P-糖蛋白在食管癌中的表达
作者：王凤璟 刘都礼
单位：(成都铁路局中心医院 病理科，四川 成都 610081)
关键词：食管癌；糖蛋白；免疫组织化学
铁道医学000333 [中图分类号]R735.1；R730.21 [文献标识码]B
[文章编号]1001-0912(2000)03-0197-01
肿瘤对抗癌药物产生耐药性是化疗失败的主要原因之一。近年来，对肿瘤多耐药基因(MDR)的研究使人们对肿瘤的耐药性有了新的认识，P-糖蛋白作为MDR 基因的蛋白产物已被人们所认可。为了解食管癌组织中P-糖蛋白表达水平及其与肿瘤分化及浸润深度的关系，我们进行了有关研究。
1 材料和方法
, 百拇医药
1.1 材料 31例食管癌均为我院外科手术切除之标本，经常规10%福尔马林固定，石蜡切片，HE染色，光镜诊断为食管鳞癌。
1.2 方法 P-糖蛋白(JSB-1)为美国Maxin公司产品，S-P试剂盒购自福州迈新公司。切片厚4μm,染色步骤如下：(1)石蜡切片常规脱蜡至水；(2)柠檬酸缓冲液高压修复充分暴露抗原；(3)加3%双氧水、正常羊血清、一抗P-糖蛋白单克隆抗体、二抗IgG及链霉素亲生物素过氧化物酶；(4)DAB染色；(5)苏木素复染；(6)中性树胶封固。光镜观察。用已知阳性病例为阳性对照，用非免疫动物血清代替一抗作阴性对照。
1.3 判断标准 P糖蛋白表达水平<2%为阴性，2%～30%为弱阳性，31%～70%为阳性，>71%为强阳性。
1.4 统计学处理 采用两样本比较的Ridit分析与四格表资料的确切概率法，数据处理用PEMS 2.1统计软件包。
, http://www.100md.com
2 结 果
2.1 P糖蛋白阳性表达率 31例食管癌组织经P-糖蛋白免疫组化染色后，镜下见阳性细胞呈棕褐色，细颗粒状，阳性都定位于细胞膜和胞浆，以胞浆为主，呈灶性或弥漫分布。31例中阳性表达14例，占45.2%。
2.2 P-糖蛋白表达与肿瘤分化程度的关系 见表1。
表1 P-糖蛋白表达与肿瘤分化程度的关系
例 肿瘤分化程度
n
P-糖蛋白表达水平
阴性
弱阳性
阳性
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强阳性
高分化
18
10
5
3
0
中度分化
13
7
2
3
1
高分化组与中度分化组P-糖蛋白表达水平比较无统计学意义(u=0.4271,P=0.6687)。
, 百拇医药
2.3 不同浸润深度食管癌P-糖蛋白表达情况 浸润浅肌层组P-糖蛋白阴性11例，阳性8例；浸润深肌层组阴性、阳性各6例。其P-糖蛋白的表达比较无统计学意义(P=0.7241)。
3 讨 论
化疗失败的主要原因是肿瘤细胞产生耐药性[1]。研究表明，肿瘤细胞产生耐药性的原因是多方面的，但以多耐药性最为常见，其特点是一旦对某种化疗药物产生耐药，则对不同类型的多种结构、细胞靶点和作用机理迥然不同的抗癌药物同时产生耐药，这是一种独特的广谱耐药现象[1]。
人类MDR基因产物是一种相对分子质量为170000的膜糖蛋白，称为P-糖蛋白，这是一种膜泵糖蛋白，具有能量依赖性“药泵”功能。分子生物学研究发现,P-糖蛋白有与ATP结合的位点，通过ATP提供能量，将已进入细胞内的药物泵出细胞外，从而降低细胞内抗癌药物的浓度，使癌细胞产生耐药现象[2]。故P-糖蛋白是细胞产生MDR表型的分子基础，具有MDR的肿瘤细胞，MDR基因表达水平与耐药程度成正比[1]。
, http://www.100md.com
不同组织类型的肿瘤其P-糖蛋白的表达程度不同[2]。文献报道食管癌、乳腺癌与卵巢癌等为化疗前低表达，而结肠癌与肝癌等为化疗前高表达[1]。纪小龙等以Peleri提出的P-糖蛋白表达>2%作为阳性标准，食管癌的阳性率为42%，若以>10%为阳性标准则其阳性率为30%[1]。吴名耀等以>0为阳性标准，检测阳性结果为53.3%[2]。
本组31例食管癌免疫组化检测结果显示，P-糖蛋白的表达与肿瘤分化程度、浸润深度无关(P>0.05)。本组阳性率为45.2%，与Peleri报道相近。
对食管癌术后标本进行P-糖蛋白检测有助于临床医师较为客观地了解患者的耐药情况。对P-糖蛋白高表达或再次化疗者应加用MDR逆转剂，如钙通道阻断剂右旋异搏定等，以逆转MDR表型，抑制P-糖蛋白的膜泵作用，增加细胞内抗癌药物的浓度，提高化疗效果。P-糖蛋白检测为食管癌患者术后化疗开创了新的前景，有利于提高患者的存活率和生存期。
[作者简介]王凤璟(1944-)，男，江苏扬州人，成都铁路局中心医院副主任医师。
[参考文献]
[1]纪小龙，施作霖.诊断免疫组织化学[M].北京：军事医学科学出版社，1997.251-8.
[2]吴名耀，沈健，关贤英.P.糖蛋白在食管癌中的表达及其临床意义[J].临床与实验病理学杂志,1997，13(2):192.
[收稿日期]1999-12-13, 百拇医药
单位：(成都铁路局中心医院 病理科，四川 成都 610081)
关键词：食管癌；糖蛋白；免疫组织化学
铁道医学000333 [中图分类号]R735.1；R730.21 [文献标识码]B
[文章编号]1001-0912(2000)03-0197-01
肿瘤对抗癌药物产生耐药性是化疗失败的主要原因之一。近年来，对肿瘤多耐药基因(MDR)的研究使人们对肿瘤的耐药性有了新的认识，P-糖蛋白作为MDR 基因的蛋白产物已被人们所认可。为了解食管癌组织中P-糖蛋白表达水平及其与肿瘤分化及浸润深度的关系，我们进行了有关研究。
1 材料和方法
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1.1 材料 31例食管癌均为我院外科手术切除之标本，经常规10%福尔马林固定，石蜡切片，HE染色，光镜诊断为食管鳞癌。
1.2 方法 P-糖蛋白(JSB-1)为美国Maxin公司产品，S-P试剂盒购自福州迈新公司。切片厚4μm,染色步骤如下：(1)石蜡切片常规脱蜡至水；(2)柠檬酸缓冲液高压修复充分暴露抗原；(3)加3%双氧水、正常羊血清、一抗P-糖蛋白单克隆抗体、二抗IgG及链霉素亲生物素过氧化物酶；(4)DAB染色；(5)苏木素复染；(6)中性树胶封固。光镜观察。用已知阳性病例为阳性对照，用非免疫动物血清代替一抗作阴性对照。
1.3 判断标准 P糖蛋白表达水平<2%为阴性，2%～30%为弱阳性，31%～70%为阳性，>71%为强阳性。
1.4 统计学处理 采用两样本比较的Ridit分析与四格表资料的确切概率法，数据处理用PEMS 2.1统计软件包。
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2 结 果
2.1 P糖蛋白阳性表达率 31例食管癌组织经P-糖蛋白免疫组化染色后，镜下见阳性细胞呈棕褐色，细颗粒状，阳性都定位于细胞膜和胞浆，以胞浆为主，呈灶性或弥漫分布。31例中阳性表达14例，占45.2%。
2.2 P-糖蛋白表达与肿瘤分化程度的关系 见表1。
表1 P-糖蛋白表达与肿瘤分化程度的关系
例 肿瘤分化程度
n
P-糖蛋白表达水平
阴性
弱阳性
阳性
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强阳性
高分化
18
10
5
3
0
中度分化
13
7
2
3
1
高分化组与中度分化组P-糖蛋白表达水平比较无统计学意义(u=0.4271,P=0.6687)。
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2.3 不同浸润深度食管癌P-糖蛋白表达情况 浸润浅肌层组P-糖蛋白阴性11例，阳性8例；浸润深肌层组阴性、阳性各6例。其P-糖蛋白的表达比较无统计学意义(P=0.7241)。
3 讨 论
化疗失败的主要原因是肿瘤细胞产生耐药性[1]。研究表明，肿瘤细胞产生耐药性的原因是多方面的，但以多耐药性最为常见，其特点是一旦对某种化疗药物产生耐药，则对不同类型的多种结构、细胞靶点和作用机理迥然不同的抗癌药物同时产生耐药，这是一种独特的广谱耐药现象[1]。
人类MDR基因产物是一种相对分子质量为170000的膜糖蛋白，称为P-糖蛋白，这是一种膜泵糖蛋白，具有能量依赖性“药泵”功能。分子生物学研究发现,P-糖蛋白有与ATP结合的位点，通过ATP提供能量，将已进入细胞内的药物泵出细胞外，从而降低细胞内抗癌药物的浓度，使癌细胞产生耐药现象[2]。故P-糖蛋白是细胞产生MDR表型的分子基础，具有MDR的肿瘤细胞，MDR基因表达水平与耐药程度成正比[1]。
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不同组织类型的肿瘤其P-糖蛋白的表达程度不同[2]。文献报道食管癌、乳腺癌与卵巢癌等为化疗前低表达，而结肠癌与肝癌等为化疗前高表达[1]。纪小龙等以Peleri提出的P-糖蛋白表达>2%作为阳性标准，食管癌的阳性率为42%，若以>10%为阳性标准则其阳性率为30%[1]。吴名耀等以>0为阳性标准，检测阳性结果为53.3%[2]。
本组31例食管癌免疫组化检测结果显示，P-糖蛋白的表达与肿瘤分化程度、浸润深度无关(P>0.05)。本组阳性率为45.2%，与Peleri报道相近。
对食管癌术后标本进行P-糖蛋白检测有助于临床医师较为客观地了解患者的耐药情况。对P-糖蛋白高表达或再次化疗者应加用MDR逆转剂，如钙通道阻断剂右旋异搏定等，以逆转MDR表型，抑制P-糖蛋白的膜泵作用，增加细胞内抗癌药物的浓度，提高化疗效果。P-糖蛋白检测为食管癌患者术后化疗开创了新的前景，有利于提高患者的存活率和生存期。
[作者简介]王凤璟(1944-)，男，江苏扬州人，成都铁路局中心医院副主任医师。
[参考文献]
[1]纪小龙，施作霖.诊断免疫组织化学[M].北京：军事医学科学出版社，1997.251-8.
[2]吴名耀，沈健，关贤英.P.糖蛋白在食管癌中的表达及其临床意义[J].临床与实验病理学杂志,1997，13(2):192.
[收稿日期]1999-12-13, 百拇医药