胞浆内抗原CD3、CD22、MPO的检测方法及临床意义
作者：翟志敏 何晓东 吴竞生 潘理明 吴树农 孙自敏 朱微波 蔡晓燕 余自强 王祖贻
单位：翟志敏(安徽省立医院 合肥，230001)；何晓东(安徽省立医院 合肥，230001)； 吴竞生(安徽省立医院 合肥，230001)；潘理明(安徽省立医院 合肥，230001)；吴树农(安徽省立医院 合肥，230001)；孙自敏(安徽省立医院 合肥，230001)；朱微波(安徽省立医院 合肥，230001)；蔡晓燕(安徽省立医院 合肥，230001)；余自强(安徽省立医院 合肥，230001)；王祖贻(安徽省立医院 合肥，230001)
关键词：CyCD3；CyCD22(胞浆内抗原CD3、CD22)；髓过氧化物酶；白血病
临床血液学杂志000212 摘 要：目的：探讨和明确胞浆内抗原CD3、CD22、MPO的检测方法及其在白血病诊断中的意义。方法：采用多聚甲醛和甲醇联合固定细胞，单抗间接荧光法标记细胞内相应的抗原，在荧光显微镜下检测计数，并将结果与形态学和细胞表面抗原检测结果进行对照研究。结果：19例初诊患者中，11例MPO阳性，6例CyCD22阳性，1例CyCD3阳性，1例3项均为阴性，结合形态学和表面抗原分析，全部病例获得明确诊断。结论：胞浆内CD3、CD22、MPO的检测简便、准确、灵敏度高，可在临床广泛开展使用，对白血病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。
, 百拇医药
Detection of cytoplasmic antigens CD3，CD22，MPO and it′s clinical significance
ZHAI Zhi-min HE Xiao-dong WU Jin-sheng PAN Li-ming WU Shu-nong
SUN Zi-min ZHU Wei-bo CAI Xiao-yan YU Zi-giang WANG Zhu-yi
(Anhui Provincial Hospital,Hefei,230001)
Abstract：Objective:To explore the examinational method of CyCD3,CyCD22.MPO and the clinical significance.Method:After immobilization of cell membrane,the cytoplasmic antigens were marked fluorescence indirectly by using monoclonal antibody.Then the qualitative and quantitative analysis was performed on fluorescent microscopy.Lastly we compared the results with the related morphology and expression of surface antigens.Result:In 19 atients,11 were MPO(+),6 were CyCD22(+),1 was CyCD3(+),only 1 was negative for all cytoplasmic antigens.All patients acquired clear diagnosis.Conclusion:The method for detecting cytoplasmic antigens is simple and clear and high sensitive.It can an important role in the diagnosis and distinguishing diagnosis of leukemia.
, 百拇医药
Key words：Cytoplasmic Antigen CD3 CD22 Myeloperoxidase Leukemia▲
目前白血病的诊断国内外均提倡统一采用MIC分型法，其中免疫分型占有重要位置。免疫分型可以更精细地从正常细胞中鉴别出恶性细胞，准确判断白血病细胞的性质及分化阶段。但国内大多仅对细胞表面抗原进行检测分析，至今尚无胞浆内抗原的检测报告。通过大量的临床实践后发现有些原认为特异性和最敏感的单克隆抗体指标，事实并非如此，往往伴有抗原交叉反应或仅在细胞发育的某一阶段表达。而细胞内抗原的检测能够有力地补充单纯检测细胞膜抗原的不足之处，进一步提高白血病的诊断水平。特别在诊断混合细胞性白血病和预测微小残留病变方面有重要价值。
1 材料和方法
1.1 研究对象
, 百拇医药
①既往确诊为AML、T-ALL及普通型B-ALL患者各1例作为标准对照(标本为-80℃冻存细胞)；②1998年10月～1999年2月在本院确诊并住院治疗的白血病患者19例，年龄2～62岁，男12例，女7例。临床初步诊断主要依据临床表现、细胞形态学分类及细胞膜表面抗原检测。
1.2 实验方法
①分离单核细胞：取患者骨髓或静脉血2～5 ml，常规涂片并用May-Giemsa染色确定原始幼稚细胞>70%。单核细胞采用淋巴细胞分离液(中国医学科学院血液病研究所)梯度密度离心法获得，一般在12 h内检测或用10%二甲亚砜及10%胎牛血清放在-80℃保存，需要时可快速解冻使用。②细胞的固定和细胞膜渗透处理：多聚甲醛和无水甲醇联合固定法。③荧光标记：间接免疫荧光标记，MPO单抗购自法国Immunotech公司，CD22、CD3及FITC-羊抗鼠IgG第2抗体购自中国科学院血液病研究所。④判断标准：反应后阳性细胞占全部计数细胞>30%者为阳性。
, 百拇医药
2 结果
2.1 单抗标记前细胞固定情况
被检测细胞经固定和胞膜渗透处理后，在普通光学镜下可见细胞均匀分布，无聚集成团和细胞破坏现象，胞膜完整，细胞活性>90%。
2.2 一抗、二抗标记后细胞反应情况
各系阳性对照细胞与标准普通型B-ALL细胞CyCD22(胞浆内抗原CD3、CD22)一样，抗原抗体反应表现为绿色荧光沿胞浆分布区呈环带状均匀着色。而阴性对照细胞无荧光着色或胞浆胞核同等淡染。
2.3 各患者胞浆内MPO、CD3、CD22的检测结果
MPO阳性11例，CyCD22阳性6例，CyCD3阳性1例，三项均阴性者1例(见表1)。
, 百拇医药
表1 19例患者形态学诊断及胞浆内MPO、CyCD3、CyCD22检测结果 患者
编号
形态学
诊断
阳性细胞百分率(%)
MPO
CyCD3
CyCD22
1
M5
60.0
, 百拇医药
0
0
2
M2
70.0
0
0
3
M5(疑诊)
45.0
5.0
0
4
M1
, 百拇医药
95.0
0
0
5
M5
40.0
0
0
6
M2
60.0
0
0
7
, http://www.100md.com
M5(疑诊)
0
80.0
0
8
M3
40.0
0
0
9
M5
85.0
5.0
0
, 百拇医药
10
CML(急粒变)
70.0
0
0
11
CML(急粒变)
70.0
0
0
12
ALL
0
, 百拇医药
0
35.0
13
ALL
0
0
90.0
14
ALL(疑诊)
0
0
80.0
15
, 百拇医药 ALL
0
0
50.0
16
ALL
0
0
0
17
ALL
0
0
30.0
, 百拇医药
18
CLL
0
0
50.0
19
诊断困难
30.0
0
0
3 讨论
3.1 方法学
细胞内抗原和膜抗原检测的主要区别是，抗体加入前需要对细胞膜进行渗透性处理，理想的方法是既能为抗体进入细胞内打开通道，又能保护细胞原有的物理和化学结构，不影响细胞的抗原抗体反应。本实验采用多聚甲醛和甲醇相结合的方法，固定后细胞基本上无损伤，用单克隆抗体间接免疫荧光法标记细胞，未发现有明显的非特异性反应，阳性和阴性细胞间差异显著，简单明了，易于判断，获得了满意效果。
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3.2 CyCD22、CyCD3、MPO的临床意义
对照细胞形态学检验，本实验组患者表面抗原结果可归纳为以下四类：①与形态学诊断一致(64%)；②不支持形态学诊断(5%)；③有双系列抗原表达或仅有非特异性共同抗原表达(26%)；④细胞少未能做表型分析(5%)。特别是4例形态学诊断疑难患者，免疫表型均归于后三类。由此可见单纯细胞膜表面抗原分析辅助形态学检查，有时仍不能满足临床需要。分析原因主要有以下几点：①发现的细胞膜表面抗原越来越多，但相互之间常有交叉反应，如T淋巴系CD7、CD5、CD2，B淋巴系CD10、CD19，髓系CD13、CD33、CD11等均可在不同系列细胞中表达〔1，2〕；②特异性强的胞膜抗原如CD3、CD22常局限在T、B淋巴细胞发育阶段中的中晚期出现，因此敏感性受到影响〔3〕；③可能与环境污染的日趋严重和医疗条件改善有关，疑难白血病病例逐年增多(如变异型、混合型、未分化型等)〔4〕；④少数患者属于低增生型或白细胞减少型，细胞少无法进行全面的表面抗原分析。
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现认为淋巴细胞中CyCD3和CyCD22先于膜表达，且特异性强，至今尚未发现异系列细胞的交叉反应，对鉴别早期T、B淋巴细胞白血病有重要意义。在髓细胞中至今还没有制备出抗粒细胞和抗单核细胞的特异性抗体及其各个发育阶段的特异性抗体，但免疫学分析对急性非淋巴系白血病和急性淋巴细胞白血病的鉴别诊断有重要意义，特别是MPO为髓细胞系特异性标志，一般淋巴细胞不会表达。而且利用单克隆抗体检测MPO比传统的化学方法更加敏感，已有报道MPO甚至可以替代电镜确诊急性髓细胞白血病微分化型(AML-AMO)。1995年国际白血病欧洲协作组提出的T、B淋巴细胞系及髓系抗原积分标准以及国内血液病专家提倡的急性混合细胞白血病诊断积分系统标准，MPO、CyCD3、CyCD22三项指标分别在髓系、B淋巴系、T淋巴系细胞中积分最高，即充分显示其在白血病诊断中占居的重要地位〔5，6〕。本实验结果，19例患者之间MPO、CyCD22、CyCD3无1例发生阳性交叉反应，9例形态学初诊为AML患者中，8例MPO阳性，阳性细胞平均所占比率为61.9%(40%～95%)，其中1例形态学疑难患者，因MPO阳性、CyCD22和CyCD3阴性从而排除ALL的可能确诊为AML：唯独1例MPO阴性者，因CyCD3阳性率高达80%，膜抗原检测也支持T淋巴系特征，故确诊为T-ALL。6例形态学初诊ALL患者(包括1例疑诊)，5例CyCD22阳性，平均阳性率为57%(30%～90%)，而相应的细胞膜表面CD22(SmCD22)除1例未测外，仅1例少量阳性(10%)，其他三项均为阴性，证明CyCD22确实比SmCD22敏感。另1例ALL患者MPO、CyCD22、CyCD3均阴性，表面抗原仅CD7阳性，考虑属于裸型或CD+7、CD-4、CD-8多能造血干细胞性白血病〔7〕。3例慢性白血病患者胞浆内抗原结果与形态学及表面抗原一致。最后1例疑难患者，形态学检查发现白血病细胞明显分为两类，一类细胞(占总有核细胞40%)较大，胞浆较多，似原始粒细胞；另一类细胞(占总有核细胞55%)偏小，胞浆较少，似原始淋巴细胞。细胞化学染色显示：过氧化物酶6%阳性，糖原反应阴性。表面抗原结果显示：CD780%、HLA-DR 95%阳性，其它抗原全部阴性。而胞浆内抗原检测后发现：CyCD3、CyCD22阴性，故基本排除急淋可能，单抗MPO占全部计数细胞的30%为阳性，且主要分布在大细胞，提示该类细胞属于具有过氧化物酶结构的原始髓细胞，其他细胞则可能为早期的髓系干细胞或多能造血干细胞，故该患者的最后诊断是急性髓细胞性白血病伴异常抗原CD7表达，国外有学者主张将此型定为AML特殊亚型，临床表现及染色体变化均有一定特点，预后较差〔8〕。
, http://www.100md.com
综合以上分析可见运用单克隆抗体间接免疫荧光法可简便、快速、准确地测出胞浆内MPO、CyCD22和CyCD3，该三项指标对白血病的诊断和鉴别诊断，特别是未分化型、混合型和变异型白血病的诊断具有重要意义。■ 参考文献：
[1]Drexler H G,Thiel E,Ludwing W D.Acute myeloid leukemias expressing lymphoid-associated antigens:diagnostic incidence and prognostic significance.Leukemia,1993,7:489～498
[2]川井进，藤本 孟男，翟志敏，等.伴髓系抗原表达(CD13、CD33)的急性淋巴细胞性白血病临床表现和预后，日本儿科血液学杂志，1993，7：210～216
, http://www.100md.com
[3]孟沛霖，闵碧荷，主编.实用血液病手册.北京：人民军医出版社，1998.100～110
[4]Kaplan S S,Penchansky L,Stolc V,et al.Immunophenotyping in the classification of acute leukemia in adults.Interpretation of multiple lineage reactivity.Cancer,1989,63:1520～1526
[5]张之南，主编.血液病诊断及疗效标准.第2版.北京：科学出版社，1998.179～193
[6]殷慧君，主编.小儿急性白血病化学治疗.北京：科学出版社，1997.20～24
[7]Joanne K,Thomas A W,Michael P D,et al.CD+7，CD-4，CD-8 Acute Leukemia:A Syndrome of Malignant Pluripotent Lymphohematopoietic Cells.Blood,1989:381～390
[8]A Venditti,G Del Poeta,F Buccisano,et al.Prognostic relevance of the expression of Tdt and CD7 in 335 cases of acute myeloid leukemia.Leukemia,1998:1056～1063
收稿日期：1999-04-06
修稿日期：1999-08-22, 百拇医药
单位：翟志敏(安徽省立医院 合肥，230001)；何晓东(安徽省立医院 合肥，230001)； 吴竞生(安徽省立医院 合肥，230001)；潘理明(安徽省立医院 合肥，230001)；吴树农(安徽省立医院 合肥，230001)；孙自敏(安徽省立医院 合肥，230001)；朱微波(安徽省立医院 合肥，230001)；蔡晓燕(安徽省立医院 合肥，230001)；余自强(安徽省立医院 合肥，230001)；王祖贻(安徽省立医院 合肥，230001)
关键词：CyCD3；CyCD22(胞浆内抗原CD3、CD22)；髓过氧化物酶；白血病
临床血液学杂志000212 摘 要：目的：探讨和明确胞浆内抗原CD3、CD22、MPO的检测方法及其在白血病诊断中的意义。方法：采用多聚甲醛和甲醇联合固定细胞，单抗间接荧光法标记细胞内相应的抗原，在荧光显微镜下检测计数，并将结果与形态学和细胞表面抗原检测结果进行对照研究。结果：19例初诊患者中，11例MPO阳性，6例CyCD22阳性，1例CyCD3阳性，1例3项均为阴性，结合形态学和表面抗原分析，全部病例获得明确诊断。结论：胞浆内CD3、CD22、MPO的检测简便、准确、灵敏度高，可在临床广泛开展使用，对白血病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。
, 百拇医药
Detection of cytoplasmic antigens CD3，CD22，MPO and it′s clinical significance
ZHAI Zhi-min HE Xiao-dong WU Jin-sheng PAN Li-ming WU Shu-nong
SUN Zi-min ZHU Wei-bo CAI Xiao-yan YU Zi-giang WANG Zhu-yi
(Anhui Provincial Hospital,Hefei,230001)
Abstract：Objective:To explore the examinational method of CyCD3,CyCD22.MPO and the clinical significance.Method:After immobilization of cell membrane,the cytoplasmic antigens were marked fluorescence indirectly by using monoclonal antibody.Then the qualitative and quantitative analysis was performed on fluorescent microscopy.Lastly we compared the results with the related morphology and expression of surface antigens.Result:In 19 atients,11 were MPO(+),6 were CyCD22(+),1 was CyCD3(+),only 1 was negative for all cytoplasmic antigens.All patients acquired clear diagnosis.Conclusion:The method for detecting cytoplasmic antigens is simple and clear and high sensitive.It can an important role in the diagnosis and distinguishing diagnosis of leukemia.
, 百拇医药
Key words：Cytoplasmic Antigen CD3 CD22 Myeloperoxidase Leukemia▲
目前白血病的诊断国内外均提倡统一采用MIC分型法，其中免疫分型占有重要位置。免疫分型可以更精细地从正常细胞中鉴别出恶性细胞，准确判断白血病细胞的性质及分化阶段。但国内大多仅对细胞表面抗原进行检测分析，至今尚无胞浆内抗原的检测报告。通过大量的临床实践后发现有些原认为特异性和最敏感的单克隆抗体指标，事实并非如此，往往伴有抗原交叉反应或仅在细胞发育的某一阶段表达。而细胞内抗原的检测能够有力地补充单纯检测细胞膜抗原的不足之处，进一步提高白血病的诊断水平。特别在诊断混合细胞性白血病和预测微小残留病变方面有重要价值。
1 材料和方法
1.1 研究对象
, 百拇医药
①既往确诊为AML、T-ALL及普通型B-ALL患者各1例作为标准对照(标本为-80℃冻存细胞)；②1998年10月～1999年2月在本院确诊并住院治疗的白血病患者19例，年龄2～62岁，男12例，女7例。临床初步诊断主要依据临床表现、细胞形态学分类及细胞膜表面抗原检测。
1.2 实验方法
①分离单核细胞：取患者骨髓或静脉血2～5 ml，常规涂片并用May-Giemsa染色确定原始幼稚细胞>70%。单核细胞采用淋巴细胞分离液(中国医学科学院血液病研究所)梯度密度离心法获得，一般在12 h内检测或用10%二甲亚砜及10%胎牛血清放在-80℃保存，需要时可快速解冻使用。②细胞的固定和细胞膜渗透处理：多聚甲醛和无水甲醇联合固定法。③荧光标记：间接免疫荧光标记，MPO单抗购自法国Immunotech公司，CD22、CD3及FITC-羊抗鼠IgG第2抗体购自中国科学院血液病研究所。④判断标准：反应后阳性细胞占全部计数细胞>30%者为阳性。
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2 结果
2.1 单抗标记前细胞固定情况
被检测细胞经固定和胞膜渗透处理后，在普通光学镜下可见细胞均匀分布，无聚集成团和细胞破坏现象，胞膜完整，细胞活性>90%。
2.2 一抗、二抗标记后细胞反应情况
各系阳性对照细胞与标准普通型B-ALL细胞CyCD22(胞浆内抗原CD3、CD22)一样，抗原抗体反应表现为绿色荧光沿胞浆分布区呈环带状均匀着色。而阴性对照细胞无荧光着色或胞浆胞核同等淡染。
2.3 各患者胞浆内MPO、CD3、CD22的检测结果
MPO阳性11例，CyCD22阳性6例，CyCD3阳性1例，三项均阴性者1例(见表1)。
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表1 19例患者形态学诊断及胞浆内MPO、CyCD3、CyCD22检测结果 患者
编号
形态学
诊断
阳性细胞百分率(%)
MPO
CyCD3
CyCD22
1
M5
60.0
, 百拇医药
0
0
2
M2
70.0
0
0
3
M5(疑诊)
45.0
5.0
0
4
M1
, 百拇医药
95.0
0
0
5
M5
40.0
0
0
6
M2
60.0
0
0
7
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M5(疑诊)
0
80.0
0
8
M3
40.0
0
0
9
M5
85.0
5.0
0
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10
CML(急粒变)
70.0
0
0
11
CML(急粒变)
70.0
0
0
12
ALL
0
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0
35.0
13
ALL
0
0
90.0
14
ALL(疑诊)
0
0
80.0
15
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0
0
50.0
16
ALL
0
0
0
17
ALL
0
0
30.0
, 百拇医药
18
CLL
0
0
50.0
19
诊断困难
30.0
0
0
3 讨论
3.1 方法学
细胞内抗原和膜抗原检测的主要区别是，抗体加入前需要对细胞膜进行渗透性处理，理想的方法是既能为抗体进入细胞内打开通道，又能保护细胞原有的物理和化学结构，不影响细胞的抗原抗体反应。本实验采用多聚甲醛和甲醇相结合的方法，固定后细胞基本上无损伤，用单克隆抗体间接免疫荧光法标记细胞，未发现有明显的非特异性反应，阳性和阴性细胞间差异显著，简单明了，易于判断，获得了满意效果。
, 百拇医药
3.2 CyCD22、CyCD3、MPO的临床意义
对照细胞形态学检验，本实验组患者表面抗原结果可归纳为以下四类：①与形态学诊断一致(64%)；②不支持形态学诊断(5%)；③有双系列抗原表达或仅有非特异性共同抗原表达(26%)；④细胞少未能做表型分析(5%)。特别是4例形态学诊断疑难患者，免疫表型均归于后三类。由此可见单纯细胞膜表面抗原分析辅助形态学检查，有时仍不能满足临床需要。分析原因主要有以下几点：①发现的细胞膜表面抗原越来越多，但相互之间常有交叉反应，如T淋巴系CD7、CD5、CD2，B淋巴系CD10、CD19，髓系CD13、CD33、CD11等均可在不同系列细胞中表达〔1，2〕；②特异性强的胞膜抗原如CD3、CD22常局限在T、B淋巴细胞发育阶段中的中晚期出现，因此敏感性受到影响〔3〕；③可能与环境污染的日趋严重和医疗条件改善有关，疑难白血病病例逐年增多(如变异型、混合型、未分化型等)〔4〕；④少数患者属于低增生型或白细胞减少型，细胞少无法进行全面的表面抗原分析。
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现认为淋巴细胞中CyCD3和CyCD22先于膜表达，且特异性强，至今尚未发现异系列细胞的交叉反应，对鉴别早期T、B淋巴细胞白血病有重要意义。在髓细胞中至今还没有制备出抗粒细胞和抗单核细胞的特异性抗体及其各个发育阶段的特异性抗体，但免疫学分析对急性非淋巴系白血病和急性淋巴细胞白血病的鉴别诊断有重要意义，特别是MPO为髓细胞系特异性标志，一般淋巴细胞不会表达。而且利用单克隆抗体检测MPO比传统的化学方法更加敏感，已有报道MPO甚至可以替代电镜确诊急性髓细胞白血病微分化型(AML-AMO)。1995年国际白血病欧洲协作组提出的T、B淋巴细胞系及髓系抗原积分标准以及国内血液病专家提倡的急性混合细胞白血病诊断积分系统标准，MPO、CyCD3、CyCD22三项指标分别在髓系、B淋巴系、T淋巴系细胞中积分最高，即充分显示其在白血病诊断中占居的重要地位〔5，6〕。本实验结果，19例患者之间MPO、CyCD22、CyCD3无1例发生阳性交叉反应，9例形态学初诊为AML患者中，8例MPO阳性，阳性细胞平均所占比率为61.9%(40%～95%)，其中1例形态学疑难患者，因MPO阳性、CyCD22和CyCD3阴性从而排除ALL的可能确诊为AML：唯独1例MPO阴性者，因CyCD3阳性率高达80%，膜抗原检测也支持T淋巴系特征，故确诊为T-ALL。6例形态学初诊ALL患者(包括1例疑诊)，5例CyCD22阳性，平均阳性率为57%(30%～90%)，而相应的细胞膜表面CD22(SmCD22)除1例未测外，仅1例少量阳性(10%)，其他三项均为阴性，证明CyCD22确实比SmCD22敏感。另1例ALL患者MPO、CyCD22、CyCD3均阴性，表面抗原仅CD7阳性，考虑属于裸型或CD+7、CD-4、CD-8多能造血干细胞性白血病〔7〕。3例慢性白血病患者胞浆内抗原结果与形态学及表面抗原一致。最后1例疑难患者，形态学检查发现白血病细胞明显分为两类，一类细胞(占总有核细胞40%)较大，胞浆较多，似原始粒细胞；另一类细胞(占总有核细胞55%)偏小，胞浆较少，似原始淋巴细胞。细胞化学染色显示：过氧化物酶6%阳性，糖原反应阴性。表面抗原结果显示：CD780%、HLA-DR 95%阳性，其它抗原全部阴性。而胞浆内抗原检测后发现：CyCD3、CyCD22阴性，故基本排除急淋可能，单抗MPO占全部计数细胞的30%为阳性，且主要分布在大细胞，提示该类细胞属于具有过氧化物酶结构的原始髓细胞，其他细胞则可能为早期的髓系干细胞或多能造血干细胞，故该患者的最后诊断是急性髓细胞性白血病伴异常抗原CD7表达，国外有学者主张将此型定为AML特殊亚型，临床表现及染色体变化均有一定特点，预后较差〔8〕。
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综合以上分析可见运用单克隆抗体间接免疫荧光法可简便、快速、准确地测出胞浆内MPO、CyCD22和CyCD3，该三项指标对白血病的诊断和鉴别诊断，特别是未分化型、混合型和变异型白血病的诊断具有重要意义。■ 参考文献：
[1]Drexler H G,Thiel E,Ludwing W D.Acute myeloid leukemias expressing lymphoid-associated antigens:diagnostic incidence and prognostic significance.Leukemia,1993,7:489～498
[2]川井进，藤本 孟男，翟志敏，等.伴髓系抗原表达(CD13、CD33)的急性淋巴细胞性白血病临床表现和预后，日本儿科血液学杂志，1993，7：210～216
, http://www.100md.com
[3]孟沛霖，闵碧荷，主编.实用血液病手册.北京：人民军医出版社，1998.100～110
[4]Kaplan S S,Penchansky L,Stolc V,et al.Immunophenotyping in the classification of acute leukemia in adults.Interpretation of multiple lineage reactivity.Cancer,1989,63:1520～1526
[5]张之南，主编.血液病诊断及疗效标准.第2版.北京：科学出版社，1998.179～193
[6]殷慧君，主编.小儿急性白血病化学治疗.北京：科学出版社，1997.20～24
[7]Joanne K,Thomas A W,Michael P D,et al.CD+7，CD-4，CD-8 Acute Leukemia:A Syndrome of Malignant Pluripotent Lymphohematopoietic Cells.Blood,1989:381～390
[8]A Venditti,G Del Poeta,F Buccisano,et al.Prognostic relevance of the expression of Tdt and CD7 in 335 cases of acute myeloid leukemia.Leukemia,1998:1056～1063
收稿日期：1999-04-06
修稿日期：1999-08-22, 百拇医药