针灸治疗窒息脑瘫幼鼠的实验研究
作者：丁春华 刘焕荣 张少丹 凌亦凌 裴林
单位：(河北医科大学基础医学院病理生理学教研室 石家庄 050017)
关键词：脑瘫；药物；针刺；治疗应用；大鼠
河北医科大学学报000311
中图号 R245▲
窒息后脑瘫患儿的治疗及功能恢复是目前世界医学界研究的重点课题，针灸治疗临床效果较满意，但其作用机理以及对脑细胞功能恢复的影响研究甚少。 本研究利用新生大鼠窒息后实验性脑瘫动物模型，观察针刺治疗窒息脑瘫幼鼠后在脑部血流量、脑细胞水肿、脑组织中一氧化氮(nitric oxide, NO)水平， 以及氧自由基损伤产物丙二醛(malondialdehyde, MDA)等水平变化，观察针刺治疗的效果。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 动物分组：新生7日龄Sprague-Dawley大鼠92只，体质量11～17 g，由河北医科大学实验动物中心提供，随机分为2大组：(1)窒息脑瘫组(64只)。制备幼鼠窒息脑瘫模型，再分为2小组：①未针刺组：窒息脑瘫后不做其他处理，以母鼠哺育，分别在即刻(12只)、第2 d(10只)、第4 d(10只)3个时间点测头部血流量后断头取脑，做各项指标检查。②针刺组：幼鼠在同样饲养条件下，每天针刺1次，再按上述时间点断头取脑。(2)对照组(28只)：幼鼠从动物中心取回后即刻(8只)、第2 d(10只)、第4 d(10只)直接测头部血流量后断头取脑，做各项指标检查。
1.2 方法：新生大鼠清醒局麻状态下，行右侧颈总动脉结扎术，再将动物置于恒温密闭玻璃容器中，通以8 %氧气+92 %氮气的混合气体，2 h后取出，观察幼鼠表现，然后分组断头取脑。根据脑组织干湿质量之比，按=[(湿重-干重)/湿重]×100 %计算脑组织含水量。将激光多普勒微循环血流计探头置于幼鼠头部百会穴部位，测定针刺前后的幼鼠头部血流量变化。采用硝酸还原酶法检测脑组织中NO水平。采用硫代巴比妥酸分光光度法测定脑组织中MDA水平。针刺方法采用“刺血通经健脑法”，选与患儿相对应的幼鼠的脑聪三线穴、大椎、涌泉等穴，自上而下，由左至右迅速针刺，微出血为宜，留针15 min。全部数据输入微机，Origin50 软件进行统计学处理，配对t检验进行分析，数据用
±s表示。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 幼鼠窒息脑瘫后与对照组比较：在窒息实验条件下，取出幼鼠后，可见其动作迟缓乏力，站立不稳，左侧肢体偏瘫等体征。测定头部血流量降低了42.10 %(134.258±6.410) mV，至第2～4 d仍低于正常血流量的38.02 %。脑组织含水量约增加了1.08 %(88.259±0.297) %，第2 d仍高于对照组，第4 d恢复正常(86.125±0.325) %。 脑组织匀浆中NO水平在窒息后即刻开始升高，第2 d达高峰，约增加了1.7倍(53.629±17.505) μmol/L，第4 d仍高于正常对照组。MDA水平在窒息后即明显升高，约增高了72.06 %(7.280±1.380) μmol/L，第4 d时仍明显高于正常对照组30.34 %(5.293±0.678) μmol/L。
2.2 幼鼠窒息脑瘫后针刺治疗前后比较：结果显示针刺后，幼鼠活动增多，协调性增强，头部血流量较未针刺组增加了约1.3倍(321.5±20.578) mV。脑组织水肿于第2 d较针刺组下降了约0.642 %，统计学比较有显著差异(P<0.05)。针刺后能使NO及MDA水平于第2 d开始下降，分别较未针刺组降低了21.21 %及38.09 %，第4 d仍低于未针刺组P<0.05。
, http://www.100md.com
3 讨 论
本实验采用幼鼠窒息脑瘫模型， 较好地反映了围产期窒息所致脑性瘫痪的病理生理改变,并进一步将针灸治疗方法应用于此动物模型。
3.1 幼鼠窒息脑瘫后头部血流量下降，脑组织水肿加重，脑组织中NO及MDA水平增高。过量的NO能与超氧阴离子O.2结合，引起脂质过氧化和细胞毒性，导致神经细胞功能紊乱甚至死亡。脂质过氧化代谢产物MDA明显增高，与脑组织水肿及脑头部血流量下降相伴行，说明过量的NO及氧自由基损伤参与并加重了窒息脑瘫幼鼠的病理损伤过程。
3.2 针刺后头部血流量增加，脑组织水肿减轻，鼠脑中NO及MDA水平明显下降。针刺采用“刺血通经健脑法”，观察到针刺后能减轻脑组织水肿，降低鼠脑中NO 及MDA水平，使自由基损伤明显减轻，幼鼠动作协调、活泼，恢复较快。提示针刺治疗能够促进脑部血液循环，提高神经兴奋性，促进神经传导功能，减轻脑水肿，清除氧自由基，减弱缺血再灌注后氧自由基及NO 对神经细胞的损伤作用，减少后遗症的发生，促进脑瘫肢体的功能恢复。■
国家中医药管理局科研基金资助项目(No.978004)
收稿日期：2000-03-31, http://www.100md.com
单位：(河北医科大学基础医学院病理生理学教研室 石家庄 050017)
关键词：脑瘫；药物；针刺；治疗应用；大鼠
河北医科大学学报000311
中图号 R245▲
窒息后脑瘫患儿的治疗及功能恢复是目前世界医学界研究的重点课题，针灸治疗临床效果较满意，但其作用机理以及对脑细胞功能恢复的影响研究甚少。 本研究利用新生大鼠窒息后实验性脑瘫动物模型，观察针刺治疗窒息脑瘫幼鼠后在脑部血流量、脑细胞水肿、脑组织中一氧化氮(nitric oxide, NO)水平， 以及氧自由基损伤产物丙二醛(malondialdehyde, MDA)等水平变化，观察针刺治疗的效果。
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1 材料和方法
1.1 动物分组：新生7日龄Sprague-Dawley大鼠92只，体质量11～17 g，由河北医科大学实验动物中心提供，随机分为2大组：(1)窒息脑瘫组(64只)。制备幼鼠窒息脑瘫模型，再分为2小组：①未针刺组：窒息脑瘫后不做其他处理，以母鼠哺育，分别在即刻(12只)、第2 d(10只)、第4 d(10只)3个时间点测头部血流量后断头取脑，做各项指标检查。②针刺组：幼鼠在同样饲养条件下，每天针刺1次，再按上述时间点断头取脑。(2)对照组(28只)：幼鼠从动物中心取回后即刻(8只)、第2 d(10只)、第4 d(10只)直接测头部血流量后断头取脑，做各项指标检查。
1.2 方法：新生大鼠清醒局麻状态下，行右侧颈总动脉结扎术，再将动物置于恒温密闭玻璃容器中，通以8 %氧气+92 %氮气的混合气体，2 h后取出，观察幼鼠表现，然后分组断头取脑。根据脑组织干湿质量之比，按=[(湿重-干重)/湿重]×100 %计算脑组织含水量。将激光多普勒微循环血流计探头置于幼鼠头部百会穴部位，测定针刺前后的幼鼠头部血流量变化。采用硝酸还原酶法检测脑组织中NO水平。采用硫代巴比妥酸分光光度法测定脑组织中MDA水平。针刺方法采用“刺血通经健脑法”，选与患儿相对应的幼鼠的脑聪三线穴、大椎、涌泉等穴，自上而下，由左至右迅速针刺，微出血为宜，留针15 min。全部数据输入微机，Origin50 软件进行统计学处理，配对t检验进行分析，数据用
±s表示。, 百拇医药
2 结 果
2.1 幼鼠窒息脑瘫后与对照组比较：在窒息实验条件下，取出幼鼠后，可见其动作迟缓乏力，站立不稳，左侧肢体偏瘫等体征。测定头部血流量降低了42.10 %(134.258±6.410) mV，至第2～4 d仍低于正常血流量的38.02 %。脑组织含水量约增加了1.08 %(88.259±0.297) %，第2 d仍高于对照组，第4 d恢复正常(86.125±0.325) %。 脑组织匀浆中NO水平在窒息后即刻开始升高，第2 d达高峰，约增加了1.7倍(53.629±17.505) μmol/L，第4 d仍高于正常对照组。MDA水平在窒息后即明显升高，约增高了72.06 %(7.280±1.380) μmol/L，第4 d时仍明显高于正常对照组30.34 %(5.293±0.678) μmol/L。
2.2 幼鼠窒息脑瘫后针刺治疗前后比较：结果显示针刺后，幼鼠活动增多，协调性增强，头部血流量较未针刺组增加了约1.3倍(321.5±20.578) mV。脑组织水肿于第2 d较针刺组下降了约0.642 %，统计学比较有显著差异(P<0.05)。针刺后能使NO及MDA水平于第2 d开始下降，分别较未针刺组降低了21.21 %及38.09 %，第4 d仍低于未针刺组P<0.05。
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3 讨 论
本实验采用幼鼠窒息脑瘫模型， 较好地反映了围产期窒息所致脑性瘫痪的病理生理改变,并进一步将针灸治疗方法应用于此动物模型。
3.1 幼鼠窒息脑瘫后头部血流量下降，脑组织水肿加重，脑组织中NO及MDA水平增高。过量的NO能与超氧阴离子O.2结合，引起脂质过氧化和细胞毒性，导致神经细胞功能紊乱甚至死亡。脂质过氧化代谢产物MDA明显增高，与脑组织水肿及脑头部血流量下降相伴行，说明过量的NO及氧自由基损伤参与并加重了窒息脑瘫幼鼠的病理损伤过程。
3.2 针刺后头部血流量增加，脑组织水肿减轻，鼠脑中NO及MDA水平明显下降。针刺采用“刺血通经健脑法”，观察到针刺后能减轻脑组织水肿，降低鼠脑中NO 及MDA水平，使自由基损伤明显减轻，幼鼠动作协调、活泼，恢复较快。提示针刺治疗能够促进脑部血液循环，提高神经兴奋性，促进神经传导功能，减轻脑水肿，清除氧自由基，减弱缺血再灌注后氧自由基及NO 对神经细胞的损伤作用，减少后遗症的发生，促进脑瘫肢体的功能恢复。■
国家中医药管理局科研基金资助项目(No.978004)
收稿日期：2000-03-31, http://www.100md.com