作者：宋泽庆 吴斌 汤斌 王胜春
单位：宋泽庆 吴斌(广东省湛江市，广东医学院附属医院524001)；汤斌 王胜春(免疫和微生物教研室)
关键词：肺疾病，阻塞性；粒细胞集落刺激因子；肿瘤坏死因子
实用医学杂志000314 摘 要 目的：探讨G-CSF及TNFα在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用和临床意义。方法：应用ELISA法测定43例COPD急性期患者和39例COPD稳定期患者血清G-CSF和TNFα水平，并同健康正常人对照。结果：COPD急性加重期患者血清G-CSF和TNFα水平显著高于健康对照组及稳定期患者(P<0.05)，血清G-CSF水平分别与TNFα含量及中性粒细胞计数呈正相关(r值分别为0.63和0.74，P值均小于0.05)。结论：G-CSF和TNFα参与COPD发病，监测血清G-CSF和TNFα有助于对患者病情判断及疗效观察。
粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、肿瘤坏死因子(TNFα)是免疫细胞网络中的重要成员，不仅对机体应急防御反应和抗感染的非特异性细胞免疫反应有重要作用，而且参与机体炎症损伤，与许多疾病的发生、发展密切相关
[1]。但关于COPD患者血清G-CSF，TNFα变化及相关性报道尚不多见。为此，本文测定了43例COPD患者血清G-CSF及TNFα水平，探讨它在COPD发病中的作用和临床意义。
1 对象与方法
1.1 对象 所选对象均为本科住院患者，COPD急性加重期患者43例，男24例，女19例，年龄38～76岁，平均58.3岁，均有不同程度的急性肺内感染，其中39例经抗感染、止咳、平喘、氧疗等综合治疗症状缓解，为COPD稳定期患者，男22例，女17例，年龄38～72岁，平均57.9岁。两组病例诊断均符合中华医学会呼吸病学会COPD诊疗规范
[2]。健康对照组40名，均为体格检查健康正常者。
1.2 方法 采集COPD急性加重期患者和稳定期患者外周静脉血，离心后置血清-20℃冰箱待测。G-CSF及TNFα均采用酶联免疫吸附法(ELISA)进行检测。G-CSF试剂盒购自北京邦定生物医学公司，TNFα试剂盒由第四军医大学免疫室提供。同时检测外周血中性粒细胞计数。
1.3 统计学分析 实验数据呈偏态分布，先行对数转换计算
±s，再取反对数行t检验及直线相关分析。
2 结果
2.1 COPD急性加重期、稳定期与健康期G-CSF及TNFα水平 见表1。
表1 COPD急性加重期、稳定期与健康组G-CSF及TNFα水平(
±s) 组别
n
G-CSF(pg/ml)
TNFα(ng/L)
中性粒细胞计数(×10
9/L)
健康对照组
40
46.33±1.40
146.15±2.50
5.02±1.26
急性加重期组
43
126.40±1.47
*△
408.23±4.20
*△
8.32±1.71
*△
稳定期组
39
92.37±1.36
*
217.38±3.90
*
6.12±1.39
*
注：与健康组比较*P<0.05；与稳定期组比较△P<0.05
2.2 COPD病人血清G-CSF与TNFα、中性粒细胞计数相关性 血清G-CSF水平分别与TNFα含量、中性粒细胞计数呈正相关。r值分别为0.63和0.74，P值均小于0.05。
3 讨论
本文结果表明，COPD急性发作期患者血清G-CSF及TNFα水平显著高于健康对照组及COPD稳定期患者，COPD稳定期患者血清G-CSF和TNFα高于健康对照组。在正常情况下，骨髓基质细胞产生少量G-CSF，使外周血细胞维持在正常水平。当机体受到外源性或内源性损害因子作用时，产生大量的炎症介质和细胞因子。COPD患者血清G-CSF水平增高，可能的机制：(1)COPD发作期患者继发肺部细菌感染，通过产生内毒素等刺激单核-巨噬细胞，产生G-CSF，TNFα和IL-1；TNFα，IL-1也可诱导纤维母细胞和内皮细胞产生G-CSF，另一方面，细胞产生的可溶性产物或受细菌感染的肺组织释放产物均可诱导远处细胞产生G-CSF，内毒素等破坏单核-巨噬细胞，影响G-CSF的分解
[3]。(2)应激状态和炎性损伤造成细胞因子网络功能紊乱，多种细胞因子分泌增高，尤其是TNFα诱导纤维母细胞和内皮细胞产生G-CSF；(3)COPD患者均合并不同程度的低白蛋白血症，G-CSF与白蛋白结合相对减少，游离的G-CSF相对增多，可能是COPD稳定期不能长期恢复正常的原因。血清G-CSF的增高可诱导血中性粒细胞趋化、吞噬和杀菌，还可促进粒细胞释放花生四烯酸和白细胞碱性磷酸酶及过氧化氢酶，并介导粒细胞超阴离子的产生和抗体依赖的细胞杀伤性作用
[4]。有研究表明革兰氏阴性杆菌感染肺的过程中，肺是血中TNFα的主要来源，肺能够分泌大量的TNFα则是由于其早期受到剧烈的感染所致。TNFα具有巨噬细胞和中性粒细胞的趋化作用，诱导中性粒细胞的局部浸润，从而启动炎症反应。TNFα可通过增加中性粒细胞吞噬功能及激活氧化物阴离子的产生，使中性粒细胞能更有效地对入侵因子发生应答反应。一旦免疫过程启动，TNFα即诱发氧化爆发，脱颗粒和提高吞噬活性。作为炎症介质，G-CSF及TNFα具有双重作用，适量释放可提高白细胞对病原体清除能力、促进组织修复，但大量释放对机体具有毒性。COPD患者反复发生肺部感染，细菌毒素侵入机体，激活炎症细胞，释放大量炎症介质，G-CSF及TNFα等激活损伤粒细胞、内皮细胞、血小板等，进一步释放氧自由基、脂质代谢产物、溶酶体等介质形成逐级放大的瀑布样链锁反应，诱导肺组织细胞损害。此外，本研究结果表明，外周血中性粒细胞计数与血清中G-CSF及TNFα水平呈正相关，提示G-CSF及TNFα能刺激中粒细胞的释放和产生。
总之，COPD急性期患者血清G-CSF及TNFα增高，随着病情的缓解、稳定，血清G-CSF及TNFα下降，说明G-CSF及TNFα可能参与COPD发病。监测血清G-CSF及TNFα有助于COPD患者病情判断及疗效观察。
4 参考文献
1，樊 娟. 粒细胞集落刺激因子及其受体. 临床血液学杂志，1999，12：138.
2，中华医学会呼吸病学会. 慢性阻塞性肺疾病(COPD)诊疗规范. 中华结核和呼吸杂志，1997，20(4)：199～203.
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