p53基因在肺癌的治疗及预后中的价值
作者：程鹏 童茂荣
单位：程鹏(河南省洛阳市150中心医院 4710310)； 童茂荣(南京军区南京总医院)
关键词：
江苏医药000325 肺癌是当前世界最常见的恶性肿瘤之一。文献报道p53肿瘤抑制基因的点突变、缺失和灭活在肺部肿瘤的发生和进展过程中甚为广泛。从分子水平研究p53与肺癌发生发展的关系，对肿瘤的诊治及预后估价具有重要的临床意义。本文综述在肺癌治疗和预后判断方面该基因研究的新进展。
许多研究已证实抑癌基因p53作为人类癌症中最常见的突变基因，在DNA致损伤物诱发的凋亡过程中起重要作用；而由于p53失活引起的凋亡过程中的缺陷导致了对治疗(主要是药物化疗)的耐受性的产生。利用反义核酸阻断或以野生型基因替代肿瘤细胞中突变的基因已被认为是基因疗法最基本的应用策略[1]。例如利用腺病毒媒介系统将野生型p53基因结构直接输入癌细胞。野生型p53基因功能的恢复使顺铂在人类非小细胞肺癌(NSCLC)及人结肠癌细胞中的抗癌效应大大增强。该项技术在癌症治疗方面的前景十分广阔，尚在进一步研究中[2]。Perdomo等将两种人类NSCLC细胞系(H226br：含一个纯合p53基因突变，即mt-p53；H226b；含完整p53基因，即wt-p53)植入裸鼠中，发现mt-p53肿瘤实际上比wt-p53的生长得更快，并且用顺铂化疗及放射治疗并没有缩小mt-p53肿瘤尺寸，却使wt-p53肿瘤缩小了将近60%。提示了p53是调节NSCLC的重要因素，也同样验证了纠正遗传学损害可增强化疗效应的想法[3]。在NSCLC癌前及Ⅰ期临床阶段的试验中，通过肿瘤细胞内注射传送基因，即可观察到由此介导的肿瘤退化效应。虽然临床试验尚处早期阶段，但该方法已显露出潜在的前所未有的高治疗指数[4]。国内有作者在人肺腺癌LAX-83裸小鼠模型上，对一种名为“益肺抗瘤饮”的中药制剂进行了对照研究。发现“益肺抗瘤饮”组模型中，该药抑瘤率达45.59%，C-myc蛋白表达及p53蛋白表达发生了改变，并且，Ki-67阳性率低，细胞周期S期细胞数减少，上述数据均有统计学差异[5]。此外，有作者在146例外科手术切除的NSCLC标本中，以免疫组化方法测定p53蛋白表达，而以蚀原冻融小滴植入培养基行药物敏感试验的方法检测体外对5-氟脲嘧啶、顺铂、阿霉素、丝裂霉素、鬼臼碱和硫酸长春地辛的化疗敏感性。经观察，146例标本中，异常p53蛋白蓄积超过10%以上(p53+)的癌细胞的例数为65，占45%；低于10%(p53-)的例数为81，占55%，p53-标本(n＝81)中，对5-氟脲嘧啶化疗敏感的、交界的、耐药的发生率分别为37%(n＝30)、14%(n＝11)、49%(n＝40)，而p53+(n＝65)中，上述三种情况的发生率分别为20%(n＝13)、6%(n＝4)、74%(n＝48)。由此，表明p53-者对5-氟脲嘧啶的敏感性明显超过p53+者(P＝0.011)，尤以腺癌为甚。上述试验提示：NSCLC患者免疫组化测定p53蛋白表达的方法也许有希望成为一些抗癌药(尤其是5-氟脲嘧啶和阿霉素)体外化疗敏感性的指标[6]。
, http://www.100md.com
检测p53基因对预后判断的价值已见多家报道，结果较为接近。Lopez报道，用SSCP检测p53分子水平异常的肺癌患者，其表皮生长因子受体含量(P<0.001)、DNA指数(D.I.)(P<0.017)等显著高于无p53异常的肺癌患者；而G1G0期细胞数比率却低于后者。在正常肺中，生长期的细胞数显著减少(P<0.05)，提示p53分子水平异常致生物活性丧失似乎与肺癌快速生长有关，p53突变等异常可能预示着肺癌的预后不良[7]。Mitsudomi等通过回顾性分析562例NSCLC患者的生存率发现p53基因异常对腺癌是一个有临床意义的独立预后指标，但对全组患者或者其中的鳞癌患者的预后判断并无价值[8]。另外，有作者在研究p53基因与K-ras基因在肺部肿瘤中的突变时，也得出类似的结论[9]。
Komiya对140例Ⅰ-ⅢA期NSCLC的患者的血清p53抗体(p53-Abs)和p53蛋白免疫组化进行了检测。发现全组患者的12.1%和鳞癌(SCC)患者的17.6%血清p53-Abs阳性。在全组患者，无论p53-Abs还是p53蛋白过度表达都不与病人生存率相关；在SCC患者中，p53过度表达而血清p53-Abs阴性时，其生存期明显长于有p53-Abs阳性或p53非表达的肿瘤病人。多变量分析结果发现，血清p53-Abs阳性和p53蛋白过度表达是SCC患者的独立预后因子[10]。
, 百拇医药
需要补充说明的是，肺部同时多发癌症病变现象的平均发生率在所有肺癌中占0.5%[11]。呈现相似组织学特点的多个恶性肿瘤病变同时存在于一个患者肺部时，就很难判断癌肿是不同恶性细胞克隆发展演变而来；还是由单个克隆转移而来。而这对于鉴别多发早期肺癌和转移性癌至关重要。Derick等根据“肺癌发生发展与K-ras和p53基因突变的遗传学异常相关，而这两个基因突变被认为发生在病变转移开始之前”的基本理论认识，利用非放射性同位素PCR-SSCP方法分析了各病变样本突变基因SSCP图型，如果得到的构象图型不一致，则表明其克隆起源不一致，病变是同步发生的早期肺癌；反之，表明病变为一个原发灶转移而来。借此，可判断这类病人的预后和选择适当正确治疗方法，避免了盲目诊治的发生[12]。
总之，p53基因作为一种抑癌基因，其失活与多种肿瘤，特别是与肺癌发生有广泛关联。对肺癌中的p53基因的检测在临床上可用作肺癌早期诊断和预后判断指标之一，但因其突变范围广，尚缺少一种准确、经济、简便的检验手段。由于肺癌发病机制复杂，涉及多种因素，多种遗传基因，因此，造成了基因治疗肺癌存在局限性，有待进一步研究。■
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参考文献：
[1]于益芝，曹雪涛.肿瘤的抑癌基因治疗研究进展.国外医学肿瘤学分册，1996，23：39-43.
[2]Fujiwara T，Inoue F，Tanaka N.Molecular therapy for human cancer with tumor suppressor p53 gene transfer.Gan To Kagaku Ryoho，1998，25：194-200.
[3]Perdomo JA，Naomoto Y，Haisa M，et al.In vivo influence of p53 status on proliferation and chemoradiosensitivity in non-small-cell lung cancer.J Cancer Res Clin Oncol，1998，124：10-18.
, 百拇医药
[4]Roth JA.Gene replacement strategies for lung cancer.Curr Opin Oncol，1998，10：127-132.
[5]许玲，刘嘉湘.益肺抗瘤饮抑制肺癌细胞增殖的实验研究.中国中西医结合杂志，1996，16：486-488.
[6]Higashiyama M，Kodama K，Yokouchi H，et al.Immunohistochemical p53 protein status in nonsmall cell lung cancer is a promising indicator in determining in vitro chemosensitivity to some anticancer drugs.J Surg Oncol，1998，68：19-24.
[7]Lopez Guerrero JA，Bolufer Gilabert P，Marugan de la Concha I，et al.Relationship of p53 molecular abnormalities with flow cytometry and growth factor receptor content in lung cancer.Clin Chim Acta，1998，269：63-76.
, http://www.100md.com
[8]Mitsudomi T，Takahashi T.Genetic alteration of lung cancer as a prognostic marker and its therapeutic implications.Gan To kagaku Ryoho，1997，3：345-352.
[9]Huang CL，Taki T，Adachi M，et al.Mutations of p53 and k-ras genes as prognostic factors for non-small cell lung cancer.Int J Oncol，1998，12：553-563.
[10]Komiya T，Hirashima T，Takada M，et al.Prognostic significance of serum p53 antibodies in squamous cell carcinoma of the lung.Anticancer Res，1997，17：3721-3724.
[11]Freguson MK.Synchronous primary lung cancers.Chest，1993，103：398-400.
[12]Derick HMLau，Bangjie Yang，Ruide Hu，et al.Clonal origin of multiple lung cancers：K-ras and p53 mutations determined by nonradioisotopic singlestand conformatin polymorphism analysis.Diagn Mol Pathol，1997，6：179-184., http://www.100md.com
单位：程鹏(河南省洛阳市150中心医院 4710310)； 童茂荣(南京军区南京总医院)
关键词：
江苏医药000325 肺癌是当前世界最常见的恶性肿瘤之一。文献报道p53肿瘤抑制基因的点突变、缺失和灭活在肺部肿瘤的发生和进展过程中甚为广泛。从分子水平研究p53与肺癌发生发展的关系，对肿瘤的诊治及预后估价具有重要的临床意义。本文综述在肺癌治疗和预后判断方面该基因研究的新进展。
许多研究已证实抑癌基因p53作为人类癌症中最常见的突变基因，在DNA致损伤物诱发的凋亡过程中起重要作用；而由于p53失活引起的凋亡过程中的缺陷导致了对治疗(主要是药物化疗)的耐受性的产生。利用反义核酸阻断或以野生型基因替代肿瘤细胞中突变的基因已被认为是基因疗法最基本的应用策略[1]。例如利用腺病毒媒介系统将野生型p53基因结构直接输入癌细胞。野生型p53基因功能的恢复使顺铂在人类非小细胞肺癌(NSCLC)及人结肠癌细胞中的抗癌效应大大增强。该项技术在癌症治疗方面的前景十分广阔，尚在进一步研究中[2]。Perdomo等将两种人类NSCLC细胞系(H226br：含一个纯合p53基因突变，即mt-p53；H226b；含完整p53基因，即wt-p53)植入裸鼠中，发现mt-p53肿瘤实际上比wt-p53的生长得更快，并且用顺铂化疗及放射治疗并没有缩小mt-p53肿瘤尺寸，却使wt-p53肿瘤缩小了将近60%。提示了p53是调节NSCLC的重要因素，也同样验证了纠正遗传学损害可增强化疗效应的想法[3]。在NSCLC癌前及Ⅰ期临床阶段的试验中，通过肿瘤细胞内注射传送基因，即可观察到由此介导的肿瘤退化效应。虽然临床试验尚处早期阶段，但该方法已显露出潜在的前所未有的高治疗指数[4]。国内有作者在人肺腺癌LAX-83裸小鼠模型上，对一种名为“益肺抗瘤饮”的中药制剂进行了对照研究。发现“益肺抗瘤饮”组模型中，该药抑瘤率达45.59%，C-myc蛋白表达及p53蛋白表达发生了改变，并且，Ki-67阳性率低，细胞周期S期细胞数减少，上述数据均有统计学差异[5]。此外，有作者在146例外科手术切除的NSCLC标本中，以免疫组化方法测定p53蛋白表达，而以蚀原冻融小滴植入培养基行药物敏感试验的方法检测体外对5-氟脲嘧啶、顺铂、阿霉素、丝裂霉素、鬼臼碱和硫酸长春地辛的化疗敏感性。经观察，146例标本中，异常p53蛋白蓄积超过10%以上(p53+)的癌细胞的例数为65，占45%；低于10%(p53-)的例数为81，占55%，p53-标本(n＝81)中，对5-氟脲嘧啶化疗敏感的、交界的、耐药的发生率分别为37%(n＝30)、14%(n＝11)、49%(n＝40)，而p53+(n＝65)中，上述三种情况的发生率分别为20%(n＝13)、6%(n＝4)、74%(n＝48)。由此，表明p53-者对5-氟脲嘧啶的敏感性明显超过p53+者(P＝0.011)，尤以腺癌为甚。上述试验提示：NSCLC患者免疫组化测定p53蛋白表达的方法也许有希望成为一些抗癌药(尤其是5-氟脲嘧啶和阿霉素)体外化疗敏感性的指标[6]。
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检测p53基因对预后判断的价值已见多家报道，结果较为接近。Lopez报道，用SSCP检测p53分子水平异常的肺癌患者，其表皮生长因子受体含量(P<0.001)、DNA指数(D.I.)(P<0.017)等显著高于无p53异常的肺癌患者；而G1G0期细胞数比率却低于后者。在正常肺中，生长期的细胞数显著减少(P<0.05)，提示p53分子水平异常致生物活性丧失似乎与肺癌快速生长有关，p53突变等异常可能预示着肺癌的预后不良[7]。Mitsudomi等通过回顾性分析562例NSCLC患者的生存率发现p53基因异常对腺癌是一个有临床意义的独立预后指标，但对全组患者或者其中的鳞癌患者的预后判断并无价值[8]。另外，有作者在研究p53基因与K-ras基因在肺部肿瘤中的突变时，也得出类似的结论[9]。
Komiya对140例Ⅰ-ⅢA期NSCLC的患者的血清p53抗体(p53-Abs)和p53蛋白免疫组化进行了检测。发现全组患者的12.1%和鳞癌(SCC)患者的17.6%血清p53-Abs阳性。在全组患者，无论p53-Abs还是p53蛋白过度表达都不与病人生存率相关；在SCC患者中，p53过度表达而血清p53-Abs阴性时，其生存期明显长于有p53-Abs阳性或p53非表达的肿瘤病人。多变量分析结果发现，血清p53-Abs阳性和p53蛋白过度表达是SCC患者的独立预后因子[10]。
, 百拇医药
需要补充说明的是，肺部同时多发癌症病变现象的平均发生率在所有肺癌中占0.5%[11]。呈现相似组织学特点的多个恶性肿瘤病变同时存在于一个患者肺部时，就很难判断癌肿是不同恶性细胞克隆发展演变而来；还是由单个克隆转移而来。而这对于鉴别多发早期肺癌和转移性癌至关重要。Derick等根据“肺癌发生发展与K-ras和p53基因突变的遗传学异常相关，而这两个基因突变被认为发生在病变转移开始之前”的基本理论认识，利用非放射性同位素PCR-SSCP方法分析了各病变样本突变基因SSCP图型，如果得到的构象图型不一致，则表明其克隆起源不一致，病变是同步发生的早期肺癌；反之，表明病变为一个原发灶转移而来。借此，可判断这类病人的预后和选择适当正确治疗方法，避免了盲目诊治的发生[12]。
总之，p53基因作为一种抑癌基因，其失活与多种肿瘤，特别是与肺癌发生有广泛关联。对肺癌中的p53基因的检测在临床上可用作肺癌早期诊断和预后判断指标之一，但因其突变范围广，尚缺少一种准确、经济、简便的检验手段。由于肺癌发病机制复杂，涉及多种因素，多种遗传基因，因此，造成了基因治疗肺癌存在局限性，有待进一步研究。■
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参考文献：
[1]于益芝，曹雪涛.肿瘤的抑癌基因治疗研究进展.国外医学肿瘤学分册，1996，23：39-43.
[2]Fujiwara T，Inoue F，Tanaka N.Molecular therapy for human cancer with tumor suppressor p53 gene transfer.Gan To Kagaku Ryoho，1998，25：194-200.
[3]Perdomo JA，Naomoto Y，Haisa M，et al.In vivo influence of p53 status on proliferation and chemoradiosensitivity in non-small-cell lung cancer.J Cancer Res Clin Oncol，1998，124：10-18.
, 百拇医药
[4]Roth JA.Gene replacement strategies for lung cancer.Curr Opin Oncol，1998，10：127-132.
[5]许玲，刘嘉湘.益肺抗瘤饮抑制肺癌细胞增殖的实验研究.中国中西医结合杂志，1996，16：486-488.
[6]Higashiyama M，Kodama K，Yokouchi H，et al.Immunohistochemical p53 protein status in nonsmall cell lung cancer is a promising indicator in determining in vitro chemosensitivity to some anticancer drugs.J Surg Oncol，1998，68：19-24.
[7]Lopez Guerrero JA，Bolufer Gilabert P，Marugan de la Concha I，et al.Relationship of p53 molecular abnormalities with flow cytometry and growth factor receptor content in lung cancer.Clin Chim Acta，1998，269：63-76.
, http://www.100md.com
[8]Mitsudomi T，Takahashi T.Genetic alteration of lung cancer as a prognostic marker and its therapeutic implications.Gan To kagaku Ryoho，1997，3：345-352.
[9]Huang CL，Taki T，Adachi M，et al.Mutations of p53 and k-ras genes as prognostic factors for non-small cell lung cancer.Int J Oncol，1998，12：553-563.
[10]Komiya T，Hirashima T，Takada M，et al.Prognostic significance of serum p53 antibodies in squamous cell carcinoma of the lung.Anticancer Res，1997，17：3721-3724.
[11]Freguson MK.Synchronous primary lung cancers.Chest，1993，103：398-400.
[12]Derick HMLau，Bangjie Yang，Ruide Hu，et al.Clonal origin of multiple lung cancers：K-ras and p53 mutations determined by nonradioisotopic singlestand conformatin polymorphism analysis.Diagn Mol Pathol，1997，6：179-184., http://www.100md.com