黄芪抗应激作用实验研究
作者：黄超培 赵鹏 杨俊峰 梁坚
单位：广西壮族自治区卫生防疫站 南宁530021
关键词：黄芪；小鼠；抗应激作用
广西预防医学000203
摘要:目的研究黄芪对抗应激能力的影响.方法给小鼠灌服黄芪提取液,剂量分为2.5,7.5,15.0g/kg/d,连续30天,然后分别对小鼠进行游泳试验,耐缺氧试验,耐低温和耐高温试验.结果服用黄芪的小鼠在上述试验条件下的生存时间均比对照组延长.结论黄芪具有提高小鼠的抗应激能力的作用.
分类号:R977.9文献标识码:A文章编号:1007-158X(2000)02-0072-03
Study on antistimulative effect of Astragalus hoangtchy
, 百拇医药
HUANG Chaopei,ZHAO Peng,YANG Junfeng,et al.
(Guangxi Health & Anti-epidemic Center,Nianjing530021)
Abstract：Objective To study the effect of Astragalus hoangtchy on stimulus.Methods Mice given orally the extract of Astragalus with 2.5,7.5,15.0g/kg.bw respectively for 30 days were with a series of stimulation condition,the living time of the the mice given Astragalus Hoangtchy were longer than that of control groups.Results Under above-mentioned stimulation condition,the living time of the mice given Astragalus hoangtchy were longerr than that of control groups.Conclusion Astragalus hoangtchy could enhance the antistimulation ability of mice.
, 百拇医药
Keywords：Astragalus hoangtchy Mice Astragalus effect
是常用的补益中药，具有促进免疫功能、延缓衰老、抗感染等作用[1～3],但少见有抗应激作用方面的研究报道。为此，本文研究了黄芪对小鼠负重游泳、耐缺氧、耐高温及耐低温等抗应激能力的影响，现报告如下。
1 材料
1.1 受试物 黄芪提取液，为黄芪水煎剂经乙醇沉淀后再将乙醇挥发而成，每毫升含黄芪干饮片4g，由美国泛华医药公司提供，存放于冰箱，试验前用蒸馏水稀释至所需浓度。
1.2 实验动物 昆明种小白鼠，体重20～25g，广西中医药研究所动物室提供。
1.3 试剂和仪器 钠石灰、蒽酮、乙醚、硫脲，尿素氮测定试剂盒(上海长征医学科学有限公司生产)等。主要仪器设备有匀浆器、721型分光光度计、ECOM-F6124型半自动生化分析仪。
, http://www.100md.com
2 实验方法与结果
2.1 小鼠负重游泳试验 试验方法参照文献[4] 。选雄性小鼠40只，随机分成4个组，每组10只。其中3个组分别组小鼠含黄芪干饮片2.5、7.5、15.0g/kg.bw的黄芪提取液，灌胃量为0.4ml/20g.bw，每天一次，连续30天。另一组为空白对照组，给予等量的蒸镏水灌胃。实验期间动物自由取食和饮水。第31天在小鼠尾根部束5%的铅条，然后将其放入玻璃水缸(50×50cm2，水深40cm，水温25±0.5℃)游泳，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，结果见表1。
表1 黄芪对小鼠游泳时间的影响 剂量组
(g/kg.bw)
动物数
(只)
, 百拇医药 游泳时间
(min)
百分率
(%)
15.0
10
61.0±10.6**
187.1
7.5
10
34.0±10.5
104.3
2.5
, 百拇医药
10
36.7±14.1
112.6
空白对照
10
32.6±10.1
100.0
注:**表示与空白对照比较(方差分析),P<0.01
高剂量组小鼠的游泳时间明显比空白对照组延长(P<0.01)，但中、低剂量组的游泳时间与空白对照组无明显差异(P<0.05),表明大剂量的黄芪有抗疲劳作用，而小剂量时其抗疲劳作用则不明显。
2.2 血乳酸、尿素氮及肝糖原含量测定 动物分组及给药同2、1项，第31天给小鼠尾部负重4%，放入缸内游泳10分钟后取出，立即用毛巾吸干小鼠身上的水，用毛细玻璃管从眼眶采血，进行血乳酸[4]和尿素氮测定[4,5]，同时迅速取肝组织，匀浆后测定肝糖原(酶法)[5]。结果见表2，黄芪试验组的血乳酸含量均低于空白对照组，其中高剂量和中剂量组降低有显著性意义(P<0.05或P<0.01)；试验组肝糖原含量则明显比对照组高，其中高剂量组升高有显著性意义(P<0.05)，而试验组血清尿素氮含量与对照组则基本上没有差异(P>0.05)。上述结果表明黄芪能够清除小鼠在运动过程中产生的乳酸，并有促进肝糖原储备或减少其消耗的作用，但对小鼠在运动过程中产生的尿素氮没有清除作用。
, http://www.100md.com
表2 黄芪对游泳小鼠的肝糖原、血乳酸和尿素氮含量的影响 剂量组
(g/kg.bw)
动物数
(只)
肝糖原
(mg/g组织)
百分率
(%)
血乳酸
(mg/100ml)
百分率
(%)
, http://www.100md.com
尿素氮
(mmol/L)
百分率
(%)
15.0
10
23.2±7.82**
252.2
39.1±39.98**
40.2
11.2±1.62
99.1
, http://www.100md.com
7.5
10
15.7±7.57
170.7
40.7±14.18*
41.9
11.9±1.66
105.3
2.5
10
14.4±7.42
156.5
, http://www.100md.com
45.2±29.40
46.5
12.2±2.25
108.0
空白对照
10
9.2±4.91
100.0
97.2±73.95
100.0
11.3±0.82
100.0
, 百拇医药
注：*和**分别表示与空白对照比较(方差分析)，P<0.05和P<0.01
2.3 常压耐缺氧试验 试验方法参照文献[5]:动物分组及给药同2.1项，第31天将小鼠放入盛有15g钠石灰的250ml磨口广口瓶(每瓶一只)，用凡士林密封瓶口后开始计时，观察记录小鼠因缺氧而死亡的时间，结果见表3。黄芪试验组小鼠的存活时间明显比空白对照组延长(P<0.05)，表明黄芪可以提高小鼠对缺氧的耐受能力，而且这种作用在较小的剂量时即显示出来。
表3 黄芪对小鼠耐缺氧能力的影响 剂量组
(g/kg.bw)
动物数
(只)
耐缺氧时间
, http://www.100md.com
(min)
百分率
(%)
张口喘气时间
(s)
百分率
(%)
15.0
10
41.3±7.34*
121.8
26.1±6.40*
, 百拇医药
131.2
7.5
10
41.1±6.54*
121.2
22.2±3.66
111.6
2.5
10
41.2±8.66*
121.5
26.1±2.94
, 百拇医药
108.5
空白对照
10
33.9±4.97
100.0
19.9±3.12
100.0
注：*表示与空白对照比较(方差分析)，P<0.05
2.4 急性脑缺血性缺氧试验 试验方法参照文献[5]。动物分组及给药同前，第31天用乙醚浅麻醉将小鼠自颈部快速断头，立即按秒表记录小鼠断头至张口喘气停止的时间，结果见表3，试验组小鼠的喘气时间比对照组延长，其中高剂量组延长有显著性意义(P<0.05),提示黄芪可以降低脑耗氧，对脑缺氧具有保护作用。
, 百拇医药
2.5 耐低温作用试验 试验方法参照文献[5]。动物分组及给药同前，第31天将小鼠放在-10±0.5℃的卧式冰柜内的隔槽里，每个槽放一只小鼠，透过冰柜的玻璃门盖观察，记录小鼠自放入冰柜至停止呼吸的死亡时间。结果见表4，试验组小鼠在低温环境下存活时间明显比对照组延长(P<0.01)，表示黄芪能提高小鼠耐低温的能力。
表4 黄芪对小鼠耐低温和耐高温能力的影响 剂量组
(g/kg.bw)
动物数
(只)
耐低温时间
(min)
百分率
(%)
, http://www.100md.com
耐高温时间(min)
百分率
(%)
15.0
10
102.2±12.78**
125.4
12.0±1.61**
127.7
7.5
10
104.6±7.85**
, 百拇医药
128.3
11.8±1.52**
125.5
2.5
10
99.6±10.06*
122.2
11.7±0.94**
124.5
空白对照
10
81.5±13.39
, 百拇医药
100.0
9.4±1.67
100.0
注：**表示与空白对照比较(方差分析)，P<0.01
2.6 耐高温作用试验 试验方法参照文献[6]。动物分组及给药同前，第31天将小鼠放入盛有100g碎陶片的250ml广口瓶(每瓶一只)，盖上塞子(瓶盖穿有一支小管以便通气)，然后将广口瓶置于45±0.5℃的恒温水箱内，观察记录小鼠停止呼吸的死亡时间，结果见表4。试验组小鼠在高温环境的存活时间明显比空白对照组延长(P<0.01),表明黄芪能提高小鼠耐受高温的能力。
3 小结
应激反应是机体受到各种有害刺激后产生的一种非特异性紧张反应，长期在应激状态下生活可导致机体生理机能下降，从而产生各种疾病。外界环境的不良刺激如过度疲劳、过冷或过热、缺氧等以及人体自身过度的忧、思、恐、怒等情感剌激均可构成应激原，使机体处于应激状态。黄芪是一种常用的补益中药，具有补气固表、益气活血、托毒排毒等增强机体抵抗力的作用。《本草纲目》记载：“可治一切气衰血虚之症” 。可见，临床上黄芪作为一个抗应激中药应用已久。本试验证实了黄芪能提高机体抗疲劳、耐缺氧、耐低温及耐高温等抗应激能力的作用，同时能促进机体清除在运动过程中产生的乳酸、促进肝糖原的贮备或减少其消耗，为黄芪的进一步开发应用提供了实验依据。
, 百拇医药
(杨玉英、李凤文、刘荣珍、李 彬、何 励、李裕生等同志参加部分实验工作，特此致谢!)
参考文献
1，李孟周.黄芪建中汤的临床应用及药理研究.中成药，1990，12(11)：36
2，黄正良， 崔祝梅，任 远， 等.红芪多糖抗衰老作
用的实验研究.中草药，1992，23(9)：469
3，黄承才.黄芪的药理作用.中药新药与临床药
理，1993，4(4)：50
4，卫生部监督司编. 保健食品管理法规汇编.长春：吉林科学技术出版社，1998：139
5，陈 奇主编.中药药理研究方法学.北京： 人民卫生出版社，1993：780
6，钱彦丛， 秦百宣， 丛月珠,等.冀产红景天抗应激作用的实验研究.基层中药杂志，1997，11(2)：44
(1999-12-06收稿。2000-01-20修回。), http://www.100md.com
单位：广西壮族自治区卫生防疫站 南宁530021
关键词：黄芪；小鼠；抗应激作用
广西预防医学000203
摘要:目的研究黄芪对抗应激能力的影响.方法给小鼠灌服黄芪提取液,剂量分为2.5,7.5,15.0g/kg/d,连续30天,然后分别对小鼠进行游泳试验,耐缺氧试验,耐低温和耐高温试验.结果服用黄芪的小鼠在上述试验条件下的生存时间均比对照组延长.结论黄芪具有提高小鼠的抗应激能力的作用.
分类号:R977.9文献标识码:A文章编号:1007-158X(2000)02-0072-03
Study on antistimulative effect of Astragalus hoangtchy
, 百拇医药
HUANG Chaopei,ZHAO Peng,YANG Junfeng,et al.
(Guangxi Health & Anti-epidemic Center,Nianjing530021)
Abstract：Objective To study the effect of Astragalus hoangtchy on stimulus.Methods Mice given orally the extract of Astragalus with 2.5,7.5,15.0g/kg.bw respectively for 30 days were with a series of stimulation condition,the living time of the the mice given Astragalus Hoangtchy were longer than that of control groups.Results Under above-mentioned stimulation condition,the living time of the mice given Astragalus hoangtchy were longerr than that of control groups.Conclusion Astragalus hoangtchy could enhance the antistimulation ability of mice.
, 百拇医药
Keywords：Astragalus hoangtchy Mice Astragalus effect
是常用的补益中药，具有促进免疫功能、延缓衰老、抗感染等作用[1～3],但少见有抗应激作用方面的研究报道。为此，本文研究了黄芪对小鼠负重游泳、耐缺氧、耐高温及耐低温等抗应激能力的影响，现报告如下。
1 材料
1.1 受试物 黄芪提取液，为黄芪水煎剂经乙醇沉淀后再将乙醇挥发而成，每毫升含黄芪干饮片4g，由美国泛华医药公司提供，存放于冰箱，试验前用蒸馏水稀释至所需浓度。
1.2 实验动物 昆明种小白鼠，体重20～25g，广西中医药研究所动物室提供。
1.3 试剂和仪器 钠石灰、蒽酮、乙醚、硫脲，尿素氮测定试剂盒(上海长征医学科学有限公司生产)等。主要仪器设备有匀浆器、721型分光光度计、ECOM-F6124型半自动生化分析仪。
, http://www.100md.com
2 实验方法与结果
2.1 小鼠负重游泳试验 试验方法参照文献[4] 。选雄性小鼠40只，随机分成4个组，每组10只。其中3个组分别组小鼠含黄芪干饮片2.5、7.5、15.0g/kg.bw的黄芪提取液，灌胃量为0.4ml/20g.bw，每天一次，连续30天。另一组为空白对照组，给予等量的蒸镏水灌胃。实验期间动物自由取食和饮水。第31天在小鼠尾根部束5%的铅条，然后将其放入玻璃水缸(50×50cm2，水深40cm，水温25±0.5℃)游泳，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，结果见表1。
表1 黄芪对小鼠游泳时间的影响 剂量组
(g/kg.bw)
动物数
(只)
, 百拇医药 游泳时间
(min)
百分率
(%)
15.0
10
61.0±10.6**
187.1
7.5
10
34.0±10.5
104.3
2.5
, 百拇医药
10
36.7±14.1
112.6
空白对照
10
32.6±10.1
100.0
注:**表示与空白对照比较(方差分析),P<0.01
高剂量组小鼠的游泳时间明显比空白对照组延长(P<0.01)，但中、低剂量组的游泳时间与空白对照组无明显差异(P<0.05),表明大剂量的黄芪有抗疲劳作用，而小剂量时其抗疲劳作用则不明显。
2.2 血乳酸、尿素氮及肝糖原含量测定 动物分组及给药同2、1项，第31天给小鼠尾部负重4%，放入缸内游泳10分钟后取出，立即用毛巾吸干小鼠身上的水，用毛细玻璃管从眼眶采血，进行血乳酸[4]和尿素氮测定[4,5]，同时迅速取肝组织，匀浆后测定肝糖原(酶法)[5]。结果见表2，黄芪试验组的血乳酸含量均低于空白对照组，其中高剂量和中剂量组降低有显著性意义(P<0.05或P<0.01)；试验组肝糖原含量则明显比对照组高，其中高剂量组升高有显著性意义(P<0.05)，而试验组血清尿素氮含量与对照组则基本上没有差异(P>0.05)。上述结果表明黄芪能够清除小鼠在运动过程中产生的乳酸，并有促进肝糖原储备或减少其消耗的作用，但对小鼠在运动过程中产生的尿素氮没有清除作用。
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表2 黄芪对游泳小鼠的肝糖原、血乳酸和尿素氮含量的影响 剂量组
(g/kg.bw)
动物数
(只)
肝糖原
(mg/g组织)
百分率
(%)
血乳酸
(mg/100ml)
百分率
(%)
, http://www.100md.com
尿素氮
(mmol/L)
百分率
(%)
15.0
10
23.2±7.82**
252.2
39.1±39.98**
40.2
11.2±1.62
99.1
, http://www.100md.com
7.5
10
15.7±7.57
170.7
40.7±14.18*
41.9
11.9±1.66
105.3
2.5
10
14.4±7.42
156.5
, http://www.100md.com
45.2±29.40
46.5
12.2±2.25
108.0
空白对照
10
9.2±4.91
100.0
97.2±73.95
100.0
11.3±0.82
100.0
, 百拇医药
注：*和**分别表示与空白对照比较(方差分析)，P<0.05和P<0.01
2.3 常压耐缺氧试验 试验方法参照文献[5]:动物分组及给药同2.1项，第31天将小鼠放入盛有15g钠石灰的250ml磨口广口瓶(每瓶一只)，用凡士林密封瓶口后开始计时，观察记录小鼠因缺氧而死亡的时间，结果见表3。黄芪试验组小鼠的存活时间明显比空白对照组延长(P<0.05)，表明黄芪可以提高小鼠对缺氧的耐受能力，而且这种作用在较小的剂量时即显示出来。
表3 黄芪对小鼠耐缺氧能力的影响 剂量组
(g/kg.bw)
动物数
(只)
耐缺氧时间
, http://www.100md.com
(min)
百分率
(%)
张口喘气时间
(s)
百分率
(%)
15.0
10
41.3±7.34*
121.8
26.1±6.40*
, 百拇医药
131.2
7.5
10
41.1±6.54*
121.2
22.2±3.66
111.6
2.5
10
41.2±8.66*
121.5
26.1±2.94
, 百拇医药
108.5
空白对照
10
33.9±4.97
100.0
19.9±3.12
100.0
注：*表示与空白对照比较(方差分析)，P<0.05
2.4 急性脑缺血性缺氧试验 试验方法参照文献[5]。动物分组及给药同前，第31天用乙醚浅麻醉将小鼠自颈部快速断头，立即按秒表记录小鼠断头至张口喘气停止的时间，结果见表3，试验组小鼠的喘气时间比对照组延长，其中高剂量组延长有显著性意义(P<0.05),提示黄芪可以降低脑耗氧，对脑缺氧具有保护作用。
, 百拇医药
2.5 耐低温作用试验 试验方法参照文献[5]。动物分组及给药同前，第31天将小鼠放在-10±0.5℃的卧式冰柜内的隔槽里，每个槽放一只小鼠，透过冰柜的玻璃门盖观察，记录小鼠自放入冰柜至停止呼吸的死亡时间。结果见表4，试验组小鼠在低温环境下存活时间明显比对照组延长(P<0.01)，表示黄芪能提高小鼠耐低温的能力。
表4 黄芪对小鼠耐低温和耐高温能力的影响 剂量组
(g/kg.bw)
动物数
(只)
耐低温时间
(min)
百分率
(%)
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耐高温时间(min)
百分率
(%)
15.0
10
102.2±12.78**
125.4
12.0±1.61**
127.7
7.5
10
104.6±7.85**
, 百拇医药
128.3
11.8±1.52**
125.5
2.5
10
99.6±10.06*
122.2
11.7±0.94**
124.5
空白对照
10
81.5±13.39
, 百拇医药
100.0
9.4±1.67
100.0
注：**表示与空白对照比较(方差分析)，P<0.01
2.6 耐高温作用试验 试验方法参照文献[6]。动物分组及给药同前，第31天将小鼠放入盛有100g碎陶片的250ml广口瓶(每瓶一只)，盖上塞子(瓶盖穿有一支小管以便通气)，然后将广口瓶置于45±0.5℃的恒温水箱内，观察记录小鼠停止呼吸的死亡时间，结果见表4。试验组小鼠在高温环境的存活时间明显比空白对照组延长(P<0.01),表明黄芪能提高小鼠耐受高温的能力。
3 小结
应激反应是机体受到各种有害刺激后产生的一种非特异性紧张反应，长期在应激状态下生活可导致机体生理机能下降，从而产生各种疾病。外界环境的不良刺激如过度疲劳、过冷或过热、缺氧等以及人体自身过度的忧、思、恐、怒等情感剌激均可构成应激原，使机体处于应激状态。黄芪是一种常用的补益中药，具有补气固表、益气活血、托毒排毒等增强机体抵抗力的作用。《本草纲目》记载：“可治一切气衰血虚之症” 。可见，临床上黄芪作为一个抗应激中药应用已久。本试验证实了黄芪能提高机体抗疲劳、耐缺氧、耐低温及耐高温等抗应激能力的作用，同时能促进机体清除在运动过程中产生的乳酸、促进肝糖原的贮备或减少其消耗，为黄芪的进一步开发应用提供了实验依据。
, 百拇医药
(杨玉英、李凤文、刘荣珍、李 彬、何 励、李裕生等同志参加部分实验工作，特此致谢!)
参考文献
1，李孟周.黄芪建中汤的临床应用及药理研究.中成药，1990，12(11)：36
2，黄正良， 崔祝梅，任 远， 等.红芪多糖抗衰老作
用的实验研究.中草药，1992，23(9)：469
3，黄承才.黄芪的药理作用.中药新药与临床药
理，1993，4(4)：50
4，卫生部监督司编. 保健食品管理法规汇编.长春：吉林科学技术出版社，1998：139
5，陈 奇主编.中药药理研究方法学.北京： 人民卫生出版社，1993：780
6，钱彦丛， 秦百宣， 丛月珠,等.冀产红景天抗应激作用的实验研究.基层中药杂志，1997，11(2)：44
(1999-12-06收稿。2000-01-20修回。), http://www.100md.com