非典型哮喘患者血浆及肺泡灌洗液内皮素和降钙素基因相关肽水平与临床意义
作者：熊瑛 李国平 王宋平 王怀莲 王蜀英
单位：熊瑛(四川省泸州医学院附属医院呼吸内科 646000)；李国平(四川省泸州医学院附属医院呼吸内科 646000)；王宋平(四川省泸州医学院附属医院呼吸内科 646000)；王怀莲(四川省泸州医学院附属医院呼吸内科 646000)；王蜀英(四川省泸州医学院附属医院呼吸内科 646000)
关键词：哮喘；内皮素；降钙素基因相关肽
中国现代医学杂志000313 目的：脊髓损伤是主动脉手术的主要并发症之一，旨在研究卡托普利对家兔肾上主动脉横夹所致脊髓损伤的保护作用。方法：家兔24只，随机分为正常对照组(A)、缺血组(B)和卡托普利组(C)。肾上横夹腹主动脉30 min后松开，C组于横夹前10 min静注卡托普利0.5 mg.kg-1继以0.15 mg.kg-1.h-1持续输注至松开前10 min。余2组静注等容量生理盐水，B组其它操作同C组，A组不夹闭。测定给药前(C-10)、松夹前(C30)和松夹后3 h(R3 h)的血浆丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性，术后观察脊髓形态变化，并测定脊髓组织MDA含量。结果：卡托普利可明显改善脊髓形态学改变；卡托普利可明显降低血中及组织中MDA含量，但不保护SOD活性；脊髓组织MDA含量与形态学改变有明显正相关。结论：卡托普利对家兔肾上主动脉横夹所致脊髓损伤有良好保护作用，其机制与抗氧化作用有关。
, 百拇医药
分类号 R-332
在主动脉的外科手术中常需要横夹主动脉以阻断血流，主动脉横夹可致程度不等的脊髓损伤并发症，如何保护脊髓功能，是人们力求解决的问题。本文旨在研究卡托普利对家免肾上主动脉横夹所致脊髓损伤的保护作用。
1 临床资料
日本雄性大耳白兔24只，体重2.0～2.5kg。随机分为三组。每组8只。A组：正常对照组；B组：缺血组；C组：卡托普利组。1.5%戊巴比妥钠1.5mg.kg-1静脉麻醉后气管切开，气管插管，以DH-140型动物呼吸机(浙江医科大学医学仪器实验厂生产)控制呼吸(潮气量12mg.kg-1，呼吸频率30次/min，呼吸比2∶1)，并经耳缘静脉滴注平衡盐液10mg.kg-1.h-1。保持动物肛温38℃左右。参照Naslund法[1]建立脊髓缺血模型,左侧腹切口,经腹膜外钝性分离,显露腹主动脉后，紧靠左肾上以弹性硅胶管松套腹主动脉待用。C组静脉缓注卡托普利(Cap) 0.5mg.kg-1，继以微量输液泵(英国Grasedy公司生产)持续输注0.001%的Cap 0.15mg.kg-1.h-1,A组B组静注等容量生理盐水,给药10min后，B组、C组拉紧主动脉套管，阻断主动脉血流，阻断30min后松开，松开前10min停用Cap。分别于给药前(C-10)、松开主动脉前(C30)和松开后3h(R3h)取动物颈内静脉血2ml以硫代巴比妥酸法测定血浆MDA含量，以黄嘌吟氧化酶法测定SOD活性(试剂均购自南京建成生物工程研究所)。再灌3h后，切开椎板，取腰膨大处脊髓0.5g加冷生理盐水4.5ml，按要求匀浆后取上清，测定MDA含量，另取T10和L3水平脊髓，分别以3%戊二醛和10%甲醛固定，作电镜和光镜观察。参照病理评分标准[5]，光镜下对动物病理变化进行评分,1级＝正常脊髓;2级＝偶有神经元坏死;3级＝大量神经元坏死。
, 百拇医药
计量资料以
±s表示，组间比较采用t检验。病理评分采用秩和检验，P<0.05为有显著性差异。
2 结果
2.1 血中MDA变化
B组动物主动脉横夹后，血中MDA浓度较横夹前及A组明显升高(P<0.01，P<0.05)，松开后3h，血中MDA有所回降，但仍明显高于横夹前及A组(均P<0.05)。C组动物横夹后，MDA较横夹前明显升高，但松开后3h，MDA回降至基础水平，其横夹及松夹后的MDA浓度均显著低于B组值(均P<0.05)。
2.2 血中SOD活性变化
主动脉横夹及松夹后B组、C组SOD活性较横夹前及A组均明显降低(P<0.01或P<0.05)，C组横夹及松夹后的均值虽略高于B组同时相值，但两组相比无显著性。
, 百拇医药
2.3 脊髓均浆MDA浓度变化
B组动物脊髓匀浆中MDA含量显著高于A组值，C组脊髓匀浆MDA含量与A组无显著差异，但明显低于B组。
2.4 病理学变化
主动脉横夹及松夹后，B组动物脊髓光镜下可见大量神经元核皱缩，核溶解，髓鞘肿胀；C组动物脊髓病理改变较轻，偶见神经元胞浆颗粒变性或空泡变性，两组病理评分有显著差异(P<0.01)。电镜观察结果：B组大量线粒体扩张，嵴减少，空泡变性，内质网扩张。核仁解体，核染色质象消失，细胞外膜有缺损，轴突水肿，脱髓鞘，C组变化较轻，胞核形态正常，胞浆内有线粒体扩张，变泡变性。
2.5 相关分析
每只动物脊髓切片任意取10个视野作病理评分，取其均数，与动物血中MDA和匀浆中MDA浓度作相关分析(血中MDA浓度为C30与R3h的合计值)，结果发现血中MDA与病理评分无明显相关性，匀浆中MDA与病理评分相关系数r=0.79(P<0.05)，表明匀浆MDA浓度与脊髓损伤呈明显相关性。
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3 讨论
本实验中我们采用主动脉横夹脊髓损伤模型，因为这种模型重复性好，操作简便，同时它代表了临床并不罕见的主动脉手术过程，因而对其研究更具实用意义。在实验中我们保护动物体温恒定，实验结果表明，卡托普利对肾上主动脉横夹所致脊髓损伤有较好保护作用，它可能明显减轻脊髓病理改变。
本实验结果发现脊髓MDA含量与脊髓病理变化明显相关，这一结果进一步证实了过氧化反应在主动脉横夹所致脊髓损伤中的病理机制。血中MDA与病理变化无明显相关，可能是因为脊髓只是主动脉横夹后缺血组织的一部分，而血中的MDA反映整个机体过氧化反应水平。
实验结果还显示，卡托普利有良好的抗氧化作用，它不仅能明显减少血中MDA浓度，也明显抑制脊髓MDA含量的升高，从而对脊髓产生保护作用。药代动力学表明卡托普利不能透过血脑屏障，但氧自由基具有透脂性并能破坏膜结构，卡托普利可能通过清除外周氧自由基而对中枢产生作用。
, 百拇医药
卡托普利的抗氧化作用已得到大多数实验证实，Demiryurek等[3]的实验表明，卡托普利对活化白细胞和黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶两种自由基生成系统都有抑制作用。本实验进一步证实了卡托普利的抗氧化作用，但结果发现卡托普利并不能保护SOD活性，说明其抗氧化作用不是依赖SOD来完成。有作者认为卡托普利的清除自由基与其含有巯基(—SH)有关[4]，具体机制尚不清楚。总之，卡托普利对肾上主动脉横夹所致脊髓损伤有良好保护作用，这种保护作用与其抗氧化作用有关。
参考文献：
1 Naslund TC,Hollier LH,Money SR,et al.Protecting the ischemic spinal cord during aortic clamping.The influence of anesthetics and hypothermia.Ann Surg,1992;215:409～415
, 百拇医药
2 Simpson JI,Eider TR,Schiff GA,et al.Intrathecal magnesium sulfate protects the spinal cord from ischemic injury during thoracic aortic cross-clamping.Anesthesiology,1994;81:1493～1499
3 Demiryurek AT,Wainwright CL,Wadsworth RM,et al.Characterization of a method for the detection of the drugs with free radical scavenging activity using procine leukocytes.J pharmactl Toxicol Methods,1994;23(1):35～40
4 Westlin W,Mullane K.Does captopril attenuate reperfusion-induced myocardial dysfunction by scavenging free radicals.Circulation,1988;77(suppl 1):30～99
(1999-04-05收稿), 百拇医药
单位：熊瑛(四川省泸州医学院附属医院呼吸内科 646000)；李国平(四川省泸州医学院附属医院呼吸内科 646000)；王宋平(四川省泸州医学院附属医院呼吸内科 646000)；王怀莲(四川省泸州医学院附属医院呼吸内科 646000)；王蜀英(四川省泸州医学院附属医院呼吸内科 646000)
关键词：哮喘；内皮素；降钙素基因相关肽
中国现代医学杂志000313 目的：脊髓损伤是主动脉手术的主要并发症之一，旨在研究卡托普利对家兔肾上主动脉横夹所致脊髓损伤的保护作用。方法：家兔24只，随机分为正常对照组(A)、缺血组(B)和卡托普利组(C)。肾上横夹腹主动脉30 min后松开，C组于横夹前10 min静注卡托普利0.5 mg.kg-1继以0.15 mg.kg-1.h-1持续输注至松开前10 min。余2组静注等容量生理盐水，B组其它操作同C组，A组不夹闭。测定给药前(C-10)、松夹前(C30)和松夹后3 h(R3 h)的血浆丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性，术后观察脊髓形态变化，并测定脊髓组织MDA含量。结果：卡托普利可明显改善脊髓形态学改变；卡托普利可明显降低血中及组织中MDA含量，但不保护SOD活性；脊髓组织MDA含量与形态学改变有明显正相关。结论：卡托普利对家兔肾上主动脉横夹所致脊髓损伤有良好保护作用，其机制与抗氧化作用有关。
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分类号 R-332
在主动脉的外科手术中常需要横夹主动脉以阻断血流，主动脉横夹可致程度不等的脊髓损伤并发症，如何保护脊髓功能，是人们力求解决的问题。本文旨在研究卡托普利对家免肾上主动脉横夹所致脊髓损伤的保护作用。
1 临床资料
日本雄性大耳白兔24只，体重2.0～2.5kg。随机分为三组。每组8只。A组：正常对照组；B组：缺血组；C组：卡托普利组。1.5%戊巴比妥钠1.5mg.kg-1静脉麻醉后气管切开，气管插管，以DH-140型动物呼吸机(浙江医科大学医学仪器实验厂生产)控制呼吸(潮气量12mg.kg-1，呼吸频率30次/min，呼吸比2∶1)，并经耳缘静脉滴注平衡盐液10mg.kg-1.h-1。保持动物肛温38℃左右。参照Naslund法[1]建立脊髓缺血模型,左侧腹切口,经腹膜外钝性分离,显露腹主动脉后，紧靠左肾上以弹性硅胶管松套腹主动脉待用。C组静脉缓注卡托普利(Cap) 0.5mg.kg-1，继以微量输液泵(英国Grasedy公司生产)持续输注0.001%的Cap 0.15mg.kg-1.h-1,A组B组静注等容量生理盐水,给药10min后，B组、C组拉紧主动脉套管，阻断主动脉血流，阻断30min后松开，松开前10min停用Cap。分别于给药前(C-10)、松开主动脉前(C30)和松开后3h(R3h)取动物颈内静脉血2ml以硫代巴比妥酸法测定血浆MDA含量，以黄嘌吟氧化酶法测定SOD活性(试剂均购自南京建成生物工程研究所)。再灌3h后，切开椎板，取腰膨大处脊髓0.5g加冷生理盐水4.5ml，按要求匀浆后取上清，测定MDA含量，另取T10和L3水平脊髓，分别以3%戊二醛和10%甲醛固定，作电镜和光镜观察。参照病理评分标准[5]，光镜下对动物病理变化进行评分,1级＝正常脊髓;2级＝偶有神经元坏死;3级＝大量神经元坏死。
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计量资料以
±s表示，组间比较采用t检验。病理评分采用秩和检验，P<0.05为有显著性差异。2 结果
2.1 血中MDA变化
B组动物主动脉横夹后，血中MDA浓度较横夹前及A组明显升高(P<0.01，P<0.05)，松开后3h，血中MDA有所回降，但仍明显高于横夹前及A组(均P<0.05)。C组动物横夹后，MDA较横夹前明显升高，但松开后3h，MDA回降至基础水平，其横夹及松夹后的MDA浓度均显著低于B组值(均P<0.05)。
2.2 血中SOD活性变化
主动脉横夹及松夹后B组、C组SOD活性较横夹前及A组均明显降低(P<0.01或P<0.05)，C组横夹及松夹后的均值虽略高于B组同时相值，但两组相比无显著性。
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2.3 脊髓均浆MDA浓度变化
B组动物脊髓匀浆中MDA含量显著高于A组值，C组脊髓匀浆MDA含量与A组无显著差异，但明显低于B组。
2.4 病理学变化
主动脉横夹及松夹后，B组动物脊髓光镜下可见大量神经元核皱缩，核溶解，髓鞘肿胀；C组动物脊髓病理改变较轻，偶见神经元胞浆颗粒变性或空泡变性，两组病理评分有显著差异(P<0.01)。电镜观察结果：B组大量线粒体扩张，嵴减少，空泡变性，内质网扩张。核仁解体，核染色质象消失，细胞外膜有缺损，轴突水肿，脱髓鞘，C组变化较轻，胞核形态正常，胞浆内有线粒体扩张，变泡变性。
2.5 相关分析
每只动物脊髓切片任意取10个视野作病理评分，取其均数，与动物血中MDA和匀浆中MDA浓度作相关分析(血中MDA浓度为C30与R3h的合计值)，结果发现血中MDA与病理评分无明显相关性，匀浆中MDA与病理评分相关系数r=0.79(P<0.05)，表明匀浆MDA浓度与脊髓损伤呈明显相关性。
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3 讨论
本实验中我们采用主动脉横夹脊髓损伤模型，因为这种模型重复性好，操作简便，同时它代表了临床并不罕见的主动脉手术过程，因而对其研究更具实用意义。在实验中我们保护动物体温恒定，实验结果表明，卡托普利对肾上主动脉横夹所致脊髓损伤有较好保护作用，它可能明显减轻脊髓病理改变。
本实验结果发现脊髓MDA含量与脊髓病理变化明显相关，这一结果进一步证实了过氧化反应在主动脉横夹所致脊髓损伤中的病理机制。血中MDA与病理变化无明显相关，可能是因为脊髓只是主动脉横夹后缺血组织的一部分，而血中的MDA反映整个机体过氧化反应水平。
实验结果还显示，卡托普利有良好的抗氧化作用，它不仅能明显减少血中MDA浓度，也明显抑制脊髓MDA含量的升高，从而对脊髓产生保护作用。药代动力学表明卡托普利不能透过血脑屏障，但氧自由基具有透脂性并能破坏膜结构，卡托普利可能通过清除外周氧自由基而对中枢产生作用。
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卡托普利的抗氧化作用已得到大多数实验证实，Demiryurek等[3]的实验表明，卡托普利对活化白细胞和黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶两种自由基生成系统都有抑制作用。本实验进一步证实了卡托普利的抗氧化作用，但结果发现卡托普利并不能保护SOD活性，说明其抗氧化作用不是依赖SOD来完成。有作者认为卡托普利的清除自由基与其含有巯基(—SH)有关[4]，具体机制尚不清楚。总之，卡托普利对肾上主动脉横夹所致脊髓损伤有良好保护作用，这种保护作用与其抗氧化作用有关。
参考文献：
1 Naslund TC,Hollier LH,Money SR,et al.Protecting the ischemic spinal cord during aortic clamping.The influence of anesthetics and hypothermia.Ann Surg,1992;215:409～415
, 百拇医药
2 Simpson JI,Eider TR,Schiff GA,et al.Intrathecal magnesium sulfate protects the spinal cord from ischemic injury during thoracic aortic cross-clamping.Anesthesiology,1994;81:1493～1499
3 Demiryurek AT,Wainwright CL,Wadsworth RM,et al.Characterization of a method for the detection of the drugs with free radical scavenging activity using procine leukocytes.J pharmactl Toxicol Methods,1994;23(1):35～40
4 Westlin W,Mullane K.Does captopril attenuate reperfusion-induced myocardial dysfunction by scavenging free radicals.Circulation,1988;77(suppl 1):30～99
(1999-04-05收稿), 百拇医药