合成鱼腥草素对环磷酰胺模型小鼠免疫功能的影响
作者：邵兰 于庆海 徐静华 李霞 张予阳 张何
单位：邵兰 庆海 徐静华 李霞 张予阳(沈阳药科大学中药系，沈阳 110015) 张何(辽宁卫生职工医学院药学系，沈阳 110005)
关键词：合成鱼腥草素；环磷酰胺；免疫调节
沈阳药科大学学报000219 摘 要：对于环磷酰胺所致免疫功能低下模型小鼠，灌胃给予合成鱼腥草素60 mg/kg、120 mg/kg能明显增加环磷酰胺所致免疫功能低下模型小鼠的脾脏指数、外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率；增强单核巨噬细胞吞噬功能、迟发型超敏反应强度及ConA诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力；对胸腺指数则无明显影响；合成鱼腥草素120 mg/kg还能明显增强环磷酰胺模型小鼠血清溶血素的生成及脾脏空斑形成细胞溶血能力.
分类号：R96
, 百拇医药
The Effect of Houttuyninum on Immunologic Function in Mice Treated with Cyclophosphamide
Shao Lan Yu Qinghai Xu Jinghua Li Xia,Zhang Yuyang Zhang He
(Department of Traditional Chinese Medicines,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Abstract：HOU by i.g. at 60 mg/kg or 120 mg/kg significantly strengthened the phagocytosing function of monocyte-macrophage system, and delayed type of hypersensitivity (DTH) reaction, ConA-induced splenocyte proliferation significantly enhanced the spleen index, ANAE (+) cell percentage of peripheral blood lymphocytes in mice treated with cyclophosphamide. However, the thymus index did not change obviously. HOU by i.g at 120 mg/kg remarkably increased the development of serum hemolysin and the production of the spleen plaque forming cell (PFC) in cyclophosphamide mice.
, 百拇医药
Key words：houttuyninum; cyclophosphamide; immunoregulation▲
合成鱼腥草素(houttuyninum,HOU)为中药鱼腥草的有效成分鱼腥草素的亚硫酸钠加成物，具有抑菌、抗炎等方面的药理作用.作者在进行抗炎研究中发现，其对免疫功能有一定调节作用，值得进一步探讨.环磷酰胺是较强的烷化剂，它能通过与DNA双链交叉连接破坏DNA，从而破坏免疫活性细胞，抑制免疫功能，因而在免疫药理学上被广泛的应用为免疫低下模型的造型剂.作者利用环磷酰胺造成小鼠免疫功能低下模型，对合成鱼腥草素免疫调节作用进行了研究.
1 实验材料与方法
1.1 主要药品与试剂
合成鱼腥草素(沈阳药科大学制药厂生产，批号970112)；环磷酰胺(CY，沈阳药科大学制药厂生产，批号950727)；2，4-二硝基氯苯(DNCB，天津市化学试剂一厂生产，批号850112)；酸性α-醋酸萘酯酶(上海试剂一厂生产，批号880601)；刀豆球蛋白(ConA，Sigma公司产品，批号30H7010)；四甲基偶氮唑兰(MTT，Sigma公司产品，批号BSO885).
, 百拇医药
1.2 环磷酰胺免疫抑制模型
昆明种小鼠，体重19～21 g，雌雄兼用(沈阳药科大学实验动物中心提供，辽实合字033号).由于环磷酰胺对免疫细胞抑制程度不同，实验中所用环磷酰胺剂量也不同.在炭粒廓清实验中，于给药第3～5 d腹腔注射环磷酰胺50 mg/kg；在血清溶血素水平及溶血空斑形成细胞分光光度法的测定中，于致敏当日给予环磷酰胺20 mg/kg；在迟发型超敏反应强度的测定中，于致敏当日及第2 d给予环磷酰胺40 mg/kg；其它实验于给药第3 d、第5 d给予环磷酰胺40 mg/kg.
1.3 实验方法
实验分4组进行，HOU低剂量组、HOU高剂量组分别灌胃(i.g.)给予HOU 60 mg/kg、120 mg/kg，连续7 d；CMC对照组、环磷酰胺模型组，给予等容量的1%CMC.末次给药后1 h，按文献方法进行胸腺指数、脾指数的测定，单核巨噬细胞炭粒廓清实验〔1〕，DNCB诱导的迟发型超敏反应强度测定〔2〕，外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率测定〔3，4〕，血清溶血素水平测定〔5〕，脾脏空斑形成细胞溶血实验〔6〕，脾脏T细胞增殖实验〔7〕.
, 百拇医药
2 实验结果
2.1 对小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响
实验结果(见表1)表明，环磷酰胺模型小鼠胸腺指数、脾脏指数与对照组比较均明显降低；i.g.HOU 60 mg/kg、120 mg/kg均能明显增加环磷酰胺致免疫功能低下小鼠脾脏指数，对胸腺指数则无明显影响.
Tab.1 Effects of HOU on thymus and spleen indices in mice treated with CY/
±s Group
Dose/mg。kg-1。d
n
, 百拇医药
Thymus index
Spleen index
(mg。g-1body weight)
Control
—
11
3.88±0.71
5.40±1.29
CY
40
12
2.62±0.55ΔΔΔ
, 百拇医药
3.93±1.24ΔΔ
HOU+CY
60+40
12
2.61±0.54
5.22±1.44*
HOU+CY
120+40
12
2.75±0.60
5.85±1.85**
, 百拇医药
ΔΔP<0.01，ΔΔΔP<0.001 compared with control group；*P<0.05，**P<0.01 compared with CY group2.2 对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响
实验结果(见表2)表明，环磷酰胺模型小鼠炭廓清能力与对照组比较明显降低，K值及α值均明显减少；i.g.HOU 60 mg/kg、120 mg/kg均能明显增强环磷酰胺致免疫功能低下小鼠炭廓清能力.
Tab.2 Effects of HOU on clearance rate of iv charcoal particles in mice treated with CY/±s Group
Dose/mg。kg-1。d
, 百拇医药
n
K value
α value
Control
—
10
0.064±0.025
6.42±0.99
CY
50
10
0.044±0.012Δ
, 百拇医药
5.14±0.63ΔΔ
HOU+CY
60+50
10
0.063±0.021*
6.36±1.06**
HOU+CY
120+50
10
0.044±0.014
5.98±0.82*
, http://www.100md.com
ΔP<0.05，ΔΔP<0.01 compared with control group；*P<0.05，* *P<0.01 compared with CY group
2.3 对小鼠DNCB诱导的迟发型超敏反应强度和外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率的影响
实验结果(见表3)表明，环磷酰胺模型小鼠耳肿胀度、外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率与对照组比较明显降低，HOU 60mg/kg、120mg/kg对以上两项指标均有明显增强作用.
Tab.3 Effects of HOU on delayed type hypersensitivity reaction and ANAE (+) cell percentage
of peripheral blood lymphocytes in mice treated with CY/±s Group
, 百拇医药
Dose/mg。kg-1。d
n
Ear swelling/mg
ANAE (+) cell rate/%
Control
—
10
1.91±0.84
69.3±5.2
CY
40
10
, http://www.100md.com
0.73±0.64ΔΔ
58.6±3.5ΔΔΔ
HOU+CY
60+40
10
1.47±0.88*
64.0±5.2*
HOU+CY
120+40
10
1.80±0.81**
, 百拇医药
66.7±4.5***
ΔΔP<0.01，ΔΔΔP<0.001 compared with the control group；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001 compared with the CY group
2.4 对小鼠血清溶血素生成和脾脏空斑形成细胞溶血能力的影响
实验结果(见表4)表明，环磷酰胺模型小鼠HC50值与脾脏空斑形成细胞溶血能力与对照组比较明显降低，HOU 120 mg/kg能明显提高环磷酰胺致免疫功能低下小鼠HC50值、脾脏空斑形成细胞溶血能力，而HOU 60 mg/kg则无明显影响.
Tab.4 Effects of HOU on serum hemolysin concentration and plaque forming cell of spleen in mice treated with CY/±s Group
, 百拇医药
Dose/mg。kg-1。d
n
HC50
PFC
Control
—
11
26.88±18.03
0.217±0.051
CY
20
10
, 百拇医药
1.98±1.38ΔΔΔ
0.106±0.038ΔΔΔ
HOU+CY
60+20
10
2.55±1.25
0.120±0.022
HOU+CY
120+20
10
3.43±1.56*
, 百拇医药
0.190±0.057* *
ΔΔΔP<0.001 compared with the control group；*P<0.05，* *P<0.01 compared with the CY group
2.5 对ConA诱导的小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力的影响
实验结果(见表5)表明，环磷酰胺模型小鼠ConA诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力与对照组比较明显降低，HOU 60 mg/kg、120 mg/kg均能明显增强环磷酰胺致免疫功能低下小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力.
Tab.5 Effects of HOU on the spleen lymphocyte proliferation in mice treated with CY/±s Group
, 百拇医药
Dose/mg。kg-1。d
n
A value
Control
—
10
1.802±0.163
CY
40
10
1.007±0.193ΔΔΔ
HOU+CY
, http://www.100md.com
60+40
10
1.510±0.558*
HOU+CY
120+40
10
1.622±0.417***
ΔΔΔP<0.001 compared with control group；*P<(0.05，***P<0.001 compared with CY group
3 讨论
单核巨噬细胞系统是机体最重要的防御系统，可以借助测定血流中炭粒的消失速度来反映单核巨噬细胞吞噬异物的能力〔8〕.作者实验结果表明，合成鱼腥草素两个剂量可以有效的拮抗环磷酰胺对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的抑制作用.根据环磷酰胺的作用〔9〕推测合成鱼腥草素这种作用可能是通过促进单核巨噬细胞DNA、RNA及蛋白质的合成来实现的.
, 百拇医药
T淋巴细胞是介导细胞免疫的主要免疫细胞〔8〕，作者实验结果表明，合成鱼腥草素两个剂量均能明显拮抗环磷酰胺对小鼠迟发型超敏反应强度、脾脏T淋巴细胞增殖的抑制作用，能增强细胞免疫功能.进一步研究表明，合成鱼腥草素能明显拮抗环磷酰胺对小鼠外周血T淋巴细胞ANAE染色率的抑制作用，提示合成鱼腥草素可通过提高T淋巴细胞数量来增强细胞免疫功能.通常,研究药物对机体体液免疫的影响，方法有溶血素测定法、溶血空斑法〔10〕.作者实验结果表明，合成鱼腥草素两个剂量均能明显拮抗环磷酰胺对上述两指标的抑制作用.表明合成鱼腥草素能增强机体的体液免疫功能.文献报道，环磷酰胺对体液免疫的抑制作用，不仅因为大剂量环磷酰胺能使脾脏及淋巴结中的B细胞数量减少，而且与TH细胞绝对数减少有关〔9〕.提示合成鱼腥草素对体液免疫的作用，不仅通过促进B细胞分化为抗体形成细胞，而且还可能具有增强TH细胞功能的作用.
由上述实验可知，在免疫及T细胞免疫辅助受损情况下合成鱼腥草素能通过增强单核巨噬细胞吞噬能力，增强T、B细胞增殖能力来调节免疫功能.因此，合成鱼腥草素对环磷酰胺致小鼠非特异性免疫、特异性免疫功能低下均有明显的调节作用.
, 百拇医药
参考文献：
[1]陈奇主编. 中药药理研究方法学. 北京：人民卫生出版社，1993.757
[2]Corsini AC. A Simple method of evaluating delayed type hypersensitivity in mice.Immuno Methods，1979,30:195
[3]孙国贤，廖永葆，朱信厚,等. 淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶测定及其应用的初步探讨. 中华医学检验杂志，1981,4(2)：76～78
[4]宫伟，于爱萍，彭风生. T淋巴细胞酶标记染色鉴定在实验动物的应用.中国医科大学学报，1979，(3)：42～46
[5]徐学瑛，李元，许津. 一个改进的体液免疫测定方法—溶血素测定法. 药学学报，1979，(3)：442～445
, 百拇医药
[6]徐叔云主编. 药理实验方法学. 第2版. 北京：人民卫生出版社，1991.1230
[7]徐叔云主编. 药理实验方法学. 第2版. 北京：人民卫生出版社，1991.1221
[8]陈奇主编. 中药药理研究方法学. 北京：人民卫生出版社，1993.708～710
[9]竺心影主编. 药理学. 第2版. 北京:人民卫生出版社, 1987.396
[10]杨藻宸主编. 药理学总论. 北京：人民卫生出版社，1987.481
收稿日期：1999-06-30
, http://www.100md.com
单位：邵兰 庆海 徐静华 李霞 张予阳(沈阳药科大学中药系，沈阳 110015) 张何(辽宁卫生职工医学院药学系，沈阳 110005)
关键词：合成鱼腥草素；环磷酰胺；免疫调节
沈阳药科大学学报000219 摘 要：对于环磷酰胺所致免疫功能低下模型小鼠，灌胃给予合成鱼腥草素60 mg/kg、120 mg/kg能明显增加环磷酰胺所致免疫功能低下模型小鼠的脾脏指数、外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率；增强单核巨噬细胞吞噬功能、迟发型超敏反应强度及ConA诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力；对胸腺指数则无明显影响；合成鱼腥草素120 mg/kg还能明显增强环磷酰胺模型小鼠血清溶血素的生成及脾脏空斑形成细胞溶血能力.
分类号：R96
, 百拇医药
The Effect of Houttuyninum on Immunologic Function in Mice Treated with Cyclophosphamide
Shao Lan Yu Qinghai Xu Jinghua Li Xia,Zhang Yuyang Zhang He
(Department of Traditional Chinese Medicines,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Abstract：HOU by i.g. at 60 mg/kg or 120 mg/kg significantly strengthened the phagocytosing function of monocyte-macrophage system, and delayed type of hypersensitivity (DTH) reaction, ConA-induced splenocyte proliferation significantly enhanced the spleen index, ANAE (+) cell percentage of peripheral blood lymphocytes in mice treated with cyclophosphamide. However, the thymus index did not change obviously. HOU by i.g at 120 mg/kg remarkably increased the development of serum hemolysin and the production of the spleen plaque forming cell (PFC) in cyclophosphamide mice.
, 百拇医药
Key words：houttuyninum; cyclophosphamide; immunoregulation▲
合成鱼腥草素(houttuyninum,HOU)为中药鱼腥草的有效成分鱼腥草素的亚硫酸钠加成物，具有抑菌、抗炎等方面的药理作用.作者在进行抗炎研究中发现，其对免疫功能有一定调节作用，值得进一步探讨.环磷酰胺是较强的烷化剂，它能通过与DNA双链交叉连接破坏DNA，从而破坏免疫活性细胞，抑制免疫功能，因而在免疫药理学上被广泛的应用为免疫低下模型的造型剂.作者利用环磷酰胺造成小鼠免疫功能低下模型，对合成鱼腥草素免疫调节作用进行了研究.
1 实验材料与方法
1.1 主要药品与试剂
合成鱼腥草素(沈阳药科大学制药厂生产，批号970112)；环磷酰胺(CY，沈阳药科大学制药厂生产，批号950727)；2，4-二硝基氯苯(DNCB，天津市化学试剂一厂生产，批号850112)；酸性α-醋酸萘酯酶(上海试剂一厂生产，批号880601)；刀豆球蛋白(ConA，Sigma公司产品，批号30H7010)；四甲基偶氮唑兰(MTT，Sigma公司产品，批号BSO885).
, 百拇医药
1.2 环磷酰胺免疫抑制模型
昆明种小鼠，体重19～21 g，雌雄兼用(沈阳药科大学实验动物中心提供，辽实合字033号).由于环磷酰胺对免疫细胞抑制程度不同，实验中所用环磷酰胺剂量也不同.在炭粒廓清实验中，于给药第3～5 d腹腔注射环磷酰胺50 mg/kg；在血清溶血素水平及溶血空斑形成细胞分光光度法的测定中，于致敏当日给予环磷酰胺20 mg/kg；在迟发型超敏反应强度的测定中，于致敏当日及第2 d给予环磷酰胺40 mg/kg；其它实验于给药第3 d、第5 d给予环磷酰胺40 mg/kg.
1.3 实验方法
实验分4组进行，HOU低剂量组、HOU高剂量组分别灌胃(i.g.)给予HOU 60 mg/kg、120 mg/kg，连续7 d；CMC对照组、环磷酰胺模型组，给予等容量的1%CMC.末次给药后1 h，按文献方法进行胸腺指数、脾指数的测定，单核巨噬细胞炭粒廓清实验〔1〕，DNCB诱导的迟发型超敏反应强度测定〔2〕，外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率测定〔3，4〕，血清溶血素水平测定〔5〕，脾脏空斑形成细胞溶血实验〔6〕，脾脏T细胞增殖实验〔7〕.
, 百拇医药
2 实验结果
2.1 对小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响
实验结果(见表1)表明，环磷酰胺模型小鼠胸腺指数、脾脏指数与对照组比较均明显降低；i.g.HOU 60 mg/kg、120 mg/kg均能明显增加环磷酰胺致免疫功能低下小鼠脾脏指数，对胸腺指数则无明显影响.
Tab.1 Effects of HOU on thymus and spleen indices in mice treated with CY/
±s GroupDose/mg。kg-1。d
n
, 百拇医药
Thymus index
Spleen index
(mg。g-1body weight)
Control
—
11
3.88±0.71
5.40±1.29
CY
40
12
2.62±0.55ΔΔΔ
, 百拇医药
3.93±1.24ΔΔ
HOU+CY
60+40
12
2.61±0.54
5.22±1.44*
HOU+CY
120+40
12
2.75±0.60
5.85±1.85**
, 百拇医药
ΔΔP<0.01，ΔΔΔP<0.001 compared with control group；*P<0.05，**P<0.01 compared with CY group2.2 对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响
实验结果(见表2)表明，环磷酰胺模型小鼠炭廓清能力与对照组比较明显降低，K值及α值均明显减少；i.g.HOU 60 mg/kg、120 mg/kg均能明显增强环磷酰胺致免疫功能低下小鼠炭廓清能力.
Tab.2 Effects of HOU on clearance rate of iv charcoal particles in mice treated with CY/
±s GroupDose/mg。kg-1。d
, 百拇医药
n
K value
α value
Control
—
10
0.064±0.025
6.42±0.99
CY
50
10
0.044±0.012Δ
, 百拇医药
5.14±0.63ΔΔ
HOU+CY
60+50
10
0.063±0.021*
6.36±1.06**
HOU+CY
120+50
10
0.044±0.014
5.98±0.82*
, http://www.100md.com
ΔP<0.05，ΔΔP<0.01 compared with control group；*P<0.05，* *P<0.01 compared with CY group
2.3 对小鼠DNCB诱导的迟发型超敏反应强度和外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率的影响
实验结果(见表3)表明，环磷酰胺模型小鼠耳肿胀度、外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率与对照组比较明显降低，HOU 60mg/kg、120mg/kg对以上两项指标均有明显增强作用.
Tab.3 Effects of HOU on delayed type hypersensitivity reaction and ANAE (+) cell percentage
of peripheral blood lymphocytes in mice treated with CY/
±s Group, 百拇医药
Dose/mg。kg-1。d
n
Ear swelling/mg
ANAE (+) cell rate/%
Control
—
10
1.91±0.84
69.3±5.2
CY
40
10
, http://www.100md.com
0.73±0.64ΔΔ
58.6±3.5ΔΔΔ
HOU+CY
60+40
10
1.47±0.88*
64.0±5.2*
HOU+CY
120+40
10
1.80±0.81**
, 百拇医药
66.7±4.5***
ΔΔP<0.01，ΔΔΔP<0.001 compared with the control group；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001 compared with the CY group
2.4 对小鼠血清溶血素生成和脾脏空斑形成细胞溶血能力的影响
实验结果(见表4)表明，环磷酰胺模型小鼠HC50值与脾脏空斑形成细胞溶血能力与对照组比较明显降低，HOU 120 mg/kg能明显提高环磷酰胺致免疫功能低下小鼠HC50值、脾脏空斑形成细胞溶血能力，而HOU 60 mg/kg则无明显影响.
Tab.4 Effects of HOU on serum hemolysin concentration and plaque forming cell of spleen in mice treated with CY/
±s Group, 百拇医药
Dose/mg。kg-1。d
n
HC50
PFC
Control
—
11
26.88±18.03
0.217±0.051
CY
20
10
, 百拇医药
1.98±1.38ΔΔΔ
0.106±0.038ΔΔΔ
HOU+CY
60+20
10
2.55±1.25
0.120±0.022
HOU+CY
120+20
10
3.43±1.56*
, 百拇医药
0.190±0.057* *
ΔΔΔP<0.001 compared with the control group；*P<0.05，* *P<0.01 compared with the CY group
2.5 对ConA诱导的小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力的影响
实验结果(见表5)表明，环磷酰胺模型小鼠ConA诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力与对照组比较明显降低，HOU 60 mg/kg、120 mg/kg均能明显增强环磷酰胺致免疫功能低下小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力.
Tab.5 Effects of HOU on the spleen lymphocyte proliferation in mice treated with CY/
±s Group, 百拇医药
Dose/mg。kg-1。d
n
A value
Control
—
10
1.802±0.163
CY
40
10
1.007±0.193ΔΔΔ
HOU+CY
, http://www.100md.com
60+40
10
1.510±0.558*
HOU+CY
120+40
10
1.622±0.417***
ΔΔΔP<0.001 compared with control group；*P<(0.05，***P<0.001 compared with CY group
3 讨论
单核巨噬细胞系统是机体最重要的防御系统，可以借助测定血流中炭粒的消失速度来反映单核巨噬细胞吞噬异物的能力〔8〕.作者实验结果表明，合成鱼腥草素两个剂量可以有效的拮抗环磷酰胺对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的抑制作用.根据环磷酰胺的作用〔9〕推测合成鱼腥草素这种作用可能是通过促进单核巨噬细胞DNA、RNA及蛋白质的合成来实现的.
, 百拇医药
T淋巴细胞是介导细胞免疫的主要免疫细胞〔8〕，作者实验结果表明，合成鱼腥草素两个剂量均能明显拮抗环磷酰胺对小鼠迟发型超敏反应强度、脾脏T淋巴细胞增殖的抑制作用，能增强细胞免疫功能.进一步研究表明，合成鱼腥草素能明显拮抗环磷酰胺对小鼠外周血T淋巴细胞ANAE染色率的抑制作用，提示合成鱼腥草素可通过提高T淋巴细胞数量来增强细胞免疫功能.通常,研究药物对机体体液免疫的影响，方法有溶血素测定法、溶血空斑法〔10〕.作者实验结果表明，合成鱼腥草素两个剂量均能明显拮抗环磷酰胺对上述两指标的抑制作用.表明合成鱼腥草素能增强机体的体液免疫功能.文献报道，环磷酰胺对体液免疫的抑制作用，不仅因为大剂量环磷酰胺能使脾脏及淋巴结中的B细胞数量减少，而且与TH细胞绝对数减少有关〔9〕.提示合成鱼腥草素对体液免疫的作用，不仅通过促进B细胞分化为抗体形成细胞，而且还可能具有增强TH细胞功能的作用.
由上述实验可知，在免疫及T细胞免疫辅助受损情况下合成鱼腥草素能通过增强单核巨噬细胞吞噬能力，增强T、B细胞增殖能力来调节免疫功能.因此，合成鱼腥草素对环磷酰胺致小鼠非特异性免疫、特异性免疫功能低下均有明显的调节作用.
, 百拇医药
参考文献：
[1]陈奇主编. 中药药理研究方法学. 北京：人民卫生出版社，1993.757
[2]Corsini AC. A Simple method of evaluating delayed type hypersensitivity in mice.Immuno Methods，1979,30:195
[3]孙国贤，廖永葆，朱信厚,等. 淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶测定及其应用的初步探讨. 中华医学检验杂志，1981,4(2)：76～78
[4]宫伟，于爱萍，彭风生. T淋巴细胞酶标记染色鉴定在实验动物的应用.中国医科大学学报，1979，(3)：42～46
[5]徐学瑛，李元，许津. 一个改进的体液免疫测定方法—溶血素测定法. 药学学报，1979，(3)：442～445
, 百拇医药
[6]徐叔云主编. 药理实验方法学. 第2版. 北京：人民卫生出版社，1991.1230
[7]徐叔云主编. 药理实验方法学. 第2版. 北京：人民卫生出版社，1991.1221
[8]陈奇主编. 中药药理研究方法学. 北京：人民卫生出版社，1993.708～710
[9]竺心影主编. 药理学. 第2版. 北京:人民卫生出版社, 1987.396
[10]杨藻宸主编. 药理学总论. 北京：人民卫生出版社，1987.481
收稿日期：1999-06-30
, http://www.100md.com