E-钙粘附蛋白、α-连接蛋白与结肠癌淋巴结转移的关系
作者：陈文书 杨代兴 张鹏飞 陈水平
单位：福建医科大学 病理解剖学教研室,福州 350004
关键词：E-钙粘附蛋白；α-连接蛋白；结直肠肿瘤；免疫组织化学
福建医科大学学报000312
摘要: 目的 比较E-钙粘附蛋白与相关蛋白α-连接蛋白在结肠腺癌的表达及在淋巴结转移中的作用。 方法 用SP免疫组织化学方法检测58例结肠癌中E-钙粘附蛋白、α-连接蛋白的表达。 结果 结肠癌中E-钙粘附蛋白、α-连接蛋白表达的减低比均为58.6%。E-钙粘附蛋白的表达减低与淋巴结转移无关(P>0.05),而α-连接蛋白的表达减低与淋巴结转移显著相关(P<0.01)。 结论 α-连接蛋白减低表达与结肠癌淋巴结转移的关系较为密切。
中图分类号: R392.11; R730.231; R735.35; R977.6 文献标识码: A
, 百拇医药
文章编号:1000-2235(2000)03-0243-02
Role of E-cadherin and α-catenin in Lymph Node Metastasis
of Colorectal Carcinoma
CHEN Wen-shu YANG Dai-xing ZHANG Peng-fei
(Department of Pathology, Fujian Medical University, Fuzhou 350004, China)
ABSTRACT: Objective To analyze the role of E-cadherin(E-cad) and associated protein α-catenin(α-cat) in lymph node metastasis of colorectal adenocarcinoma. Methods E-cad and α-cat immunoreactivities were evaluated in 58 colorectal cancer specimens and 10 normal colorectal mucosa using streptavidin peroxidase method. The results of immunostaining were compared with clinicopathological parameter. Results E-cad or α-cat levels were reduced in 58.6%,58.6% cancers,respectively. α-cat but E-cad expression were significantly correlated with lymph node metastasis of colorectal carcinoma(P<0.01). Conclusion Reduced α-cat expression has closer relationship with lymph node metastasis of colorectal carcinoma than E-cad.
, 百拇医药
KEY WORDS: E-cadherin; α-catenin; colorectal neoplasms; immunohistochemistry
E-钙粘附蛋白(epithelial cadherin,E-cad)是一种介导同种细胞间粘附的跨膜糖蛋白,主要作用于粘着连接,对上皮细胞的极性与组织结构的形成和维持具有重要作用。E-cad胞浆端与连接蛋白(catenins,cat,包括α、β和γ 3种) 结合,形成E-钙粘附蛋白/连接蛋白复合体,由α-cat锚着于胞内微丝骨架。近年来的研究表明,复合体组分的表达状况与某些肿瘤的侵袭和转移有关[1]。本实验旨在比较E-cad、α-cat表达与结肠腺癌的淋巴结转移的关系。
1 材料与方法
1.1 一般资料 58例结肠腺癌手术标本取自福建省立医院病理科(1997～1998年,45例)和福建医科大学病理解剖学教研室(1996～1998年,13例)。所有病例术前均未经抗癌治疗。标本均经中性福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,病理确诊。58例患者中,男性22例,女性36例;年龄22～77岁,平均58±13.0岁。瘤体直径1～14 cm,平均4.8±2.2 cm;组织学类型为管状腺癌41例,乳头状腺癌12例,粘液腺癌4例,印戒细胞癌1例。
, 百拇医药
1.2 试剂 浓缩型抗E-cad单克隆抗体购自北京中山生物技术有限公司(Zymed公司产品),工作浓度1∶20。即用型抗α-cat多克隆抗体购自武汉博士德生物工程公司(Sigma公司产品)。即用型广谱SP试剂盒和DAB显色试剂盒购自福州迈新公司。
1.3 免疫组织化学染色(SP法) 全部肠癌标本均取肿瘤与正常粘膜交界处蜡块,作4 μm厚切片行组织化学染色,染色程序依试剂盒说明。用高压锅作抗原修复。以PBS代替一抗作为阴性对照。
1.4 染色判断(参照文献[2]) 肿瘤细胞中E-cad、α-cat染色以同一切片中正常粘膜细胞为阳性对照。癌细胞染色与正常粘膜细胞相同者为阳性(+);全部癌细胞染色普遍降低、灶性降低者为异质性(±);癌细胞染色完全消失者为阴性(-)。异质性和阴性为表达减低。
1.5 统计方法 Fisher精确概率法(SAS软件)。P<0.05为有统计学意义。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 E-cad和α-cat在正常结肠粘膜中的表达
正常结肠粘膜上皮细胞E-cad呈一致性强染色,集中于细胞-细胞交界处。胞浆中见浅染色。α-cat染色形式与E-cad相似,也见于细胞膜上,但细胞浆着色较多。
2.2 E-cad和α-cat在结肠癌中的表达(图1,2)
大部分癌组织E-cad和α-cat表达降低。其中7例E-cad(+)/α-cat(±)、3例E-cad(±)/α-cat(-)。58例结肠癌中E-钙粘附蛋白、 α-连接蛋白表达减低的构成比均为58.6%(34/58)。
2.3 E-cad和α-cat的表达与结肠癌的淋巴结转移的关系(附表)
α-cat的表达与癌的淋巴结转移关系显著(P<0.01),而E-cad的表达与癌的淋巴结转移无关(P>0.05)。28例中α-cat(±)12例(42.9%)、6例阴性者则全部见淋巴结转移。另有6例E-cad(+)/α-cat(+)、1例E-cad(±)/α-cat(+)及4例α-cat(±)E-cad(+)/α-cat(±),发生淋巴结转移。附表 E-cad和α-cat的表达与结肠癌淋巴结转移的关系 淋巴结转移
, 百拇医药
E-cad
α-cat*
+
±
-
+
±
-
无
14
17
2
17
, http://www.100md.com 16
0
有
10
10
5
7
12
6
E-cad:E-上皮钙粘附蛋白; α-cat:α-连接蛋白. *:P<0.01.
3 讨 论
肿瘤细胞从其母体脱离是肿瘤侵袭和转移的起始步骤。E-cad及α-cat表达减低或缺失会破坏粘着连接,使肿瘤细胞间的粘附性减弱,易于脱离和迁移,侵入周围组织和血管。
, 百拇医药
本实验显示E-cad的表达与结肠癌的淋巴结转移关系无显著性(P>0.05),α-cat的表达则与淋巴结转移关系密切(P<0.01),α-cat表达减低尤其是完全缺失表达的肿瘤,易于发生淋巴结转移。文献报道了相似的结果[3]。
E-cad是E-钙粘附蛋白/连接蛋白复合体的跨膜部分,其胞外区直接与相邻细胞的同种分子结合,又参与α-cat的转录后调节,影响后者的稳定性[4],其缺失对粘着连接的功能应具有决定性的影响。但实验表明α-cat的减低表达与结肠癌的淋巴结转移的关系更为密切,可能由于α-cat是复合体的锚定成分,对复合体的稳定和功能至为重要[1]。α-cat还参与组成桥粒和组装紧密连接,其表达减少可损害桥粒和紧密连接的完整性,使细胞间的粘附性更弱[5]。
本实验观察到6例(占转移病例的24%)α-cat(+)/E-cad(+)而有淋巴结转移。看来在肿瘤淋巴结转移的多步骤过程中,癌细胞同质性粘附减弱所起的作用不是绝对的[6]。
, 百拇医药
图1 低分化腺癌E-钙粘附蛋白呈异质性表达.SP法×200
图2 中分化腺癌.α-连接蛋白呈异质性表达.SP法×200
作者简介:陈文书(1968～),男,助教,医学硕士.
参考文献:
[1] Smith ME,Pignatelli M.The molecular histology of neoplasia:the role of the cadherin/catenin complex[J]. Histopathology, 1997,31:107～111.
[2]Kinsella AR,Green B,Lepts GC,et al. The role of cell-cell adhesion moleculeE-cadherin in large bowel tumor invasion and metastasis[J].Br J Cancer, 1993,67:904～909.
, http://www.100md.com
[3] Gofuku J,Shiozaki H,Tsujinaka T,et al. Expression of E-cadherin and α-catenin in patients with colorectal carcinoma. Correlation with cancer invasion and metastasis[J]. Am J Clin Pathol, 1999,111:29～37.
[4] Nagafuchi A,Takeichi M,Tsukita S,et al. The 102 kd cadhein-associated protein:similarity to vinculin and posttranscription regulation of expression[J]. Cell, 1991,65:2849～2857.
[5] Watabe UM,Uchida N,Imamura Y,et al. α-catnin-vinculin interaction functions to organize the apical junction complex in epithelial cells[J]. J Cell Biol, 1998,142:847～857.
[6] Foty RA,Steinberg MS. Measurement of tumor cell cohesion and suppression of invasion by E-and P-cadherin[J]. Cancer Res, 1997,37:5033～5036.
收稿日期:2000-01-13, 百拇医药
单位：福建医科大学 病理解剖学教研室,福州 350004
关键词：E-钙粘附蛋白；α-连接蛋白；结直肠肿瘤；免疫组织化学
福建医科大学学报000312
摘要: 目的 比较E-钙粘附蛋白与相关蛋白α-连接蛋白在结肠腺癌的表达及在淋巴结转移中的作用。 方法 用SP免疫组织化学方法检测58例结肠癌中E-钙粘附蛋白、α-连接蛋白的表达。 结果 结肠癌中E-钙粘附蛋白、α-连接蛋白表达的减低比均为58.6%。E-钙粘附蛋白的表达减低与淋巴结转移无关(P>0.05),而α-连接蛋白的表达减低与淋巴结转移显著相关(P<0.01)。 结论 α-连接蛋白减低表达与结肠癌淋巴结转移的关系较为密切。
中图分类号: R392.11; R730.231; R735.35; R977.6 文献标识码: A
, 百拇医药
文章编号:1000-2235(2000)03-0243-02
Role of E-cadherin and α-catenin in Lymph Node Metastasis
of Colorectal Carcinoma
CHEN Wen-shu YANG Dai-xing ZHANG Peng-fei
(Department of Pathology, Fujian Medical University, Fuzhou 350004, China)
ABSTRACT: Objective To analyze the role of E-cadherin(E-cad) and associated protein α-catenin(α-cat) in lymph node metastasis of colorectal adenocarcinoma. Methods E-cad and α-cat immunoreactivities were evaluated in 58 colorectal cancer specimens and 10 normal colorectal mucosa using streptavidin peroxidase method. The results of immunostaining were compared with clinicopathological parameter. Results E-cad or α-cat levels were reduced in 58.6%,58.6% cancers,respectively. α-cat but E-cad expression were significantly correlated with lymph node metastasis of colorectal carcinoma(P<0.01). Conclusion Reduced α-cat expression has closer relationship with lymph node metastasis of colorectal carcinoma than E-cad.
, 百拇医药
KEY WORDS: E-cadherin; α-catenin; colorectal neoplasms; immunohistochemistry
E-钙粘附蛋白(epithelial cadherin,E-cad)是一种介导同种细胞间粘附的跨膜糖蛋白,主要作用于粘着连接,对上皮细胞的极性与组织结构的形成和维持具有重要作用。E-cad胞浆端与连接蛋白(catenins,cat,包括α、β和γ 3种) 结合,形成E-钙粘附蛋白/连接蛋白复合体,由α-cat锚着于胞内微丝骨架。近年来的研究表明,复合体组分的表达状况与某些肿瘤的侵袭和转移有关[1]。本实验旨在比较E-cad、α-cat表达与结肠腺癌的淋巴结转移的关系。
1 材料与方法
1.1 一般资料 58例结肠腺癌手术标本取自福建省立医院病理科(1997～1998年,45例)和福建医科大学病理解剖学教研室(1996～1998年,13例)。所有病例术前均未经抗癌治疗。标本均经中性福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,病理确诊。58例患者中,男性22例,女性36例;年龄22～77岁,平均58±13.0岁。瘤体直径1～14 cm,平均4.8±2.2 cm;组织学类型为管状腺癌41例,乳头状腺癌12例,粘液腺癌4例,印戒细胞癌1例。
, 百拇医药
1.2 试剂 浓缩型抗E-cad单克隆抗体购自北京中山生物技术有限公司(Zymed公司产品),工作浓度1∶20。即用型抗α-cat多克隆抗体购自武汉博士德生物工程公司(Sigma公司产品)。即用型广谱SP试剂盒和DAB显色试剂盒购自福州迈新公司。
1.3 免疫组织化学染色(SP法) 全部肠癌标本均取肿瘤与正常粘膜交界处蜡块,作4 μm厚切片行组织化学染色,染色程序依试剂盒说明。用高压锅作抗原修复。以PBS代替一抗作为阴性对照。
1.4 染色判断(参照文献[2]) 肿瘤细胞中E-cad、α-cat染色以同一切片中正常粘膜细胞为阳性对照。癌细胞染色与正常粘膜细胞相同者为阳性(+);全部癌细胞染色普遍降低、灶性降低者为异质性(±);癌细胞染色完全消失者为阴性(-)。异质性和阴性为表达减低。
1.5 统计方法 Fisher精确概率法(SAS软件)。P<0.05为有统计学意义。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 E-cad和α-cat在正常结肠粘膜中的表达
正常结肠粘膜上皮细胞E-cad呈一致性强染色,集中于细胞-细胞交界处。胞浆中见浅染色。α-cat染色形式与E-cad相似,也见于细胞膜上,但细胞浆着色较多。
2.2 E-cad和α-cat在结肠癌中的表达(图1,2)
大部分癌组织E-cad和α-cat表达降低。其中7例E-cad(+)/α-cat(±)、3例E-cad(±)/α-cat(-)。58例结肠癌中E-钙粘附蛋白、 α-连接蛋白表达减低的构成比均为58.6%(34/58)。
2.3 E-cad和α-cat的表达与结肠癌的淋巴结转移的关系(附表)
α-cat的表达与癌的淋巴结转移关系显著(P<0.01),而E-cad的表达与癌的淋巴结转移无关(P>0.05)。28例中α-cat(±)12例(42.9%)、6例阴性者则全部见淋巴结转移。另有6例E-cad(+)/α-cat(+)、1例E-cad(±)/α-cat(+)及4例α-cat(±)E-cad(+)/α-cat(±),发生淋巴结转移。附表 E-cad和α-cat的表达与结肠癌淋巴结转移的关系 淋巴结转移
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E-cad
α-cat*
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E-cad:E-上皮钙粘附蛋白; α-cat:α-连接蛋白. *:P<0.01.
3 讨 论
肿瘤细胞从其母体脱离是肿瘤侵袭和转移的起始步骤。E-cad及α-cat表达减低或缺失会破坏粘着连接,使肿瘤细胞间的粘附性减弱,易于脱离和迁移,侵入周围组织和血管。
, 百拇医药
本实验显示E-cad的表达与结肠癌的淋巴结转移关系无显著性(P>0.05),α-cat的表达则与淋巴结转移关系密切(P<0.01),α-cat表达减低尤其是完全缺失表达的肿瘤,易于发生淋巴结转移。文献报道了相似的结果[3]。
E-cad是E-钙粘附蛋白/连接蛋白复合体的跨膜部分,其胞外区直接与相邻细胞的同种分子结合,又参与α-cat的转录后调节,影响后者的稳定性[4],其缺失对粘着连接的功能应具有决定性的影响。但实验表明α-cat的减低表达与结肠癌的淋巴结转移的关系更为密切,可能由于α-cat是复合体的锚定成分,对复合体的稳定和功能至为重要[1]。α-cat还参与组成桥粒和组装紧密连接,其表达减少可损害桥粒和紧密连接的完整性,使细胞间的粘附性更弱[5]。
本实验观察到6例(占转移病例的24%)α-cat(+)/E-cad(+)而有淋巴结转移。看来在肿瘤淋巴结转移的多步骤过程中,癌细胞同质性粘附减弱所起的作用不是绝对的[6]。
, 百拇医药
图1 低分化腺癌E-钙粘附蛋白呈异质性表达.SP法×200
图2 中分化腺癌.α-连接蛋白呈异质性表达.SP法×200
作者简介:陈文书(1968～),男,助教,医学硕士.
参考文献:
[1] Smith ME,Pignatelli M.The molecular histology of neoplasia:the role of the cadherin/catenin complex[J]. Histopathology, 1997,31:107～111.
[2]Kinsella AR,Green B,Lepts GC,et al. The role of cell-cell adhesion moleculeE-cadherin in large bowel tumor invasion and metastasis[J].Br J Cancer, 1993,67:904～909.
, http://www.100md.com
[3] Gofuku J,Shiozaki H,Tsujinaka T,et al. Expression of E-cadherin and α-catenin in patients with colorectal carcinoma. Correlation with cancer invasion and metastasis[J]. Am J Clin Pathol, 1999,111:29～37.
[4] Nagafuchi A,Takeichi M,Tsukita S,et al. The 102 kd cadhein-associated protein:similarity to vinculin and posttranscription regulation of expression[J]. Cell, 1991,65:2849～2857.
[5] Watabe UM,Uchida N,Imamura Y,et al. α-catnin-vinculin interaction functions to organize the apical junction complex in epithelial cells[J]. J Cell Biol, 1998,142:847～857.
[6] Foty RA,Steinberg MS. Measurement of tumor cell cohesion and suppression of invasion by E-and P-cadherin[J]. Cancer Res, 1997,37:5033～5036.
收稿日期:2000-01-13, 百拇医药