小鼠巨噬细胞细胞化学染色研究
作者：王彩云 魏艳静 王贵娟 武惠珍 韦再华
单位：王彩云(河北医科大学第二医院)；魏艳静 王贵娟 武惠珍 韦再华(河北医科大学实验诊断教研室 石家庄 050017)
关键词：巨噬细胞；组织化学；小鼠
河北医科大学学报000330
中图号 R446.8▲
目前对于巨噬细胞在机体防御中的作用研究较多,但巨噬细胞细胞化学的研究资料国内未见报道。采用4 %淀粉生理盐水溶液注入昆明系小鼠腹腔,3 d后抽取腹腔液作为巨噬细胞的来源,制备涂片后进行了17种细胞化学染色研究。现报道如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源:取昆明系小鼠2只,无菌注射4 %淀粉生理盐水溶液2 ml,第3 d消毒小鼠腹部,打开腹腔,以注射器向腹腔内注入少量生理盐水,用滴管吸取腹腔液注入试管,再重复冲洗1次,离心腹腔液,弃上清,向沉淀中加入少量同系小鼠血清,混匀,用沉渣作涂片,按染色方法要求固定染色。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 酶类:过氧化物酶染色(POX,Washburn法),琥珀酸脱氢酶染色(SDH,Hayhoe法),α-乙酸萘酯酶染色(α-NAE,改良Braunstein法),酸性酯酶染色(ANAE,改良müller法),酸性磷酸酶染色(ACP,Gomori铅法),碱性磷酸酶染色(ALP,Gomori钙钴法),5′-核苷酸酶染色(5′-N,Wachstein法)。
1.2.2 糖类:过碘酸-Schiff反应(PAS,改良Wislock法),阿利新蓝染色(改良Lison法),甲苯胺蓝染色(Kramer法),罗达尼蓝染色(改良Kass法)。
1.2.3 脂类:油红O染色(ORO,Catalan法),酸性氧化苏木素染色(改良Baker法),缩醛磷脂酶染色(Hayes法),苏丹黑B染色(SBB,Sheehan法)。
, 百拇医药
1.2.4 核糖核酸染色(甲绿派若宁法)。
1.2.5 无机盐类:铁染色(改良Perls法)。
2 结 果
17种巨噬细胞化学染色见表1。
表1 巨噬细胞17种细胞化学染色结果 染色技术
结果
染色技术
结果
过氧化物酶染色(POX)
-
阿利新蓝染色
, 百拇医药
-
琥珀酸脱氢酶染色(SDH)
-
甲苯胺蓝染色
-
α-乙酸萘酯酶染色(α-NAE)
+
苏丹黑B染色(SBB)
-
酸性酯酶染色(ANAE)
+
油红O染色(ORO)
, 百拇医药
-
酸性磷酸酶染色(ACP)
+
酸性氧化苏木素
+
碱性磷酸酶染色(ALP)
+
缩醛磷酯染色
-
5′-核苷酸酶染色(5′-N)
-
核糖核酸(RNA)
+
, 百拇医药
过碘酸-Schiff反应(PAS)
+
铁染色
-
罗达尼蓝染色
+
3 讨 论
小鼠17种巨噬细胞细胞化学染色结果显示巨噬细胞含有多种水解酶类,α-NAE、ANAE、ACP、ALP均阳性,氧化还原酶类均阴性。含有糖原和酸性粘多糖,过碘酸-Schiff反应阳性,罗达尼蓝染色阳性。含有磷脂,酸性氧化苏木素染色阳性。但不显示中性脂肪,ORO阴性。显示核糖核酸的甲绿派若宁染色阳性。
巨噬细胞属于成熟单核细胞,在细胞化学染色上基本相同,但略有差异,单核细胞POX阳性、弱阳性或阴性,而小鼠腹腔巨噬细胞则是阴性。脱氢酶类中,单核细胞SDH阳性,而巨噬细胞为阴性。水解酶类中α-NAE、ANAE、ACP巨噬细胞和单核细胞均为阳性,仅ALP染色不同,单核细胞ALP为阴性,巨噬细胞为阳性。糖类中单核细胞和小鼠腹腔巨噬细胞的过碘酸-Schiff反应和罗达尼蓝染色均阳性。脂类中,单核细胞SBB为阳性,巨噬细胞SBB为阴性,其它脂类染色均一致。核糖核酸两者均阳性。铁染色两者均阴性。
单核细胞和巨噬细胞同属单核吞噬细胞系统,都具有高度吞噬能力,其生物学特性、功能相同,细胞化学染色特点略有不同,主要表现在POX和ALP,POX单核细胞呈阳性或阴性,而巨噬细胞则阴性。ALP单核细胞阴性,而巨噬细胞阳性。■
收稿日期：1999-09-24, 百拇医药
单位：王彩云(河北医科大学第二医院)；魏艳静 王贵娟 武惠珍 韦再华(河北医科大学实验诊断教研室 石家庄 050017)
关键词：巨噬细胞；组织化学；小鼠
河北医科大学学报000330
中图号 R446.8▲
目前对于巨噬细胞在机体防御中的作用研究较多,但巨噬细胞细胞化学的研究资料国内未见报道。采用4 %淀粉生理盐水溶液注入昆明系小鼠腹腔,3 d后抽取腹腔液作为巨噬细胞的来源,制备涂片后进行了17种细胞化学染色研究。现报道如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源:取昆明系小鼠2只,无菌注射4 %淀粉生理盐水溶液2 ml,第3 d消毒小鼠腹部,打开腹腔,以注射器向腹腔内注入少量生理盐水,用滴管吸取腹腔液注入试管,再重复冲洗1次,离心腹腔液,弃上清,向沉淀中加入少量同系小鼠血清,混匀,用沉渣作涂片,按染色方法要求固定染色。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 酶类:过氧化物酶染色(POX,Washburn法),琥珀酸脱氢酶染色(SDH,Hayhoe法),α-乙酸萘酯酶染色(α-NAE,改良Braunstein法),酸性酯酶染色(ANAE,改良müller法),酸性磷酸酶染色(ACP,Gomori铅法),碱性磷酸酶染色(ALP,Gomori钙钴法),5′-核苷酸酶染色(5′-N,Wachstein法)。
1.2.2 糖类:过碘酸-Schiff反应(PAS,改良Wislock法),阿利新蓝染色(改良Lison法),甲苯胺蓝染色(Kramer法),罗达尼蓝染色(改良Kass法)。
1.2.3 脂类:油红O染色(ORO,Catalan法),酸性氧化苏木素染色(改良Baker法),缩醛磷脂酶染色(Hayes法),苏丹黑B染色(SBB,Sheehan法)。
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1.2.4 核糖核酸染色(甲绿派若宁法)。
1.2.5 无机盐类:铁染色(改良Perls法)。
2 结 果
17种巨噬细胞化学染色见表1。
表1 巨噬细胞17种细胞化学染色结果 染色技术
结果
染色技术
结果
过氧化物酶染色(POX)
-
阿利新蓝染色
, 百拇医药
-
琥珀酸脱氢酶染色(SDH)
-
甲苯胺蓝染色
-
α-乙酸萘酯酶染色(α-NAE)
+
苏丹黑B染色(SBB)
-
酸性酯酶染色(ANAE)
+
油红O染色(ORO)
, 百拇医药
-
酸性磷酸酶染色(ACP)
+
酸性氧化苏木素
+
碱性磷酸酶染色(ALP)
+
缩醛磷酯染色
-
5′-核苷酸酶染色(5′-N)
-
核糖核酸(RNA)
+
, 百拇医药
过碘酸-Schiff反应(PAS)
+
铁染色
-
罗达尼蓝染色
+
3 讨 论
小鼠17种巨噬细胞细胞化学染色结果显示巨噬细胞含有多种水解酶类,α-NAE、ANAE、ACP、ALP均阳性,氧化还原酶类均阴性。含有糖原和酸性粘多糖,过碘酸-Schiff反应阳性,罗达尼蓝染色阳性。含有磷脂,酸性氧化苏木素染色阳性。但不显示中性脂肪,ORO阴性。显示核糖核酸的甲绿派若宁染色阳性。
巨噬细胞属于成熟单核细胞,在细胞化学染色上基本相同,但略有差异,单核细胞POX阳性、弱阳性或阴性,而小鼠腹腔巨噬细胞则是阴性。脱氢酶类中,单核细胞SDH阳性,而巨噬细胞为阴性。水解酶类中α-NAE、ANAE、ACP巨噬细胞和单核细胞均为阳性,仅ALP染色不同,单核细胞ALP为阴性,巨噬细胞为阳性。糖类中单核细胞和小鼠腹腔巨噬细胞的过碘酸-Schiff反应和罗达尼蓝染色均阳性。脂类中,单核细胞SBB为阳性,巨噬细胞SBB为阴性,其它脂类染色均一致。核糖核酸两者均阳性。铁染色两者均阴性。
单核细胞和巨噬细胞同属单核吞噬细胞系统,都具有高度吞噬能力,其生物学特性、功能相同,细胞化学染色特点略有不同,主要表现在POX和ALP,POX单核细胞呈阳性或阴性,而巨噬细胞则阴性。ALP单核细胞阴性,而巨噬细胞阳性。■
收稿日期：1999-09-24, 百拇医药