应用快速斑点免疫结合试验检测泌尿生殖道沙眼衣原体
作者：应伟芬 余素飞 姜彩琴
单位：应伟芬(浙江省仙居县中医院检验科，浙江 仙居 317300)；余素飞(浙江省台州市医院，浙江 台州)；姜彩琴(浙江省台州市医院，浙江 台州)
关键词：沙眼衣原体；斑点免疫层析
宁夏医学杂志000235 【摘要】采用新型免疫层析技术，以特异性沙眼衣原体单克隆抗体的快速定性检测方法，对634例性病门诊患者泌尿生殖道标本的沙眼衣原体检测。结果，总CT检出率20.0%(127/634)，男性CT检出率17.8%(58/326)，女性CT检出率22.4%(69/308)。提示泌尿生殖道的CT感染在本地区存在，且构成流行，应引起高度重视。
【中图分类号】R446.61 【文献标识码】B
文章编号：1001-5949(2000)02-0118-01
, http://www.100md.com
我们应用斑点免疫结合试验检测了634例性传播疾病(STD)高危人群的泌尿生殖道标本，旨在探讨本地区STD高危人群的沙眼衣原体(CT)感染，并建议将CT检测作为STD常规检查项目。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本：所检测的病例为1998年7月～11月台州医院STD门诊634例患者，其中男性326例，女性308例，年龄15～59岁，平均28岁，共收集各类泌尿生殖道标本634份。患者在检测前均未使用广谱抗生素及抗衣原体药物。
1.1.2 标本采集：男性尿道标本用无菌拭子插入尿道2cm～4cm，旋转3～5秒钟取出；女性宫颈标本用无菌棉拭子将宫颈口外区域的分泌物擦净，将取样拭子插入宫颈管内1cm～2cm，旋转拭子15～20秒钟取出。将取样后的拭子放入样品处理管中，如果标本不能及时检测，可储存于室温(15～30℃)4小时或冰箱(2～8℃)24小时内使用。
, 百拇医药
1.1.3 试剂：沙眼衣原体用美国YKI公司生产的快速斑点免疫结合试验试剂盒，即Sure Chlamydia抗原检测卡。
1.2 方法
1.2.1 原理：在检测卡硝酸纤维膜的检测线上固定有抗衣原体属特异性抗原LPS(Lipopolysaccharide)的单克隆抗体，对照线固定有抗鼠IgG抗体，处理后的样品首先与结合了抗衣原体单克隆抗体的胶体金颗粒混和，并靠毛细管作用向检测线移动。如果样品中含有衣原体则可形成双抗体夹心免疫复合物，并聚集在检测区形成一条红线，无此红线则表示该标本无沙眼衣原体存在。
1.2.2 方法：将临床样品放入含有溶液A的样品处理管中，2分钟后，加入溶液B，混合均匀后滴4滴在检测卡的样品孔中，等待结果出现。
1.2.3 结果判断：阴性，仅在对照区(C)有一条红线，检测区(T)无红线出现；阳性，除对照线外，另有一条红线在检测区(T)出现。
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1.2.4 质量控制：检测卡内已有对照控制系统，对照区出现红线，表示试验有效，否则应更换新的检测卡重复试验。每次试验设立阴性和弱阳性对照，这样可以确定试验的敏感性和特异性。
2 结果
634例STD高危人群患者的泌尿生殖道标本，总CT检出率为20.0%。其中男性CT检出率为17.8%，女性CT检出率为22.4%，男女患者之间CT检出率无显著性差异(χ2=2.1022，P>0.05)。
3 讨论
沙眼衣原体所致的泌尿生殖道感染是西方国家最常见的性传播疾病之一。在我国据对南京、上海、重庆、广州等地性病高危人群的检测，CT感染率在16.2%～27.0%[1]。我们检测634例性传播疾病高危人群患者的泌尿生殖道标本，CT总检出率为20.0%。应引起高度重视。由于泌尿生殖道CT感染无特殊临床表现，CT检测迄今尚未引入STD常规检查[2]，人们对其缺乏认识，故易误诊或漏诊，因而CT感染的早期诊断和及时治疗对控制CT的传播和预防并发症的发生极为重要。笔者建议，将CT检测列入STD常规检查项目。目前，沙眼衣原体感染的实验室检查可分为细胞培养和非细胞培养法。利用细胞培养技术检测细胞内包涵体存在，是传统的衣原体感染诊断方法，被公认为“金标法”。它具有高敏感性及高度特异性，但因实验设备、操作技术要求高，所需时间长(48～72小时)，不易在大多数实验室推广应用。非细胞培养法，包括直接免疫荧光法、免疫酶法、PCR法等，这些方法均需特殊的仪器和熟练的操作人员[4]。快速斑点免疫结合试验是近几年国外兴起的一种快速诊断技术[3]，其原理是以微孔滤膜为载体，通过毛细管作用使抗原抗体反应快速进行。DIBA试验具有敏感性高，特异性强，并且操作简便，不需任何仪器设备，几分钟即可用肉眼观察结果，适合各级医疗单位应用。
, 百拇医药
责编：杨自革
参考文献
[1]叶顺章，等.我国部分地区性病高危人群生殖道衣原体感染和HIV抗体的调查[J].中华皮肤科杂志，1993，26：201
[2]张桂宁，等.孕妇沙眼衣原体感染危险因素的研究[J].中华流行病学杂志，1998，19：147
[3]陶义训.快速斑点免疫结合试验在医学检验中的应用评价[J].中华医学检验杂志，1994，17：197
[4]郭建巍.用夹心ELISA检测沙眼衣原体[J].中国人兽共患病杂志，1998，14：66
(收稿：1999-08-23), 百拇医药
单位：应伟芬(浙江省仙居县中医院检验科，浙江 仙居 317300)；余素飞(浙江省台州市医院，浙江 台州)；姜彩琴(浙江省台州市医院，浙江 台州)
关键词：沙眼衣原体；斑点免疫层析
宁夏医学杂志000235 【摘要】采用新型免疫层析技术，以特异性沙眼衣原体单克隆抗体的快速定性检测方法，对634例性病门诊患者泌尿生殖道标本的沙眼衣原体检测。结果，总CT检出率20.0%(127/634)，男性CT检出率17.8%(58/326)，女性CT检出率22.4%(69/308)。提示泌尿生殖道的CT感染在本地区存在，且构成流行，应引起高度重视。
【中图分类号】R446.61 【文献标识码】B
文章编号：1001-5949(2000)02-0118-01
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我们应用斑点免疫结合试验检测了634例性传播疾病(STD)高危人群的泌尿生殖道标本，旨在探讨本地区STD高危人群的沙眼衣原体(CT)感染，并建议将CT检测作为STD常规检查项目。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本：所检测的病例为1998年7月～11月台州医院STD门诊634例患者，其中男性326例，女性308例，年龄15～59岁，平均28岁，共收集各类泌尿生殖道标本634份。患者在检测前均未使用广谱抗生素及抗衣原体药物。
1.1.2 标本采集：男性尿道标本用无菌拭子插入尿道2cm～4cm，旋转3～5秒钟取出；女性宫颈标本用无菌棉拭子将宫颈口外区域的分泌物擦净，将取样拭子插入宫颈管内1cm～2cm，旋转拭子15～20秒钟取出。将取样后的拭子放入样品处理管中，如果标本不能及时检测，可储存于室温(15～30℃)4小时或冰箱(2～8℃)24小时内使用。
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1.1.3 试剂：沙眼衣原体用美国YKI公司生产的快速斑点免疫结合试验试剂盒，即Sure Chlamydia抗原检测卡。
1.2 方法
1.2.1 原理：在检测卡硝酸纤维膜的检测线上固定有抗衣原体属特异性抗原LPS(Lipopolysaccharide)的单克隆抗体，对照线固定有抗鼠IgG抗体，处理后的样品首先与结合了抗衣原体单克隆抗体的胶体金颗粒混和，并靠毛细管作用向检测线移动。如果样品中含有衣原体则可形成双抗体夹心免疫复合物，并聚集在检测区形成一条红线，无此红线则表示该标本无沙眼衣原体存在。
1.2.2 方法：将临床样品放入含有溶液A的样品处理管中，2分钟后，加入溶液B，混合均匀后滴4滴在检测卡的样品孔中，等待结果出现。
1.2.3 结果判断：阴性，仅在对照区(C)有一条红线，检测区(T)无红线出现；阳性，除对照线外，另有一条红线在检测区(T)出现。
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1.2.4 质量控制：检测卡内已有对照控制系统，对照区出现红线，表示试验有效，否则应更换新的检测卡重复试验。每次试验设立阴性和弱阳性对照，这样可以确定试验的敏感性和特异性。
2 结果
634例STD高危人群患者的泌尿生殖道标本，总CT检出率为20.0%。其中男性CT检出率为17.8%，女性CT检出率为22.4%，男女患者之间CT检出率无显著性差异(χ2=2.1022，P>0.05)。
3 讨论
沙眼衣原体所致的泌尿生殖道感染是西方国家最常见的性传播疾病之一。在我国据对南京、上海、重庆、广州等地性病高危人群的检测，CT感染率在16.2%～27.0%[1]。我们检测634例性传播疾病高危人群患者的泌尿生殖道标本，CT总检出率为20.0%。应引起高度重视。由于泌尿生殖道CT感染无特殊临床表现，CT检测迄今尚未引入STD常规检查[2]，人们对其缺乏认识，故易误诊或漏诊，因而CT感染的早期诊断和及时治疗对控制CT的传播和预防并发症的发生极为重要。笔者建议，将CT检测列入STD常规检查项目。目前，沙眼衣原体感染的实验室检查可分为细胞培养和非细胞培养法。利用细胞培养技术检测细胞内包涵体存在，是传统的衣原体感染诊断方法，被公认为“金标法”。它具有高敏感性及高度特异性，但因实验设备、操作技术要求高，所需时间长(48～72小时)，不易在大多数实验室推广应用。非细胞培养法，包括直接免疫荧光法、免疫酶法、PCR法等，这些方法均需特殊的仪器和熟练的操作人员[4]。快速斑点免疫结合试验是近几年国外兴起的一种快速诊断技术[3]，其原理是以微孔滤膜为载体，通过毛细管作用使抗原抗体反应快速进行。DIBA试验具有敏感性高，特异性强，并且操作简便，不需任何仪器设备，几分钟即可用肉眼观察结果，适合各级医疗单位应用。
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责编：杨自革
参考文献
[1]叶顺章，等.我国部分地区性病高危人群生殖道衣原体感染和HIV抗体的调查[J].中华皮肤科杂志，1993，26：201
[2]张桂宁，等.孕妇沙眼衣原体感染危险因素的研究[J].中华流行病学杂志，1998，19：147
[3]陶义训.快速斑点免疫结合试验在医学检验中的应用评价[J].中华医学检验杂志，1994，17：197
[4]郭建巍.用夹心ELISA检测沙眼衣原体[J].中国人兽共患病杂志，1998，14：66
(收稿：1999-08-23), 百拇医药