利福平对金属硫蛋白在大鼠肝中的诱导与合成
作者：张志仁 徐顺清 陈志飞 葛艳
单位：陈志飞(武汉市结核病防治所)；张志仁 徐顺清 葛艳(同济医科大学环境医学研究所，武汉 430030)
关键词：
卫生毒理学杂志000221 金属硫蛋白(MT)为机体的一种内源性保护蛋白，可参与对金属的储存、运输、解毒及对自由基的清除等。且可被多种因素诱导合成，锌为其合成的强力诱导剂之一。利福平(RFP)为临床常用抗结核药物之一，对肝脏具有一定作用。在RFP使用中MT在肝脏中浓度变化如何，我们进行了初步探讨。
1 材料与方法
1.1 试剂和仪器 RFP胶囊(武汉第四制药厂)；硫酸锌(分析纯，湖南试剂厂)；原子吸收分光光度计(岛津AA-680型，日本岛津公司生产)；高速离心机(HERMLE-ZK401，德国产)。
1.2 动物分组 Wistar大鼠24只，雌雄各半，200～250 g，由同济医科大学试验动物中心提供。随机分成3组，每组雌雄各半，分笼喂养。RFP用生理盐水配制成10 mg/ml，硫酸锌用去离子水配制成0.2 mg/ml。阴性对照组：腹腔注射生理盐水5 ml.kg-1.d-1，自由饮用去离子水；实验组：腹腔注射RFP液，5 ml.kg-1.d-1，自由饮用去离子水；阳性对照组： 腹腔注射硫酸锌液，5 ml.kg-1.d-1，自由饮用去离子水。
1.3 样品采集与保存 在给予RFP21 d后，各组大鼠断头处死，取右叶肝组织，冰冻保存，用于测定MT含量。
1.4 样品的测定 肝中MT含量测定按Cd-hem法。
1.5 统计学处理 数据采用Excel处理，用(
±s)表示，组间比较用t检验。
结果与讨论
结果可见实验组大鼠肝含量为(0.176±0.021)mg/g，与阴性对照组[(0.117±0.016)mg/g]比较，差异有显著性(P<0.01)，与阳性对照组[(0.091±0.021)mg/g]比较,差异无显著性。
研究结果表明，大鼠单独腹腔注射RFP，MT合成明显增加，与阴性对照组比较上升了93.4 %(P<0.01)，说明RFP具有明显的MT诱导合成作用。所有MT最明显的生物学特性就是它的可诱导性，各种因素诱导MT合成都是通过改变金属离子(如Zn2+,Cu2+等)的浓度，然后金属离子与MT基因结合蛋白结合，结合后的MT基因结合蛋白与相应的启动子作用，从而启动MT基因的表达，诱导其合成。锌为MT合成的强力诱导剂，可能为MT合成的基本金属离子，其他金属离子诱导MT合成都是由于它们能够在一定程度上改变细胞内的锌池。RFP主要成分为力复霉素类衍生物，其抗菌机制是通过特异性地抑制细菌依赖于DNA的RNA多聚酶，阻碍RNA合成，从而抑制细菌生长。在本实验中观察到其具有诱导MT合成的作用，可能机制是由于其可改变肝脏锌离子代谢，从而启动肝MT基因的表达，诱导肝脏MT的合成。
RFP诱导大鼠肝脏MT合成能力与其改变大鼠肝脏金属离子浓度有关。进一步的研究可从RFP使用期间，大鼠肝脏金属离子浓度变化及肝脏MT浓度变化方面进行。
(收稿日期：1999-04-26), http://www.100md.com
单位：陈志飞(武汉市结核病防治所)；张志仁 徐顺清 葛艳(同济医科大学环境医学研究所，武汉 430030)
关键词：
卫生毒理学杂志000221 金属硫蛋白(MT)为机体的一种内源性保护蛋白，可参与对金属的储存、运输、解毒及对自由基的清除等。且可被多种因素诱导合成，锌为其合成的强力诱导剂之一。利福平(RFP)为临床常用抗结核药物之一，对肝脏具有一定作用。在RFP使用中MT在肝脏中浓度变化如何，我们进行了初步探讨。
1 材料与方法
1.1 试剂和仪器 RFP胶囊(武汉第四制药厂)；硫酸锌(分析纯，湖南试剂厂)；原子吸收分光光度计(岛津AA-680型，日本岛津公司生产)；高速离心机(HERMLE-ZK401，德国产)。
1.2 动物分组 Wistar大鼠24只，雌雄各半，200～250 g，由同济医科大学试验动物中心提供。随机分成3组，每组雌雄各半，分笼喂养。RFP用生理盐水配制成10 mg/ml，硫酸锌用去离子水配制成0.2 mg/ml。阴性对照组：腹腔注射生理盐水5 ml.kg-1.d-1，自由饮用去离子水；实验组：腹腔注射RFP液，5 ml.kg-1.d-1，自由饮用去离子水；阳性对照组： 腹腔注射硫酸锌液，5 ml.kg-1.d-1，自由饮用去离子水。
1.3 样品采集与保存 在给予RFP21 d后，各组大鼠断头处死，取右叶肝组织，冰冻保存，用于测定MT含量。
1.4 样品的测定 肝中MT含量测定按Cd-hem法。
1.5 统计学处理 数据采用Excel处理，用(
±s)表示，组间比较用t检验。结果与讨论
结果可见实验组大鼠肝含量为(0.176±0.021)mg/g，与阴性对照组[(0.117±0.016)mg/g]比较，差异有显著性(P<0.01)，与阳性对照组[(0.091±0.021)mg/g]比较,差异无显著性。
研究结果表明，大鼠单独腹腔注射RFP，MT合成明显增加，与阴性对照组比较上升了93.4 %(P<0.01)，说明RFP具有明显的MT诱导合成作用。所有MT最明显的生物学特性就是它的可诱导性，各种因素诱导MT合成都是通过改变金属离子(如Zn2+,Cu2+等)的浓度，然后金属离子与MT基因结合蛋白结合，结合后的MT基因结合蛋白与相应的启动子作用，从而启动MT基因的表达，诱导其合成。锌为MT合成的强力诱导剂，可能为MT合成的基本金属离子，其他金属离子诱导MT合成都是由于它们能够在一定程度上改变细胞内的锌池。RFP主要成分为力复霉素类衍生物，其抗菌机制是通过特异性地抑制细菌依赖于DNA的RNA多聚酶，阻碍RNA合成，从而抑制细菌生长。在本实验中观察到其具有诱导MT合成的作用，可能机制是由于其可改变肝脏锌离子代谢，从而启动肝MT基因的表达，诱导肝脏MT的合成。
RFP诱导大鼠肝脏MT合成能力与其改变大鼠肝脏金属离子浓度有关。进一步的研究可从RFP使用期间，大鼠肝脏金属离子浓度变化及肝脏MT浓度变化方面进行。
(收稿日期：1999-04-26), http://www.100md.com