丙型肝炎病毒感染与肝细胞癌
作者：赵久法 杨沛 苏文 崔琢 王淑民
单位：赵久法(蚌埠医学院附属医院 传染病科，安徽 蚌埠 233004)发；杨沛(安徽省肿瘤康 复医院，安徽 蚌埠 233004)；苏文(安徽省肿瘤康 复医院，安徽 蚌埠 233004)；崔琢(蚌埠医学院附属医院 传染病科，安徽 蚌埠 233004)；王淑民(蚌埠医学院附属医院 传染病科，安徽 蚌埠 233004)
关键词： 肝炎病毒；肝肿瘤；肝硬化
蚌埠医学院学报000307
〔摘要〕 目的：了解丙型肝炎病毒(HCV)感染与肝细胞 癌(HCC)的关系。方法：采用ELISA和聚合酶链反应(PCR)对皖北地区87例肝细胞癌、80例肝 硬化和100名健康对照者进行乙型肝炎病毒(HBV)、HCV血清标志和HBV-DNA、HCV-RNA检测 。结果：肝癌组和肝硬化组HCV感染率均显著高于对照组(P<0.01)；肝 癌组和肝硬化组肝炎病毒感染以HBV为主，其次为HBV和HCV重叠感染及HCV感染。结论：皖北地区肝癌和肝硬化的发生，除与HBV感染密切相关外，与HCV感 染亦密切相关。
, 百拇医药
〔中国图书资料分类法分类号〕 R 373.21；R 735.7 〔 文献标识码〕 A
〔文章编号〕 1000-2200(2000)03-0169-02
Hepatitis C virus infection and hepatocellular carcinoma
ZHAO Jiu-fa,YANG Pei,SU Wen,CUI Zhuo,WANG Shu-min
(Department of Infectious Diseases,Affiliated Hospital o f Bengbu Medical College,Anhui 233004,China)
〔Abstract〕 Objective:To explore the relationship betwee n the infection of hepatitis C virus(HCV) and hepatocellular carcinoma(HCC).Methods:ELISA and PCR techniques were used to detect the serologic m arkers of HBV and HCV,HBV-DNA and HCV-RNA of 87 patients with hepatocellular c arcinoma(HCC),80 patients with liver cirrhosis(LC) and 100 healthy controls from north Anhui area.Results:Both the infection rates of HCV in HCC group and LC group we re significantly higher than that in healthy control group(P<0.01).It was showed that the rate of HBV infection was the higherest,the following was HBV an d HCV overlapping infection and HCV infection,and non-HCV and non-HBV infectio n was the lowerest in both HCC group and LC group.Conclusions:It is suggested that HBV infection was associated highly with HCC and LC,and HCV infection was also associated highly with HCC and LC in north Anhui area.The overlapping infection of HCV and HBV might increase the ri sk of the development process of HCC.
, 百拇医药
〔Key words〕 hepatitis viruses;liver neoplasms;liver cirrhosis
乙型肝炎病毒(HBV)在肝细胞癌(HCC)病因学中的重要作用已得到证实 〔1，2〕。近年来，丙型肝炎病毒(HCV)特异性检测方法的建立，使HCV与肝细 胞癌的关系受到关注；一些研究表明，HCV感染与HCC的发生密切相关〔3～5〕。为进 一步探讨本地区HCC与HCV感染的关系，对87例HCC患者的血清HCV及HBV标志进行分析研究。
1 资料与方法
1.1 一般资料 (1)HCC组：1995年6月～1997年1月，蚌埠医学院附属医院 及安徽省肿瘤康复医院收治的肝细胞癌患者87例，符合1977年全国肝癌会议制定的诊断标准 。男74例，女13例；年龄18～69岁。(2)肝硬化组：同期我院门诊及住院患者80例，诊断标 准符合1990年全国病毒性肝炎学术会议修订的标准。男68例，女12例；年龄23～72岁。有输 血制品史8例。(3)健康对照组：同期自然人群常规体检时，取100例肝功能正常者。男72例 ，女28例；年龄7～63岁。以上三组人群均来自皖北地区，采集血清标本-20℃储藏备检 。
, 百拇医药
1.2 检测方法 (1)抗-HCV检测：采用第二代EIA丙肝抗体检测试剂盒(上 海)，严格按操作说明进行。(2)HCV-RNA检测：采用逆转录套式PCR方法，血清中HCV-RNA 提取采用Weiner的异硫氰酸胍-酚抽提法〔6〕。HCV基因引物在5′末端非编码 区设 计，由复旦大学合成，逆转录酶及耐热DNA聚合酶购自华美公司。本扩增产物长度为260 bp, 与同步电泳的DNA分子量标准比较，和阳性参照平行的条带即为阳性。(3)乙肝二对半检测： 采 用ELISA试剂盒(上海)，严格按操作说明进行。(4)HBV-DNA检测：采用PCR试剂盒(中山医科 大学)，严格按操作说明进行，检测结果判断同HCV-RNA。以上检测阳性结果均二次重复证 实。
1.3 统计学方法 采用χ2检验。
2 结果
2.1 各组HCV感染情况比较 血清抗-HCV或HCV-RNA任一项阳性即为HCV 感染。结果显示，肝癌组和肝硬化组的HCV感染检出率无明显差异，而肝癌组和肝硬化组与 健康对照组HCV感染检出率差异均有显著性(见表1)。
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表1 三组抗-HCV、HCV-RNA及HCV感染阳性结果比较(n) 分组
n
抗-HCV
HCV-RNA
HCV
肝癌组
87
29
23
30**
肝硬化组
80
, 百拇医药
25
21
26**
健康组
100
3
1
3
合计
267
57
45
59
, 百拇医药
χ2
-
32.16
28.66
33.97
P
-
<0.005
<0.005
<0.005
χ2分割法： 与健康组比较**P<0.012.2 HCC、肝硬化和健康对照组HBV、HCV感染比较 患者血中HBsAg 、HBeAg或HBV-DNA任一项阳性即可诊断为HBV感染。结果87例肝癌患者肝炎病毒感染以HBV 为主，其次为HBV与HCV重叠感染以及HCV感染，而HCV、HBV均无感染者为最少。肝硬化组中 也以HBV感染最多，其次为HCV和HBV混合感染以及HCV感染。健康对照组以HBV、HCV感染均阴 性居多。三组间差异有显著性(P<0.005)(见表2)。
, 百拇医药
表2 三组HBV、HCV感染检测结果(n) 分组
n
感染类型
HBV
HCV
HBV+HCV
HBV、HCV
均阴性
肝癌组
87
53
11
19
, 百拇医药
4
肝硬化组
80
50
10
16
4
健康组
100
11
3
0
86
合计
, 百拇医药
267
114
24
35
94
χ2=182.26,P<0.005
3 讨论
我国是肝癌的高发区，本文HCC患者HBV感染阳性率达82.76%，证实我省皖北地区HBV感 染仍是肝癌的主要危险因素。在欧美及日本与HBV相关的肝癌病例数已明显减少，但肝癌的 发病率却仍在上升〔3，4〕。因此，人们推测HCV可能为肝癌的病因之一。大量研究 证据表明，HCV与肝癌之间确实存在密切关系〔3～5〕。本研究发现，HCC患者的HCV 感染阳性率为34.48%，明显低于HBV低度流行的日本和欧美国家肝癌患者50%～70%抗-HCV检 出水平〔3〕，而与国内报道接近〔5，7，8〕。而肝癌及肝硬化患者HCV检出 率均较高，且分别与对照组存在显著不同，提示HCV感染可引起肝癌及肝硬化。本组肝癌患 者均属皖北地区，结果可靠地说明本地区肝癌的发生除主要与HBV感染密切有关外，与HCV感 染亦密切相关。
, 百拇医药
本调查中肝癌及肝硬化患者的HCV重叠感染分别达21.84%和20.00%。一项前瞻性研究表明，H BV和HCV并存感染是肝癌发生的最高危险因素〔9〕，在HCC的发生过程中HBV和HCV可 具有协同作用。HBV、HCV均可促进肝细胞转化，由于二者重叠感染更易发展为慢性肝炎和肝 硬化，从而增加肝细胞恶变的可能。
本研究提示，HCV感染与肝硬化及肝癌有密切关系。尽管目前肝癌患者HCV感染率仍低于HBV 感染，但可以预言，随着乙型肝炎疫苗免疫接种的实施，今后HCV感染将是我国肝癌发生的 高危因素。因此，加强对HCV感染的预防和诊治研究不容忽视。
作者简介：赵久法(1965-)，男，安徽寿县人，主治医师.
〔参考文献〕
〔1〕 吕 凌，彭文伟，何树初.肝癌和癌周双份肝组织的HBV DNA整合 状况〔J〕.临床肝胆病杂志，1992，8(2)∶63.
, http://www.100md.com
〔2〕 姚集鲁，郑锡澄，黄影梨，等.广州地区原发性肝癌与HBV感染关系的血清学 调查〔J〕.中华传染病杂志，1985，3(2)∶130.
〔3〕 Okuda K,Fujimoto I,Hanai A,et al.Changing incidence of hep atocellular carcinoma in Japan〔J〕.Cancer Res,1989,47(18)∶4 967.
〔4〕 Kiyosawa K,Sodeyama T,Tanaka E,et al.Interrelationship of bloo d transfusion non-A,non-B hepatitis and hepatocellular carcinoma:Analysis by d etection of antibody to hepatitis C virus〔J〕.Hepatology,1990,12(4)∶641.
, http://www.100md.com
〔5〕 魏金荣，刘金兰，张玉魁，等.乙型和丙型肝炎病毒感染与肝细胞癌〔J 〕.中华传染病杂志，1997，15(3)∶151.
〔6〕 Weiner AJ,Kuo G,Bradley DW,et al.Detection of hepatitis C vi rus sequence in non-A,non-B hepatitis〔J〕.Lancet,1990,335∶1.
〔7〕 范小玲，彭文伟，姚集鲁，等.肝细胞癌患者乙、丙和丁型肝炎病毒感染状 况〔J〕.中华传染病杂志，1995，13(3)∶129.
〔8〕 于 君，冯存民，赵俊秀，等.丙型肝炎病毒感染与原发性肝癌〔J〕.同济医科大学学报，1998，27(2)∶139.
〔9〕 Benvegnu L,Fattouich G,Noventa F,et al.Concurrent hepatitis B and C virus infection and risk of hepatocellular carcinoma in cirrhosis:A prospe ctive study〔J〕.Cancer,1994,74(9)∶2 442.
收稿日期：1999-11-19, 百拇医药
单位：赵久法(蚌埠医学院附属医院 传染病科，安徽 蚌埠 233004)发；杨沛(安徽省肿瘤康 复医院，安徽 蚌埠 233004)；苏文(安徽省肿瘤康 复医院，安徽 蚌埠 233004)；崔琢(蚌埠医学院附属医院 传染病科，安徽 蚌埠 233004)；王淑民(蚌埠医学院附属医院 传染病科，安徽 蚌埠 233004)
关键词： 肝炎病毒；肝肿瘤；肝硬化
蚌埠医学院学报000307
〔摘要〕 目的：了解丙型肝炎病毒(HCV)感染与肝细胞 癌(HCC)的关系。方法：采用ELISA和聚合酶链反应(PCR)对皖北地区87例肝细胞癌、80例肝 硬化和100名健康对照者进行乙型肝炎病毒(HBV)、HCV血清标志和HBV-DNA、HCV-RNA检测 。结果：肝癌组和肝硬化组HCV感染率均显著高于对照组(P<0.01)；肝 癌组和肝硬化组肝炎病毒感染以HBV为主，其次为HBV和HCV重叠感染及HCV感染。结论：皖北地区肝癌和肝硬化的发生，除与HBV感染密切相关外，与HCV感 染亦密切相关。
, 百拇医药
〔中国图书资料分类法分类号〕 R 373.21；R 735.7 〔 文献标识码〕 A
〔文章编号〕 1000-2200(2000)03-0169-02
Hepatitis C virus infection and hepatocellular carcinoma
ZHAO Jiu-fa,YANG Pei,SU Wen,CUI Zhuo,WANG Shu-min
(Department of Infectious Diseases,Affiliated Hospital o f Bengbu Medical College,Anhui 233004,China)
〔Abstract〕 Objective:To explore the relationship betwee n the infection of hepatitis C virus(HCV) and hepatocellular carcinoma(HCC).Methods:ELISA and PCR techniques were used to detect the serologic m arkers of HBV and HCV,HBV-DNA and HCV-RNA of 87 patients with hepatocellular c arcinoma(HCC),80 patients with liver cirrhosis(LC) and 100 healthy controls from north Anhui area.Results:Both the infection rates of HCV in HCC group and LC group we re significantly higher than that in healthy control group(P<0.01).It was showed that the rate of HBV infection was the higherest,the following was HBV an d HCV overlapping infection and HCV infection,and non-HCV and non-HBV infectio n was the lowerest in both HCC group and LC group.Conclusions:It is suggested that HBV infection was associated highly with HCC and LC,and HCV infection was also associated highly with HCC and LC in north Anhui area.The overlapping infection of HCV and HBV might increase the ri sk of the development process of HCC.
, 百拇医药
〔Key words〕 hepatitis viruses;liver neoplasms;liver cirrhosis
乙型肝炎病毒(HBV)在肝细胞癌(HCC)病因学中的重要作用已得到证实 〔1，2〕。近年来，丙型肝炎病毒(HCV)特异性检测方法的建立，使HCV与肝细 胞癌的关系受到关注；一些研究表明，HCV感染与HCC的发生密切相关〔3～5〕。为进 一步探讨本地区HCC与HCV感染的关系，对87例HCC患者的血清HCV及HBV标志进行分析研究。
1 资料与方法
1.1 一般资料 (1)HCC组：1995年6月～1997年1月，蚌埠医学院附属医院 及安徽省肿瘤康复医院收治的肝细胞癌患者87例，符合1977年全国肝癌会议制定的诊断标准 。男74例，女13例；年龄18～69岁。(2)肝硬化组：同期我院门诊及住院患者80例，诊断标 准符合1990年全国病毒性肝炎学术会议修订的标准。男68例，女12例；年龄23～72岁。有输 血制品史8例。(3)健康对照组：同期自然人群常规体检时，取100例肝功能正常者。男72例 ，女28例；年龄7～63岁。以上三组人群均来自皖北地区，采集血清标本-20℃储藏备检 。
, 百拇医药
1.2 检测方法 (1)抗-HCV检测：采用第二代EIA丙肝抗体检测试剂盒(上 海)，严格按操作说明进行。(2)HCV-RNA检测：采用逆转录套式PCR方法，血清中HCV-RNA 提取采用Weiner的异硫氰酸胍-酚抽提法〔6〕。HCV基因引物在5′末端非编码 区设 计，由复旦大学合成，逆转录酶及耐热DNA聚合酶购自华美公司。本扩增产物长度为260 bp, 与同步电泳的DNA分子量标准比较，和阳性参照平行的条带即为阳性。(3)乙肝二对半检测： 采 用ELISA试剂盒(上海)，严格按操作说明进行。(4)HBV-DNA检测：采用PCR试剂盒(中山医科 大学)，严格按操作说明进行，检测结果判断同HCV-RNA。以上检测阳性结果均二次重复证 实。
1.3 统计学方法 采用χ2检验。
2 结果
2.1 各组HCV感染情况比较 血清抗-HCV或HCV-RNA任一项阳性即为HCV 感染。结果显示，肝癌组和肝硬化组的HCV感染检出率无明显差异，而肝癌组和肝硬化组与 健康对照组HCV感染检出率差异均有显著性(见表1)。
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表1 三组抗-HCV、HCV-RNA及HCV感染阳性结果比较(n) 分组
n
抗-HCV
HCV-RNA
HCV
肝癌组
87
29
23
30**
肝硬化组
80
, 百拇医药
25
21
26**
健康组
100
3
1
3
合计
267
57
45
59
, 百拇医药
χ2
-
32.16
28.66
33.97
P
-
<0.005
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χ2分割法： 与健康组比较**P<0.012.2 HCC、肝硬化和健康对照组HBV、HCV感染比较 患者血中HBsAg 、HBeAg或HBV-DNA任一项阳性即可诊断为HBV感染。结果87例肝癌患者肝炎病毒感染以HBV 为主，其次为HBV与HCV重叠感染以及HCV感染，而HCV、HBV均无感染者为最少。肝硬化组中 也以HBV感染最多，其次为HCV和HBV混合感染以及HCV感染。健康对照组以HBV、HCV感染均阴 性居多。三组间差异有显著性(P<0.005)(见表2)。
, 百拇医药
表2 三组HBV、HCV感染检测结果(n) 分组
n
感染类型
HBV
HCV
HBV+HCV
HBV、HCV
均阴性
肝癌组
87
53
11
19
, 百拇医药
4
肝硬化组
80
50
10
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健康组
100
11
3
0
86
合计
, 百拇医药
267
114
24
35
94
χ2=182.26,P<0.005
3 讨论
我国是肝癌的高发区，本文HCC患者HBV感染阳性率达82.76%，证实我省皖北地区HBV感 染仍是肝癌的主要危险因素。在欧美及日本与HBV相关的肝癌病例数已明显减少，但肝癌的 发病率却仍在上升〔3，4〕。因此，人们推测HCV可能为肝癌的病因之一。大量研究 证据表明，HCV与肝癌之间确实存在密切关系〔3～5〕。本研究发现，HCC患者的HCV 感染阳性率为34.48%，明显低于HBV低度流行的日本和欧美国家肝癌患者50%～70%抗-HCV检 出水平〔3〕，而与国内报道接近〔5，7，8〕。而肝癌及肝硬化患者HCV检出 率均较高，且分别与对照组存在显著不同，提示HCV感染可引起肝癌及肝硬化。本组肝癌患 者均属皖北地区，结果可靠地说明本地区肝癌的发生除主要与HBV感染密切有关外，与HCV感 染亦密切相关。
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本调查中肝癌及肝硬化患者的HCV重叠感染分别达21.84%和20.00%。一项前瞻性研究表明，H BV和HCV并存感染是肝癌发生的最高危险因素〔9〕，在HCC的发生过程中HBV和HCV可 具有协同作用。HBV、HCV均可促进肝细胞转化，由于二者重叠感染更易发展为慢性肝炎和肝 硬化，从而增加肝细胞恶变的可能。
本研究提示，HCV感染与肝硬化及肝癌有密切关系。尽管目前肝癌患者HCV感染率仍低于HBV 感染，但可以预言，随着乙型肝炎疫苗免疫接种的实施，今后HCV感染将是我国肝癌发生的 高危因素。因此，加强对HCV感染的预防和诊治研究不容忽视。
作者简介：赵久法(1965-)，男，安徽寿县人，主治医师.
〔参考文献〕
〔1〕 吕 凌，彭文伟，何树初.肝癌和癌周双份肝组织的HBV DNA整合 状况〔J〕.临床肝胆病杂志，1992，8(2)∶63.
, http://www.100md.com
〔2〕 姚集鲁，郑锡澄，黄影梨，等.广州地区原发性肝癌与HBV感染关系的血清学 调查〔J〕.中华传染病杂志，1985，3(2)∶130.
〔3〕 Okuda K,Fujimoto I,Hanai A,et al.Changing incidence of hep atocellular carcinoma in Japan〔J〕.Cancer Res,1989,47(18)∶4 967.
〔4〕 Kiyosawa K,Sodeyama T,Tanaka E,et al.Interrelationship of bloo d transfusion non-A,non-B hepatitis and hepatocellular carcinoma:Analysis by d etection of antibody to hepatitis C virus〔J〕.Hepatology,1990,12(4)∶641.
, http://www.100md.com
〔5〕 魏金荣，刘金兰，张玉魁，等.乙型和丙型肝炎病毒感染与肝细胞癌〔J 〕.中华传染病杂志，1997，15(3)∶151.
〔6〕 Weiner AJ,Kuo G,Bradley DW,et al.Detection of hepatitis C vi rus sequence in non-A,non-B hepatitis〔J〕.Lancet,1990,335∶1.
〔7〕 范小玲，彭文伟，姚集鲁，等.肝细胞癌患者乙、丙和丁型肝炎病毒感染状 况〔J〕.中华传染病杂志，1995，13(3)∶129.
〔8〕 于 君，冯存民，赵俊秀，等.丙型肝炎病毒感染与原发性肝癌〔J〕.同济医科大学学报，1998，27(2)∶139.
〔9〕 Benvegnu L,Fattouich G,Noventa F,et al.Concurrent hepatitis B and C virus infection and risk of hepatocellular carcinoma in cirrhosis:A prospe ctive study〔J〕.Cancer,1994,74(9)∶2 442.
收稿日期：1999-11-19, 百拇医药