中药田三七对二甲基亚硝胺中毒性肝损伤大鼠的干预作用
作者：李兆健 金树根
单位：李兆健(上海中医药大学，上海 200032)；金树根(上海中医药大学附属曙光医院)
关键词：田三七；中毒性肝损伤；秋水仙碱；实验研究
成都中医药大学学报000219摘 要：目的：观察中药田三七对肝损伤大鼠的干预作用。方法：采用二甲基亚硝胺肝损伤大鼠的实验模型，分为正常对照组、病理对照组、秋水仙碱组(灌服秋水仙碱)及中药田三七组(灌服生田三七粉浸液)进行观察。结果：田三七有增加体重、肝脾重和改善蛋白代谢、抗氧化能力及肝脏病理等作用，其效果优于秋水仙碱。结论：与具有促进肝脏癌变作用的肝细胞微粒体扩增促进剂的降脂药物作用方向相反，田三七有促进肝内适量脂肪储存作用，这可能是田三七抗肿瘤作用的表现之一。
中图分类号：R285.5;R595.4 文献标识码：A 文章编号：1004-0668(2000)02-0033-03
, http://www.100md.com
Effect of Traditional Chinese Herb Panax
Notorogenseng(Burk) F.H. Chen
on Dimethylnitrosamine-induced Liver Injury in Rats
LI Zhao-jian, JIN Shu-gen
Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (Shanghai, 200032,China)
ABSTRACT:Objective： To investigate effect of Traditional Chinese herb Panax Notorogenseng(Burk) F.H. Chen on dimethylnitrosamine-induced liver injury in rats. Methods: The power of Panax Notorogenseng (Burk) F.H. Chen was gavaged into fibrotic rats induced by dimethylnitrosamine for four weeks with colchicines as compared group.Results:As to increasing growth of body ,liver and spleen weight, improving metabolism of protein, capacity of anti-oxidation and pathological changes of liver, effects of Panax Notorogenseng(Burk) F.H. Chen were superior to those of colchicines. Contrast to the cancer-promorting function of the liver microsome proliferate accelerator, Panax Notorogenseng(Burk) F.H. Chen promoted some fat storing in liver, which may be the manifestation of its anti-cancer effects.Conclusions: Panax Notorogenseng(Burk) F.H. Chen had some therapeutical value in the treatment of liver injury.
, 百拇医药
KEY WORDS:Panax Notorogenseng(Burk) F.H. Chen; liver injury; experimental research
基金项目：国家自然基金(青年基金)资助项目(No:39600189)
作者简介：李兆健，男，1967年10月生；医学硕士，主治医师；研究方向：肝病、心脑血管疾病及慢性疲劳综合征的临床与实验研究。
田三七具有化瘀止血，活血定痛等功能。药物成分分析发现，田三七含有多人参皂甙、田三七皂甙等活性成分。药理研究发现，田三七对血液系统、循环系统、内分泌系统和机体能量代谢、特异性与非特异性防御系统、肝脏、骨骼肌和平滑肌等均有调节作用[1]。今拟用田三七粉浸液灌服，观察其对二甲基亚硝胺DMN中毒性肝损伤大鼠的干预作用。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 动物
雄性SD大鼠20只，体重200 g±15 g，由上海中医药大学动物实验中心提供。随机分为正常对照组、病理对照组、秋水仙碱组及中药田三七组，每组各5只。普通颗粒饲料，自由饮水，实验全程6周。
1.2 造模方法
除正常对照组5只外，其余15只大鼠均用DMN(Sigma产品)以生理盐水稀释成1%溶液，按每日每千克体重1 mL稀释液(含10 μL DMN)，每周连续3日、共3周腹腔内注射，制成肝纤维化实验模型[2]。造模后随机分成病理对照组5 只、中药田三七组5 只和秋水仙碱组5 只。正常对照组大鼠以等量生理盐水作相应处理。
1.3 用药方法
生用田三七(上海雷允上产品，粉剂，3g/包)和秋水仙碱(Colchoicine,Serva 产品进口分装，Lot 88-11-10)，分别以成人剂量每日6g和1mg，采用体表面积折算法，按成人剂量0.018倍，用蒸馏水稀释，于实验第2周开始对相应大鼠灌胃给药，每日1次，共4 周。正常对照组与病理对照组大鼠均以等量生理盐水灌服处理。
, 百拇医药
1.4 检查项目
一般情况、肝脾大体、血清肝功能、血液抗氧化指标、肝脾组织光镜检查和肝组织电镜检查。
2 结果
2.1 一般情况
DMN染毒1周后(治疗前)，大鼠体重明显减轻，伴活动、摄食减少。停止染毒后，染毒大鼠体重呈代偿性增加，病理对照组、中药田三七组和秋水仙碱组未见大鼠死亡，中药田三七组体重增加，同时伴活动、摄食与饮水增加。秋水仙碱组后期体重增加不明显，同时伴活动与摄食饮水相对减少。实验各组大鼠灌服过程中每周体增重及体增率变化情况见表1。
2.2 肝脾大体
病理对照组肝脏色黯质中，脑回样改变；脾脏明显肿大而紫黯；中药田三七组大鼠肝脏与脾脏均明显增大，且质软色黯；秋水仙碱组大鼠肝脾脏改变与病理对照组类似。实验大鼠肝脾湿重及其体率改变情况见表2。
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2.3 血清肝功能指标改变
各组ALT、AST、AKP、GGT、SB、DB、IB无显著差异。各组大鼠血清蛋白指标改变情况见表3。
2.4 血浆抗氧化指标改变(见表4)
表1 实验各组大鼠每周体重及体增率改变(
±s) 组 别
治疗前体重(g)
治疗后体重(g)
治疗总增重(g)
治疗总增率(%)
正常对照组
, http://www.100md.com
198±17.9
302±3.00
104±16.1
53.6±12.2
病理对照组
166±13.5**
276±16.9
110±14.5
66.7±11.5
中药田三七组
164±16.4**
, 百拇医药
280±39.8
115±26.7
70.2±11.5
秋水仙碱组
164±15.6**
251±28.3**
87.5±27.9
54.1±20.3
与正常对照组比较，**P<0.01表2 实验各组大鼠肝脾湿重及其体率改变(±s)
, http://www.100md.com 组 别
肝湿重(g)
肝体重(g)
脾湿重(g)
脾体率(‰)
肝 脾 率
正常对照组
7.83±0.80
2.65±0.22
0.77±0.19
2.58±0.50
10.5±17.1
, http://www.100md.com
病理对照组
7.68±1.04
2.81±0.14
0.97±0.10
3.56±0.44*
7.97±0.90*
中药田三七组
8.20±1.69
2.91±0.25
1.01±0.22
9.62±0.69*
, 百拇医药
8.30±1.82
秋水仙碱组
7.45±1.10
2.85±0.27
0.95±0.36
3.57±1.11
8.94±4.02
与正常对照组比较，*P<0.05表3 实验各组大鼠血清蛋白指标改变(±s)
组 别
TP(g/L)
, 百拇医药
A(g/L)
G(g/L)
A/G
正常对照组
60.4±1.48
33.5±3.12
26.9±1.178
1.26±0.19
病理对照组
59.8±1.98
29.7±1.71*
30.2±1.89**
, 百拇医药
0.98±0.08*
中药田三七组
59.3±1.71
30.9±1.57
28.4±1.59**#△△
1.09±0.06**△△△
秋水仙碱组
59.4±1.24
30.1±0.98**
29.3±1.46**
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1.03±0.33**△△
与正常对照组比较，*P<0.01，*P<0.01；与病理对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与秋水仙碱组比较，#P<0.05。表4 实验各组大鼠血浆抗氧化指标改变(±s) 组 别
T-SOD(nU/mL)
LPO(nM MDA/mL)
正常对照组
105.9±6.43
2.39±0.31
病理对照组
, 百拇医药
86.6±5.16**
60.8±0.83**
中药田三七组
97.7±10.5
4.02±0.55**△△
秋水仙碱组
97.9±6.83*
4.01±0.51**△△
与正常对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；与病理对照组比较，△△P<0.01
, 百拇医药
2.5 肝组织光镜检查
(1)正常对照组 肝组织常规HE染色检查示肝内小叶和汇管区结构正常，肝细胞呈索状分布，无明显肝细胞坏死，间质无扩增(成纤维细胞等间质细胞和纤维组织增生均不明显)，偶见有凋亡肝细胞和空泡样变肝细胞散在分布。天狼星红胶原纤维染色普通光镜低倍镜下可见红色胶原纤维分布于汇管区和中央静脉管壁中；高倍镜下可见极其纤细胶原纤维分布于管壁周边伸入肝小叶并包绕肝细胞。天狼星红胶原纤维染色偏振光镜下红色粗密(Ⅰ型胶原纤维)、绿色纤细(Ⅲ型胶原纤维)及黄色疏松(Ⅳ型胶原纤维)胶原纤维主布于汇管区和中央静脉管壁中，胞周亦有极其纤细、点状的红、黄色胶原纤维分布。糖醛酸染色示糖原染色，肝小叶内呈分射状，但以胞外染色为主。
脾组织常规HE染色检查示脾白红髓质分明，无间质增生。天狼星红胶原纤维染色普通光镜下所见与HE染色所见相同，红黄色胶原纤维只分布于间质中，红白内髓质内没有胶原纤维分布。天狼星红胶原纤维染色偏振光镜下见红、黄、绿色胶原纤维只分布于间质内，而且与肝内胶原纤维有所不同。脾内绿色胶原含量明显增加，红白髓质内没有明显胶原纤维分布。
, 百拇医药
(2)病理对照组 肝组织常规HE染色检查示失去正常肝小叶样结构，间质增生明显，成纤维细胞等间质细胞在纤维间隔内及周边亦增加，肝小叶为不完全性纤维间隔分隔，肝细胞为胞周纤维所包绕，但未见典型肝硬化再生肝小结，大片肝细胞变性坏死亦不明显，但可见较多的凋亡细胞及空泡变性肝细胞肝内散在分布。天狼星红胶原纤维染色普通光镜低倍镜下可见明显粗大红色胶原纤维分布于汇管区和中央静脉管壁中，不完全性汇管间(Portal-Portal,P-P)纤维间隔主要染为红黄色，间有纤细绿色。高倍镜下可见纤细胶原纤维分布于管壁周边和纤维间隔周边并伸入肝小叶包绕肝细胞。天狼星红胶原纤维染色偏振光镜下可见粗大红黄色的胶原纤维分布于汇管区和中央静脉管壁及不完全性纤维间隔中，胞周亦有点、线状纤细的红色胶原纤维分布。糖醛酸染色示肝内浓染，类似糖原染色，但以胞外染色为主。
脾组织常规HE染色检查示脾红白髓质欠分明，并为纤维组织所包绕，间质增生明显，纤维组织明显增多。天狼星红胶原纤维染色普通光镜下所见与HE染色所见相同。天狼星红胶原纤维染色偏振光镜下见增生胶原纤维组成的纤维间隔包绕脾红白髓质，红白髓质内有红色胶原纤维残存。
, 百拇医药
(3)秋水仙碱组 肝组织常规HE染色检查示失去正常肝小叶样结构，肝细胞体积增大，间质增生明显但轻于病理对照组，成纤维细胞等间质细胞在纤维间隔内及周边增加，凋亡细胞及空泡变性肝细胞亦散在分布，但明显多于病理对照组。天狼星红胶原纤维染色普通光镜及偏振光镜所见同病理对照组，但纤维化程度不如病理对照组。糖醛酸染色示肝内浓染，以胞外染色为主。
脾组织常规HE染色检查示脾红白髓质欠分明，并为纤维组织所包绕，间质增生明显，纤维组织明显增多。天狼星红胶原纤维染色普通光镜和偏振光镜下所见与病理对照组相同，纤维化无明显改善。
(4)中药田三七组 肝组织常规HE染色检查示肝脏结构基本正常，肝脏细胞坏死不明显，有脂滴空泡样改变，炎性浸润不明显，成纤维细胞等间质细胞在纤维间隔内散在分布，纤维化减轻，间隔和胞周性纤维化较秋水仙碱组改善，但凋亡细胞及空泡变性肝细胞不明显。残存肝小叶呈放射状在肝内分布。天狼星红胶原纤维染色普通光镜和偏振光镜下所见同秋水仙碱组，但纤维间隔性和胞周性纤维化程度不如病理对照组和秋水仙碱组明显。糖醛酸染色示肝内仍浓染，以胞外染色为主。
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脾组织常规HE染色检查示脾内细胞较秋水仙碱组更丰富，红白髓质较分明，并为纤维组织所包绕，间质增生，纤维组织增多。天狼星红胶原纤维染色普通光镜及偏振光镜下所与HE染色所见相同，纤维化较秋水仙碱组为轻。
2.6 肝组织电镜检查
(1)正常对照组 肝细胞呈多角形，双核或单核，核圆形，但居中央，核仁常为1～2个，胞质中有各种细胞器，线粒体呈杆状卵圆形，基质较深暗，嵴清晰。多组粗面内质网呈平行状排列，核糖体正常，滑面内质网呈囊泡状但不及粗面内质网发达。其他如溶酶体、微体、高尔基复合体等呈正常分布，细胞间连接明显。
(2)病理对照组 大鼠肝脏总体结构欠佳，肝细胞外形不规则，肝细胞核呈异形核变明显，或呈锯齿状，或呈“哑铃”状，或呈“腰果”状，核仁常边集，胞浆中可见呈片状或块状不规则空变坏死灶，线粒体大小不一，个别嵴形变，基质呈均质化，嵴不清晰，部分区域见滑面内质网增生，粗面内质网也扩张，脱颗粒明显，在部分肝细胞之间常有炎细胞浸润，细胞间连接不明显。
, 百拇医药
(3)秋水仙碱组 肝脏总体结构良好，基本接近正常对照组。肝细胞外形不规则，核形规则，呈圆形或椭圆形，无明显异型核变，线粒体多数正常，个别亦呈基质均质化，嵴欠清晰，粗面内质网正常，脱颗粒不明显，滑面内质网增生，部分区域可见溶酶体增多，无明显空变或坏死现象，凋亡现象不明显，肝细胞间胶原纤维明显可见，细胞间连接结构不明显。
(4)中药田三七组 肝脏总体结构改变基本如秋水仙碱组的改变，肝细胞核形尚规则，脂滴明显增多并有明显空变成片出现，凋亡现象不明显，肝细胞间胶原纤维不明显，细胞间连接结构亦不明显。
3 讨 论
本研究表明，作为一种钙离子通道阻滞剂(CCB)的中药田三七对二甲基亚硝胺亚急性化学中毒性肝损伤大鼠有防治作用，能增加体重和肝脾重量，改善蛋白代谢和抗氧化能力，改善肝脏病理尤其是肝纤维化，其效果优于秋水仙碱。这与我们以往研究发现的少量田三七便有抗肝纤维化作用的结果是一致的[1]。
, 百拇医药
对中药田三七组大鼠肝脾重明显增加、脾体重明显上升的结果，我们认为这是由于二甲基亚硝胺所致的动物模型是一免疫低下尤其是体液免疫明显低下为特征的动物实验模型，田三七具有抗衰老、抗应激、促进代谢和调节免疫功能等作用，因此其肝脏和脾脏均增生而血清球蛋白下降。
一般认为，降血脂药物中有一些是通过阻止血脂来源即通过损伤肝脏，减少血脂分泌入血而达到降低血脂的目的的。文献报道，田三七对血脂有调节作用，即生用三七降血脂而熟三七升血脂[1]。本研究采用生田三七粉浸液对实验大鼠灌服处理，发现其导致肝纤维化明显减轻和血清白、球蛋白比例上升，同时肝细胞内轻度脂肪沉积。究其原因，我们认为，肝细胞内适量脂肪分布(非大泡性肝内脂滴沉积)既表明肝细胞有足够的能量储备，更说明肝细胞处于正常功能(分化)状态。事实上，降脂药物中属于肝细胞微粒体扩增促进剂的药物往往得通过动用肝脏内脂肪，促进肝细胞再生，抑制肝细胞调亡而具有促进肝脏肝脏癌变的作用(非致肝脏癌变作用)。调查研究发现，肝内脂肪浸润和脂肪肝尤非酒精性脂肪肝的肝癌发生率不仅远远低于非脂肪变性的肝病的肝癌发生率，并且还低于正常人肝癌发生率[3，4]。结合田三七有良好的抗肿瘤和抗突变等作用，因此我们认为肝细胞内适度脂肪分布可能是其抗肿瘤作用的表现之一。
, 百拇医药
参考文献
1 李兆健.中药三七药理作用研究[J].上海中医药大学、上海市中医药研究院学报，1995，(1)：65
2 竺丽明，金树根，邹奎昌.维生素A类药物对二甲基亚硝胺肝损伤大鼠的干预作用[J].上海医药，1997，(4)：22
3 汤大鸣，许银花，柳新春.超声检查对探讨原发性肝癌在脂肪肝、HBV感染、肝硬化及正常肝中的发生率的应用价值[J].湖南医学，1995，(4)：240
4 黄克诚，范钦萍，苗景芝，等.脂肪肝与非脂肪患者的肝癌发生率比较[J].苏州医学杂志，1995，(3)：31
(收稿日期：2000-02-23), 百拇医药
单位：李兆健(上海中医药大学，上海 200032)；金树根(上海中医药大学附属曙光医院)
关键词：田三七；中毒性肝损伤；秋水仙碱；实验研究
成都中医药大学学报000219摘 要：目的：观察中药田三七对肝损伤大鼠的干预作用。方法：采用二甲基亚硝胺肝损伤大鼠的实验模型，分为正常对照组、病理对照组、秋水仙碱组(灌服秋水仙碱)及中药田三七组(灌服生田三七粉浸液)进行观察。结果：田三七有增加体重、肝脾重和改善蛋白代谢、抗氧化能力及肝脏病理等作用，其效果优于秋水仙碱。结论：与具有促进肝脏癌变作用的肝细胞微粒体扩增促进剂的降脂药物作用方向相反，田三七有促进肝内适量脂肪储存作用，这可能是田三七抗肿瘤作用的表现之一。
中图分类号：R285.5;R595.4 文献标识码：A 文章编号：1004-0668(2000)02-0033-03
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Effect of Traditional Chinese Herb Panax
Notorogenseng(Burk) F.H. Chen
on Dimethylnitrosamine-induced Liver Injury in Rats
LI Zhao-jian, JIN Shu-gen
Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (Shanghai, 200032,China)
ABSTRACT:Objective： To investigate effect of Traditional Chinese herb Panax Notorogenseng(Burk) F.H. Chen on dimethylnitrosamine-induced liver injury in rats. Methods: The power of Panax Notorogenseng (Burk) F.H. Chen was gavaged into fibrotic rats induced by dimethylnitrosamine for four weeks with colchicines as compared group.Results:As to increasing growth of body ,liver and spleen weight, improving metabolism of protein, capacity of anti-oxidation and pathological changes of liver, effects of Panax Notorogenseng(Burk) F.H. Chen were superior to those of colchicines. Contrast to the cancer-promorting function of the liver microsome proliferate accelerator, Panax Notorogenseng(Burk) F.H. Chen promoted some fat storing in liver, which may be the manifestation of its anti-cancer effects.Conclusions: Panax Notorogenseng(Burk) F.H. Chen had some therapeutical value in the treatment of liver injury.
, 百拇医药
KEY WORDS:Panax Notorogenseng(Burk) F.H. Chen; liver injury; experimental research
基金项目：国家自然基金(青年基金)资助项目(No:39600189)
作者简介：李兆健，男，1967年10月生；医学硕士，主治医师；研究方向：肝病、心脑血管疾病及慢性疲劳综合征的临床与实验研究。
田三七具有化瘀止血，活血定痛等功能。药物成分分析发现，田三七含有多人参皂甙、田三七皂甙等活性成分。药理研究发现，田三七对血液系统、循环系统、内分泌系统和机体能量代谢、特异性与非特异性防御系统、肝脏、骨骼肌和平滑肌等均有调节作用[1]。今拟用田三七粉浸液灌服，观察其对二甲基亚硝胺DMN中毒性肝损伤大鼠的干预作用。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 动物
雄性SD大鼠20只，体重200 g±15 g，由上海中医药大学动物实验中心提供。随机分为正常对照组、病理对照组、秋水仙碱组及中药田三七组，每组各5只。普通颗粒饲料，自由饮水，实验全程6周。
1.2 造模方法
除正常对照组5只外，其余15只大鼠均用DMN(Sigma产品)以生理盐水稀释成1%溶液，按每日每千克体重1 mL稀释液(含10 μL DMN)，每周连续3日、共3周腹腔内注射，制成肝纤维化实验模型[2]。造模后随机分成病理对照组5 只、中药田三七组5 只和秋水仙碱组5 只。正常对照组大鼠以等量生理盐水作相应处理。
1.3 用药方法
生用田三七(上海雷允上产品，粉剂，3g/包)和秋水仙碱(Colchoicine,Serva 产品进口分装，Lot 88-11-10)，分别以成人剂量每日6g和1mg，采用体表面积折算法，按成人剂量0.018倍，用蒸馏水稀释，于实验第2周开始对相应大鼠灌胃给药，每日1次，共4 周。正常对照组与病理对照组大鼠均以等量生理盐水灌服处理。
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1.4 检查项目
一般情况、肝脾大体、血清肝功能、血液抗氧化指标、肝脾组织光镜检查和肝组织电镜检查。
2 结果
2.1 一般情况
DMN染毒1周后(治疗前)，大鼠体重明显减轻，伴活动、摄食减少。停止染毒后，染毒大鼠体重呈代偿性增加，病理对照组、中药田三七组和秋水仙碱组未见大鼠死亡，中药田三七组体重增加，同时伴活动、摄食与饮水增加。秋水仙碱组后期体重增加不明显，同时伴活动与摄食饮水相对减少。实验各组大鼠灌服过程中每周体增重及体增率变化情况见表1。
2.2 肝脾大体
病理对照组肝脏色黯质中，脑回样改变；脾脏明显肿大而紫黯；中药田三七组大鼠肝脏与脾脏均明显增大，且质软色黯；秋水仙碱组大鼠肝脾脏改变与病理对照组类似。实验大鼠肝脾湿重及其体率改变情况见表2。
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2.3 血清肝功能指标改变
各组ALT、AST、AKP、GGT、SB、DB、IB无显著差异。各组大鼠血清蛋白指标改变情况见表3。
2.4 血浆抗氧化指标改变(见表4)
表1 实验各组大鼠每周体重及体增率改变(
±s) 组 别治疗前体重(g)
治疗后体重(g)
治疗总增重(g)
治疗总增率(%)
正常对照组
, http://www.100md.com
198±17.9
302±3.00
104±16.1
53.6±12.2
病理对照组
166±13.5**
276±16.9
110±14.5
66.7±11.5
中药田三七组
164±16.4**
, 百拇医药
280±39.8
115±26.7
70.2±11.5
秋水仙碱组
164±15.6**
251±28.3**
87.5±27.9
54.1±20.3
与正常对照组比较，**P<0.01表2 实验各组大鼠肝脾湿重及其体率改变(
±s), http://www.100md.com 组 别
肝湿重(g)
肝体重(g)
脾湿重(g)
脾体率(‰)
肝 脾 率
正常对照组
7.83±0.80
2.65±0.22
0.77±0.19
2.58±0.50
10.5±17.1
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病理对照组
7.68±1.04
2.81±0.14
0.97±0.10
3.56±0.44*
7.97±0.90*
中药田三七组
8.20±1.69
2.91±0.25
1.01±0.22
9.62±0.69*
, 百拇医药
8.30±1.82
秋水仙碱组
7.45±1.10
2.85±0.27
0.95±0.36
3.57±1.11
8.94±4.02
与正常对照组比较，*P<0.05表3 实验各组大鼠血清蛋白指标改变(
±s)组 别
TP(g/L)
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A(g/L)
G(g/L)
A/G
正常对照组
60.4±1.48
33.5±3.12
26.9±1.178
1.26±0.19
病理对照组
59.8±1.98
29.7±1.71*
30.2±1.89**
, 百拇医药
0.98±0.08*
中药田三七组
59.3±1.71
30.9±1.57
28.4±1.59**#△△
1.09±0.06**△△△
秋水仙碱组
59.4±1.24
30.1±0.98**
29.3±1.46**
, http://www.100md.com
1.03±0.33**△△
与正常对照组比较，*P<0.01，*P<0.01；与病理对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与秋水仙碱组比较，#P<0.05。表4 实验各组大鼠血浆抗氧化指标改变(
±s) 组 别T-SOD(nU/mL)
LPO(nM MDA/mL)
正常对照组
105.9±6.43
2.39±0.31
病理对照组
, 百拇医药
86.6±5.16**
60.8±0.83**
中药田三七组
97.7±10.5
4.02±0.55**△△
秋水仙碱组
97.9±6.83*
4.01±0.51**△△
与正常对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；与病理对照组比较，△△P<0.01
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2.5 肝组织光镜检查
(1)正常对照组 肝组织常规HE染色检查示肝内小叶和汇管区结构正常，肝细胞呈索状分布，无明显肝细胞坏死，间质无扩增(成纤维细胞等间质细胞和纤维组织增生均不明显)，偶见有凋亡肝细胞和空泡样变肝细胞散在分布。天狼星红胶原纤维染色普通光镜低倍镜下可见红色胶原纤维分布于汇管区和中央静脉管壁中；高倍镜下可见极其纤细胶原纤维分布于管壁周边伸入肝小叶并包绕肝细胞。天狼星红胶原纤维染色偏振光镜下红色粗密(Ⅰ型胶原纤维)、绿色纤细(Ⅲ型胶原纤维)及黄色疏松(Ⅳ型胶原纤维)胶原纤维主布于汇管区和中央静脉管壁中，胞周亦有极其纤细、点状的红、黄色胶原纤维分布。糖醛酸染色示糖原染色，肝小叶内呈分射状，但以胞外染色为主。
脾组织常规HE染色检查示脾白红髓质分明，无间质增生。天狼星红胶原纤维染色普通光镜下所见与HE染色所见相同，红黄色胶原纤维只分布于间质中，红白内髓质内没有胶原纤维分布。天狼星红胶原纤维染色偏振光镜下见红、黄、绿色胶原纤维只分布于间质内，而且与肝内胶原纤维有所不同。脾内绿色胶原含量明显增加，红白髓质内没有明显胶原纤维分布。
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(2)病理对照组 肝组织常规HE染色检查示失去正常肝小叶样结构，间质增生明显，成纤维细胞等间质细胞在纤维间隔内及周边亦增加，肝小叶为不完全性纤维间隔分隔，肝细胞为胞周纤维所包绕，但未见典型肝硬化再生肝小结，大片肝细胞变性坏死亦不明显，但可见较多的凋亡细胞及空泡变性肝细胞肝内散在分布。天狼星红胶原纤维染色普通光镜低倍镜下可见明显粗大红色胶原纤维分布于汇管区和中央静脉管壁中，不完全性汇管间(Portal-Portal,P-P)纤维间隔主要染为红黄色，间有纤细绿色。高倍镜下可见纤细胶原纤维分布于管壁周边和纤维间隔周边并伸入肝小叶包绕肝细胞。天狼星红胶原纤维染色偏振光镜下可见粗大红黄色的胶原纤维分布于汇管区和中央静脉管壁及不完全性纤维间隔中，胞周亦有点、线状纤细的红色胶原纤维分布。糖醛酸染色示肝内浓染，类似糖原染色，但以胞外染色为主。
脾组织常规HE染色检查示脾红白髓质欠分明，并为纤维组织所包绕，间质增生明显，纤维组织明显增多。天狼星红胶原纤维染色普通光镜下所见与HE染色所见相同。天狼星红胶原纤维染色偏振光镜下见增生胶原纤维组成的纤维间隔包绕脾红白髓质，红白髓质内有红色胶原纤维残存。
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(3)秋水仙碱组 肝组织常规HE染色检查示失去正常肝小叶样结构，肝细胞体积增大，间质增生明显但轻于病理对照组，成纤维细胞等间质细胞在纤维间隔内及周边增加，凋亡细胞及空泡变性肝细胞亦散在分布，但明显多于病理对照组。天狼星红胶原纤维染色普通光镜及偏振光镜所见同病理对照组，但纤维化程度不如病理对照组。糖醛酸染色示肝内浓染，以胞外染色为主。
脾组织常规HE染色检查示脾红白髓质欠分明，并为纤维组织所包绕，间质增生明显，纤维组织明显增多。天狼星红胶原纤维染色普通光镜和偏振光镜下所见与病理对照组相同，纤维化无明显改善。
(4)中药田三七组 肝组织常规HE染色检查示肝脏结构基本正常，肝脏细胞坏死不明显，有脂滴空泡样改变，炎性浸润不明显，成纤维细胞等间质细胞在纤维间隔内散在分布，纤维化减轻，间隔和胞周性纤维化较秋水仙碱组改善，但凋亡细胞及空泡变性肝细胞不明显。残存肝小叶呈放射状在肝内分布。天狼星红胶原纤维染色普通光镜和偏振光镜下所见同秋水仙碱组，但纤维间隔性和胞周性纤维化程度不如病理对照组和秋水仙碱组明显。糖醛酸染色示肝内仍浓染，以胞外染色为主。
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脾组织常规HE染色检查示脾内细胞较秋水仙碱组更丰富，红白髓质较分明，并为纤维组织所包绕，间质增生，纤维组织增多。天狼星红胶原纤维染色普通光镜及偏振光镜下所与HE染色所见相同，纤维化较秋水仙碱组为轻。
2.6 肝组织电镜检查
(1)正常对照组 肝细胞呈多角形，双核或单核，核圆形，但居中央，核仁常为1～2个，胞质中有各种细胞器，线粒体呈杆状卵圆形，基质较深暗，嵴清晰。多组粗面内质网呈平行状排列，核糖体正常，滑面内质网呈囊泡状但不及粗面内质网发达。其他如溶酶体、微体、高尔基复合体等呈正常分布，细胞间连接明显。
(2)病理对照组 大鼠肝脏总体结构欠佳，肝细胞外形不规则，肝细胞核呈异形核变明显，或呈锯齿状，或呈“哑铃”状，或呈“腰果”状，核仁常边集，胞浆中可见呈片状或块状不规则空变坏死灶，线粒体大小不一，个别嵴形变，基质呈均质化，嵴不清晰，部分区域见滑面内质网增生，粗面内质网也扩张，脱颗粒明显，在部分肝细胞之间常有炎细胞浸润，细胞间连接不明显。
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(3)秋水仙碱组 肝脏总体结构良好，基本接近正常对照组。肝细胞外形不规则，核形规则，呈圆形或椭圆形，无明显异型核变，线粒体多数正常，个别亦呈基质均质化，嵴欠清晰，粗面内质网正常，脱颗粒不明显，滑面内质网增生，部分区域可见溶酶体增多，无明显空变或坏死现象，凋亡现象不明显，肝细胞间胶原纤维明显可见，细胞间连接结构不明显。
(4)中药田三七组 肝脏总体结构改变基本如秋水仙碱组的改变，肝细胞核形尚规则，脂滴明显增多并有明显空变成片出现，凋亡现象不明显，肝细胞间胶原纤维不明显，细胞间连接结构亦不明显。
3 讨 论
本研究表明，作为一种钙离子通道阻滞剂(CCB)的中药田三七对二甲基亚硝胺亚急性化学中毒性肝损伤大鼠有防治作用，能增加体重和肝脾重量，改善蛋白代谢和抗氧化能力，改善肝脏病理尤其是肝纤维化，其效果优于秋水仙碱。这与我们以往研究发现的少量田三七便有抗肝纤维化作用的结果是一致的[1]。
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对中药田三七组大鼠肝脾重明显增加、脾体重明显上升的结果，我们认为这是由于二甲基亚硝胺所致的动物模型是一免疫低下尤其是体液免疫明显低下为特征的动物实验模型，田三七具有抗衰老、抗应激、促进代谢和调节免疫功能等作用，因此其肝脏和脾脏均增生而血清球蛋白下降。
一般认为，降血脂药物中有一些是通过阻止血脂来源即通过损伤肝脏，减少血脂分泌入血而达到降低血脂的目的的。文献报道，田三七对血脂有调节作用，即生用三七降血脂而熟三七升血脂[1]。本研究采用生田三七粉浸液对实验大鼠灌服处理，发现其导致肝纤维化明显减轻和血清白、球蛋白比例上升，同时肝细胞内轻度脂肪沉积。究其原因，我们认为，肝细胞内适量脂肪分布(非大泡性肝内脂滴沉积)既表明肝细胞有足够的能量储备，更说明肝细胞处于正常功能(分化)状态。事实上，降脂药物中属于肝细胞微粒体扩增促进剂的药物往往得通过动用肝脏内脂肪，促进肝细胞再生，抑制肝细胞调亡而具有促进肝脏肝脏癌变的作用(非致肝脏癌变作用)。调查研究发现，肝内脂肪浸润和脂肪肝尤非酒精性脂肪肝的肝癌发生率不仅远远低于非脂肪变性的肝病的肝癌发生率，并且还低于正常人肝癌发生率[3，4]。结合田三七有良好的抗肿瘤和抗突变等作用，因此我们认为肝细胞内适度脂肪分布可能是其抗肿瘤作用的表现之一。
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参考文献
1 李兆健.中药三七药理作用研究[J].上海中医药大学、上海市中医药研究院学报，1995，(1)：65
2 竺丽明，金树根，邹奎昌.维生素A类药物对二甲基亚硝胺肝损伤大鼠的干预作用[J].上海医药，1997，(4)：22
3 汤大鸣，许银花，柳新春.超声检查对探讨原发性肝癌在脂肪肝、HBV感染、肝硬化及正常肝中的发生率的应用价值[J].湖南医学，1995，(4)：240
4 黄克诚，范钦萍，苗景芝，等.脂肪肝与非脂肪患者的肝癌发生率比较[J].苏州医学杂志，1995，(3)：31
(收稿日期：2000-02-23), 百拇医药