-061
0.72
96.0
1998-062
0.70
100.0
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9 片剂含量测定
取本品20片，精密称定，碾细，精密称取适量(约相当于麦角溴烟酯30 mg)，置50 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释到刻度，摇匀，滤过，取续滤液进行HPLC测定，外标法计算。3批样品测定结果(标示量%)分别为98.9%，102.0%，100.7%。
10 讨论
10.1 本品合成过程中可能会带进原料、中间体、副产物等杂质，且本品遇光、遇热均不稳定，易产生分解产物。据知主要的杂质为1-去甲基尼麦角林、甲基光麦角醇、去甲氧基尼麦角林和未知杂质[1]。专属性研究表明，本法能有效分离这些杂质，原料、中间体、分解产物均不干扰尼麦角林测定。
10.2 本法色谱条件简单，在乙腈-磷酸盐溶液流动相中，色谱峰扩散、拖尾，加入三乙胺1 mL于每1 000 mL流动相中后，色谱峰变窄，拖尾现象消失。
, 百拇医药
10.3 本品用流动相溶解后立即进样，测定主峰峰面积为12 696.5，24 h后再进样测定主峰峰面积为12 842.6，表明用本流动相配制的样品溶液稳定。
10.4 尼麦角林的活性是通过吸收水解成麦角溴烟酯进入体内后起作用的，含量应以有效部分麦角溴烟酯计，因此原料药的含量及片剂的规格均按麦角溴烟酯计。原料药的含量为含麦角溴烟酯不得低于95%，其片剂的含量应为标示量的90%到120%(如标示量为10 mg，则含量为9 mg到12 mg，如标示量为30 mg，则含量为27 mg到36 mg)。
10.5 尼麦角林含量的测定在开发的早期采用紫外分光光度法，在280 nm处的吸收度与浓度成线性关系，其杂质的测定采用TLC法[2]。因尼麦角林的杂质在280 nm处有较大的吸收度，对含量的测定有较大的影响，测定结果的准确度较差。本文采用HPLC法能有效地分离杂质，测定结果的准确度较好。
参考文献
1，尼麦角林进口药品质量标准.BX19990006
2，USP.Ⅹ Ⅹ Ⅲ.621
(本文于1999年9月6日收到), http://www.100md.com