肝外胆管癌组织中的HBsAg和HCV NS5抗原检测
作者：陈明易 黄志强 陈乐真 高亚兵 彭瑞云 王德文
单位：陈明易 黄志强(解放军总医院肝胆外科，北京 100853)；陈乐真(解放军总医院病理科)；高亚兵 彭瑞云 王德文(军事医学科学院放射医学研究所实验病理研究室，北京 100850)
关键词：胆管癌；乙型肝炎病毒；丙型肝炎病毒；免疫组织化学
军医进修学院学报000229 中图号：R657.4 文献标识码：A
文章编号：1005-1139(2000)02-0116-01
1 材料和方法
1.1 材料 51 例肝外胆管癌(EBDC)选自解放军总医院外科手术切除标本，均为不同分化程度的腺癌，经 10% 甲醛固定、脱水，常规石蜡包埋。其中 2 例血清HBsAg阳性 (3.9%)， 9 例抗HCV阴性， 2 例同时检测了血清HCV RNA 和 HBV DNA，均为阴性， 40 例无血清HCV相关检查。
鼠抗HBsAg和HCV NS5 抗体、生物素化二抗、HRP标记的链霉亲合素(S-A/HRP)，购自北京中山生物技术有限公司。
1.2 方法 采用酶标链霉亲合素-生物素(SP)方法。切片脱蜡至水，微波炉抗原修复，血清封闭，加 1 抗 (1∶50 稀释)， 4 ℃ 过夜，加二抗 (1∶200 稀释)， 37 ℃ 45 min，加 S-A/HRP要(1∶1000稀释)， 37 ℃ 45 min，DAB显色。
HBV DNA和HCV RNA阳性肝组织作为阳性对照，PBS取代一抗、二抗和S-A/HRP作为阴性对照。
2 结果
51 例EBDC癌组织中，HBsAg和HCV NS5 抗原阳性率分别为 9.8% (5/51 例)和 27.5% (14/51 例)。HCV NS5 抗原分布与HBsAg相似。阳性信号位于胞浆内，呈棕黄色颗粒，未见胞膜和胞核阳性。
无 1 例癌组织HBsAg和HCV NS5 抗原同时呈阳性表达。
3 讨论
51 例EBDC患者中，血清HBsAg阳性率 3.9%，癌组织中HBsAg阳性率 9.8%，表明EBDC患者中HBV感染率与普通人群中HBV流行率相接近，与传统认为HBV感染与EBDC发病无关的观点一致，但是这一结论尚需检测HBV其它免疫标志物和DNA等研究来进一步观察和证明。而癌组织中HCV NS5 抗原阳性率达 27.5%，表明EBDC患者中HCV感染率较普通人群明显高，提示HCV感染与EBDC发生有密切的关系，但其致癌机制尚不清楚。
作者简介：陈明易，男，1965-12-15生，四川省德阳市人，汉族，1987年泸州医学院毕业，军医进修学院97级肝胆外科博士生，导师黄志强院士；发表论文1篇。电话：(010)66937322
收稿日期：1999-11-08
修回日期：1999-12-13, 百拇医药
单位：陈明易 黄志强(解放军总医院肝胆外科，北京 100853)；陈乐真(解放军总医院病理科)；高亚兵 彭瑞云 王德文(军事医学科学院放射医学研究所实验病理研究室，北京 100850)
关键词：胆管癌；乙型肝炎病毒；丙型肝炎病毒；免疫组织化学
军医进修学院学报000229 中图号：R657.4 文献标识码：A
文章编号：1005-1139(2000)02-0116-01
1 材料和方法
1.1 材料 51 例肝外胆管癌(EBDC)选自解放军总医院外科手术切除标本，均为不同分化程度的腺癌，经 10% 甲醛固定、脱水，常规石蜡包埋。其中 2 例血清HBsAg阳性 (3.9%)， 9 例抗HCV阴性， 2 例同时检测了血清HCV RNA 和 HBV DNA，均为阴性， 40 例无血清HCV相关检查。
鼠抗HBsAg和HCV NS5 抗体、生物素化二抗、HRP标记的链霉亲合素(S-A/HRP)，购自北京中山生物技术有限公司。
1.2 方法 采用酶标链霉亲合素-生物素(SP)方法。切片脱蜡至水，微波炉抗原修复，血清封闭，加 1 抗 (1∶50 稀释)， 4 ℃ 过夜，加二抗 (1∶200 稀释)， 37 ℃ 45 min，加 S-A/HRP要(1∶1000稀释)， 37 ℃ 45 min，DAB显色。
HBV DNA和HCV RNA阳性肝组织作为阳性对照，PBS取代一抗、二抗和S-A/HRP作为阴性对照。
2 结果
51 例EBDC癌组织中，HBsAg和HCV NS5 抗原阳性率分别为 9.8% (5/51 例)和 27.5% (14/51 例)。HCV NS5 抗原分布与HBsAg相似。阳性信号位于胞浆内，呈棕黄色颗粒，未见胞膜和胞核阳性。
无 1 例癌组织HBsAg和HCV NS5 抗原同时呈阳性表达。
3 讨论
51 例EBDC患者中，血清HBsAg阳性率 3.9%，癌组织中HBsAg阳性率 9.8%，表明EBDC患者中HBV感染率与普通人群中HBV流行率相接近，与传统认为HBV感染与EBDC发病无关的观点一致，但是这一结论尚需检测HBV其它免疫标志物和DNA等研究来进一步观察和证明。而癌组织中HCV NS5 抗原阳性率达 27.5%，表明EBDC患者中HCV感染率较普通人群明显高，提示HCV感染与EBDC发生有密切的关系，但其致癌机制尚不清楚。
作者简介：陈明易，男，1965-12-15生，四川省德阳市人，汉族，1987年泸州医学院毕业，军医进修学院97级肝胆外科博士生，导师黄志强院士；发表论文1篇。电话：(010)66937322
收稿日期：1999-11-08
修回日期：1999-12-13, 百拇医药